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细菌的分离培养实验目的：掌握在各种培养基上的接种方法并观察生长现象。
实验材料：菌种、普通琼脂平板、肉汤培养基、半固体培养基、斜面培养基、接种环、接种针、酒精灯。
实验内容：一、平板划线接种法（分离培养法）原理：通过在平板上划线，将混杂的细菌在琼脂平板表面充分的分散开，使单个细菌能固定在一点上生长繁殖，形成单个菌落，以达到分离纯种的目的。
若需从平板上获取纯种，则挑取一个单个菌落作纯培养。
用途：分离出纯种细菌，以利作纯培养。
操作方法（三区划线法）：1、右手拿接种环，烧灼冷却后，取菌液一环。
2、左手抓握琼脂平板（让皿盖留于桌上），在酒精灯火焰左前上方，使平板面向火焰，以免空中杂菌落入，右手将已沾菌的接种环在琼脂表面密集而不重叠的来回划线，面积约占整个平板的1/5-1/6，此为第一区。
划线时接种环与琼脂呈30-40度角轻轻接触，利用腕力滑动，切忌划破琼脂。
3、接种环上多余的细菌可烧灼（每划完一个区域是否需要烧灼灭菌视标本中含菌量多少而定），待冷后，在划线末端重复2-3根线后，再划下一区域（约占1/4面积），此为第二区。
4、第二区划完后可不烧灼接种环，用同样方法划第三区，划满整个平皿。
5、划线完毕，将平板扣入皿盖并作好标记，置37°C温箱孵育18-24小时观察琼脂表面菌落分布情况，注意是否分离出单个菌落，并记录菌落特征（如大小、形状、透明度、色素等）。
二、液体培养基接种法用途：凡肉汤、蛋白胨水，各种单糖发酵均用此法接种。
可以观察细菌不同的生长性状、生化特性以供鉴别之用。
操作方法：右手执笔式握住接种环，灭菌冷却后取单个菌落。
1、左手拇指、食指、中指托住液体培养基之下端，右手小指和无名指（或手掌）拔取试管塞，将管口移至火焰上旋转烧灼。
2、将沾菌的接种环移入培养基管中，在液体偏少侧接近液面的管壁上轻轻研磨，沾取少许液体与之调和，使菌液混合于培养基中（图5）。
3、管口通过火焰，塞好试管塞，将接种环灭菌后放下，经37C温箱孵育18-24小时，取出观察生长情况。
实验报告课程名称：环境微生物学实验实验类型：综合实验实验项目名称：微生物的分离与培养与菌落观察学生姓名：专业：环境工程学号：同组学生姓名：指导老师：实验地点：实验日期：2018 年 10月16日一、实验目的和要求1.掌握微生物接种培养技术2.掌握微生物分离纯化技术3.学习并掌握放菌落形态结构的观察方法，认识并理解它们的形态特征。
二、实验内容和原理土壤是微生物生活的大本营，是寻找和发现具有重要价值微生物的主要菌源。
在不同土壤中，各类微生物的数量千差万别。
为了分离获得某种微生物,需要预先制备不同稀释度的菌悬液，并添加相应的抗生素抑制不需要的微生物，例如，添加链霉素25~50U/mL抑制细菌;添加0.5%重铬酸钾液或制霉素50 U/mL 抑制霉菌。
通过10倍稀释以及平板分离、平板涂布和平板划线等操作，微生物可在平板上分散成单个的个体，经过适宜条件培养，单个个体可形成单个菌落。
挑取单个菌落转接至新鲜平板上，即可使目的菌种纯化。
1.菌种的分离纯化：从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。
在分子生物学的研究及应用中，不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物，而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“单一性”，防止其他微生物的混入。
2.平板涂布法：因为将微生物悬液先加到较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中常用的纯种分离方法是涂布平板法。
用途上，一般多用于从菌种的纯化;优点是可以观察菌落特征，对混合菌进行分离;但不能计数3.平板划线法：最简单的分离微生物的方法是平板划线法，其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。
