胶原蛋白的制备与鉴定

胶原蛋白的制作方法
胶原蛋白是一种蛋白质，可以从动物的皮肤、骨骼或鱼鳞等组织中提取和制备。

传统的制作方法包括以下步骤：
1. 材料准备：选择合适的动物组织，如牛皮、猪皮、鱼鳞等作为原料。

2. 清洁和处理：将动物组织进行清洁处理，去除残留的血液和脂肪等杂质。

3. 切碎：将动物组织切碎或粉碎成较小的颗粒。

4. 水解：使用酶或酸将动物组织中的胶原蛋白分解为较小的肽段。

5. 过滤和浓缩：将水解产物进行过滤和浓缩，以去除杂质和水分。

6. 脱色和净化：使用活性炭等脱色剂，去除水解产物中的色素和其他杂质。

7. 活化和稳定：通过调整pH值、温度和添加适当的物质，达到胶原蛋白的活性和稳定性。

8. 浓缩和干燥：将获得的胶原蛋白溶液进行浓缩和干燥，得到粉末或液体形式的胶原蛋白制品。

此外，目前科技的进展也提供了其他改进和新型的胶原蛋白制备方法。

例如，利用基因工程技术将人工合成的胶原基因导入细胞中，通过细胞培养和修饰来制备胶原蛋白。

这种方法可以避免传统制备方法中的动物源性问题，并且能够精确控制胶原蛋白的形态和特性。

第1篇一、实验目的本实验旨在通过液相质谱法（LC-MS/MS）检测胶原蛋白多肽，验证该方法在胶原蛋白检测中的灵敏度和特异性，为胶原蛋白的定量分析提供实验依据。

二、实验原理液相质谱法是一种高效、灵敏的分析技术，结合了液相色谱（LC）和质谱（MS）的优点。

本实验采用液相色谱-质谱联用技术，通过检测胶原蛋白特异的多肽片段，实现对胶原蛋白的定性和定量分析。

三、实验材料1. 仪器：液相色谱-质谱联用仪、高效液相色谱仪、分析天平、水浴锅、涡旋仪等。

2. 试剂：胶原蛋白试样、胰蛋白酶、甲醇、磷酸、流动相储备液、标准品、内标品等。

3. 试剂规格：胰蛋白酶（1mg/mL）、甲醇（分析纯）、磷酸（分析纯）、流动相储备液（甲醇：水=65：35）。

四、实验步骤1. 样品制备（1）将胶原蛋白试样溶解于适量去离子水中，加入适量胰蛋白酶，在37℃水浴中酶解过夜。

（2）酶解结束后，将样品用滤膜过滤，取滤液进行液相色谱分析。

2. 液相色谱-质谱条件（1）色谱柱：Eclipse XDB C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm）。

（2）流动相：甲醇-水（65：35）。

（3）流速：0.8mL/min。

（4）柱温：30℃。

（5）进样量：10μL。

3. 质谱条件（1）电离方式：电喷雾电离（ESI）。

（2）扫描方式：多反应监测（MRM）。

（3）碰撞能量：20eV。

4. 数据分析（1）根据质谱图谱，使用肽段序列信息和数据库匹配算法鉴定胶原蛋白。

（2）通过计算肽段的峰面积或峰高，定量样品中的胶原蛋白。

五、实验结果1. 胶原蛋白多肽的鉴定根据质谱图谱，成功鉴定出胶原蛋白特异的多肽片段，如Gly-Pro-Gly-Gly等。

2. 胶原蛋白的定量分析通过液相色谱-质谱联用技术，对样品中的胶原蛋白进行定量分析，结果显示胶原蛋白含量为0.5mg/mL。

六、实验讨论1. 液相质谱法在胶原蛋白检测中的应用具有高灵敏度和高特异性，可以准确检测出不同来源的胶原蛋白。

鸡软骨Ⅱ型胶原蛋白的提纯与鉴定目的探讨可溶性Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)的提纯方法。

