实验三 茎段培养与茎尖剥离
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植物的茎尖培养姓名: 李希东专业: 植物学学号: 200808201 日期: 2009.4.25 成绩:一、实验目的:1. 掌握茎尖培养的原理和方法;2. 练习使用实体显微镜剥离茎尖;二、实验原理:植物细胞具有全能性,即每个植物细胞含能产生完整植株的全部遗传基因。
理论上讲,只要条件合适,含全部遗传基因的细胞都能分裂分化,产生完整植株。
在茎尖和根尖的分生组织中一般是无毒或仅含极低浓度的病毒粒子,而较老的组织中,病毒含量随离茎尖距离的增加而提高。
据此原理采用茎尖组织培养可获得无毒植株。
三、实验材料、器皿:实验材料:冬青顶芽实验器皿:高压蒸汽灭菌锅、电子天平、微波炉、三角瓶、培养皿、超净工作台、实体显微镜、酒精灯、烧杯、量筒、移液器、pH试纸、橡皮筋、解剖针、滤纸、剪刀、容量瓶、长柄镊子、酒精四、实验步骤:1.培养基配制配制母液:(按照培养基配方,配置不同扩大倍数的培养基母液)大量元素:母液扩大20倍;微量元素:母液扩大1000倍;CaCl2·2H2O:母液扩大100倍;铁盐:母液扩大200倍。
培养基配制方案:1. MS2. MS+BA 0.5 mg/L3. MS+BA 0.5 mg/L+IAA 0.1 mg/L4. MS+BA 1.5 mg/L+IAA 0.1 mg/L5. MS+BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L6. MS+BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L按方案依次加入大量元素、微量元素、铁盐和有机物质,加入蔗糖30g/L,琼脂6.0g/L,肌醇50mg/L,水解乳清蛋白300 mg/L,和不同浓度的激素,定容到400ml,混合后微波炉加热溶解,再按配方加入各种激素,调节pH值为5.8-6.0,分装到锥形瓶中,每瓶20-25ml,用锡箔纸封口。
本实验选取1,4,6号培养基。
2. 灭菌:高压锅灭菌,121℃,保温20min,冷却,凝固,用于实验。
3. 接种(实体显微镜剥离茎尖-接种)(1)材料表面消毒:植物茎尖(顶芽或侧芽)用自来水水冲净,70%的酒精漂洗材料半分钟,然后放入0.1%的升汞中进行表面消毒8-10min,用无菌水冲洗材料3-5次。
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准备无菌培养器具,如培养皿、镊子、剪刀等。
第1篇一、实验目的1. 掌握茎段培养的方法和技术,理解茎段培养形成幼苗的基本原理。
2. 学习并操作茎尖剥离的技巧,认识茎尖生长点的形态特征。
3. 了解不同植物激素对茎段生长的影响。
二、实验材料与仪器1. 材料:某植物幼嫩茎段、茎尖、愈伤组织诱导培养基、再生培养基、植物激素(生长素、赤霉素等)。
2. 仪器:无菌操作台、剪刀、镊子、解剖针、显微镜、培养箱、天平、酒精灯、高压灭菌锅等。
三、实验方法1. 茎段培养(1)选取健康的某植物幼嫩茎段,剪成约1-2cm长的切段。
(2)将切段放入75%酒精中消毒30秒,再用无菌水冲洗3次。
(3)将切段接种到愈伤组织诱导培养基中,置于培养箱中培养。
(4)观察并记录愈伤组织的形成和生长情况。
2. 茎尖剥离(1)选取健康的某植物茎尖,用解剖针剥离出茎尖生长点。
(2)将茎尖生长点放入75%酒精中消毒30秒,再用无菌水冲洗3次。
(3)将茎尖生长点接种到再生培养基中,置于培养箱中培养。
(4)观察并记录茎尖生长点的生长情况。
3. 植物激素对茎段生长的影响(1)将茎段接种到含有不同浓度生长素和赤霉素的培养基中。
(2)置于培养箱中培养,观察并记录茎段生长情况。
四、实验结果与分析1. 茎段培养结果经过一段时间的培养,愈伤组织诱导培养基中的切段逐渐形成愈伤组织,并逐渐生长。
2. 茎尖剥离结果经过一段时间的培养,再生培养基中的茎尖生长点逐渐生长,形成新的植株。
3. 植物激素对茎段生长的影响(1)生长素对茎段生长的影响:低浓度生长素能促进茎段生长,高浓度生长素则抑制茎段生长。
(2)赤霉素对茎段生长的影响:赤霉素能促进茎段生长,其促进作用随浓度增加而增强。
五、实验结论1. 通过茎段培养实验,掌握了茎段培养的方法和技术,理解了茎段培养形成幼苗的基本原理。
2. 通过茎尖剥离实验,学习了茎尖剥离的技巧,认识了茎尖生长点的形态特征。
3. 通过植物激素对茎段生长的影响实验,了解了生长素和赤霉素对茎段生长的促进作用及其浓度依赖性。
马铃薯茎尖组织脱毒培养及植物激素在培养中的作用摘要:马铃薯茎尖组织脱毒培养,愈伤组织解除分化形成新个体时,体细胞有丝分裂的异染色质延迟复制行为较正常活体植株更严重,后代变异较自然群体变异高出500倍,若在培养过程添加辐射和化学诱变试剂变异率会更高。
因此,组织培养环境不只是现代生物技术辅助育种的一个重要条件,更是诱变育种的一个有效途径,对于以营养体繁殖的马铃薯作物效果更好。
本文介绍了马铃薯茎尖培养的意义和方法,综述了植物激素在马铃薯生长中的作用。
关键词:茎尖体细胞组织培养变异植物激素Abstract: Potato virus-free cultivation of the tip meristem, callus formation of new individual remove differentiation, somatic cell mitosis heterochromatin delay of normal living plant copy behavior more serious than natural group, variation and variation of 500 times higher in the training process, if add radiation and chemical mutagenesis reagent mutation rate is higher. Therefore, tissue culture of modern biological technology environment is not only an important supplementary conditions, is an efficient way of mutation breeding for excessive n-redistribution breeding, potato crop effect is better. The paper introduces the significance of potato meristem-tip culture were reviewed, and the method of plant hormone role in growth of potatoes.Key words: Stem cells; Tissue culture; variation; Plant hormones1马铃薯生态习性和种类对土壤的适应性很强,但对气候要求凉、冷、燥,在湿热地区虽然也能生长,不过一代以后品种就会演化,需要经常从寒冷地区引进新的种。