划线的方法很多，常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。
用途一般多用于筛选菌株。
实验五真菌的分离培养及形态观察真菌分离培养应考虑所分离真菌的特性，配制合适的培养基，选择所需的气体环境。
同时, 由于真菌分离材料常污染有大量细菌，所以可在培养基中加入抗菌素并在分离培养过程中严格执行无菌操作。
目的要求1．掌握真菌分离培养方法。
2．认识真菌菌落的特征，比较与细菌菌落有何不同。
3．了解真菌载片培养法。
4．掌握观察真菌的基本方法，并观察其形态特征。
操作步骤—、真菌的分离培养方法（－）平板划线分离法1．取适合真菌的琼脂培养基融化，冷至45℃，注入无菌平皿中，每皿15～20ml，制成平板待用。
2．取要分离的材料（如田土、混杂的或污染的真菌培养物、真菌）少许，投入盛无菌水的试管内，振摇，使分离菌悬浮于水中。
3．将接种环经火焰灭菌并冷却后，蘸取上述菌悬浮液，进行平板划线(同细菌的划线法)。
4．划线完毕，置温箱中培养2～5d，待长出菌落后，钓取可疑单个菌落先作制片检查，若只有一种所需要的真菌生长，即可进行钓菌纯培养。
如有杂菌可从单个菌落中钓少许菌制成悬液，再作划线分离培养，有时需反复多次，才得纯种。
另外，也可在放大镜的观察下，用无菌镊子夹取一段待分离的真菌菌丝，直接放在平板上作分离培养，可获得该种真菌的纯培养。
（二）稀释分离法1．取盛有无菌水的试管5支（每管9ml），分别标记1、2、3、4、5号。
取样品（如田土等）1g，投入1号管内，振摇，使悬浮均匀。
2．用1ml灭菌吸管，按无菌操作法，从1号管中吸取1ml悬浮液注入2号管中，并摇匀；同样由2号管取1ml至3号管，依此类推，直至5号管。
注意每稀释一管应更换一支灭菌吸管。
3．用2支无菌吸管分别由4号、5号试管中各取1ml悬液，并分别注入2个灭菌培养皿中，再加入融化后冷至45℃的琼脂培养基约15ml，轻轻在桌面上摇转，静置，使冷凝成平板。
然后倒置温箱中培养，2～5d后，从中挑选单个菌落，并移植于斜面上。
二．真菌培养性状观察（一）真菌在固体培养基上的生长表现1 .酵母菌菌落：酵母菌在固体培养基上多呈油脂状或蜡脂状，表面光滑、湿润、黏稠，有的表面呈粉粒状、粗糙或皱褶。
会宁职业中等专业学校养殖专业（模块版）生农实验实年月《畜禽疫病防治》实训大纲一、性质与任务本课程是中职养殖专业的一门重要基础课。
它以化学、生物化学、家畜解剖生理学为基础，通过学习本课程，为学习兽医药理学、家畜病理学、家畜传染病学和兽医卫生检验等奠定基础。
实施本课程的教学是使学生运用辩证唯物主义观点去认识畜禽疾病的本质，掌握畜禽传染病的微生物学检查，为诊断、防治动物传染病提供科学的理论依据。
二、适用专业3年制中职养殖专业。
三、教学目标通过本课程的教学实训，使学和基本掌握以下技能：1.学会显微镜油镜的选用及细菌形态结构观察。
2.掌握实验室常用仪器的选用与保养。
3.学会细菌标本片制备和染色法。
4.学会培养基本制备。
5.学会细菌的分离、移植和微生物学检查。
6.学会细菌药敏试验操作技术。
7.学会实验动物的人工接种和剖检技术。
8.学会应用血清学试验诊断畜禽传染病。
五、实训内容实训一显微镜油镜的选用及细菌形态结构观察(一)实训目的能利用显微镜油镜观察细菌的基本形态和特殊结构，熟悉显微镜的保养。
(二)材料用具1.材料香柏油、二甲苯、擦镜纸和细菌染色标本片。
2.用具生物显微镜。
(三)实训内容1.油镜的选用方法。
2.细菌基本形态的观察。
(四)实训报告布置实训报告，画出所观察的细菌形态。
(五)考核办法实训成绩以100分计，其中，实训态度占10分,操作能力占40分，实训结果占20分，实训报告占30分。
实训二微生物实验室常用仪器的选用与保养(一)实训目的要求学生掌握微生物实验室主要常用仪器的选用与保养方法。
(二)材料用具恒温培养箱、普通冰箱、干热灭菌箱、高压灭菌器、离心机、振荡器。
(三)实训内容恒温培养箱、普通冰箱、干热灭菌箱、高压灭菌器、离心机、振荡器选用与保养方法。
(四)实训报告布置实训报告，写出高压灭菌器选用注意事项。
