07埃希菌属、沙门菌属、志贺氏菌属鉴定
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志贺氏菌的鉴定要点志贺氏菌(Salmonella typhi)是引起伤寒病的致病菌,其鉴定对于诊断和防控伤寒病具有重要意义。
下面我们将从菌落特征、生物化学反应、免疫学方法等几个方面介绍志贺氏菌的鉴定要点。
一、菌落特征志贺氏菌的菌落形态多样,但一般具有以下特征:1. 形态:菌落呈圆形或不规则形状,边缘整齐或呈波浪状。
2. 颜色:菌落表面呈乳白色、灰白色或淡黄色。
3. 粘液性:菌落表面有时出现透明的粘液层。
4. 反射性:菌落表面有时呈金属光泽。
5. 直径:菌落直径一般为2-3毫米,但也有较大的菌落。
二、生物化学反应志贺氏菌的生物化学反应是鉴定的重要依据之一,常用的方法包括氧化/发酵反应、代谢产物反应、酶反应等。
1. 氧化/发酵反应:志贺氏菌能利用葡萄糖产生酸和气体,而不能利用乳糖产生酸和气体,这是其与大肠杆菌等其他肠道细菌的区别之一。
2. 代谢产物反应:志贺氏菌在代谢过程中产生一些特殊的代谢产物,如硫化氢和尿素酶等。
3. 酶反应:志贺氏菌具有一些特定的酶活性,如葡萄糖酶、麦芽糖酶和内切酶等。
三、免疫学方法免疫学方法是志贺氏菌鉴定的重要手段,包括血清学方法和分子生物学方法。
1. 血清学方法:通过检测志贺氏菌特异性抗原和抗体的反应来鉴定菌株。
常用的方法有血清凝集试验、血清中和试验和酶联免疫吸附试验等。
2. 分子生物学方法:利用PCR技术检测志贺氏菌的特异性基因序列,如vi抗原基因和fliC基因等。
除了上述的菌落特征、生物化学反应和免疫学方法,还有一些其他的鉴定要点需要注意:1. 样品的处理:鉴定志贺氏菌需要注意样品的采集和保存,避免污染和细菌数量的剧烈变化。
2. 培养基的选择:选择适宜的培养基,如MacConkey琼脂和XLD琼脂等,以利于志贺氏菌的生长和鉴定。
3. 防止交叉反应:志贺氏菌与其他细菌在某些生物化学反应上存在交叉反应,需要进行鉴别。
4. 结合多种方法:综合应用不同的鉴定方法可以提高鉴定的准确性和可靠性。
中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的肠杆菌科噬菌体检验方法Mic伪biological examination of food hygi叨ewe Examination of Salmonellae , Shigellae , and diarrhoea causative 及cherich血coli妙means of thed泣agnostic typing phage set for enterobacteriaceae前言本标准对GB/T4789.31一1994袭食品卫生微生物学检验沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌肠杆菌科噬菌体检验方法》进行修订。
本标准与GB/T4789.31一19料相比主要修改如下:―按照GB/T1.1一2000对标准文本的格式和文字进行修改。
―规范原标准中的“设备和材料”。
本标准自实施之日起,GB/T4789.31一19944同时废止。
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。
本标准起草单位:江西省卫生防疫站、中国疚病预防控制中心营养与食品安全所。
本标准主要起草人:何晓青、付萍、计融。
本标准于1994年首次发布,本次为第一次修订。
范围本标准规定了应用肠杆菌科噬菌体诊断法检验食品中沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的基本要求、操作程序和结果判定本标准适用于各种食品、食物中毒的检验,也适用于食品从业人员的肠道沙门氏菌和志贺氏菌带菌检验.2、规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。
凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。
凡是不注日期的引用文件,其墩新版本适用于本标准。
埃希菌属、沙门菌属、志贺氏菌属鉴定
一、目的对某一细菌的鉴定水平,可提供以下几方面的价值:(1)决定治病方法;(2)作流行病学研究;(3)了解细菌与感染的关系;(4)进行学术交流。
二、原理
根据肠杆菌科的形态染色、培养特性、生化反应、抗原构造等
将肠杆菌科由属鉴定到具体种类。
三、标本
不同病种及不同检查目的而定,可为脓汁、渗透液、咽拭子、
血、脑脊液、食物、呕吐物、粪便等,置于无菌瓶内送检。
四、试剂及器材
革兰氏染液、培养皿、培养瓶、生化鉴定管、标准血清、玻片、接种针(环)、酒精灯等。
五、鉴定程序
埃希菌属、沙门菌属、志贺氏菌属鉴定
标本增菌培养
分离培养(SS、麦康凯)
观察生长情况,挑可疑菌落
革兰氏染色镜检:G—杆菌,氧化酶(—)纯培养(转种克氏双糖铁培养基)及做动力、靛基
质、尿素、MIU
肠杆菌生化编码管
据结果初步报告
血清学凝集试验(多价、单价进一步定属、分型)
确定报告
六、临床意义
1、大肠埃希氏菌在肠道可分为致病性与非致病性,非致病性菌作为正常菌群存在,致病菌引起腹泻。
肠道作为致病菌外引起其他感染。
2、沙门菌可引起伤寒和副伤寒、败血症、食物中毒、肠炎等。
3、志贺氏菌多侵犯肠道引起菌痢。
七、全防护措施
在操作过程中,要穿好工作衣,戴好口罩、手套,必要时戴眼
罩,严格按操作规程,结束后,用次氯酸溶液(0.2%)擦拭实
验台、显微镜手柄、载物台,浸泡手,然后紫外线消毒30分钟。
八、标本处理
废弃标本,培养基等统一由专门人员高压消毒处理。
九、参考文献
诊断细菌学,李仲兴等主编、第一版、香港、黄河文化出版社,1992。