紫外可见分光光度法测定阿司匹林中乙酰水杨酸和水杨酸含量

分光光度法测定阿司匹林肠溶片的含量(一)【摘要】目的：建立分光光度法阿司匹林含量的测定方法。

方法：在碱性条件下，乙酰水杨酸与羟胺反应生成羟肟酸;在酸性溶液中，后者与三氯化铁形成红色的羟肟酸铁，一定浓度范围内，吸光度呈线性关系。

结果：在520nm波长下，采用标准曲线法，测得阿司匹林肠溶片中乙酰水杨酸的含量为25mg/片。

结论：方法操作简便、快速、准确;可用于阿司匹林含量的测定和产品质量控制。

【关键词】分光光度法;阿司匹林;含量测定阿司匹林(C9H8O4,180.16)又名：乙酰氧基)苯甲酸，或乙酰水杨酸，是常用的解热镇痛药，临床上多用于治疗心脑血管方面的疾病，也可用于消化道肿瘤和老年性痴呆症的预防。

阿司匹林药片中乙酰水杨酸的含量测定，大多采用酸碱滴定法测定1]和高效液相色谱法分析测定2]。

本方法采用可见分光光度法3]测定阿司匹药片中乙酰水杨酸的含量，操作简便、快速、准确，实验成本低，可用于阿司匹林药品的分析和产品质量控制。

1仪器和材料仪器：722型分光光度计(上海)，容量瓶(25mL)，吸量管(5mL，1mL)。

材料：2mol·L-1NaOH，4mol·L-1HCl，10%FeCl3，7%盐酸羟胺乙醇液;0.5g·L-1乙酰水杨酸标准溶液;阿司匹林样品溶液(阿司匹林肠溶片，配制成20片·L-1乙醇液)。

2方法和结果阿司匹林肠溶片的主要成分为乙酰水杨酸，分子中酯基在碱性溶液中可与羟胺反应生成羟肟酸;后者在酸性条件下与三氯化铁形成酒红色的羟肟酸铁，最大吸收波长为520nm，在一定浓度范围内，吸光度呈线性关系，可测出阿司匹林药片中乙酰水杨酸的含量。

2.1标准溶液系列和样品溶液的配制分别取0.5g·L-1乙酰水杨酸标准溶液0.00mL(空白溶液)，0.50mL，1.00mL，1.50mL，2.00mL和阿司匹林样品溶液1.00mL置于25mL容量瓶中，分别加入7%盐酸羟胺乙醇液1.00mL，2mol·L-1NaOH1.00mL，放置3分钟，再分别加入4mol·L-1HCl和10%FeCl3各1.00mL，加水至刻度，摇匀。

荧光光度法测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量一、实验目的1.掌握用荧光法测定药物中的乙酰水杨酸含量的方法。

2.掌握970CRT 型荧光分光光度计的操作方法。

3.加深对荧光光度法原理的理解。

二、实验原理1.荧光光度法原理（1）常温下，处于基态的分子吸收一定的紫外可见光的辐射能成为激发态分子，激发态分子通过无辐射跃迁至第一激发态的最低振动能级，再以辐射跃迁的形式回到基态，发出比吸收光波长长的光而产生荧光。

在稀溶液中，当实验条件一定时，荧光强度I F 与物质的浓度c 成线性关系：即Kc I F （这是荧光光谱法定量分析的理论依据）。

（2）荧光光谱激发光谱：固定测量波长(选最大发射波长)，化合物发射的荧光强度与照射光波长的关系曲线。

激发光谱曲线的最高处，处于激发态的分子最多，荧光强度最大。

荧光强度波长发射光谱：固定激发光波长(选最大激发波长), 化合物发射的荧光强度与发射光波长关系曲线。

固定发射光波长进行激发光波长扫描，找出最大激发光波长，然后固定激发光波长进行荧光发射波长扫描，找出最大荧光发射波长。

激发光波长和发射荧光波长的选择是本实验的关键。

2. 荧光光度法测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量通常称为ASA 的乙酰水杨酸（阿司匹林）水解即生成水杨酸（SA ）（如下式）。

而在阿司匹林中或多或少存在一些水杨酸，用醋酸—氯仿作为溶剂，然后用荧光法可以分别测定其含量，少许醋酸还可以增加二者的荧光强度（本次实验只测定阿司匹林中乙酰水杨酸的含量）。

