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预防疾控微生物检验技术：细菌及细菌检验综合题考试题库三1、单选带菌者是指（）A.病原菌潜伏在体内，不向体外排菌者B.感染后，临床症状明显，并可感染他人者C.体内带有条件致病菌者D.体内正常菌群的数量超（江南博哥）出了正常范围E.感染后，临床症状消失，但体内病原菌未被彻底清除，并不断向体外排菌者。
正确答案：E2、单选为了从患者的标本中分离到单个菌落，应将标本接种到（）A.液体培养基中B.半固体培养基中C.固体培养基中D.含抗生素的培养基中E.高渗透压培养基中正确答案：C3、单选以噬菌体为媒介的基因转移方式为（）A.转化B.转导C.接合D.原生质融合E.以上都不对正确答案：B4、单选如果肥达试验结果是H：1：640、O：1：320、PA：1：80、PB：1：80，该患者可能是（）A.甲型副伤寒沙门菌所致副伤寒B.肖氏沙门菌所致副伤寒C.伤寒沙门菌感染D.回忆反应E.预防注射正确答案：C5、多选正常菌群转化为条件致病菌的因素有（）A.条件致病菌从无毒株变为有毒株B.不适当的抗菌药物治疗C.医源性刺激D.宿主免疫功能降低或缺陷E.定位转移正确答案：B, C, D, E6、多选病原菌被吞噬细胞吞噬后，可能的结局有（）A.病原菌被吞噬细胞杀死B.病原菌不被吞噬细胞杀死C.细菌在体扩散D.造成邻近组织损伤E.杀死吞噬细胞正确答案：A, B, C, D, E参考解析：病原菌被吞噬细胞吞噬后。
其后果随细菌种类、毒力和人体免疫力不同而异。
有的病原菌被吞噬后被杀死，是为完全吞噬。
而胞内寄生菌在免疫力低下的宿主中，虽被吞噬但不被杀死，此为不完全吞噬。
有的病原菌甚至在吞噬细胞内生长繁殖，导致吞噬细胞死亡，或随吞噬细菌经淋巴液或血液扩散到其他部位，造成广泛病变。
此外，在吞噬过程中，溶酶体释放出多种水解酶，破坏邻近的正常组织细胞。
7、多选分离致病性肠杆菌科菌时，应选用的培养基是（）A.营养琼脂平板B.血平板C.选择培养基D.鉴别培养基E.厌氧培养基正确答案：C, D参考解析：粪便标本中常含有很多杂菌，应根据检验目的菌的不同而选用具有选择和鉴别作用的培养基，如SS、伊红-美蓝平板、三糖铁培养基等，尽可能地抑制杂菌，以利于病原菌的检出，并能将致病菌与非致病菌区分开来。
从临床标本分离、鉴定细菌的基本要领
1．重视标本送检申请单
标本送检申请单上通常均注明标本的来源及患者的主要临床情况，检验者应予以重视。
这样，可有目的的去检出病原菌，避免走弯道。
2．注意选择适宜的培养基
各种标本初分离应选用的培养基类别参见下表。
各种标本初分离细菌应选用的培养基
3．认真识别污染菌
在从标本中分离出细菌时，应特别注意区分是否是人体正常菌群成员。
并且要识别是否是污染菌，其识别法通常有以下几点：
（1）观察菌落是否在划线上。
（2）结合拟培养细菌的生长特点去对照判断（如菌落的形状、大小、边缘、透明度、湿润度、溶血现象等）。
（3）注意观察培养时间。
非致病菌与致病菌的生长速度不同。
例如布鲁菌与结核分枝杆菌生长缓慢。
（4）涂片染色检查，观察是否与目的菌一样。
值得提出的是机体的某些部位通常是无菌的，若检出细菌，应视为致病菌（如血液、骨髓、脑脊液等）。
项目10：标本中未知细菌的分离和鉴定【目的要求】熟悉临床标本中常见的病原性细菌的分离鉴定方法。
【实验内容】一、脓汁、咽拭子等标本中病原性细菌的分离与鉴定（一）标本采集1．脓拭子：用无菌棉签蘸取患处深部脓液或分泌物少许，置入无菌空试管内，送检。
2．痰拭子：用消毒容器收集病人痰液，用无菌棉签挑取脓稠痰块，置入无菌空试管内，送检。
3．咽拭子：嘱病人把口张大，用压舌板压住舌根，用无菌棉签迅速蘸取咽部分泌物，置入无菌空试管内，送检。
4．血标本：疑为败血症患者，在严格无菌操作下，静脉采血，床旁直接加入含50ml的肉汤瓶内，立即摇匀后送培养。
5．脑脊液：对疑似流脑患者，作腰椎穿刺取脑脊液，立即行直接床旁接种(送检过程中应注意保温)。
6．尿道、阴道分泌物：对可疑淋病患者，男性可从尿道取材，取材时导尿管应进入尿道1cm～2cm，如为刚排尿，应等待1h左右；女性则可以从宫颈口取分泌物，当内窥器插入宫颈口后应稍等片刻，再旋转取出，取材应立即送检，不可放置冰箱。
（二）分离鉴定程序待检标本可直接做涂片染色检查鉴定，必要时可做分离培养、生化反应及致病性鉴定。
常见的致病性球菌检查程序如下。
