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细胞生物学实验报告实验一、二实验名称石蜡包埋切片技术和苏木精-伊红染色1、为什么生物体的组织要经过如此繁琐的步骤才能观察其组织结构?①首先，生物体是一个非常复杂的组合体。
②其次，这个复杂的组合体是比较脆弱的；作为一个生物研究者，想要观察一个生物体的组织，就必须尽量观察其完整形态，步骤繁琐，并不是在浪费时间，而是为了保证看见的是最真实的，最接近想要看到的结果。
态度严谨了，就不觉得繁琐了。
③石蜡包埋是用于样本固定，方便切片。
切片的目的是方便观察，样本如果厚的话，不利于透光，而且组织重叠，是无法有效观察的。
④染色的目的是也是为了更直观的观察，原始样本不染色的话，在显微镜下是近乎透明的，无法区分细胞或细胞器。
2、查阅文献，有哪些文章采用石蜡包埋切片和H.E染色?请列出这些文献(至少10篇)。
（1）王慧丰,徐亦辰,赵文婧,陈维平.微小组织结构石蜡切片的制备[J].临床与实验病理学杂志,2020,36(08):997-998.（2）赵学影,肖慧,胡子豪,陈云帆,王黎源,隋东莉.HE和免疫组化染色观察人体结肠系膜淋巴管构筑[J].赣南医学院学报,2020,40(01):54-57.（3）万慧颖,徐敏燕,李芳华,胥颖,谢震.荧光原位杂交技术快速鉴定石蜡包埋组织中的曲霉菌感染[J].实用医院临床杂志,2020,17(01):43-46.（4）张晓恒,姚佳,秦冬梅.毛菊苣提取物对小鼠肝纤维化的保护作用[J].世界华人消化杂志,2020,28(03):86-91.（5）连国亮,陈东,商建峰,李彦玮,李倩.胸腔积液凝集物在组织脱落细胞学诊断中的应用[J].医学研究杂志,2019,48(05):152-155+161.（6）张彩丽,张俊霞,刘湘花,孙丽敏,李瑞琴.实验动物多脏器组织石蜡切片统一制做流程及影响条件[J].临床与实验病理学杂志,2019,35(01):108-109.（7）张强,解植伟,尹昊锋,王君,马昊,马福顺.A型肉毒毒素对兔脂肪组织影响的实验研究[J].中国美容整形外科杂志,2019,30(08):467-469.（8）焦哲,王鑫坤,霍军,阴正兴,吴凤笋,吴玉臣,康静静.3例犬淋巴瘤和1例猫淋巴瘤的病理组织学诊断[J].动物医学进展,2019,40(11):137-140.（9）罗晓舟,金小千,温小鹏,罗伦,唐纯志.针刺太冲、太溪对自发性高血压大鼠下丘脑病理形态的影响[J].中华中医药学刊,2019,37(04):781-787+1025.（10）尚宏伟,路欣,郭晓霞.褪色胃组织标本再染色后在教学中的应用[J].继续医学教育,2019,33(03):25-26.3、通过你自己所查阅的文献，谈一下石蜡包埋切片和H.E染色的用途。
细胞生物学实验（本科生）实验内容实验一细胞的结构目的：1、熟悉实验室规范2、掌握光镜下细胞器的形态、分布特点；3、掌握临时制片法；4、学会生物绘图内容：（一）录像：临时标本片的制作（二）光镜下细胞器形态学观察：1、高尔基体（兔神经节切片）2、细胞核及核仁（蝾螈表皮装片）3、线粒体（肾小管切片）4、细胞骨架（培养肝癌细胞飞片）5、中心体*（马蛔虫受精卵切片）（二）操作：制作人口腔上皮细胞临时制片（显示活体线粒体）（三）实验报告：绘制人口腔粘膜上皮细胞实验二细胞化学细胞工程目的：1、掌握甲基绿-派洛咛染色法原理及操作技巧2、了解几种化学成分的显示方法及原理；3、观察各种化学成分在细胞中的分布；4、了解PCC原理；5、了解细胞融合及其应用；内容：（一）录象：克隆羊（二）观察：1、糖原（动物肝切片，PAS反应）2、酸性蛋白（蟾蜍血涂片，酸性固绿染色）3、酸性磷酸酶*（鼠腹腔液涂片，金属沉淀法显色）4、DNA* （小鼠睾丸切片，Feulgen反应）5、DNA、RNA*（人口腔粘膜上皮细胞涂片，吖啶橙染色，荧光显微镜观察）6、细胞融合（鸡血细胞、培养细胞）7、PCC*（Hela细胞）（三）操作：制作蟾蜍血涂片，显示DNA、RNA（四）实验报告：甲基绿-派洛咛染色原理、步骤及结果实验三显微测量细胞的生理活动目的：1、掌握显微测量技术；2、观察细胞的生理活动；3、掌握死活细胞的鉴别方法及原理；内容：(一)录象：细胞的活动显微测量（二）观察：1、胞质环流（黑藻叶片）2、吞噬作用*（小鼠白细胞）3、吞噬作用（蟾蜍白细胞）（三）操作：1、显微测量（蟾蜍红细胞）2、死活细胞鉴别（酵母细胞）（四）实验报告：1、测量5-10个细胞的大小，计算平均值；2、计算细胞存活率。
