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结核感染T细胞检测ppt课件

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骨科结核感染T细胞斑点检测(SPOT)课件

骨科结核感染T细胞斑点检测(SPOT)课件
分类
根据感染部位，骨科结核感染可 分为脊柱结核、关节结核和骨结 核等。
临床表现与诊断
临床表现
早期症状可能不明显，随着病情发展 可能出现疼痛、肿胀、活动受限等症 状。
诊断
结合临床表现、影像学检查和实验室 检查进行诊断，其中T细胞斑点检测（ SPOT）是一种常用的实验室检查方法。
骨科结核感染的流行病学
采用其他检测方法进行确认。
05 SPOT检测的案例分享
案例一
患者情况
一位中年男性，因髋关节疼痛就诊，疑似髋 关节结核感染。
诊断结果
结合患者临床表现和SPOT检测结果，最终 诊断为髋关节结核感染。
SPOT检测
对患者进行T细胞斑点试验（SPOT），检测 结果显示阳性，提示存在结核感染。
治疗方案
患者接受抗结核药物治疗，并进行髋关节手 术治疗，术后恢复良好。
案例二
患者情况
一位青年女性，已确诊为脊柱结核感 染。

02
SPOT检测
对患者进行T细胞斑点试验（SPOT）， 检测结果显示阳性，提示结核感染活 动期。
01
治疗方案
继续抗结核药物治疗，并定期进行复 查。
05
03
病情变化
经过一段时间的抗结核药物治疗后， 患者病情得到控制，再次进行SPOT检 测。
04
检测结果
结合其他技术
扩大应用范围
探索将SPOT检测与其他诊断技术相结合， 提高诊断的全面性和准确性。
研究SPOT检测在骨科其他疾病诊断中的应 用价值，拓展其应用领域。
感谢您的观看
THANKS
监测疗效
治疗后，SPOT检测可以监测治疗效 果，评估病情恢复情况。
预测复发
通过长期监测SPOT检测结果，可以 预测结核感染的复发风险。

骨科结核感染T细胞斑点检测(SPOT)课件

骨科结核感染T细胞斑点检测(SPOT)课件
02
报告格式应规范、清晰，易于阅 读和理解。建议使用表格、图表 等形式展示数据和结果。
SPOT检测结果的沟通与交流
医生应向受检者详细解释SPOT 检测结果的含义，并根据结果制
定相应的诊疗方案。
对于阳性或灰区结果，医生应进 一步询问受检者的结核病史、接 触史、临床表现等信息，以便更 好地评估病情和制定治疗方案。
病患者都有症状。
结核病对肺部、骨骼、肾脏等器 官均可造成损害，其中骨科结核
感要发生在脊柱、 髋关节和膝关节等部位，其中 脊柱结核是最常见的。
骨科结核感染的发病率呈逐年 上升趋势，主要与人口老龄化、 免疫系统疾病增多等因素有关。
骨科结核感染的流行病学特征 包括地域差异、人群分布和传 播途径等。
实验环境
确保实验室环境清洁、无 菌，符合进行细胞培养和 检测的要求。
样本采集与处理
采集样本
根据实验需求，采集患者的血液或淋巴结样本。
样本处理
将采集的样本进行离心，分离出血清或淋巴结组织。对血清或组织进行预处理，如去除杂质、过滤等。
SPOT检测实验步骤
细胞培养
将处理后的样本加入细胞培养板或瓶中，进行细胞培养。
T细胞斑点检测的优势与局限性
优势
T细胞斑点检测具有较高的特异性和敏感性，能够早期检测结核感染，尤其对 于潜伏感染者；该方法操作简便、快速，适合大规模筛查。
局限性
T细胞斑点检测无法区分活动性结核感染与潜伏感染，对于已经接受抗结核治疗 的患者可能出现假阴性结果；此外，该方法对于免疫抑制人群的准确性有待提高。
SPOT检测的未来发展方向与挑战
提高灵敏度和特异性
针对不同病种和人群，进一步 提高SPOT检测的灵敏度和特异
性，减少误诊和漏诊。