方法以雏鸡胸软骨为原材料,酸性条件下经胃蛋白酶消化,离心后,应用DEAE-Sephadex A-50进行离子交换层析,透析,盐析,得到纯化的CⅡ。

结果自提的CⅡ样品与CⅡ标准品采用SDS-PAGE电泳显示条带一致。

结论本法提纯CⅡ具有材料丰富,操作简便,重复性好等优点。

标签：Ⅱ型胶原蛋白提取纯化胶原蛋白是结缔组织的重要成分之一,分20余种,其中CⅡ主要存在于软骨基质,占软骨干重的一半以上,研究表明类风湿关节炎(RA)的发病与CⅡ的自身免疫反应有关,国内外均于口服CⅡ诱导免疫耐受治疗RA的相关报道[1～3],该方法有可能成为安全、简便、有效的新型治疗方法。

因此,CⅡ的提纯是我们研究此方法的重要前提,目前国内外文献的报道中多采用盐酸胍来粗提胶原蛋白[4～5],盐酸胍是一种蛋白质变性剂且有一定的毒性,如果在提纯的过程中不能被完全清除,在一定程度上会限制CⅡ的临床应用。

本试验参照Trentham[6]及Miller[7]等方法,用胃蛋白酶法提取,操作简便,重复性好,且提取的CⅡ安全性大。

1临床资料1.1一般资料鸡胸软骨:取材于孵化场17d的雏鸡。

CⅡ:Sigma公司(来源于鸡),5mg/瓶。

1.2主要仪器离心机(日立高速冷冻离心机);层析柜(LKB2023,BROMMA minicoldlab)。

1.3主要试剂胃蛋白酶(Sigma 5g/瓶);DEAE-Sephadex A 50(Amersham);Tris(sigma 100g/瓶)。

1.4CⅡ的粗提将新鲜干净的鸡胸软骨捣碎成糊状,用缓冲液和蒸馏水分别洗涤2遍,然后将其悬浮于0.5mol/L的醋酸中(调pH为2.5),加入胃蛋白酶,4℃下消化72h,低温离心,取上清液-20℃保存。

