优 点:
细胞生物学技术
—流式细胞仪
❖ 1、具有操作简便,只要将染色的单个细胞推入仪器 中,就会得出数据。
❖ 2、具有较高的灵敏度及测定速度,而且每次可测出 许多数据,一般情况下,每秒可测5000个细胞,能 迅速分析和记数大量细胞,并能准确统计群体中荧 光标记细胞的比例。
❖ 3、应用广泛,即可用于测定细胞活力、繁殖周期和 细胞定型分析,也可区别死亡细胞、分裂细胞和静 止细胞群,既可测定DNA和RNA、测凋亡峰 ,又可 测蛋白含量,特别是胞浆蛋白。
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Charged Plates
中;其它液体被当作废
液抽吸掉,某些类型的
仪器也有采用捕获管来
进行分选的。
Single cells sorted
into test tubes
FALS Sensor
Fluorescence detector
+
细胞生物学技术
—流式细胞仪
单参数直方图(Histogram)
数据处理原理:FCM的 数据处理主要包括数据 的显示和分析,至于对 仪器给出的结果如何解 释则随所要解决的具体 问题而定。
细胞生物学技术
—流式细胞仪 应 用:
❖ 目前流式细胞仪(FCM)已在各学科中获得应 用。
❖ 细胞生物学:定量分析细胞周期并分选不同 细胞周期时相的细胞;分析生物大分子如 DNA、RNA、抗原、癌基因表达产物等物质 与细胞增殖周期的关系,进行染色体核型分 析,并可纯化X或Y染色体,等等。
细胞生物学技术
细胞生物学技术
—流式细胞仪
工作原理
流式细胞仪技术,主要是测 量群体中单个细胞经适当染 色后其成分所发出的散射光 和荧光,经染色的细胞在悬 液中以单行流过高强度光源 的焦点,当每个细胞经过焦 点时,发出一束散射光/或荧 光。它们经过过滤及光镜系 统收集到达一个光电检测器 (光电倍增管或一个固态装 置),光检测器把散射光定量 转化成电信号,经数字转换 器进行数字化后而成整数, 然后进行电子存储,以后数 据可以调出显示和进行分析。 如左图所示。