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• 利用结核杆菌感染者外周血单个核细胞（PBMC）中存
在结核特异性T细胞，这些淋巴细胞在受到结核特异
抗原刺激后分泌r干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。 • 检测外周血中受结核特异抗原刺激释放r干扰素的T淋巴
细胞，经酶联免疫显色后，通过ELISPOT分析系统 对斑点进行计数，1个斑点代表一个细胞，计算出抗原 特异性细胞的频率。
基于T淋巴细胞检测结核感染的原理
包
基于T淋巴细胞检测结核感染的原理
• T-SPOT.TB高灵敏度Βιβλιοθήκη • T-SPOT.TB高特异性
ESAT-6＆CFP 10均来自结核分枝杆菌基因组RD1区域 仅结核分枝杆菌复合群（人型、牛型、非洲型）存在 RD1区基因 卡介苗和大多数环境分枝杆菌缺失RD1区基因 T-SPOT.TB不会受卡介苗接种影响
TSPOT.TB的原理及临床应用
基于T淋巴细胞检测结核感染的原理
• 结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主，结核感染后 体内长期存在抗原特异性的记忆性T细胞
• 当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释放r干扰 素
• r干扰素是结核分枝杆菌感染后机体免疫应答中最重要 的细胞因子
T-SPOT.TB技术：

TB-IGRA结核感染T细胞检测ppt课件

TB-IGRA结核感染T细胞检测ppt课件

昆明三院
TB-IGRA 90.0% 90.7% 80.0%
QFT-GIT 86.8% 87.3% 80.0%
总标本数 342
322
20
老年医院
TB-IGRA 76.6% 76.5% 78.6%
QFT-GIT 67.3% 66.2% 85.7%
总标本数 248
234
14
厦门CDC
TB-IGRA 70.9% 70.6% 100.0%
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6
特异性T细胞体外释放酶联免疫法检 测
TB-IGRA
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7
TB-IGRA原理、方法
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8
特异性T细胞体外检测在发达国家已广泛应用
• IGRA技术目前已获得美国FDA批准，在欧洲获得了CE标志认证，在日 本已经被MHLW批准
• “特异性T细胞体外检测”方法在国际上被越来越多地应用于TB感染 的辅助诊断，已成为欧美国家结核常规检测方法之一。
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18
消化科/心内科/肾内科/骨科
肺外结核免疫学辅助诊断
40％的结核感染者存在肺外病灶，1/4的结核患者为肺 外结核。而对肺外结核取样难度大，用IGRA检测为阳性时，高 度怀疑结核。单肺外结核不具有传染性，可分布在综合医院的 呼吸科外的其他科室。
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19
儿科
可判断传染 可进行定性
优点 性高低
及半 定量分 析
分子诊断
核酸检测
特异性高， 涂阳标本检 出率高
检出率20-
30%，不能
区分非结核
缺点
分枝杆菌； 取样难
检出率59% ，耗时长（ 2-6周）；缺 陷的活菌无 法培养；肺 外结核病人 取样困难

结核感染t细胞检测课件

结核感染t细胞检测课件
自动化和智能化
开发自动化和智能化的T细胞检测系 统，提高检测的效率和可重复性。
T细胞检测与其他检测方法的联合应用
与细菌学检测联合
将T细胞检测与传统的细菌学检测方法相结合，以提高结核病的诊 断准确性。
与免疫学检测联合
将T细胞检测与其他免疫学指标（如抗体水平）相结合，以提供更 全面的免疫反应信息。
与分子生物学检测联合
04
结核感染T细胞检
测的临床应用
诊断结核病
诊断准确性
结核感染T细胞检测通过检测体内是否存在结核特异性抗原，能够准确诊断结 核病，尤其对于肺外结核和痰菌阴性肺结核的诊断具有重要意义。
早期诊断
由于结核感染T细胞检测具有较高的灵敏度，能够在结核病早期阶段就检测出阳 性结果，有助于早期诊断和治疗，减少疾病传播。
临床验证
进行大规模的临床验证研 究，以评估新型T细胞检 测方法的性能和实用性。
THANKS
感谢您的观看
T细胞检测通常采用 酶联免疫法（ELISA） 或酶标仪进行定量检 测。
通过检测IFN-γ水平， 判断是否存在结核特 异性T细胞反应。
T细胞检测的优势与局限性
优势
T细胞检测具有较高的灵敏度和特异 性，能够早期发现结核感染，尤其适 用于潜伏性结核感染的诊断。
局限性
T细胞检测无法区分活动性结核与潜伏 性结核感染，且受免疫系统功能状态 、年龄、疫苗接种等因素影响，可能 出现假阳性或假阴性结果。
结核感染T细胞检测 课件
目录
CONTENTS
• 结核感染概述 • 结核感染的检测方法 • 结核感染T细胞检测原理 • 结核感染T细胞检测的临床应用 • 结核感染T细胞检测的未来发展
01
结核感染概述