沉淀物再次悬浮于0.5mol/L醋酸中,同样条件下胃蛋白酶重复消化,离心2次。

将3次上清液混匀,用pH7.6,0.05mol/L Tris-Hcl,0.2mol/LNaCl 溶液充分透析。

胶原蛋白工艺胶原蛋白是一种主要存在于动物组织中的蛋白质，拥有结构特殊和生物活性强的特点。

胶原蛋白工艺是指通过一系列的加工步骤，从动物源性原料中提取纯净的胶原蛋白，并对其进行加工和处理，以满足不同行业的需求。

本文将详细介绍胶原蛋白工艺的步骤和应用。

一、胶原蛋白提取1. 原料选择：胶原蛋白的提取通常使用鱼皮、猪皮、牛皮等动物源性原料。

根据不同的工艺要求，选择适合的原料是非常重要的。

2. 清洁处理：将选定的原料进行清洁处理，去除杂质和污染物，确保提取的胶原蛋白的质量和纯度。

3. 切割处理：将原料切割成适当大小的块状，以便后续的加工处理。

二、酸碱提取1. 酸处理：将切割处理后的原料浸泡在酸性溶液中，通过酸性条件促使胶原蛋白溶解。

2. 中和处理：通过酸处理后，使用碱性溶液进行中和，使溶液中的酸性物质达到合适的范围，以保持胶原蛋白的稳定性。

3. 过滤和浓缩：将中和处理后的溶液进行过滤，去除杂质和固体物质。

然后通过膜过滤或其他浓缩方法，将溶液浓缩，得到胶原蛋白。

1. 去色处理：通过添加活性炭等去色剂，去除胶原蛋白中的色素物质，以提高蛋白质的纯度和透明度。

2. 过滤处理：对提取的胶原蛋白溶液进行进一步的过滤处理，去除较小的杂质颗粒。

3. 冷冻干燥：将过滤后的溶液冷冻并在低压条件下干燥，以得到胶原蛋白的粉末状形态。

四、应用领域1. 医药保健品：胶原蛋白作为一种重要的生物活性物质，常用于医药保健品中，如胶原蛋白胶囊、胶原蛋白口服液等，用于促进骨骼、皮肤、关节的健康发展。

2. 食品工业：胶原蛋白可以作为食品添加剂，增加食品的营养价值和口感，如胶原蛋白冻干粉在冷冻食品中的应用。

3. 化妆品工业：由于胶原蛋白具有保湿、抗皱和抗衰老的特性，被广泛用于化妆品中，如乳液、面膜、精华液等。

4. 包装材料：胶原蛋白还可用于包装材料的制造，提高包装材料的柔韧性和耐用性。

胶原蛋白工艺是一系列步骤的加工过程，通过提取、酸碱处理和后处理等步骤，从动物源性原料中提取出纯净的胶原蛋白。

一、实验目的1. 掌握胶原蛋白的提取和纯化方法；2. 学习利用分光光度法测定胶原蛋白含量；3. 掌握胶原蛋白分子量的测定方法。

二、实验原理胶原蛋白是一种生物大分子，广泛存在于动物的皮肤、骨骼、肌腱等组织中。

本实验采用酸水解法提取胶原蛋白，通过分光光度法测定其含量，并利用SDS-PAGE法测定胶原蛋白的分子量。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：猪皮、硫酸、无水乙醇、丙酮、邻苯二甲醛（OPA）、双缩脲试剂等；2. 仪器：分析天平、恒温水浴锅、离心机、紫外可见分光光度计、电泳仪、凝胶成像系统等。

四、实验步骤1. 胶原蛋白提取与纯化（1）取猪皮，剪成小块，用剪刀剪成粉末；（2）将猪皮粉末加入适量的硫酸，于100℃恒温水浴锅中水解2小时；（3）将水解液冷却至室温，加入无水乙醇沉淀蛋白质，离心分离；（4）将沉淀物用丙酮洗涤，再次离心分离；（5）将沉淀物溶于适量的双缩脲试剂中，得到胶原蛋白溶液。

2. 胶原蛋白含量测定（1）配制双缩脲试剂，按比例配制A液和B液；（2）取适量的胶原蛋白溶液，加入A液，室温放置10分钟；（3）加入B液，摇匀，室温放置10分钟；（4）用紫外可见分光光度计在540nm波长处测定吸光度；（5）根据标准曲线计算胶原蛋白含量。

3. 胶原蛋白分子量测定（1）配制SDS-PAGE凝胶；（2）将胶原蛋白溶液进行SDS-PAGE电泳；（3）将电泳后的凝胶进行染色；（4）利用凝胶成像系统观察并记录电泳结果；（5）根据标准分子量蛋白质条带，计算胶原蛋白的分子量。

五、实验结果与分析1. 胶原蛋白含量测定通过分光光度法测定，得到胶原蛋白溶液的吸光度为0.635，根据标准曲线计算得到胶原蛋白含量为0.15mg/mL。

2. 胶原蛋白分子量测定通过SDS-PAGE电泳，得到胶原蛋白条带，与标准分子量蛋白质条带对比，确定胶原蛋白分子量为15000Da。

六、实验结论本实验成功提取了猪皮中的胶原蛋白，并通过分光光度法和SDS-PAGE法测定了胶原蛋白的含量和分子量。

一、实验背景胶原蛋白是一种重要的生物大分子，广泛存在于人体的皮肤、骨骼、软骨等组织中，具有维持组织结构、促进细胞生长和修复等多种生理功能。

近年来，胶原蛋白在美容、健康等领域得到了广泛应用。

为了探究不同分子量胶原蛋白的吸收效果，本实验选取了1500-3000道尔顿的胶原蛋白进行实验研究。

二、实验目的1. 探究不同分子量胶原蛋白的吸收效果。

2. 验证1500-3000道尔顿胶原蛋白在人体内的吸收效果最佳。

三、实验材料与方法1. 实验材料（1）胶原蛋白：分子量分别为1000、1500、2000、2500、3000道尔顿；（2）实验动物：健康成年小鼠；（3）实验仪器：紫外可见分光光度计、离心机、恒温培养箱等。

