结核感染T细胞斑点试验诊断结核性心包积液的意义
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T细胞斑点试验联合腺苷脱氨酶在结核性胸膜炎诊断中的应用价值1. 引言1.1 研究背景结核病是一种由结核分枝杆菌引起的慢性感染疾病,其最常见的肺部感染形式是肺结核。
结核病也可侵犯其他器官,其中胸膜是比较常见的受累部位之一。
结核性胸膜炎是指结核分枝杆菌侵袭胸膜引起的炎症反应,临床症状表现为胸膜积液等症状。
早期诊断和治疗对于结核性胸膜炎的治疗和预后至关重要。
传统的结核性胸膜炎诊断依赖于细菌培养或酸杆菌涂片检查,但这些方法存在着一定的局限性,诊断效率较低。
近年来,基于免疫学原理的检测方法得到了广泛应用,其中T细胞斑点试验(T-SPOT)和腺苷脱氨酶测定(ADA)作为诊断结核病的辅助方法备受关注。
T-SPOT 检测通过检测T细胞对结核分枝杆菌蛋白的特异性反应,而ADA测定则是通过检测胸膜积液中ADA活性来帮助诊断结核性胸膜炎。
在这样的背景下,本研究旨在探讨T细胞斑点试验联合腺苷脱氨酶在结核性胸膜炎诊断中的应用价值,以期提高结核性胸膜炎的早期诊断率和准确性,为临床治疗提供更有力的支持。
1.2 研究目的研究目的:本文旨在探讨T细胞斑点试验联合腺苷脱氨酶在结核性胸膜炎诊断中的应用价值。
结核性胸膜炎是结核病的一种常见并发症,其诊断具有一定的难度和挑战性。
传统的结核性胸膜炎诊断方法存在局限性,如结核杆菌培养、涂片检查等方法需要较长的时间且结果不稳定。
本研究旨在评估T细胞斑点试验结合腺苷脱氨酶在结核性胸膜炎诊断中的准确性和敏感性,为临床提供更为快速、准确的诊断手段。
通过深入分析临床研究结果和影响因素,探讨T细胞斑点试验联合腺苷脱氨酶在结核性胸膜炎诊断中的应用前景,为临床实践提供更科学的指导和决策依据。
2. 正文2.1 T细胞斑点试验在结核性胸膜炎诊断中的应用T细胞斑点试验是一种检测T细胞对结核分枝杆菌的反应的方法,已被广泛运用于结核病的诊断中。
在结核性胸膜炎的诊断中,T细胞斑点试验可以帮助鉴别结核感染和非结核感染,提高了诊断的准确性和敏感性。
结核分枝杆菌T细胞斑点试验对结核性胸腔积液诊断价值的研究许雪成;茅利明【摘要】目的:探讨结核分枝杆菌(MTB)T细胞斑点试验(T-SPOT)在疑似MTB感染伴胸腔积液患者快速诊断中的应用价值。
方法疑似MTB感染伴胸腔积液患者124例,应用T-SPOT检测外周血淋巴细胞对MTB特异性分泌蛋白EAST-6和CFP-10的免疫反应。
利用MTB DNA法检测胸腔积液中的MTB,同时用免疫金标法检测血清MTB抗体,并进行统计学分析。
结果124例疑似患者经过痰和胸腹水抗酸染色镜检、痰液和胸腹水MTB培养、结核菌素皮肤试验、MTB DNA和MTB抗体等试验确诊结核病患者44例,阳性检出率为35.5%。
T-SPOT的阳性检出率为33.06%(41/124),MTB DNA的阳性检出率为14.52%(18/124),血清MTB抗体的阳性检出率为9.68%(12/124)。
对已确诊的44例结核病患者进行数据分析,T-SPOT、MTB DNA和血清MTB抗体的准确率分别为86.36%(38/44)、27.27%(12/44)和18.18%(8/44)。
T-SPOT的阳性检出率和结核诊断的准确率均显著高于其它2种方法(P <0.05)。
T-SPOT对疑似MTB感染的胸腔积液患者诊断的阳性预测值为92.68%,阴性预测值为92.77%。
结论 T-SPOT对疑似MTB感染伴胸腔积液患者的诊断具有快速、高敏感性和高特异性的优点,优于MTB DNA和血清MTB 抗体试验,可以作为一种新的技术应用于人体 MTB感染的诊断。
%Objective To investigate the application significance of Mycobacterium tuberculosis ( MTB) T cells spot test ( T-SPOT) in the rapid diagnosis for suspected MTB infected patients with pleural effusion .Methods The 124 patients with pleural effusion which were suspected as having suspected MTB infectionwere enrolled .T-SPOT was used to detect the immune response of peripheral blood lymphocyte against MTB special secreted protein EAST -6 and CFP-10. The MTB DNA method was used to detect MTB in pleural effusion , meanwhile serum anti-MTB antibody was detected by immuno-gold filtration assay , and the results were analyzed statistically .Results The 44 of 124 cases were diagnosed as tuberculosis by sputum , pleural effusion and ascites