实验四细胞增殖染色体（质）目的：1、熟悉细胞增殖的主要方式；2、掌握细胞增殖周期各期的形态学特点；3、熟悉人染色体的基本形态特征；4、掌握X染色质标本的制备方法及原理；内容：（一）观察：1、动物细胞有丝分裂（马蛔虫受精卵切片）2、植物细胞有丝分裂（洋葱根尖纵切片）3、收缩环*（肝癌细胞飞片）4、无丝分裂*（草履虫装片）5、人染色体的基本形态（人血涂片）（二）操作：1、制作有丝分裂压片（洋葱根尖）2、制作X染色质标本片（人口腔粘膜上皮细胞）（三）实验报告：绘有丝分裂图、X染色质图。
第三章细胞生物学研究方法习题一、选择题1 正常细胞培养的培养基中长需加入血清，主要是因为血清中含有（C ）A. 氨基酸B. 核酸C.生长因子D.维生素2 冷冻蚀刻技术主要用于（A ）。
A.电子显微镜B. 光学显微镜C.原子力显微镜D.激光共聚焦显微镜3 建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞是通过下列哪种技术构建的？（A ）A. 细胞融合B. 核移植C. 病毒转化D. 基因转移4 关于光镜的使用，下列哪项有误？（C ）A. 观察标本时，应双眼同时睁开、双手并用B. 按照从低倍镜到高倍镜到油镜的顺序进行操作C. 使用油镜时，需要在标本上滴上香柏油，将聚光器降至最低，光圈全部开放。
5 为了实现细胞内某种蛋白质的亚细胞精细定位，可对该蛋白进行标记，下面哪种标记可行（C）A. GFP标记B. 免疫荧光标记C. 免疫电镜技术D. 荧光染料直接染色6 为了提高雌性乳牛出生的比例，可在体外将携带X染色体和Y染色体的镜子分离开，进行人工授精。
最好的分离方法使（A ）A. 流式细胞分选术B. 离心技术C. 细胞电泳D. 层析7 为了观察病毒，可通过何种方法进行观察（B ）A. 相差显微镜观察B. 负染色后用电镜观察C. 激光共聚焦显微镜观察D.以上都错8 以下哪些技术一般不用于分离活细胞？（CD ）（可多选）A. 流式细胞技术B. 细胞电泳C. 超速离心D.差速离心9 某研究生为了研究一特定膜蛋白的胞质结构域的功能，需要制备和分离外翻的细胞膜泡，为了获得无污染的外翻膜泡，下列选项中，哪些是他在实验中有可能使用到的?（BD ）（可多选）A. SDSB. 凝集素C.流式细胞仪D. 柱层析10 绿色荧光蛋白GFP（Green Fluorescent Protein）基因与目的基因融合后，转入细胞后可以（ABD ）（可多选）A. 检测融合蛋白在细胞中的准确定位B. 检测目的基因所编码的蛋白在细胞中的含量C. 检测目的基因所编码的蛋白在细胞中的分子结构D. 检测目的蛋白质在细胞中的表达量E. 以上答案都不对二、填空题1 流式细胞仪可以定量测定细胞中的DNA，RNA或某种特异蛋白的含量及细胞群体中上述成分含量不同的细胞数量。
《细胞生物学》实验教学大纲（Cell Biology）课程编号：1922011（1923011）课程名称：细胞生物学实验学分：1实验学时：32适用专业：生物技术、生物科学、生物科学（师范）、生物工程实验名称与学时安排实验一、细胞化学技术与显微切片技术实验性质：综合性实验实验内容：①装片、涂片、压片、徒手切片等显微制片技术；②石蜡切片技术；③冰冻切片技术；④鉴定DNA的细胞化学方法；⑤显示多糖的PAS反应；⑥细胞中过氧化物酶的显示方法；⑦显示碱性蛋白与总体蛋白的细胞化学定位。