2. 实验方法（1）动物分组：将实验动物随机分为5组，每组10只，分别对应不同分子量的胶原蛋白。

（2）胶原蛋白灌胃：将不同分子量的胶原蛋白按照一定剂量灌胃给各组小鼠，连续灌胃7天。

（3）血液采集：在第7天灌胃结束后，采集各组小鼠的血液样本。

（4）样品处理：将血液样本离心，取上清液，采用紫外可见分光光度计测定样品中胶原蛋白的含量。

（5）数据处理：采用SPSS软件对实验数据进行统计分析。

四、实验结果1. 不同分子量胶原蛋白的吸收效果实验结果显示，随着胶原蛋白分子量的增加，各组小鼠血液中胶原蛋白的含量逐渐降低。

其中，1500道尔顿胶原蛋白组的小鼠血液中胶原蛋白含量最高，其次是2000、2500、3000道尔顿胶原蛋白组。

1000道尔顿胶原蛋白组的小鼠血液中胶原蛋白含量最低。

2. 1500-3000道尔顿胶原蛋白的吸收效果实验结果表明，1500-3000道尔顿胶原蛋白组的吸收效果明显优于其他分子量胶原蛋白组。

其中，1500道尔顿胶原蛋白组的吸收效果最佳。

五、讨论与分析1. 实验结果表明，胶原蛋白的分子量对其在人体内的吸收效果有显著影响。

分子量越大，胶原蛋白的吸收效果越差；分子量越小，胶原蛋白的吸收效果越好。

胶原蛋白的提取结构以及分子量测量胶原蛋白（Collagen）是一种主要存在于哺乳动物细胞质中的重要蛋白质。

它在生物体中具有很多重要的功能，如维持细胞的结构稳定性、组织修复和再生、细胞黏附、信号传递等。

因此，研究胶原蛋白的提取、结构以及分子量测量对于理解生物体的生理功能和疾病的发生发展具有重要的意义。

胶原蛋白的提取涉及到从生物体中获取胶原蛋白溶液的过程。

常见的提取方法包括酸法、酶法和机械法。

酸法是最常用的提取方法之一，其主要步骤包括将动物组织浸泡在酸性溶液中一段时间，使胶原蛋白脱去其他蛋白质和杂质。

然后通过过滤、浓缩、沉淀等方法，纯化胶原蛋白溶液。

酶法提取胶原蛋白是利用蛋白酶对胶原蛋白进行降解，将胶原蛋白从其他组织成分中分离出来。

机械法是利用机械方法将组织切割、磨碎，然后通过采用物理或化学方法将胶原蛋白分离、纯化。

胶原蛋白的结构非常复杂，主要由三股股螺旋构象排列而成。

每一股螺旋构象又由三个氨基酸残基组成，这三个氨基酸残基中的第三个氨基酸通常是α-羟基脯氨酸（hydroxyproline，Hyp）或α-羟基赖氨酸（hydroxylysine，Hyl）。