smear test , sputum, pleural effusion and ascites MTB culture , tuberculin test, MTB DNA method and anti-MTB antibody test, and the positive rate was 35.5%.The positive rate of T-SPOT in the 124 patients with pleural effusion was 33.06%(41/124).The positive rate of MTB DNA method was 14.52%(18/124), and that of anti-MTB antibody test was 9.68%(12/124).Among the 44 confirmed tuberculosis patients, T-SPOT had the consistency rate of 86.36%(38/44), while the consistency rates of MTB DNA method and anti-MTB antibody test were 27.27%(12/44) and18.18%(8/44), respectively.The positive rate and consistency rate of T-SPOT were significantly higher than those of the others (P<0.05).The positive and negative predictive values of T-SPOT in suspected MTB infected patients with pleural effusion were 92.68% and 92.77%, respectively. Conclusions T-SPOT is fast, sensitive and specific to diagnose the suspected MTB infected patients with pleural effusion.T-SPOT is better than MTB DNA method and anti-MTB antibody test .T-SPOT can become a new diagnostic method to be applied in the diagnosis of MTB infection .【期刊名称】《检验医学》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】4页(P254-257)【关键词】T细胞试验;DNA;抗体;结核分枝杆菌;胸腔积液【作者】许雪成;茅利明【作者单位】绍兴县柯桥街道社区卫生服务中心检验科,浙江绍兴312030;绍兴县中心医院检验科,浙江绍兴 312030【正文语种】中文【中图分类】R446.5胸腔积液是临床最常见的症候群,可由恶性肿瘤、肺结核和胸膜结核等疾病引起。
结核感染T细胞斑点试验在肺结核中的诊断价值抗结核治疗的基本原则是早期、联合、适量、规律、全程,如何早期诊断结核病是结核病防控工作中的一个难题,我国结核感染率和卡介苗接种率均高,结核菌素试验对于活动性结核的诊断价值低,同时不能排除非结核分枝杆菌感染。
近年来,有一种用于诊断结核分枝杆菌感染的新方法,即结核感染T细胞斑点试验,用于诊断潜伏性结核分枝杆菌感染及结核病。
本研究采用结核感染T细胞斑点试验和结核菌素试验两种检测方法在疑似肺结核病人中进行对比研究,探讨两者在结核诊断中的敏感性。
现将结果报告如下。
1.资料与方法1.1一般资料:选择2014年9月-2016年12月在我科住院胸片或者胸部CT疑似肺结核的患者53例,其中男45例,女8例,年龄19-86〔平均(46.94±18.77)〕岁,在其他详细检查基础上,同时作结核感染T细胞斑点试验、结核菌素试验、结核抗体、痰找抗酸杆菌检测,根据临床表现、影像学检查、病原学检查、组织病理学以及抗结核试验治疗追踪随访。
最后确诊14例,排除肺结核4例,临床诊断35例。
临床诊断+确诊肺结核患者共49例,其中男42例,女7例,年龄19-86〔平均(46.53±18.46)〕岁。
1.2方法:结核感染T细胞斑点试验检测方法根据试剂盒说明书步骤进行操作。
首先抽取所有患者外周静脉血液5ml,分离出外周血单个核细胞(PBMC)。
在已包被抗IFN-γ抗体微量板的4个孔中,分别加入不同的阳性对照物:植物血凝素,阴性对照细胞营养液,A 抗原早期分泌性靶抗原6(ESAT-6)以及B抗原滤液培养蛋白10(CRP-10).然后依次向每孔加入2ⅹ105浓度PBMC,放置在37.0℃条件下CO2培养箱内孵育处理20小时。
PBS溶液洗脱处理后再加入碱性磷酸酶标记的抗γ干扰素抗体,在室温条件下孵育处理2小时,PBS 溶液洗脱处理后显色,采用PBS溶液终止反应。
最后仔细计数斑点数。
结果判断:空白对照孔斑点数为0-5个时且(抗原A或抗原B孔的斑点数)-(空白对照孔斑点数)≥6,判断为阳性;空白对照孔斑点数为6-10个时且(抗原A或抗原B孔的斑点数)≥2ⅹ(空白对照孔斑点数),判断为阳性;上述标准不符合且阳性质控对照孔正常时检测结果为“无反应性”。