T-SPOT.TB-PPT精选课件

T-SPOT.TB-PPT精选课件
结核感染T细胞检测（T-SPOT.TB）简介 与临床应用
1
• 科室需求与结核检测现状 • T-Spot·TB 简介 • T-Spot·TB的临床应用
4
临床对结核检测的需求如何
• 结核病发病比例近些年不降反升，多种疾病合并发病— —多科室需求
• 菌阴肺结核比例高——灵敏 • 阴影待查情况较多——特异 • 呼吸系统（肺癌、肺间质病等）、神经系统、消化系统
27
基本要素
• 原理：干扰素释放试验 • 方法：酶联免疫斑点法 • 抗原： ESAT-6与CFP 10
28
γ-干扰素释放实验（IGRA）
γ干扰素 检测阴性
γ干扰素 检测阳性
TB抗原多肽
T细胞
活化T细胞
γ 干扰素
29
酶联免疫斑点技术（ELISPOT）
30
结核杆菌特异抗原
Tuberculosis Complex
M. tuberculosis M. africanum M. bovis BCG substrain
gothenburg moreau tice tokyo danish glaxo montreal pasteur
Antigens
ESAT-6 CFP 10
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非结核分枝杆菌病是指感染了NTM，并引起相应器 官或组织病变。 迄今为止，共发现NTM菌种154种，NTM可以侵犯人 体肺脏、淋巴结、骨骼、关节、皮肤和软组织等组 织器官并可引起全身播散性疾病。人可从环境中感 染NTM而患病，水和土壤是重要的传播途径。 NTM病发病率明显增长，其发病约占结核病的十分 之一。已成为人们关注的重要课题。

结核感染T细胞检测在结核病潜伏感染中的临床应用-PPT

结核感染T细胞检测在结核病潜伏感染中的临床应用-PPT
血:肝素抗凝血（5ml绿头管抽1管）
成人4-6ml;儿童2-3ml 常温送检（不可冰浴、冰冻） 4h内送达实验室 注意：输血及PET-CT（2周后） 浆膜腔积液样本（胸水，腹水，脑积液,
心包积液等）： 50ml离心管（无菌）加0.2ml肝素抗凝剂 与血标本同时送检。
酶联免疫斑点试验（T-SPOT-TB）
193 participants from 39 countries 20120513-18,非洲乌干达，坎帕拉
国家“十二五”科技重大专项
感染与免疫
“一旦感染，终生感染” 结核病发生、发展和转归与机体的免疫状态密切相关
1882年 柯赫：细菌不是结核病的全部病因
潜伏感染的再认识
WHO 2014年《结核潜伏感染管理指南》： 潜伏感染：
Ø 入院18小时出现发热，体温最高达 39.6℃，行头孢呋辛皮试阳性，交待
Ø 后2拒01绝3使-1用2-其06他出抗现2生0阴1素道3；-1流2液-16，找到羊齿2014-03-18 状结晶，考虑难免流产，放弃保胎；
Ø 2013-12-07 排出死婴，仍高热；
2015-05-25
Ø TB-IGRA（+）； Ø 2013-12-20病理诊断：子宫内膜结核； Ø HRZE/Lfx抗结核药物治疗18月。
伏立康唑”抗感染治疗 症状无缓解。 • 肺部弥漫性大B淋巴细胞瘤
IGRA的临床应用：发热原因排筛
原因不明发热（FUO）患者的结核感染排筛；
定义：发热持续2～3周以上，体温几度超过38.5 ℃， 经完整的病史询问、体格检查以及常规的实验 室检查不能明确诊断者。
病因：感染 肿瘤性疾病 结缔组织病 最终诊断不明者
T-SPOT-TB在筛查结核潜伏感染人群中的应用价值