在1%的乙酸—氯仿中乙酰水杨酸的激发光谱和荧光光谱如图所示：（为了消除药片之间的差异，可以取几片一起研磨，然后取部分由代表性的样品进行分析）三、仪器与试剂：仪器：970CRT 型荧光分光光度计及附件；容量瓶：1000mL 2只，100 mL 2只，50mL 8只；l0mL 吸管2支；铁架台；研钵；称量瓶；玻璃棒；烧杯；定量滤纸；电子天平。

试剂：冰醋酸；氯仿；乙酰水杨酸；阿司匹林；丙酮。

第28卷,第4期光　谱　实　验　室Vol.28,No.4 2011年7月Chinese J ournal of Sp ectroscop y L abor atory July,2011紫外光谱法监测阿司匹林合成体系中的阿司匹林和水杨酸张小玲　粟晖 姚志湘　兰月来(广西工学院生物与化学工程系　广西柳州市城中区东环大道268号　545006)摘　要　建立一种同时快速定量分析阿司匹林合成体系中阿司匹林和水杨酸的方法。

通过均匀设计构造样本并采集其紫外光谱,结合偏最小二乘法(P LS)建立同时测定混合体系中阿司匹林和水杨酸的校正模型,阿司匹林和水杨酸模型的校正均方根误差分别为1.708 g/mL和0.435 g/m L。

该模型用于预测氨基磺酸催化合成过程中阿司匹林和水杨酸含量,二组分回收率在93.48%—108.37%之间,相对标准偏差(R SD)分别为3.45%和4.80%。

结果表明,紫外光谱法结合P LS模型实现氨基磺酸催化合成阿司匹林过程的实时监测是可行的。

关键词　阿司匹林;水杨酸;紫外光谱法;偏最小二乘法中图分类号:O657.32 文献标识码:A 文章编号:1004-8138(2011)04-1911-051　引言阿司匹林,即乙酰水杨酸,是一种常用的解热镇痛和抗风湿类药。

阿司匹林由水杨酸和乙酸酐或乙酰氯催化反应制得。

氨基磺酸催化合成阿司匹林经济环保、产品收率高、反应时间短[1],但依靠某一固定时刻来判断反应终点,存在一定的误差。

目前,需要一种可实现实时或接近实时的方法保证合成阿司匹林的质量。

乙酰水杨酸易水解成水杨酸,2005版《中国药典》[2]以中性乙醇为溶剂、酚酞为指示剂,用NaOH滴定其含量,步骤繁琐,误差较大。

高效液相法[3]测量结果精确度高,但分析时间较长。

王桂梅[4]提出近红外光谱法实时监控阿司匹林的合成过程,设备费用高。

拉曼光谱法可实现阿司匹林过程的监测,但背景干扰大,易受光学系统参数影响[5]。

3-可见分光光度法测定复方乙酰水杨酸中水杨酸含量可见分光光度法测定复方乙酰水杨酸中水杨酸含量复方乙酰水杨酸片又名“阿司匹林”，具有解热、镇痛、抗风湿、抗血栓形成等功效，是人类常用的一种药品。

潮湿条件下，乙酰水杨酸分子中的酯基易水解而生成水杨酸(SA)；水杨酸若被服用，会对肠胃有很大的刺激作用。

因此，找到一套不受乙酰水杨酸干扰，又可以准确测定水杨酸含量的方法具有重要意义。

1 实验原理水杨酸 (SA)与Fe 3 +在 pH 值 3下发生络合反应，形成稳定的紫红色络合物，在一定浓度范围内, 络合物的浓度与吸光度满足朗伯-比尔定律A =εbc 络合物，络合物的络合比为1，则c 络合物=c SA 。

考虑到Fe 3+水合离子（黄色）对吸光度的影响，选用相同浓度的Fe 3+溶液作参比液。

在适宜的温度、pH 、波长等测定条件下，配制一系列与参比液Fe 3+浓度相同但 SA 浓度不同的溶液，以空白Fe 3 +溶液为参比，测其吸光度A ，并绘制A - c SA 标准曲线。