直接涂片、革兰染色、镜检（形态、排列、染色性）脓、痰、咽拭子分泌物、脑脊液观察菌落性状、溶血性、色素血琼脂平板→↑挑取可疑菌落生化反应血液、穿刺液→肉汤培养基纯分离致病性测定↓药敏试验如培养液混浊时可涂片、染色、镜检（三）常见临床标本的检查方法1．脓拭子在脓汁中除了球菌外，也有杆菌存在，例如革兰阳性的有炭疽杆菌、白喉杆菌、结核杆菌、枯草杆菌等，革兰阴性的有大肠杆菌、绿脓杆菌、变形杆菌等，此外尚可有真菌、放线菌、螺旋体等。
【材料】（1）标本：脓拭子（2）培养基：血琼脂平板（3）兔血浆、白色滤纸片、无菌生理盐水、载玻片【方法】脓汁→革兰染色→镜检↓↑血琼脂平板→观察菌落形态及溶血情况↓致病力试验(1)将脓拭子作革兰染色，镜检(先作培养再涂片以免污染)。
预防疾控微生物检验技术：细菌及细菌检验综合题题库考点三1、单选外斐反应结果为OX19阳性和OXk阴性，支持的诊断是（）A.流行性斑疹伤寒B.恙虫病C.Q热D.甲型副伤寒E.乙型副伤寒正确答案：A2、（江南博哥）单选紫外线杀菌的最适波长为（）A.242nmB.255nmC.265nmD.286nmE.以上都不对正确答案：C3、单选消毒外科手术包应采用的消毒方式是（）A.焚烧B.高压蒸气灭菌法C.干烤D.煮沸E.间歇灭菌正确答案：B4、单选用于饮水、游泳池水消毒的常用消毒剂是（）A.高锰酸钾B.生石灰C.氯D.臭氧E.漂白粉正确答案：E5、单选病原体侵入人体后，临床上不显示出任何症状、体征，但可产生特异性免疫，被称为（）A.潜伏性感染B.病原体被清除C.隐性感染D.显性感染E.病原携带状态正确答案：C6、单选与细菌耐药性有关的质粒是（）A.F质粒.B.R质粒C.Col质粒D.产毒性质粒E.非接合质粒正确答案：B7、单选对肠热症患者进行细菌分离培养，从第1周-第3周均可采集的临床标本是（）A.静脉血B.粪便C.尿液D.骨髓液E.十二指肠引流液正确答案：D8、多选专性需氧生长的细菌是（）A.结核分枝杆菌B.霍乱弧菌C.伤寒杆菌D.绿脓杆菌E.链球菌正确答案：A, B9、单选有关“菌毛”的叙述，哪一项是正确的（）A.多见于革兰阳性菌B.不能直接用光学显微镜观察C.性菌毛与细菌的致病性有关D.普通菌毛与细菌的接合有关E.是细菌的运动器官正确答案：B参考解析：菌毛是许多革兰阴性菌、少数革兰阳性菌菌体表面存在的比鞭毛纤细、短而直的丝状物，须用电子显微镜观察才能看见。
按其功能，菌毛可分普通菌毛与性菌毛两种。
普通菌毛具有粘附宿主细胞的作用，细菌借此可牢固粘附在人体粘膜上皮细胞表面定居，进而侵入细胞内。
无菌毛的细菌则易被排出体外。
因此普通菌毛与细菌致病力有关。
性菌毛由F因子编码产生，供体菌能通过性菌毛，将遗传物质传递给受体菌，故与细菌接合和某些遗传性状的传递有关。
实验十标本中未知细菌的分离和鉴定
实验目的：
（1）了解细菌的分离培养方法和染色技术。
（2）掌握未知细菌的分离与鉴定方法。
（3）使用基本的鉴定技术确定未知菌株的种属。
实验原理：
细菌的分离和鉴定是微生物学领域中的研究重点之一，它是一项极其重要的技术，可以用于从环境中分离出未知细菌，或者为疾病的诊断和治疗提供依据。
分离和鉴定的基本步骤包括准备标本、分离、纯化、染色、形态学特征观察、生理生化特征鉴定等。
（2）菌落计数
菌落计数是一种比较简单、实用的微生物数量统计方法。
其基本原理是在相应培养基中培养所需数量的细菌，将其种在匀质培养基表面上，等待一定时间后，通过肉眼观察和计数器计数，得出单位体积菌落数的统计数据。
（3）清洁措施
实验室的卫生和清洁非常重要，工作区域要每日进行消毒。
要使用消毒剂擦拭实验台面和灭菌设备，保持实验环境的清洁卫生。
实验步骤：
1. 标本处理：将未知标本放入对应的生长基内，摇晃并在恒温箱内培养48小时，使菌落生长到适当的大小。
2. 细菌分离：采用计数板分别涂抹标本样品，摇晃平板均匀扩散，培养48小时。
3. 排除细菌：对分离出的单个菌落进行传代培养，过渡培养10天，如果单个菌落都是一种细菌，即为纯菌。
4. 细菌染色：染色是确定未知菌株种类的重要步骤。
首先进行革兰氏染色以区分细菌的细胞壁特征。
5. 形态学特征观察：观察页面。
6. 生理生化鉴定：
(1)对产酸细菌进行发酵测试，对氧化细菌进行氧化测试。
(2)对氧化酶进行试验。
(3)对盐耐性进行测试。
(4)对温度和气氛的适应性进行测试。
实验结果：
通过上述步骤，我们成功地分离出未知细菌，对其进行染色、形态学特征观察和生理生化鉴定，最终确定了它的种属为大肠杆菌。
通过实验，我们掌握了未知细菌的分离和鉴定方法，成功地确定了未知细菌的种属，这对于深入研究细菌的生物学及其应用具有重要意义。
同时，本实验也提醒我们实验室的消毒及环境卫生的重要性。