结核病tspotPPT课件

结核病tspotPPT课件
n 假阴性
—免疫力状况 —年龄（新生儿、老年人） —药物
• 特异性
—不受卡介苗接种影响 —不受环境分枝杆菌影响
• 灵敏度
—基本不受免疫力状况影响 —肺外结核检出率高 —药物、年龄
.
19
γ-干扰素释放实验（IGRAs)在欧美国家 得到全面推广，并被写入诊疗指南
• 美国（CDC和儿科学会）；加拿大 （加拿大结核病委员会）；巴 西（卫生部）
1、结核病辅助诊断/疗效评价
• “菌阴”结核病患者的辅助诊断
• 肺外结核的鉴别诊断
• 抗痨治疗的疗效评价
2、免疫力低下/受抑制患者的结核诊断/感染筛查
• 使用生物制剂/免疫抑制剂患者的结核感染筛查
• HIV感染者/肾透析患者/器官移植患者
3、儿童结核病的辅助诊断
4、结核密切接触者/高危人群的结核感染筛查
.
27
科室应用
风湿免疫用药 前排筛结核
风湿免疫科
临床开展的代表性医院：上海仁济医院等
——生物制剂/免疫抑制剂使用前的结核筛查
——肺结核与肺间质病的鉴别诊断
——结脑”和“狼脑”的鉴别诊断
写入由全国风湿病学权威署名的英夫利西单抗治 疗前结核预防与管理专家建议
.
28
科室应用
呼吸与结核
呼吸科/结核科
临床开展的代表性医院：上海肺科医院等
儿科
——儿童肺结核的辅助诊断 ——儿童肺外结核的鉴别诊断 卡介苗（ BCG ）接种——PPD结果不准确 儿童肺结核——干咳不排痰，其它方法几
乎无法诊断 肺外结核多
.
31
科室应用
移植，HIV感染者并发结核
IBD，克罗恩 病与结核分辨
临床开展的代表性医院：上海公共卫生中心等
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种类 特异性
内容摘要
用T-SPOT.TB检测14例鸟分枝杆菌感染者，13例阴性，1例为 临界值，复查也为阴性。
受试者数 量
文献发表
14
Adams et al Sc. J Inf.
Dis..
2008;40(3):196-203.
经过结核筛查的无症状的受试者，T-SPOT.TB检测结果全部为
47
Clark et al. Clin. Exp.
阴性，特异性100%。
Imm.
2007; 150(2):238-44
在德国用T-SPOT.TB对健康的卫生保健工作者进行筛查。仅1 例阳性（1/95） ，为影像学工作者，接触病人超过35年。 TST检测假阳性结果34% （32/95）。
95
Barsegian et al.
J of Hospital Inf
结核特异性T细胞，这些淋巴细胞在受到结核特异
抗原刺激后分泌γ 干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。 检测外周血中受结核特异抗原刺激释放γ 干扰素的T淋巴细
胞，经酶联免疫显色后，通过ELISPOT分析系统 对斑点进行计数，1个斑点代表一个分泌细胞，计算出抗原 特异性细胞的频率。
空白对照孔内斑点数小于10且阳性对照孔内斑点 数大于20时视为试验有效
在经培养确诊的活动性结核患者中，T-SPOT.TB的灵敏度 为94%。
87
Lee et al.
ERJ 2006; 28:24–30
30
Clark et al. Clin. Exp.
Imm.
2007; 150(2):238-44
140
Kang et al Chest.
2007 Sep;132(3):959-65
细菌培养
3.TSPOT检测原理
结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主，结核 感染后体内长期存在抗原特异性的记忆性T细胞。
当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释放 γ 干扰素
γ 干扰素是结核分枝杆菌感染后机体免疫应答中 最重要的细胞因子。