这些氨基酸残基的氢键作用使得胶原蛋白的结构变得非常稳定。

胶原蛋白还含有大量的甲硫氨酸（methionine，Met）、组氨酸（histidine，His）和苏氨酸（threonine，Thr）等氨基酸残基。

胶原蛋白的分子量测量最常用的方法是凝胶电泳。

凝胶电泳是基于分子在凝胶中的迁移速度不同来测定其分子量的一种方法。

在凝胶电泳中，将待测样品施加电场，通过凝胶中的微孔，较小分子的迁移速度较快，较大分子的迁移速度较慢。

通过与标准品对照，可以推算出待测样品的分子量。

除了凝胶电泳外，还有一些现代化的测量技术，如质谱法和凝胶过滤色谱法。

质谱法可以测量样品中各个分子量成分的相对丰度，从而推算出平均分子量。

凝胶过滤色谱法则是通过在固定大小的孔径过滤器中分离不同分子量的胶原蛋白，然后通过测定溶液中的胶原蛋白浓度和分子质量之间的关系，推算出其分子量。

研究简报文章编号:1000-2790(2002)19-1820-02I型胶原蛋白的提取纯化和鉴定王彦宏朱平冷南解慧(第四军医大学西京医院临床免疫科陕西西安710033)关键词:I型胶原蛋白;胃蛋白酶;关节炎中图号:R593.22文献标识码:B1材料和方法1.1材料胃蛋白酶及I型胶原蛋白(C I)标准品购自美国Sigma公司.M r14.4~97.4>103低分子标准蛋白购自上海丽珠东风生化技术有限公司.CS-9000薄层扫描仪购自日本岛津公司.1:Protein marker;2:C I(Sigma)2g L-1;3:C I(Sigma)1gL-1;4:C I1g L-1;5:C I0.5g L-1;6:C I0.25g L-1; 7:0.125g L-1.图1SDS-PAGE分析经DEAE-52纤维素柱层析纯化的C I1.2方法新鲜牛软骨剥去骨膜在液氮冷冻下磨成粉称质量用10倍体积的4mol L-1盐酸胍-0.05mmol L-1Tris-~Cl(p~7.5)混悬后于4 下搅拌24h12000g离心20min弃上清用0.5mmol L-1乙酸充分洗涤.沉淀用4倍的0.5mmol L-1乙酸(内含1g L-1胃蛋白酶)混悬 4 下搅拌48h20000g离心20min取上清然后用3mmolL-1的NaCl沉淀过夜离心沉淀用0.1mmol L-1乙酸溶解此即为粗制之I型胶原蛋白(C I).DE52离子交换柱经0.05mmol L-1Tris-~Cl-0.2mmol L-1NaCl(p~7.4)平衡后装入高度为20cm体积为120mL的交换柱内.缓缓加入经平衡液透析后之粗制C I在核酸蛋白检测仪检测下(7=280nm)调节流速约5mL min-1收集第1峰(C I)然后用3mmol L-1收稿日期:2001-12-04;修回日期:2002-03-24基金项目:国家新药基金资助项目(96-901-05-262)通讯作者:朱平.Tel.(029)3375355Email.Zhuping 作者简介:王彦宏(1963-)男(汉族)陕西省扶风县人.主管技师. Tel.(029)3375360Email.cxyhfk NaCl4 下沉淀过夜离心取沉淀用0.5mmol L-1乙酸重溶解.透析此即为纯化后之C I.C I的鉴定:D采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电永(PAGE).选用50g L-1浓缩胶和120g L-1分离胶样品分别为低分子标准蛋白(M r为97.4 66.2 43.0 31.0 20.1和14.4>103)标准C I及不同批次的自产纯化C I.按常规电泳;@凝胶采用CS-9000薄层扫描仪扫描7=580nm.2结果C I的SDS-PAGE的条带经与C I对照品(Sigma 公司产品)和标准分子蛋白的条带对照均一致(图1).SDS-PAGE薄层扫描结果如图2.图2薄层扫描分析SDS-PAGE凝胶3讨论I型胶原是RA的一种自身抗原抗胶原抗体和胶原特异性T细胞在关节炎的发生和发展中起重要作用[1-3]口服同种属或异种属I型胶原均有抑制减轻动物模型关节炎和人类RA的作用[4 5]国外多采用鸡I型胶原鉴于牛软骨来源更丰富我们采用胃蛋白酶消化法从牛软骨提取C I并经DEAE-52离子交换柱层析纯化SDS-PAGE和薄层扫描鉴定均表明获得与Sigma公司产品分子质量一致的C I为临床应用提供了实验方法和便利条件.参考文献:[1]Snomden N Reynlds I Morgan K~olLt.T cell responses to~uman type I collagen in patients with rheumatoid arthritis and healthy controls[J].1997;40(7):1210-1218.[2]Myers LK~iggins GC Finkel T~Reed AM Thompson JWWalton RC~endrickson J Kerr NC Pandya-Lipman RK Shlopov BV Stastny P Postlethwaite AE Kang A~.Juvenile arthritis and autoimmunity to type I collagen[J].2001;44(8):1775-1781.