探讨结核感染T细胞斑点试验在结核病中的诊断价值探讨结核感染T细胞斑点试验在结核病中的诊断价值引言:结核病是一种由结核分枝杆菌引起的慢性传染病,全球范围内仍然是重大公共卫生问题之一。
早期和准确的结核病诊断对于控制疾病的传播和提供有效的治疗举措至关重要。
近年来,结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)逐渐成为结核病的主要诊断工具之一,本文将探讨T-SPOT.TB在结核病中的诊断价值。
一、T-SPOT.TB的原理与技术:T-SPOT.TB是一种利用酶联免疫斑点法检测结核分枝杆菌特异性T细胞反应的技术。
该方法基于测量体外T细胞的干预和测量干预期间T细胞产生的干预细胞因子的原理,通过寻找和计数结核分枝杆菌特异性T细胞的干预斑点来判断人体是否感染了结核分枝杆菌。
二、T-SPOT.TB的优势:与传统的结核诊断方法相比,T-SPOT.TB具有以下显著的优势:1. 高度特异性:T-SPOT.TB能有效区分结核病与非结核分枝杆菌感染,降低了假阳性率,提高了诊断的准确性。
2. 高敏感性:T-SPOT.TB能更早地检测出结核感染,尤其是对于免疫缺陷患者和隐性感染者具有更高的敏感性。
3. 快速结果:T-SPOT.TB的检测结果通常在24小时内可得,对于紧急情况和迅速诊断起到了关键作用。
4. 无交叉反应:T-SPOT.TB不受BCG疫苗和其他非结核分枝杆菌感染因素的影响,避免了传统诊断方法的交叉反应。
三、T-SPOT.TB在结核病中的诊断价值:1. 早期诊断:由于T-SPOT.TB的高敏感性,它能够早期检测出结核感染,避免了疾病的进一步传播,为尽早治疗提供了依据。
2. 预测疾病进展:通过监测T细胞反应的变化,T-SPOT.TB可以评估结核感染的严重程度和预测患者的疾病进展,以便采取及时的干预措施。
3. 监测治疗效果:T-SPOT.TB可以用于评估结核患者的治疗效果,及时调整治疗方案,提高治疗的效果。
4. 作为筛查工具:T-SPOT.TB可以作为结核病的筛查工具,在高感染风险群体中进行广泛的应用,以便早期发现结核感染,减少疾病传播。
T-SPOT.TB在结核病诊断中的临床意义目的:探讨基于γ-干扰素释放的T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在结核病诊断中的意义。
方法:首先对2013年1月-12月间在我院住院的肺结核病人30例,结核性胸膜炎30例,结核性脑膜炎9例进行T-SPOT.TB检测,并分别对他们的血清、胸腔积液和脑脊液进行腺苷脱氨酶(ADA)检测,在某医院职工进行年底查体时,采用T-SPOT.TB对他们进行检测,对他们的血清进行ADA检测,在保密个人信息的前提下,调查所有进行T-SPOT试验的职工的健康状况。
结果:肺结核病人30例,T-SPOT.TB阳性30例,ADA阳性25例,结核性胸膜炎30例,T-SPOT.TB阳性30例,ADA阳性27例,结核性脑膜炎9例,T-SPOT.TB阳性9例,ADA阳性5例。
某医院共有420名工作人员查体,做T-SPOT试验的共291人,阳性54人,阳性率为18.6%,阴性237人,经调查及询问本人发现,54人中有3人曾先后患肺结核并治疗,现已治愈停药。
其他51人皆无症状(如:午后低热,盗汗等)、无体征(如:胸部X光片无病变,包括钙化灶、无胸腔积液)、内科、外科检查无淋巴结肿大,无关节肿大、疼痛等,基本排除活动性结核病。
结论:T-SPOT.TB作为结核菌感染检测的最为准确的方法之一,敏感性极高,各种结核病病人都表现阳性,而感染过结核菌未发病的人一般也都表现为实验阳性,由此可见:T-SPOT.TB阳性对结核病的诊断具有强大的支持作用,但存在一定的假阳性,而通过ADA阳性诊断结核病存在一定的假阴性,两者联合,能明显提高阳性率和特异性;但T-SPOT.TB检测阴性,基本可排除结核病(HIV 病人除外)[1],对结核病的排除具有十分重要的意义。
标签:T-SPOT.TB,结核病,阴性排除TO investigate the Clinical significance of T-SPOT.TB assay in thediagnosis of TuberculosisObjective: To investigate the significance thatT-SPOT.TB assay based on the release of interferongamma in the diagnosis of tuberculosis.Methods :First, Random select 30 Pulmonary tuberculosis cases,30 Tuberculous pleurisy cases and 9Tuberculous meningitis cases inpatient during 2013 Jan. to 2013 Dec. using T-SPOT.TB and ADA to detect them . When one hospital staffs check their bodies, in the case of informed consent, using T-SPOT.TB to detect them .Then survey their health status and pledge myself to a top secret. At the same time using