(五)考核办法实训成绩以100分计，其中，实训态度占10分,操作能力占40分，实训结果占30分，实训报告占20分。
江苏省中等职业学校农林牧渔类畜禽生产技术专业《动物微生物》课程标准（试行）一、课程性质本课程是江苏省中等职业学校农林牧渔类畜禽生产技术专业必修的一门专业核心课程，是在《生物基础》《畜禽解剖生理》等课程基础上，开设的一门理论与实践相结合的专业课程，其任务是让学生掌握微生物实验室诊断和免疫防治等基础知识和基本技能，为后续《畜禽疫病防治》《畜禽普通病》等课程的学习奠定基础。
二、学时与学分54学时，3学分。
三、课程设计思路本课程按照立德树人的要求，突出核心素养、必备品格和关键能力，兼顾中高职课程衔接，将动物微生物基础知识和基本技能的学习和职业精神培养高度融合。
1.依据《江苏省中等职业学校农林牧渔类畜禽生产技术专业指导性人才培养方案》确定的培养目标、综合素质、职业能力，按照知识与技能、过程与方法、情感态度与价值观三个维度，突出敏感药物选择、病毒鸡胚接种和传染病防治等能力的培养，结合学生职业生涯发展需要，确定本课程目标。
2.根据“江苏省中等职业学校畜禽生产技术专业‘工作任务与职业能力’分析表”，依据课程目标和动物疫病防治员等岗位需求，围绕动物疫病防治工作实际，体现科学性、适用性原则，确定本课程内容。
3.以畜禽生产技术专业岗位典型工作任务为主线，将相应的专业理论知识、专业技能和职业素养有机融入所设置的模块和教学单元，遵循学生的年龄特征以及认知和技能形成规律，确定学习内容的顺序。
四、课程目标学生通过学习本课程，掌握常见细菌病和病毒病的实验室诊断基础知识和基本技能，能进行畜禽生产与疾病防治，养成良好的学习习惯，确立良好的职业意识。
1.了解微生物的营养、代谢和生长的特点，掌握细菌、病毒等主要病原微生物的形态结构特征、生长繁殖规律和主要特征。
2.掌握微生物检验常用仪器的使用保养，能完成微生物检验中常用玻璃器皿的准备。
3.能采集细菌病料，能熟练地进行涂片染色镜检、细菌分离培养，会通过药敏试验选择敏感药物。
4.掌握病毒病料采集方法，能熟练地进行病毒的鸡胚接种。
实验报告课程名称：环境微生物学实验实验类型：综合实验实验项目名称：微生物的分离与培养与菌落观察学生姓名：专业：环境工程学号：同组学生姓名：指导老师：实验地点：实验日期：2018 年 10月16日一、实验目的和要求1.掌握微生物接种培养技术2.掌握微生物分离纯化技术3.学习并掌握放菌落形态结构的观察方法，认识并理解它们的形态特征。
二、实验内容和原理土壤是微生物生活的大本营，是寻找和发现具有重要价值微生物的主要菌源。
在不同土壤中，各类微生物的数量千差万别。
为了分离获得某种微生物,需要预先制备不同稀释度的菌悬液，并添加相应的抗生素抑制不需要的微生物，例如，添加链霉素25~50U/mL抑制细菌;添加0.5%重铬酸钾液或制霉素50 U/mL 抑制霉菌。
通过10倍稀释以及平板分离、平板涂布和平板划线等操作，微生物可在平板上分散成单个的个体，经过适宜条件培养，单个个体可形成单个菌落。
挑取单个菌落转接至新鲜平板上，即可使目的菌种纯化。
1.菌种的分离纯化：从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。
在分子生物学的研究及应用中，不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物，而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“单一性”，防止其他微生物的混入。
2.平板涂布法：因为将微生物悬液先加到较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中常用的纯种分离方法是涂布平板法。
用途上，一般多用于从菌种的纯化;优点是可以观察菌落特征，对混合菌进行分离;但不能计数3.平板划线法：最简单的分离微生物的方法是平板划线法，其原理是将微生物样品在固体培养基表面多次作“由点到线”稀释而达到分离目的的。
划线的方法很多，常见的比较容易出现单个菌落的划线方法有斜线法、曲线法、方格法、放射法、四格法等。
用途一般多用于筛选菌株。