通过测定复方乙酰水杨酸待测样的吸光度，便可在标准曲线上查出其对应的 SA 浓度，从而求出样品中 SA 的含量。

2 试剂配制(1) pH=3的CH 3COOH-CH 3COONa 缓冲溶液的配置：取0.2273g CH 3COONa ，用水溶解，转移进1000 mL 容量瓶中，再加入5.63 mL 冰醋酸，加水稀释至刻度。

(2) 0.0100 mol/L Fe 3+标准液的配置：准确的称取FeC l 3·6H 2O 0.2703 g ，用pH=3的缓冲液稀释，加水定容于100 mL 的容量瓶中。

(3)水杨酸贮备液的配置：准确称取0.7500 g 水杨酸，用乙醇溶解，加水定容于50 mL 容量瓶中。

(4)水杨酸使用液的配置：取水杨酸贮备液10 mL ，用水稀释定容于100 mL 容量瓶中。

3 实验步骤（1）最大吸收波长的选择准确量取2.00 mL 水杨酸使用液及6.00 mL 的0.0100 mol/LFe 3+标准液（保证显色剂稍微过量）于50 mL 容量瓶中，用水稀释至刻度摇匀，以试剂空白作为参比，测定其在不同波长下的吸光度。

紫外分光光度法对阿司匹林的含量测定紫外分光光度法对阿司匹林的含量测定紫外--可见分光光度法：是根据物质分子对波长为200-760nm这一范围的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。

操作简单、准确度高、重现性好。

波长长(频率小)的光线能量小，波长短(频率大)的光线能量大。

分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。

描述物质分子对辐射吸收的程度随波长而变的函数关系曲线，称为吸收光谱或吸收曲线。

紫外-可见吸收光谱通常由一个或几个宽吸收谱带组成。

最大吸收波长（λmax）表示物质对辐射的特征吸收或选择吸收，它与分子中外层电子或价电子的结构（或成键、非键和反键电子）有关。

朗伯-比尔定律是分光光度法和比色法的基础。

即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比。

A= lg1/T = εcl (Lambert-Beer定律)紫外-可见分光光度计由5个部件组成：①辐射源。

必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱，如钨灯、卤钨灯（波长范围350～2500纳米），氘灯或氢灯（180～460纳米），或可调谐染料激光光源等。

②单色器。

它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件（棱镜或光栅）组成，是用以产生高纯度单色光束的装置，其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。

③试样容器，又称吸收池。

供盛放试液进行吸光度测量之用，分为石英池和玻璃池两种，前者适用于紫外到可见区，后者只适用于可见区。

容器的光程一般为0.5～10厘米。

④检测器，又称光电转换器。

常用的有光电管或光电倍增管，后者较前者更灵敏，特别适用于检测较弱的辐射。

近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器，具有快速扫描的特点。

⑤显示装置。

这部分装置发展较快。

较高级的光度计，常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等，可将图谱、数据和操作条件都显示出来。

仪器类型有：单波长单光束直读式分光光度计，单波长双光束自动记录式分光光度计和双波长双光束分光光度计。

简述快速紫外光谱法对阿司匹林有效成分含量的测定摘要：目的：本次研究对快速紫外光谱法测定阿司匹林有效成分含量进行论述。

方法：本次试验采取紫外光谱扫描标准溶液的方式，采集具体的数据确定体系的最佳吸光度，对乙酰水杨酸-无水乙醇溶液体系进行测定。

结果：从结果上看，阿司匹林的浓度范围在6.0-100.0μg·mL-1呈现出良好的线性关系。

测定结果为阿司匹林乙酰水杨酸的浓度范围为78.87-79.84μg·mL-1，折合的百分比含量为98.58%-99.80%，总平均含量为99.03%，每片阿司匹林含片中的乙酰水杨酸有效成分为99.03mg。

结论：快速紫外光谱法在操作上较为便捷，且分析的速度较快，测定结果稳定性高。

通过研究结果可知，紫外光谱法可以用于批量的阿司匹林片的有效成分含量测定。

关键词：快速紫外光谱法；阿司匹林、有效成分阿司匹林是临床中一种常见的解热镇痛类药物。

其有效成分主要以乙酰水杨酸为主，乙酰水杨酸是水杨酸的衍生物质。

阿司匹林长期放置于空气中会因为温度湿度的影响产生一定的有毒物质，影响阿司匹林的药物效果且对患者的生命安全造成威胁［1］。

临床中目前对于阿司匹林的测定主要以高效液相色谱法为主，这种方式虽然在阿司匹林的成效测定上精确度较高，但是在操作方式上比较复杂且测定的费用比较昂贵，对于一般的基层医院及医疗机构中无法实现大面积的普及。