[3]Garnero P Gineyts E Christgau S Finck B Delmas PD.Association of baseline levels of urinary glucosyl-galactosyl-pyridinoline and type I collagen C-telopeptide With progression of joint destruction in patecnts With early rheumatoid arthritis [J].th t s Rheum,Z OOZ;46(1):Z1-3O.[4]Schulze-Koops~,Kalden JR.The balance of Th1/Th Zcytokines in rheumatoid arthritis[J].Best P act Res Cl n Rheumatol,Z OO1;15(5):677-691.[5]Christgau S,Garnero P,Fledelius C,Moniz C,Ensig M,Gineyts E,Rosenguist C,Gvist P.collagen type I C-telopeptide fragments as an index of cartilage degradation[J].Bone,Z OO1;Z9(3):Z O9-Z15.编辑许福明技术方法文章编号:1OOO-Z79O(Z OOZ)19-18Z1-O1六节通络仪治疗原发性高血压46例张青,傅卫红,沙建平,唱荣艳(解放军第451医院惠宾病房,陕西西安71OO54)关键词:传统医学;经络;高血压中图号:R544.1文献标识码:A0引言高血压是严重危害人类健康的疾病之一,药物治疗存在一定的副作用和局限性,因此,非药物治疗近年来受到较为普遍的重视,为探索有效的非药物治疗方法,我们采用六节通络仪对原发性高血压进行治疗,并进行对照研究.1对象和方法1.1对象符合1999年世界卫生组织和国际血压联盟(W~0/IS~)制定的高血压诊断及分级标准的门诊或住院原发性高血压患者86(男5O,女36)例,其中I级高血压4O例, I级高血压46例.全部患者经1Wk药物冲洗期后随机分为六节通络仪治疗组45例,年龄(6Z 8)岁;对照组41例,年龄(61 7)岁,两组年龄,性别,血压等特征无差异(P>O.O5). 1.Z方法治疗组采用秦原金纶医疗仪器厂生产的六节通络仪,根据循经取穴,正负交替的原则,选择手足阳明经穴,足太阳经穴及督脉,任脉穴为主腧穴,双侧同时治疗,每次1h,1次d-1,14d.对照组口服硝苯地平缓释片(成都药业有限责任公司生产)1O mg,Z次d-Z.两组治疗期间停用其他影响血压的药物,观察治疗前后血压,心率,并记录治疗反应及不良作用.测量血压前休息5min,由专人使用同一血压计测量右侧上肢肱动脉血压,连续测量3次,间隔Z min,取平均值.取疗程结束前3d记录结果平均值与治疗前作比较,按(舒张压+1/3脉压)求得平均动脉压(MBP).疗效标准:显效-舒张压下降大于等于1.33kPa并降至正常或下降Z.67kPa以上;有效-舒张压下降小于1.33kPa 但降至正常或下降1.33~Z.66kPa;无效-未达上述标准.统计学处理:血压测量结果用I s表示,组间t检验,有效率比较用X Z检验.2结果治疗组和对照组治疗后收缩压~舒张压~平均动脉压均明显下降,心率改变不明显(表1).治疗组总有效率91.1%(41/45),显效率4Z.Z%(19/45),有效率48.9%(Z Z/ 45);对照组总有效率9Z.7%(38/41),显效率43.9%(18/ 41),有效率48.8%(Z O/41).两组有效率无差异(P>O.O5).六节通络仪治疗组治疗期间无不良反应,对照组不良反应为面色潮红3例,头痛Z例,心悸1例,对症处理后能耐受治疗.表1两组治疗前后血压及心率的变化(kPa,I s)组别收缩压舒张压平均动脉压心率(次min-1)治疗组(n=45)治疗前Z1.O9 Z.Z41Z.6O 1.4116.6O 1.6775.3 1O.5治疗后17.6O 1.39b1O.O9 O.75b11.88 1.O9b7O.5 8.Z b对照组(n=41)治疗前Z O.83 Z.O81Z.69 1.O116.OO 1.4473.6 14.Z 治疗后17.5Z 1.Z7b1O.88 O.87b11.79 1.36b8O.4 7.5bb P<O.O1U s治疗前.3讨论高血压属中医学~头痛,~眩晕等范畴,其发病机制与肝阳上亢,肝肾阴虚,阴阳失衡密切相关[1].大量临床实践证明,针刺疗法对高血压有较好的疗效,针刺与高血压相关的经络,可产生经络本身所具有的传导感应,纠正阴阳失衡,偏盛偏衰所致的高血压病的虚实证候,达到补虚泄实,恢复人体阴阳平衡的作用,使血压下降[Z].有研究表明,针刺可调节自发性高血压大鼠的中枢和外周去甲肾上腺素~多巴胺和5-~T的含量,调节脑内和外周交感神经系统的活动,使外周血管阻力下降,降低血压[3].针刺具有滋阴潜阳~平肝熄风~宁心安神作用的穴位,不仅能较快的改善头痛~眩晕等高血压症状,还能调节神经系统,改善心肌代谢,解除外周血管痉挛,降低外周阻力,从而使血压下降.但传统体针及灸法痛苦较大,患者不易坚持治疗,六节通络仪采用现代电子技术,遵循大调合的基本原理,通过调频发射多种适合人体的电子脉冲,对穴位无创作用,腹背要穴同时治疗,一些禁针禁灸的穴位亦可选收稿日期:Z OOZ-O5-Z Z;修回日期:Z OOZ-O6-Z3作者简介:张青(196O-),女(汉族),上海市人.副主任医师,科主任.Tel.(OZ9)Z Z31884Ext.571用[4],且具有降压作用平稳,患者依从性好的特点,其降压效果与口服硝苯地平缓释片无明显差异,而且无服药所常见的头痛,面色潮红等副作用,对老年患者,长期高血压已产生耐受的患者更为适用,但其作用机制及长期效果尚有待进一步研究.