实验目标与要求：掌握细胞生物学常规的生物制片方法，以及在制片基础上进行细胞化学染色，使细胞内的各种组成结构和化学成分定性、定量地得以显示。
了解常用的原位显示细胞内某些化学成分的一般原理和方法。
掌握细胞内DNA、多糖、蛋白质、酶等在细胞内的分布状况。
注意要点：注意有机溶剂和染料对人体的伤害和污渍；双面刀片的正确使用；切片机的使用。
实验二、细胞凝集反应实验性质：验证性实验实验内容：红细胞的凝集反应。
实验目标与要求：了解及学习细胞凝集反应的过程及操作方法，通过实验加深对细胞表面结构的理解。
注意要点：注意显微镜的正确使用。
实验三、细胞膜的渗透性实验性质：验证性实验实验内容：红细胞的渗透性。
实验目标与要求：了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。
注意要点：对试管轻拿轻放。
实验四、线粒体和液泡系的超活染色与观察实验性质：验证性实验实验内容：人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色观察；洋葱鳞茎表皮细胞线粒体的超活染色观察；小麦胚根液泡系的超活染色。
实验目标与要求：观察动、植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布，学习一些细胞器的超活染色技术。
注意要点：注意染料的使用。
实验五、植物细胞骨架的光学显微镜观察实验性质：验证性实验实验内容：洋葱鳞茎表皮细胞骨架的分布。
实验目标与要求：了解细胞骨架的相关知识，掌握细胞骨架的简单制备方法。
注意要点：注意戊二醛、考马斯亮兰的使用。
细胞生物学专业硕士研究生培养方案一、培养目标：1、本学科培养德、智、体全面发展，在细胞生物学领域掌握坚实的理论基础与系统的专业知识以及与本学科有关的实验方法和技能，了解细胞生物学发展的前沿。
在本学科及相关学科领域独立开展研究工作，具有独立承担细胞生物学研究、教学、科技开发与推广等工作的能力。
2、能正确使用计算机，较熟练掌握一门外国语。
3、具有健康的体魄和良好的心理素质。
二、研究方向：1、植物染色体结构与功能：以植物染色体为研究对象，研究染色体的数目、形态结构及物质组成，染色体的运动、染色体的功能等方面特征，以及这些特征的各类变异对遗传传递、重组、表达与调控的作用和影响。
2植物细胞与细胞周期调控：将细胞结构、细胞生理生化方法与基因工程方法结合起来研究植物的遗传本质和遗传规律、细胞增殖与调控、代谢与生长等。
3、植物细胞信号转导：利用各种显微成像（超微、激光共聚焦）和分子遗传学等技术，研究植物生长和发育过程中各种植物细胞信号（细胞分裂素，Ca2+等）对细胞分裂和细胞分化起的各种作用，以及植物细胞生理以及植物感受各种逆境胁迫的信号转导机制，揭示环境信号在植物发育过程中的调节机制。
4、植物细胞工程：本方向主要研究植物生长发育机制、特别是植物胚和胚乳发育机制，重要植物的组织培养。
将植物细胞培养、细胞诱变育种、细胞遗传操作等现代生物技术与常规遗传育种相结合，培育林木和花卉的新品种（新材料），建立相关新技术。
三、学习年限和时间安排全日制硕士研究生学习年限一般为3年。
根据实际情况，经本人申请、导师同意、学校批准，可适当提前或延长一年，在职硕士可延长二年。
累计在学年限一般不超过5年。
第一年一般以课程学习为主，后两年以论文工作为主。
四、课程设置, 学分要求和课程说明硕士生总学分不少于32学分（2学分实践性环节）。
课程分为学位课和非学位课程，其中学位课程不少于18学分，对于同等学力和跨学科考的硕士生需补本科生课程。
硕士生32学分中，学位课约占57%左右，非学位（即选修课）约占43%左右（包括实践环节）。
第二章细胞生物学技术细胞生物学的发展是与实验技术的进步密切相关的，细胞生物学的每一个重大进展都是由于引入了新的研究技术的结果。
光学显微镜的发明开创了细胞学，电子显微镜的出现使人们对细胞结结构的认识深入到超微结构水平。
细胞化学和分析细胞学技术可对细胞的各种成分进行定位和定量的分析，有利于细胞结构与功能的研究。
