细胞生物学常用技术共99页
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第二章细胞生物学技术细胞生物学的发展是与实验技术的进步密切相关的,细胞生物学的每一个重大进展都是由于引入了新的研究技术的结果。
光学显微镜的发明开创了细胞学,电子显微镜的出现使人们对细胞结结构的认识深入到超微结构水平。
细胞化学和分析细胞学技术可对细胞的各种成分进行定位和定量的分析,有利于细胞结构与功能的研究。
细胞培养技术可将细胞在体外环境中生长,在体外研究细胞的结构、功能和生命活动规律,而细胞工程技术则可人为地将细胞进行改造,以获得具有特定生物学特性的细胞。
近年来,分子生物学技术的广泛应用,更有力地推动了细胞生物学的发展。
细胞生物学技术种类很多,包括物理技术、化学技术和实验生物学技术等,本章仅对主要的细胞生物学技术作简略的介绍,对于在细胞生物学研究中广泛应用的分子生物学技术,由于篇幅有限,本书不作介绍了。
第一节显微镜技术显微镜技术是细胞学和细胞生物学得以建立和发展的重要工具,包括光学显微镜(light microscope)、电子显微镜(electron microscope )和扫描探针显微镜(scanning probe microscope)三个层次的显微镜和相应的技术。
在光学显微镜下看到的细胞结构称为细胞显微结构(microscopic structure),由于受到分辨率的限制,光学显微镜不能分辨直径小于0.2μm的结构,如生物膜、细胞骨架和一些细胞器等。
电子显微镜下则可以观察到这些光学显微镜下看不到的结构,称为细胞亚显微结构(submicroscopic structure)。
随着电子显微镜分辨率的不断提高,再结合一些其他技术如扫描探针显微镜和X光衍射等,己使人们对细胞结构的认识达到分子水平。
一般把细胞从亚显微水平到分子水平的结构统称为细胞超微结构(ultrastructure)。
图2-1显示了不同分辨率时所看到的拇指表皮结构,从大体、显微、亚显微、一直到分子、原子水平。
图2-1 细胞与原子比例图(引自Alberts等,2002)参照前书图2-1一、显微镜与分辨率人类最初只是用肉眼直接观察周围世界,可是人眼观察事物的能力是有限的,一般情况下在25cm的明视距离内,只能分辨相距0.1~0.2mm的两个物体,如果小于这一距离,人的眼睛就不能分辨。