所以，为满足基层医院和医疗机构的需求，临床中研究出价格低廉且操作较为简单的测定方式。

快速紫外光谱法是基于紫外-可见光度法结合样品前的处理方法，达成对于阿司匹林的测定。

临床中快速紫外光谱法操作简单且对于阿司匹林的成分测定快速，精确度较高［2］。

为证实临床中对于快速紫外光谱法的认定，本次研究采取部分阿司匹林片实施快速紫外光谱法测定，具体研究结果如下。

1.资料与方法1.1仪器与试剂本次研究选择阿司匹林标准品（JL190811001，20mg，江莱生物）；无水乙醇（AR国药集团化学试剂有限公司）；阿司匹林（100mg·片，大同市利群药业有限责任公司、国药准字H14020485）。

应用化学实验二准备实验卡实验名称阿司匹林的合成、鉴定与含量的测定年级-专业2014级应化计划学时 4 准备教师席朵日期2016.09预习要求1、了解乙酰水杨酸的合成原理和方法2、了解利用紫外光谱法测定乙酰水杨酸的含量的原理和方法讲解要点1、乙酰水杨酸的合成原理和方法2、紫外光谱法测定乙酰水杨酸的含量的原理和方法目的和要求1. 掌握乙酰水杨酸的合成、鉴定及含量测定的方法。

2. 进一步熟练重结晶及熔点测定等基本操作。

3. 通过实践了解紫外光谱法、红外光谱法、核磁共振谱法在有机合成中的应用。

实验原理及反应COOHOH+(CH3CO)2O H2SO4△COOHOCCH3O+CH3COOHCOOHOHH+COOOCOOCOO+ H2O n物理化学常数化合物摩尔质量性状 b.p(℃) m.p(℃) d n 溶解度乙酰水杨酸180.15 白色晶体133-135 1.40 溶水、乙醇水杨酸138.12 白色晶体211/2.6Kpa 157-159 1.44 微溶水、乙醇乙酸酐102.09 淡黄色液体139.6 -73.1 1.082 1.3904 溶水、乙醇仪器试剂仪器数量/组总计试剂总计圆底烧瓶100ml 1 11 水杨酸≥50g烧杯50/150ml 各1 各11 乙酸酐≥50ml 锥形瓶100ml 1 11 NaHCO3饱和水溶液≥1000ml 容量瓶100ml ≥5 55 浓HCL ≥100ml 量筒10ml、50ml 1 11 1%FeCL3溶液≥50ml 移液管5ml 1 11 浓H2SO4≥100ml 玻璃棒 1 11 0.1mol/L NaOH水溶液≥100ml 加压过滤装置1台乙醇1瓶紫外分光光度计1台蒸馏水水浴1-2台滤纸1盒电子天平2-3台实验内容1．乙酰水杨酸的合成在干燥的100 mL锥形瓶中加入3.2 g干燥的水杨酸，8mL新蒸的乙酸酐和5滴浓H2SO4，旋摇锥形瓶使水杨酸全部溶解后，在水浴上加热5～10min，控制水浴温度在85～90o C，冷至室温，即有乙酰水杨酸结晶析出。

阿司匹林片剂中乙酰水杨酸含量的测定(plan B)【分析方法及简单原理】乙酰水杨酸（阿司匹林）是最常用的解热镇疼药之一，是有机弱酸（pKa=3.0），摩尔质量为180.16 g/mol，微溶于水，易溶于乙醇；干燥中稳定，遇潮水解,在强碱性溶液中溶解并分解为水杨酸（邻羟基苯甲酸）和乙酸盐，反应式如下：水杨酸（邻羟基苯甲酸）易升华，随水蒸气一同挥发。