T-SPOT.TB to detect 30 patients that been diagnosed and are receiving treatment for tuberculosis.Results: T-SPOT.TB Positive numbers are:30 cases, 30 cases, 9 cases. ADA Positive numbers are 25 cases, 27 cases, 5 cases, There are 420 hospital staffs that check their bodies this time, andin the experiment of a total of 291 people, There are 54 people was positive, the positive rate was 18.6%, There are 237 people was negative. In fact, there are 3 people in 54 people had been suffered from tuberculosisand have now been cured. The other 51 people had no symptoms (such as: afternoon fever, night sweats), no signs (such as: no lesions after X ray chest, including calcification,no pleural effusion) , surgical, medical examination no lymph node swelling, no joint swelling or pain, Say in another way, the 51 people are ruled out active tuberculosis. At the same time using T-SPOT.TB to detect 30 patients that were suffered from tuberculosis and are receiving treatment, all the 30 cases were positive.Conclusion: T-SPOT.TB is one of the most accurate methods for detecting latent TB infection, it is high sensitivity. People infected with TB are usually manifested positive, Whether or not he has TB disease at that time. T-SPOT.TB test is negative have very important meanings for eliminating TB: T-SPOT.TB test was negative can exclude tuberculosisKey words:T-SPOT.TB,tuberculosis,negative test can exclude the disease在全球公共衛生问题中,慢性传染性疾病结核病的形势是异常严峻和迫切的,我国的结核病疫情更显严重,属全球22个结核病高负担国家之一,结核病的患病人数在全球仅次于印度居第二位。
结核感染T 细胞试验对于肺结核诊断的意义研究陈新秀,郑成芳(海南西部中心医院感染科,海南儋州571799) 摘要:目的探讨结核感染T 细胞试验对于肺结核诊断的意义㊂方法回顾性分析2015年5月-2018年10月我院收治的68例肺结核患者的临床资料,患者均经实验室㊁X 线或CT 胸片检查㊁结核感染T 细胞斑点试验㊁结核菌素试验检测㊂结果以临床诊断为金标准,T-SPOT.TB 灵敏度和阴性预测值高于其他三种检测,特异度和阳性预测值高于结核抗体和影像学检查,T-SPOT.TB 检测的漏诊率低于其他三种检测方式,误诊率低于结核抗体和影像学检测㊂T-SPOT.TB 在痰培养阴性和痰培养阳性患者中的检测敏感度高于TST ,差异有统计学意义(P <0.05)㊂结论T-SPOT.TB 检测不受标本采集及机体免疫状态的影响,对结核感染具有较高的敏感性,对活动性肺结核的辅助诊断具有较高价值㊂ 关键词: 结核感染; T 细胞试验; 肺结核; 诊断 中图分类号:R52 文献标志码:A 文章编号:1001-5248(2019)05-0005-02基金项目:海南省自然科学基金资助项目(No.818MS161)作者简介:陈新秀(1982-),女,大学本科,主治医师㊂从事临床感染科疾病研究㊂ 肺结核是由结核分枝杆菌引起的以呼吸道传播为主严重危害人民群众身体健康的呼吸系统传染病之一㊂2017年我国约有88.9万新发结核病患者,位居全球第2位〔1〕㊂快速㊁准确地诊断肺结核患者并及时采取有效干预措施,切断其传播途径能有效促进疾病的防治与控制㊂目前临床诊断肺结核多依赖于影像学㊁痰涂片检菌㊁结核抗体等,但敏感性及检出率低,无法满足临床上实际需要〔2〕㊂结核感染T 细胞试验(tuberculosis T cell spot assay,T-SPOT.TB )是通过体外检测外周血中结核分枝杆菌感染后是否存在结核杆菌效应T 