细胞培养技术可将细胞在体外环境中生长，在体外研究细胞的结构、功能和生命活动规律，而细胞工程技术则可人为地将细胞进行改造，以获得具有特定生物学特性的细胞。
近年来，分子生物学技术的广泛应用，更有力地推动了细胞生物学的发展。
细胞生物学技术种类很多，包括物理技术、化学技术和实验生物学技术等，本章仅对主要的细胞生物学技术作简略的介绍，对于在细胞生物学研究中广泛应用的分子生物学技术，由于篇幅有限，本书不作介绍了。
第一节显微镜技术显微镜技术是细胞学和细胞生物学得以建立和发展的重要工具，包括光学显微镜（light microscope）、电子显微镜(electron microscope )和扫描探针显微镜(scanning probe microscope)三个层次的显微镜和相应的技术。
在光学显微镜下看到的细胞结构称为细胞显微结构（microscopic structure），由于受到分辨率的限制，光学显微镜不能分辨直径小于0.2μm的结构，如生物膜、细胞骨架和一些细胞器等。
电子显微镜下则可以观察到这些光学显微镜下看不到的结构，称为细胞亚显微结构（submicroscopic structure）。
随着电子显微镜分辨率的不断提高，再结合一些其他技术如扫描探针显微镜和X光衍射等，己使人们对细胞结构的认识达到分子水平。
一般把细胞从亚显微水平到分子水平的结构统称为细胞超微结构（ultrastructure）。
图2-1显示了不同分辨率时所看到的拇指表皮结构，从大体、显微、亚显微、一直到分子、原子水平。
图2-1 细胞与原子比例图（引自Alberts等，2002）参照前书图2-1一、显微镜与分辨率人类最初只是用肉眼直接观察周围世界，可是人眼观察事物的能力是有限的，一般情况下在25cm的明视距离内，只能分辨相距0.1～0.2mm的两个物体，如果小于这一距离，人的眼睛就不能分辨。
细胞生物学研究技术和基本原理1. 大纲要求1.1. 观察细胞形态结构的技术方法和仪器1.1.1.光学显微技术1.1.1.1 了解普通复式光学显微镜：掌握分辨率及计算公式，像差与复合透镜1.1.1.2 了解观察样品的一般制备：固定、切片、染色1.1.1.3了解荧光显微镜与观察样品的荧光染色1.1.1.4 了解暗视野显微镜：聚光器，分辨率1.1.1.5了解相差显微镜：用途、特有装置（光栏、相版），原理1.1.1.6了解干涉显微镜：用途、特有装置干涉器1.1.1.7了解激光共聚焦扫描显微镜及其原理、用途1.1.1.8了解计算机等技术在光学显微技术中的应用1.1.2.电子显微镜技术1.1.2.1了解透射电镜：基本构造，成像原理，分辨率；超高压电镜1.1.2.2了解透射电镜观察样品制备：超薄切片技术，负染色和暗视场制片术冰冻劈裂一复型技术和金属投影技术1.1.2.3了解扫描电镜和隧道电镜及其原理和用途1.2. 细胞化学组成及其定位和动态分析技术1.2.1理解细胞和细胞器的分离：如匀浆和差速离心技术等1.2.2理解基本生物化学和分子生物学技术1.2.3理解细胞化学、免疫荧光细胞化学、细胞光度和流式细胞分离技术1.2.4了解电镜细胞化学和电镜免疫细胞化学技术1.2.5了解显微放射自显影、分子原位杂交1.3. 了解细胞培养、细胞工程、显微操作、活体染色等技术方法2. 大纲详解2.1. 观察细胞形态结构的技术方法和仪器2.1.1.光学显微技术2.1.1.1 了解普通复式光学显微镜：掌握分辨率及计算公式，像差与复合透镜分辨率：是指区分开两个质点间的最小距离，是任何显微镜最重要的性能参数。
分辨率的高低取决于：官员的波长λ、物镜的镜口角α和介质的直射率N，它们之间的关系为D=0.61λ/N sin(α/2)2.1.1.2 了解观察样品的一般制备：固定、切片、染色为了便于光学显微镜、电子显微镜进行观察，经过固定、切片、染色等操作步骤更易于进行。
第1章绪论一、填空1．细胞生物学是从显微水平、超微水平、分子水平等3个水平上研究细胞生命活动的科学。