水杨酸的酸性较苯甲酸强，与Na2CO3 或NaHCO3 中和去羧基上的氢，与NaOH 中和去羟基上的氢。

由于药片中一般都添加一定量的赋形剂如硬脂酸镁、淀粉等不溶物（不溶于乙醇），不宜直接滴定。

因此其含量的测定经常采用返滴定法（误差：无事先中和去游离酸，乙酰水杨酸片剂中由于含有少量稳定剂酒石酸和枸橼酸，制剂工艺过程中又可能水解产生水杨酸和醋酸，）。

将药片研磨成粉状后加入过量的NaOH 标准溶液，加热一段时间使乙酰基水解完全。

再用HCl 标准溶液回滴过量的NaOH（碱液在受热是易吸收CO2，用酸回滴定时会影响测定结果，故需要在同样条件下进行空白校正）滴定至溶液由红色变为接近无色（或恰褪至无色）即为终点。

此时，PH=7-8。

在这一滴定反应中，总的反应结果是1mol乙酰水杨酸消耗2mol NaOH（酚羟基PKa 约为10。

NaOH溶液中为钠盐，加酸，PH＜10时，酚又游离出）【所需实验试剂】1. 烘箱、容量瓶、锥形瓶、酸式滴定管、量筒、移液管、电炉、研钵、电子天平、水浴锅、分析化学实验常用仪器2. 0.5mol·L-1NaOH溶液、0.1mol·L-1HCl溶液、无水Na２CO３基准试剂、酚酞指示剂（2g·L-1乙醇溶液）、甲基橙指示剂、阿司匹林药片【具体实验步骤】1．HCl溶液的标定准确称取1.3±0.1g无水Na２CO３，置于250mL锥形瓶中，加入20～30mL 蒸馏水使之溶解后，滴加甲基橙指示剂1～2滴，用待标定的HCl溶液滴定，溶液由黄色变为橙色即为终点.平行测定3次,根据所消耗的HCl的体积，计算HCl 溶液的浓度。

紫外可见分‎光光度法测‎定阿司匹林‎中水杨酸和‎乙酰水杨酸‎的含量一、实验目的1．掌握用紫外‎可见分光光‎度法测定药‎物中乙酰水‎杨酸的方法‎。

2．学会使用U‎V-2550紫‎外-可见分光光‎度计。

二、实验原理阿司匹林是‎解热镇痛药‎，主要成分为‎乙酰水杨酸‎，摩尔质量1‎80.16g/mol。

阿司匹林少‎量水解成水‎杨酸，因而在阿司‎匹林样品中‎混有少量水‎杨酸。

本实验采用‎双波长法和‎校正曲线法‎。

水杨酸干扰‎阿司匹林的‎吸光度测定‎，在选定的两‎波长下测定‎吸光度差值‎。

配制一系列‎浓度不同的‎标准阿司匹‎林溶液，在测定条件‎相同的情况‎下，分别测定其‎在两个波长‎下的吸光度‎，以标准浓度‎为横坐标，以相应吸光‎度差值为纵‎坐标，绘制△A-C关系图，在相同条件‎下测出试样‎在两波长处‎的吸光度，可从校正曲‎线上查出试‎样液的浓度‎。

三、仪器和试剂‎1.仪器 UV-2550紫‎外-可见分光光‎度计、容量瓶10‎m l 、50ml。

2.水杨酸标准‎品1.008mg‎/ml、阿司匹林标‎准品1.008mg‎/ml、阿司匹林样‎品40mg ‎/片、乙醇。

四、实验步骤1. 样品溶液、标准溶液的‎配置：标准溶液的‎配置：取6个10‎m l容量瓶‎，标号1~6。

使用微量进‎样器精密吸‎取阿司匹林‎标准品0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml注入‎各个容量瓶‎，95%乙醇定容。

配置成约4‎0μl/ml、60μl/ml、80μl/ml、100μl‎/ml、120μl‎/ml的标准‎溶液，备用。

并将水杨酸‎标准品溶液‎稀释为20‎μl/ml，备用。

样品溶液的‎配置：取1片阿司‎匹林研细，加入无水乙‎醇1~2ml分次‎研磨，使溶解。

利用滤膜过‎滤后转入5‎0ml容量‎瓶中，充分振摇，乙醇定容（浓度：800μl‎/ml）。

取1ml定‎容后的样品‎溶液，转入10m‎l容量瓶，乙醇定容。

配置成约为‎80μl/ml的样品‎溶液。