与食用菌生产相关脉孢菌的分离鉴定及其生物学特性
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食用菌生产线及野生菌标本的识别食用菌是一种具有高营养价值和药用价值的真菌,其在食品行业中具有重要地位。
为了满足人们对食用菌的需求,食用菌生产线得以发展壮大。
同时,野生菌也是人们在山野中常见的食材之一。
本文将介绍食用菌生产线的工作原理以及野生菌标本的识别方法。
一、食用菌生产线的工作原理食用菌生产线是一种用于大规模种植食用菌的设备,其工作原理如下:1. 培养基制备:首先,制备适合食用菌生长的培养基。
培养基的主要成分包括麦麸、玉米粉、麸皮等,这些成分富含碳水化合物和氮源,为食用菌提供营养。
2. 混合物发酵:将培养基和食用菌菌种混合后,放入发酵室进行发酵。
发酵过程中,菌种利用培养基中的营养物质进行生长,产生菌丝。
3. 菌丝接种:将发酵后的混合物接种到含有食用菌菌丝的基质中,利用其菌丝的生长能力,使菌种快速繁殖。
4. 培养:将接种好的基质放入培养室,提供适宜的温度、湿度和光照条件,促进食用菌的生长。
5. 采收和加工:待食用菌长成后,进行采收和加工。
采收时,首先将基质取出,然后将菌体剪切下来,清洗干净后进行加工。
二、野生菌标本的识别方法野生菌是指在自然环境中生长的菌类,由于其生长环境的多样性,野生菌的种类繁多。
为了正确识别野生菌标本,可以采用以下方法:1. 外观特征观察:首先,观察野生菌标本的外观特征,包括菌盖的形状、颜色、表面纹理,菌褶的形态和密度,菌柄的高度和粗细等。
这些特征可以帮助初步判断野生菌的种类。
2. 孢子颜色观察:野生菌的孢子颜色对于种类鉴定也非常重要。
可以使用显微镜观察野生菌的孢子,通过孢子的颜色和形态来判断野生菌的种类。
3. 气味辨认:某些野生菌具有独特的气味,可以通过嗅觉来识别。
例如,松茸具有浓郁的松香味,香菇具有特殊的香味等。
4. 化学试剂检测:化学试剂检测是一种常用的野生菌识别方法。
通过向野生菌标本中滴加特定的化学试剂,观察颜色变化和反应结果,可以确定野生菌的种类。
5. DNA分析:最后,如果以上方法无法确定野生菌的种类,可以借助现代生物技术手段进行DNA分析。
2022年厦门大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案)一、填空题1、在G-细菌细胞壁的外膜与细胞膜间有一狭窄空间,称为______,其中含有多种周质蛋白,如______、______和______等。
2、温和噬菌体能以______整合在寄主细胞的染色体上,形成______细胞,该细胞具有______、______、______、______、______等几个特征(填三个特征即可)。
3、TCA循环是指丙酮酸经过一系列的循环式反应而彻底氧化、脱羧、形成______、______和______的过程。
4、微生物培养基中各营养要素的量有一定的比例,从含量最多的______开始,其他成分的次序是______、______、______、______和______。
5、蕈菌从其______、______、______、______和______等方面来考察,证明它是典型的微生物,其大型子实体相当于其他真菌的______。
6、微生物在现代生物分类系统中分别属于______界、______界、______界和______界。
7、生产中,为了长期维持对数生长期可采取______。
8、细菌沥滤又称细菌冶金,主要分三阶段:______,______,______;其中后一步是关键,它由化能自养细菌______来完成的。
9、无论在原核生物还是真核生物中,DNA结合蛋白有几种共同的结构形式:______、______和______,这些形式对于蛋白质准确地与DNA相结合是非常关键的。
10、免疫细胞主要包括______、______、______和______等,它们均来自骨髓多能______。
二、判断题11、放线菌具有菌丝,并以孢子进行繁殖,它属于真核微生物。
()12、从经济的角度和对微生物适用性来看,“C·H·O·N”类均不是多数微生物良好的碳源。
()13、无氧呼吸的最终氢受体只有氧化态无机盐一种类型。
附录四食用菌孢子分离技术(专业版)孢子分离法是常用的食用菌菌种分离方法之一,这种方法是在无菌操作条件下,使孢子在适宜的培养基上萌发成菌丝体而获得的纯菌种,属于有性繁殖。
孢子分离法是指用食用菌成熟的有性孢子(担孢子或子囊孢子)萌发培养成菌丝体而得到菌种的方法。