2．细胞最初由胡克在1665年首先发现的。
4.1953年沃森和克里克共同提出了DNA分子的双螺旋结构模型。
5．细胞生物学是研究细胞基本生命活动规律的科学，它在不同层次上研究细胞结构与功能、细胞增殖、分化、衰老与凋亡、细胞信号传递等内容。
6．生命体是多层次、非线性、多侧面的复杂结构体系，而细胞是生命体的结构与生命活动的基本单位，有细胞才有完整的生命活动。
7．生命体的生长、发育、遗传等生命活动的研究都要以细胞为基础。
核心是将遗和发育在细胞水平上结合起来。
8．当前细胞生物学研究中的三大基本问题：基本表达，结构体系和细胞器的组装，生命活动的调节9.生物科学的发展阶段：以形态描述学位主的生物科学时期：实现生物学时期；精细定位与定量的生物学时期三、简答题1．简述细胞学说的主要内容。
①认为细胞是有机体，一切动植物都是由细胞发育而来，并由细胞和细胞产物所构成；②每个细胞作为一个相对独立的单位，既有它“自己的”生命，又对与其它细胞共同组成的整体的生命有所助益；③新的细胞可以通过老的细胞繁殖产生。
第2章细胞概述一、填空题1.细胞中含量最多的4种化学元素是C、H、O、N。
2.细胞中的生物大分子一般包括蛋白质、核酸和酶等。
3.酶分子的主要特性有高效、特异和可调。
4.真核细胞的超微结构可分为生物膜系统和遗传信息表达体系、细胞骨架体系三大类。
5.无机盐在细胞中的主要功能有：调节渗透压和维持酸碱平衡。
6.构成细胞的最基本的要素是细胞膜、遗传信息载体DNA与RNA完整的代谢系统。
7.由于发现了类病毒，有理由推测RNA是最早形成的遗传信息的一级载体。
8.目前发现的最小最简单的原核细胞是支原体。
9.原核细胞的核是原始状态的核，主要表现在没有明显可见的细胞核，同时也没有核膜和核仁，只有拟核，进化地位较低10.细胞是由细胞膜包围着含有遗传物质的细胞核所组成。
2014细胞生物学实验课内容（细胞形态观察、细胞器活体染色、细胞骨架观察）第一篇：2014 细胞生物学实验课内容(细胞形态观察、细胞器活体染色、细胞骨架观察)实验三细胞形态的观察【实验目的】1.认识光学显微镜下细胞的形态结构；2.掌握临时制片和显微绘图的方法。
【材料、器材和试剂】材料：人体口腔黏膜上皮细胞、洋葱鳞茎；器材：显微镜、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、牙签、滤纸；试剂：1%碘液。
【方法和步骤】1.口腔黏膜上皮细胞的制片与观察口腔黏膜细胞涂片标本的制备：吸取一滴碘液滴在一张洁净的载玻片中央，用一根事先灭菌的牙签伸入自己的口腔内壁轻轻刮取黏膜上皮细胞，然后，将其放入载玻片上的染液中并来回搅动使细胞散开，染色1 min左右后小心加盖玻片（尽量避免产生气泡），用滤纸吸去盖玻片周围的液体。
观察：将自制的口腔黏膜上皮细胞标本装片置于显微镜下观察，先用低倍镜观察较分散的、轮廓清晰的黏膜上皮细胞。
由于该细胞体积较小、着色较淡，观察时应稍降低视野亮度以便于较快找到目标（在低倍镜下，用碘液染色的细胞呈黄色，成群或分散分布，形态大小多呈扁平椭圆形）。
选择轮廓清晰的细胞移至视野中央，转换至高倍镜下观察。
在高倍镜下，可见口腔黏膜上皮细胞外围有一层薄薄的细胞膜，扁圆形的细胞核呈深黄色，细胞质呈浅黄色或浅蓝色，核中央致密的结构为核仁。
2.洋葱鳞茎内表皮细胞的制片与观察表皮细胞装片标本的制备：取一干净载玻片，在其中央滴一滴碘液，将洋葱鳞茎用小刀分为几块，取一块肉质鳞叶，用剪刀在内表皮划“田”字形小方格，每一小方格边长3-4mm，然后用镊子轻轻撕下一小方格的膜质表皮，置于载玻片的碘液滴中铺平，取一干净的盖玻片，将其一侧先接触标本旁的碘液，再缓缓地盖上盖玻片，尽量避免产生气泡，用滤纸吸去盖玻片周围的液体。
观察：将制备好的装片标本放到显微镜下，先用低倍镜观察，可见许多长柱状、排列整齐、彼此相连的细胞，选择其中一个典型的细胞移至视野中央，再转换至高倍镜下仔细观察细胞壁、细胞核、细胞质和液泡等结构。