淋巴细胞来判断是否感了结核杆菌〔3〕,敏感性好㊁能够尽早发现并对抗结核药物治疗效果进行评估㊂本文旨在分析结核感染T 细胞试验在肺结核中的临床价值,探讨肺结核快速㊁准确的诊断方法㊂1 资料与方法1.1 临床对象 回顾性分析2015年5月-2018年10月我院收治的97例疑似肺结核患者的临床资料,所有患者均经临床㊁实验室㊁影像学检查和临床治疗转归证实确诊68例(其中活动性肺结核32例,陈旧性肺结核36例),男42例,女26例,年龄22~68岁,平均(53.17±3.58)岁㊂1.2 方法1.2.1 T-SPOT.TB 检测 采血后离心分离,使用Ficoll 提取液收集外周血单个核细胞,严格按照操作步骤说明操作㊂T-SPOT.TB 检测试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司㊂结果判定〔4〕:A 抗原孔或B 抗原孔斑点数≥6为阳性㊂1.2.2 结核菌素皮肤试验(tuberculin skin test,TST)检测方法 对所有入选者皮内注射0.1ml(含5个结素单位)TB-PPD,48~72h 后观察结果,硬结直径≥10mm 者或部出现水泡㊁破溃㊁坏死㊁淋巴管炎者判为PPD 试验阳性,否则判为阴性㊂1.2.3 痰培养 依据罗氏培养法进行培养㊂未见菌落生长为阴性㊂1.3 统计学方法 数据应用SPSS 20.0统计软件分析㊂计数资料应用χ2检验㊂P <0.05为差异有统计学意义㊂2 结果2.1 各检测方法诊断效能比较 以临床诊断为金标准,T-SPOT.TB 灵敏度和阴性预测值高于其他三种检测,特异度和阳性预测值高于结核抗体和影像学检查,T-SPOT.TB 检测的漏诊率低于其他三种检测方式,误诊率低于结核抗体和影像学检测㊂见表1㊂表1 各检测方法诊断效能比较(%)方法灵敏度特异度阳性预测值阴性预测值漏诊率误诊率T-SPOT.TB 88.2475.8686.9773.3311.7624.14结核抗体52.9444.8369.2328.8947.0655.17痰培养23.53100.00100.0035.0076.470.00影像学47.0658.6272.7232.0752.9441.382.2 结核抗体与T-SPOT.TB诊断效能比较 T-SPOT.TB在两组患者中的检测敏感度高于TST,差异有统计学意义(P<0.05)㊂见表2㊂表2 结核抗体与T-SPOT.TB诊断效能比较(%)项目例数TST T SPOT.TB 痰培养阳性肺结核1668.77(11)93.75(15)*痰培养阴性肺结核5248.07(25)86.54(45)* 注:括号内数据为例数;与TST比较:*P<0.053 讨论 细菌学检查是结核病实验室诊断的金标准,特异性高,缺乏较好的敏感性,由于肺结核患者痰液标本受受送检次数和病情在排菌期的影响,结核菌自身生长的速度缓慢,使得痰涂片的阳性检出率较低,不适合用于结核病的早期诊断,导致大部分活动性结核病例漏诊㊂结核菌素皮肤试验简单易行㊁廉价,但缺乏足够的灵敏度和特异度㊂分枝杆菌液体费用适中,但操作相对复杂,培养周期较长㊂XpertMTB/ RIF检测高速㊁快效,但检测费用高,未能广泛推广应用〔5〕㊂T-SPOT.TB能对结核病的早期进行快速诊断,耗时短㊂在本文研究中,T-SPOT.TB灵敏度和阴性预测值高于其他三种检测,特异度和阳性预测值高于结核抗体和影像学检查,T-SPOT.TB检测的漏诊率低于其他三种检测方式,误诊率低于结核抗体和影像学检测,T-SPOT.TB诊断快速敏感,检测价格便宜㊁简单易行,且不受BCG接种的影响,可有效避免假阳性结果及筛查结核分枝杆菌感染㊂严松盛〔6〕应用T-SPOT.TB㊁血清抗结核抗体㊁痰涂片(培养)㊁BALF涂片(培养)和痰TB-DNA-RNA方法检测老年活动性肺结核,T-SPOT.TB有很高的灵敏度,减少肺结核的漏诊,是5种检测方法综合判断后最好的一种检测方法㊂向瑜等研究也显示,与结核抗体㊁涂片㊁基因检测和影像学比较,T-SPOT.TB对结核病的诊断有较高的灵敏度和特异性,T-SPOT.TB阴性时可有效的排除结核分枝杆菌的感染,当T-SPOT.TB阳性时有利于辅助诊断活动性结核病〔7〕㊂痰菌阴性肺结核诊断无明显的细菌学或病理学证据,常常依靠临床症状㊁影像学表现及对诊断性抗结核治疗的反应来进行判断,可能会造成诊断不明确,患者不能得到及时发现和治疗,不仅患者病情加重,还会导致疾病的发展和传播㊂国外的临床诊疗指南推荐把T-SPOT用于菌阴肺结核及肺外结核的临床辅助诊断〔8〕㊂罗槑等〔9〕报道,结核感染T细胞检测有较高的阳性预测值,对菌阴性肺结核诊断的灵敏度为85.5%㊁特异度为84.4%,阳性预测值为94.7%,阴性预测值为64.4%㊂在本研究中,T-SPOT.TB在痰培养阳性和痰培养阴性患者中的检测敏感度高于TST,T-SPOT.TB对菌阴㊁菌阳性肺结核有较高的灵敏度㊁特异度㊂菌阴性肺结核缺乏影像学改变或细菌学证据,很多菌阴肺结核患者被误诊或漏诊,TST试验易受卡介苗接种和非结核分枝杆菌感染的影响,而T-SPOT.TB可以能够较好地区分真性结核感染和卡介苗接种诱导的反应,在菌阴肺结核中检出阳性率更高,与TST检测相比无需回访且结果判读更为客观〔10〕㊂综上所述,T-SPOT.TB检测不受标本采集及机体免疫状态的的影响,对结核感染具有较高的敏感性,对活动性肺结核的辅助诊断具有较高价值㊂参考文献:〔1〕 WORLD HEALTH ORGANIZATION.Global tuberculosis re⁃port2017〔R〕.Geneva:World Health Organization2017.