T-SPOT.TB技术：
利用结核杆菌感染者外周血单个核细胞（PBMC）中存在
受试者数 量
72
文献发表
Meier et al Eur J Microbiol Infect Dis (2005)；24: 529-536
在经培养确诊的活动性结核受试者中，T-SPOT.TB的灵敏 度为96.6%。其中29例免疫力低下患者，T-SPOT.TB的灵 敏度为100%
在确诊病例（涂片或培养阳性）和临床诊断病例（有临床 症状和抗痨治疗有效）中，T-SPOT.TB的灵敏度为90.3% ，并且不受CD4细胞数量影响。
T-SPOT.TB试验结果用每106 PBMCs中斑点形成细 胞（SFCs）的数目来描述，即SFCs/106 PBMCs
5. T-SPOT.TB的临床意义
敏度
内容摘要
将T-SPOT.TB的检测结果与最后通过涂片和培养确诊的结 果进行比较。包括牛型结核杆菌和非洲型结核杆菌感染的 患者。T-SPOT.TB的灵敏度为97.2%。（CI 90.3-99.7%）
2008；69(1):69-76
在接触结核的健康医务工作者和健康对照受试者中用TST和TSPOT.TB检测。155健康医务工作者中，TST阳性的27例，而 T-SPOT.TB仅3例阳性。健康对照组T-SPOT.TB全部阴性而
TST有3例阳性。
218
Storla et al.
BMC Infectious
32
Kim et al. Arch Intern
Med.
2007; 167;20:2255-2259
186
Kim et al. Am J Med
2009；122, 189-195
58
Janssens et al ERJ
2007；30(4):722-8
32
Dominguez et al Clin
Vacc
在经痰培养或肺部病变组织病理活检确诊的结核患者中， T-SPOT.TB的灵敏度为92%。
在确诊的肺结核患者和疑似肺外结核患者中，T-SPOT.TB 的阳性率94%。
在免疫力正常和免疫力低下的受试人群中，T-SPOT.TB的 灵敏度分别为94%和95%。所有受试者中，42%为肺外结 核患者。
经培养确诊、抗痨治疗不超过2周的结核患者用TSPOT.TB检测，阳性率98%（57/58）。
新检验项目
结核感染特异性T细胞 （T-SPOT.TB）检测技术
1、结核病的疫情
结核病是一种慢性传染病，可在身体各个 器官发病，其中以肺结核最为常见，因此肺 结核病是一种严重危害人类健康的传染病， 得了肺结核病如果不能彻底治疗就会完全丧 失劳动能力，而且还会传染他人，对个人、 家庭和社会都是极大的危害。
Diseases
2009,9:60
6.结论
T-SPOT.TB在诊断结核感染方面具有良好的敏感 性和特异性，在现有结核诊断方法存在缺陷的今 天， T-SPOT.TB 可以给临床诊断提供参考。
基于结核抗原特异性T细胞向病变部位集中的特点 ， T-SPOT.TB的检测物已不局限于静脉血，支气 管肺泡灌洗液、痰液、胸腹水、脑脊液等也可用 于对肺内及肺外结核的诊断。
我国是全球22个结核病高负担国家之一，活 动性肺结核病人数仅次于印度，居世界第二 位。结核病仍是目前严重影响我国人民健康 的公共卫生问题，而且影响到社会和经济的 发展，是我国重点控制的疾病之一。
1.23结结核核诊诊断断
不能区分非结核 分 枝杆菌
敏感度低，近半 肺结核阴性
肺外结核取材难
结核杆菌生长缓 慢，培养周期长， 不利于早期诊断
Immunol 2008; 15;168-
71
T-SPOT.TB高特异性 检测所用的ESAT-6＆CFP 10抗原均来自结核
分枝杆菌基因组RD1区域，RD1区基因仅存在于结 核分枝杆菌复合群（人型、牛型、非洲型）。 卡介苗和大多数环境分枝杆菌缺失RD1区基因 因此 T-SPOT.TB不会受卡介苗或者非结核分枝杆 菌影响。