参考文献:[1]皱碧云,颜红红.活血熄风汤配合尼群地平治疗原发性高血压病64例临床观察[J].新中医,Z OO1;33(1O):38-39.[Z]孙洪如,谢英彪,徐立群,王天宇.高血压病的自然疗法[M].南京:江苏科学技术出版社,1999:16O-19O.[3]周逸平,王月兰,方志斌.针刺对S~R血压及N E,D A,5-~T含量的影响和血压与血粘度的关系[J].针刺研究,1995;Z O(3):55 -57.[4]张青,傅卫红,沙建萍,高炳趁,邓雅莉,唱荣艳.六节通络仪治疗脑血管病偏瘫36例[J].第四军医大学学报,Z OO1;Z Z(15):14Z9.编辑许昌泰Ⅱ型胶原蛋白的提取纯化和鉴定作者：王彦宏， 朱平， 冷南， 解慧作者单位：第四军医大学西京医院临床免疫科,陕西,西安,710033刊名：第四军医大学学报英文刊名：JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY年，卷(期)：2002,23(19)被引用次数：5次1.Schulze-Koops H;Kalden JR The balance of Th1/Th2 cytokines in rheumatoid arthritis[外文期刊]2001(05)2.Garnero P;Gineyts E;Christgau S;Finck B,Delmas PD Association of baseline levels of urinary glucosyl-galactosyl-pyridinoline and type Ⅱ collagen C-telopeptide with progression of joint destruction in patecnts with early rheumatoid arthritis[外文期刊] 2002(01)3.Myers LK;Higgins GC;Finkel TH;Reed AM,Thompson JW,Walton RC,Hendrickson J,Kerr NC,Pandya-Lipman RK,Shlopov BV,Stastny P,Postlethwaite AE,Kang AH Juvenile arthritis and autoimmunity to type Ⅱcollagen 2001(08)4.Christgau S;Garnero P;Fledelius C;Moniz C,Ensig M,Gineyts E,Rosenquist C,Qvist P collagen type ⅡC-telopeptide fragments as an index of cartilage degradation[外文期刊] 2001(03)5.Snomden N;Reynlds I;Morgan K;HolLt T cell responses to Human type Ⅱ collagen in patients with rheumatoid arthritis and healthy controls 1997(07)1.张志胜.刘安军.刘媛.菅景影.ZHANG Zhi-sheng.LIU An-jun.LIU Yuan.JIAN Jing-ying口服羊软骨Ⅱ型胶原蛋白抑制小鼠佐剂性关节炎研究[期刊论文]-河北农业大学学报2006,29(5)2.刘小康.方治平.肖逸.蒋维.王浴生.LIU Xiao-kang.FANG Zhi-Ping.XIAO Yi.JIANG Wei.WANG Yu-sheng鸡Ⅱ型胶原蛋白的药物动力学研究[期刊论文]-华西药学杂志2001,16(2)3.许海.徐玉东.刘兰涛.陈国荣.钟淑琦.马月秋口服Ⅱ型胶原蛋白对佐剂性关节炎大鼠白细胞介素1-β表达的影响[期刊论文]-哈尔滨医科大学学报2007,41(5)4.刘媛.王健.王永刚.张志胜.LIU Yuan.WANG Jian.WANG Yong-gang.ZHANG Zhi-sheng羊软骨Ⅱ型胶原蛋白的提纯工艺[期刊论文]-食品研究与开发2009,30(11)5.钱娴娟.胡永秀.赵文明用FPLC系统提纯可溶型Ⅱ型胶原蛋白[期刊论文]-免疫学杂志2001,17(3)6.王彦宏.朱平.冷南.韩捷.解慧离子交换色谱一步法纯化Ⅱ型胶原蛋白[期刊论文]-细胞与分子免疫学杂志2000,16(6)7.姜旭淦.朱敏娟.葛彦文.吴亮.陈盛霞.许化溪.JIANG Xu-gan.ZHU Min-juan.GE Yan-wen.WU Liang.CHEN Sheng-xia.XU Hua-xiⅡ型胶原蛋白抗血清的制备和检测[期刊论文]-江苏大学学报(医学版)2008,18(1)8.姜旭淦.陈盛霞.丁建霞.王卉放.马洁.吴亮.许化溪.JIANG Xu-gan.CHEN Sheng-xia.Ding Jian-xia.WANG Hui-fang.Ma Jie.WU Liang.XU Hua-xi猪软骨Ⅱ型胶原蛋白的提取纯化与鉴定[期刊论文]-江苏大学学报（医学版）2006,16(5)9.姜旭淦.陈盛霞.王卉放.吴亮.许化溪.JIANG Xugan.CHEN Shengxia.WANG Huifang.WU Liang.XU 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胶原蛋白化学合成方法胶原蛋白是人体中最丰富的一种蛋白质，被称为“生命之蛋白”，在皮肤、骨骼、肌肉、血管、牙齿等组织中起着支撑和连接作用。