〔2〕 冯晓朦,王晶莹,时景伟,等.血清ADA水平和T-spot.TB联合检测在肺结核诊断中的应用〔J〕.吉林大学学报(医学版),2016,42(2):306.〔3〕 杨彤彤,李弘,王宗正,等.T-SPOT.TB在HIV/AIDS 合并结核病中的临床诊断价值〔J〕.传染病信息,2018, 31(6):555.〔4〕 李辉,汤进,黄晓霞.涂阳肺结核患者TB_DNA定量㊁γ干扰素释放试验㊁结核抗体检测的价值〔J〕.国际检验医学杂志,2016,37(2):211.〔5〕 王慧.3种方法对痰液标本结核分枝杆菌检测结果的影响〔J〕.临床合理用药杂志,2013,6(7):103.〔6〕 严松盛.结核感染T细胞斑点试验检测对老年活动性肺结核的诊断价值〔J〕.中国继续医学教育,2017,2(28):19.〔7〕 向瑜,杨捷,张莉萍,等.T细胞斑点试验反应强度在诊断活动性结核病中的价值〔J〕.中国微生态学杂志, 2016,28(12):1456.〔8〕 NATIONAL INSTITUTE FOR HEALTH AND CARE EX⁃CELLENCE.Tuberculosis:clinical diagnosis and manage⁃ment of tuberculosis,and measures for its prevention and control〔S〕.London:National Institute for Health and Care Excellence,2011.〔9〕 罗槑,徐园红,吴桂辉,等.结核感染T细胞检测在菌阴性肺结核诊断中的应用价值〔J〕.国际检验医学杂志,2016,37(8):1035.〔10〕 段月庭,毕科研,解金磊,等.酶联免疫斑点法联合肺泡灌洗液结核菌Xpert检测在涂阴肺结核的诊断价值〔J〕.国际检验医学杂志,2018,39(12):1460.(收稿日期:2019-03-23;修回日期:2019-04-25)。
•2564 •广东医学2020 年丨2 月第41 卷第 24 期Guangdong Medical Journal Dec. 2020, Vol. 41, No. 24结核感染T细胞斑点试验联合胸腔积液Xpert MTB/RIF检测诊断结核性胸腔积液的价值张新宝\张妍搭,姚超洪青青\韩波波\张毕玲11安徽省'胸科医院结核六科(安徽合肥230022); 2安徽医科大学第一附属医院干部呼吸内科(安徽合肥230000)【摘要】目的评估结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)联合胸腔积液结核分枝杆菌/利福平耐药实时荧光定量核酸扩增检测技术(Xpert M TB/m F)在结核性胸腔积液的诊断价值方法收集胸腔积液患者112例,其中确诊或临床诊断为结核性胸腔积液76例,非结核性胸腔积液36例所纳入患者治疗前均行胸腔积液T- SPOT.TB、血T- SPOT.TB、胸腔积液Xpert M TB/RIF、胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA)检测,并对其检测结果进行分析结果胸腔积液T- SPOT.TB诊断结核性胸腔积液的敏感度(97. 37% ,74/76),高于外周血T-SP0T.TB (76.32% ,58/76)、胸腔积液Xpert M TB/FUF(65. 79% ,50/76)和胸腔积液AI)A(28. 95%,22/76),差异均有统计学意义(x:=丨4. 74、25.22、76. 45,P<0.0丨).胸腔积液Xpert M TB/RIF检测的特异度(100% ,36/36)均高于胸腔积液T-SPOT.TB(77. 78% ,28/36)、外周血T-SPOT.TB(55. 56% ,20/36)和胸腔积液ADA(50.00% ,18/36),差异均有统计学意义(x: =6. 89、20. 57、24. 00,P均<0. 01)胸腔积液T-SPOT.TB和胸腔积液Xpert M TB/KIK联合检测的敏感度(64. 47% , 49/76)低于胸腔积液T- SPOT.单独检测(97.37% ,74/76),差异有统计学意义(x2 =26. 63,P<0.01),但特异度由77. 78% (28/36)提高至100%(36/36),差异有统计学意义(X: =45. 82,P<0.01) 结论胸腔积液T- SPOT.TB检测结核性胸腔积液具有较高的敏感度和特异度,胸腔积液T- SPOT.TB和胸腔积液X丨《*rt M il.>/KIF联合检测可明显提高诊断的特异度【关键词】酶联免疫斑点试验;结核;胸腔积液;Xpert M TB/RIF;腺苷脱氨酶【中图分类号】K521.7;K561 【文献标志码】ADOI:10. 13820/ki.gdyx.20192604The value of T cell spot test combined with pleural fluid Xpert MTB/RIF test in the diagnosis of tuberculous pleural effusion. ZHANG Xin - bao, /HANG Y a n-b e i, YAO Chao, HONG Q in g-q in g, HAN B o-b o, ZHANG B i-lin. Tuberculosis Department l /, Anhui Provincial Chest Hospital, Hefei 230022, Anhui, ChinaCorresponding author:ZHANG Van - bci, E - mail :zhangyanl)***************;YAO Chao ^E - mail :\101(f(j. com 【Abstract】Objective To evaluate the diagnostic value of l -spot test combined with real -time fluorescence quantitative nucleic acid amplification (X pert M T B/R IF) in diagnosis of tuberculous pleural effusion. Methods FromJune 2018 lojune 2019,1 12 patients with pleural effusion in Anhui province chest hospital were enrolled, including 76confirmed or rlinit al diagnosticluherculous pleural effusion casesand 36 non -tuberculous pleural effusion cases. All theincluded pcitients were tested with t - spot, tb ol pleural effusion, t - spot, th of blood, Xpert M TB/RIF of pleural effusionand ADA of |)le»ural effusion before treatment. Results The sensitivity of t - spot, tb in the diagnosis of tuberculous pleural effusion (97. 37%,74/76)was significantly higher than lliat of t -spot, tl) in periplieral blood (76. 32%,58/76),Pleural effusion Xpert M TO/RIF (65. 79%, 50/76) and ADA (28. 95%,22/76) (/2=14.74, y;=25.22and y;=76.45, P<0. 01). The specificity of Xpert M TB/R IF test in pleural effusion ( 100% , 36/36) was significantly higherth出.i pleural effusion I-spot, tl) ( 77. 78%,28/36 ),p n」|)hei’al l>lo()(l t -spot, tb ( ^(50. 00%, 18/36) {y j=6. 89, y j=20. 57 and x=24. 00, P<0. 01 ). The sensitivity of pleural effusion t - spot, tband Xpert M PB/KIF comhiiied detection (64. A lc/c, 49/76) was signific antly lower than that of pleural effusion t - spot, thalone (97. 37%,74/76) ( =26. 63, P <0. 0\ ) ;but the specificity was significantly increased from (77. 78%, 28/36) to ( 100% , 36/36) (=45.82, P<0. 01 ). Conclusions T - spot TB of pleural effusion has a high sensitivityand specificity (or detecting tuberculous pleural effusion. The conihined detection of t -spol TB of pleural effusion andXpert M th/KIF of pleural effusion can signifu antlv improve the specificity of diagnosis.【Key words】enzyme linked immune spol te st; tul)t”rul(>us; pleural effusion;Xpert M T B/R IF;adenosine deami-A通信作.否:张研搭,K -mail:*************************;姚超,K -mail:****************结核病是危害公共安全的主要传染病之一,据 2017年WHO最新一次的流行病学统计显示:全世 界新发结核感染患者约1 040万例,我国估算的发 病数约为93万例,发病率为68/10万,居第3 位11。