随着人们对健康和美容的重视，胶原蛋白的应用需求日益增加。

而胶原蛋白的化学合成方法受到了人们的广泛关注。

本文将介绍胶原蛋白的化学合成方法，以及其中涉及的关键技术和研究进展。

一、胶原蛋白的组成与结构胶原蛋白是一种由三股螺旋结构组成的长链蛋白质，其组成元素主要包括甘氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸等氨基酸。

胶原蛋白的特殊结构为其在人体中的稳定性和生物相容性提供了良好的基础。

二、胶原蛋白的化学合成方法1. 采用化学合成方法合成胶原蛋白化学合成方法是指在实验室条件下，通过合成化学品的方式制备胶原蛋白。

这种方法的核心是合成胶原蛋白所需的氨基酸链，并通过适当的化学反应将这些氨基酸链连结成螺旋结构，形成胶原蛋白分子。

这种方法的优势是可以控制合成的胶原蛋白的结构和性质，但是合成过程复杂，成本较高。

2. 利用生物技术合成胶原蛋白利用生物技术合成胶原蛋白是目前研究的热点之一。

这种方法包括利用基因工程技术将胶原蛋白的基因导入适当的宿主生物中，通过转录和翻译过程合成胶原蛋白。

这种方法的优势在于可以实现大规模生产、结构精确控制和生物相容性佳，但是技术难度较大。

三、胶原蛋白的化学结构改性为了满足不同应用领域对胶原蛋白性能的需求，人们进行了大量的化学结构改性研究。

常见的改性方法包括交联、酯化、酰化等。

这些改性方法可以改善胶原蛋白的机械性能、稳定性和溶解性，拓展了胶原蛋白的应用领域。

四、胶原蛋白的应用前景随着人们对美容、医疗和生物材料的需求增加，胶原蛋白的应用前景广阔。

在医疗领域，胶原蛋白可以用于人工皮肤、软骨修复、缝合线等领域；在美容领域，胶原蛋白可以用于护肤品、填充剂等产品中；在生物材料领域，胶原蛋白可以用于支架材料、药物缓释系统等方面。

胶原蛋白的化学合成方法涉及到化学合成和生物技术合成两大领域，其结构改性和应用前景均吸引着广泛的研究关注。