结核感染T细胞斑点试验诊断结核性心包积液的意义标签:结核;T SPOT.TB试验;心包积液
36结核感染T细胞斑点试验(T_SPOT.TB)通过酶联免疫斑点技术(ELISPOT)检测外周血中经结核菌特异性抗原刺激后释放γ干扰素的T细胞,诊断结核分枝杆菌感染具有较高的敏感性和特异性,本文主要针对我院收治的高度怀疑结核性心包积液患者的外周血液行ELISPOT检测,探讨该方法对结核性心包积液的诊断价值。
1资料与方法
1.1一般资料:选取我院2011年11月至2013年11月住院患者48例,根据以下标准,将患者分为两组:观察组拟诊结核性心包积液组21例,其中男12例,女9例,年龄16~72(38.9±13.5)岁,包括结核杆菌培养阳性、或结核杆菌培养阴性,但临床表现、影像学检查疑似结核,抗结核治疗有效的患者;对照组27例,其中男15例,女12例,年龄14~75(48.3±18.7)岁;其中7例非结核感染性渗出性心包积液、8例癌性心包积液(肺癌5例、淋巴瘤1例、乳腺癌2例)、11例与心力衰竭有关、1例与肾上腺功能减退有关。
所有病例均排除HIV感染。
1.2方法:
1.2.1T_SPOT.TB检测:根据T_SPOT.TB试剂盒(Oxford Immunotec,Oxford UK)操作。
肝素抗凝管采集6ml外周静脉血,样本室温(15~25℃)保存与运输,样本采集后尽早(24小时内)送到杭州市艾迪康医学检验中心。
密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMCs)。
洗涤后进行细胞计数。
PBMCs和结核特异性抗原同时加入包被抗体的反应孔中,孵育过夜(37℃,5% CO2),效应T 淋巴细胞释放细胞因子,与预包被的抗体结合。
洗板,加入二抗,孵育1小时。
洗板,加入底物显色液孵育7分钟。
蒸馏水终止反应。
一个斑点代表一个效应T 淋巴细胞。
1.2.2结果判定:根据T SPOT.TB试剂盒使用说明书。
结果包括阴性对照、抗原A、抗原B和阳性对照。
阳性结果参照以下标准:阴性对照孔斑点数0~5个,且(抗原A或者抗原B)-(阴性对照孔斑点数)≥6 。
阴性对照孔斑点数6~10个,且(抗原A或者抗原B)≥2×(阴性对照孔斑点数)。
如果上述标准不符合且阳性对照孔正常示检测结果为“阴性”。
1.3评价指标:采用敏感性、特异性、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)。
1.4统计学处理:应用SPSS 16.0版统计软件,率的比较采用卡方检验,对各组检出阳性率进行统计学分析,P<0.05表示差异有统计学意义。
2结果
在观察组21例可疑结核性心包积液患者中,20例T_SPOT TB试验阳性,阴性1例;在对照组27例中T_SPOT TB试验阳性4例,阴性23例。
T_SPOT.TB 试验诊断结核性心包积液的敏感性为95.2%,特异性为85.2%,阳性预测值为83.3%,阴性预测值为95.8%。
3讨论
肺外结核是指发生在肺部以外的全身其他脏器的结核感染,结核性心包积液属肺外结核感染导致的渗出性病变。
国外资料显示肺外结核约占结核病的20%左右,在中国约占结核病的9.7%~11.8%,病死率占总结核病病死率的14.1%~17.6%[1]。
现在诊断肺外结核仍存在一定困难,结核菌素试验(TST)虽然是目前筛查结核感染的主要的辅助手段,但有很多局限性,Madariaga等[2]对47例痰菌阳性的结核患者进行检测,结果表明T_SPOT TB诊断活动性结核比TST的灵敏度高。
目前,大量研究证实,T_SPOT TB检测对于潜伏性结核感染及活动性肺结核具有较高的敏感性及特异性。
Kim等[3]随诊72例疑诊肺外结核患者的前瞻性研究显示,对于活动性肺外结核,T_SPOT.TB的敏感性为94%,TST敏感性为47%。
类似TST,如果T_SPOT.TB的斑点数在短时间内显著增加,则强烈提示体内活动性结核,此时给予预防性治疗十分必要[4]。
本文局限性在于例数较少,若准确评价外周血T_SPOT.TB检测在中国人群诊断心包结核应用价值,尚需要进行大样本、前瞻性队列研究。
此外,T_SPOT.TB 结果的可靠性、稳定性与各个实验室的质量控制水平有关。
参考文献
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[2]Madariaga MG,Jalali Z,Swindells S. Clinical utility of interferon gamma assay in the diagnosis of tuberculosis[J]. Am Board Fam Med,2007,20(6):540-547.
[3]Kim SH,Song KH,Choi SJ. Diagnostic usefulness of a T_cell_based assay for extrapulmonary tuberculosis in immunocompromised patients[J]. Am J Med,2009,122(2):189-195.
[4]Pai M,Zwerling A,Menzies D. T_cell_based assays for the diagnosis of latent tuberculosis infection:an update[J]. Ann Intern Med,2008,149(3):177-184.。