食用菌的有性孢子具备双亲的遗传特征,而且孢子的数量大,变异的机会多,生命力强,所得菌种菌龄小,培育成的菌种质量好。
有性孢子是选育优良新品种和杂交育种的好材料。
孢子分离又可分为单孢分离和多孢分离,双孢蘑菇、草菇等同宗结合的菌类可采用单孢子分离法;香菇、平菇、木耳、金针菇、杏鲍菇等大多数异宗结合的菌类应采用多孢子分离法,否则菌丝不育,培养成的菌丝体不能产生子实体,不能用作菌种。
单孢分离法主要用于杂交育种的研究。
孢子分离法的主要操作程序:选择种菇→种菇消毒→采收孢子→接种→培养→挑菌落→纯化菌种→母种。
一、单孢子分离法主要用于单孢子的分离。
为了从孢子中选优及杂交,必须进行单孢子分离,即在人工控制下,使两个优良品系的单孢子进行杂交,从而选育新的优质菌种。
从许多孢子中挑选出单个孢子,一般需要单孢子分离器。
如果没有单孢子分离器,也可采用平板稀释法、连续稀释法、毛细管法获得单个孢子。
1、平板稀释法将菌盖置于超净工作台内的硫酸纸上获取孢子。
在无菌条件下挑取少许孢子放在无菌水中,充分摇匀制成孢子悬浊液。
然后用医用注射器吸取悬浊液并滴到PDA培养基上,用无菌玻璃三角刮把液滴推平,使孢子分散成单个。
在25℃下培养,经48-72小时后,镜检平板背面,观察孢子萌发情况,并在萌发的单个孢子旁做好标记。
继续培养,待见到星芒状菌落时,转接到斜面培养基上。
待菌落长到1cm左右时,再进行镜检,取菌丝于载玻片上,将刚果红滴于其上,观察锁状联合。
根据有无锁状联合,初步确定是否为单核菌丝,再考虑选用。
2、连续稀释法获取孢子后,在无菌条件下用接种针挑取一定量的孢子,注入10ml无菌水中摇匀,再从中取出1ml孢子液,加入9ml无菌水中,如此反复稀释,一直到每滴稀释液中,在低倍镜下一个视野内只有一个孢子时,用无菌注射器把孢子液缓慢流下至培养基上。
DQI :10.15906/11—2975/s.20211105—株饲用贝莱斯芽孢杆菌的 分离鉴定及其生理特性钟丽娟,张庆华*基金项目:辽宁省科学事业公益研究基金项目(GY-2018-0038)作者简介:钟丽娟(1981-),女,硕士,副研究员,从事农业微生物菌种选育与应用工作,E -mail : zljl217 @sina. com*通讯作者:张庆华(1965-),女,研究员,主要从事微生物资源 化利用,E-mail : *********************(辽宁省微生物科学研究院,辽宁朝阳122000)[摘要]本试验以淀粉培养基和羧甲基纤维素钠培养基为筛选培养基,自AA+白羽肉鸡肠道中分离到1株高产 淀粉酶和纤维素酶的细菌菌株CY-03,经形态学和分子生物学鉴定,确定该菌株为贝莱斯芽抱杆菌(Bacillusvelezensis )(对该菌株的产酶能力及其生物安全性进行了初步研究,试验结果表明:菌株CY-03具有高产淀粉酶和 纤维素酶的特性,摇瓶液体酶活分别为89.47 U/mL 和65.63 U/mL (并以斑马鱼为宿主进行高浓度菌液饲养试验, 饲喂30 d 的斑马鱼状态正常。
表明该菌株具有较丰富的产酶能力,对生物安全,在生物饲料领域具有较好开发潜力。
[关键词]贝莱斯芽抱杆菌;淀粉酶;纤维素酶;安全性;生物饲料[中图分类号]S816.3[文献标识码]A 近年来,随着畜牧业的快速发展,人畜争粮、饲料转化率低、环境污染等问题都已成为养殖业 发展的瓶颈,尤其是人们对食品安全、环境问题的关注,使得畜牧业抗生素滥用问题的解决刻不容缓,寻找新的抗生素替代品已成为畜牧业生产亟待解决的需求。
生物饲料为丰富非粮饲料资 源、提高饲料转化率、“减抗”“替抗”及缓解环境污染提供了综合的解决方案。
微生物菌种是生物饲料功能和质量的基础,直接关系到产品安全和 生物安全性,世界各国对此都有明确规定和严格管理。
我国农业农村部《饲料添加剂品种目录 (2008)曳中规定可用于直接饲喂动物的饲料级微生物添加剂菌种有16种,但对可饲用微生物资源的开发利用还远远不够。
食用菌育种之多孢子分离法
食用菌孢子分离分为单孢分离法和多孢子分离法两种,育种常用的是多孢子分离法,而单孢子分离用于杂交育种。
多孢子分离是利用食用菌有性繁殖进行的,孢子分离后,菌丝萌发,是担子菌生活史的一部分,担孢子局域保持亲本遗传性状的特点,但是遗传性能不稳定,容易发生突变,多孢子分离能够选育出比偶亲本更加优秀的品种。
1、制备培养基
常规法制备培养基,待用。
2、取孢子
用弹射法取得孢子,“种菇”要选择去八九分成熟的,这是弹射的孢子数量多、活性强。
“种菇”表面消毒同本站食用菌育种之组织分离中的消毒事项。
3、稀释
在无菌状态下,用无菌水稀释孢子,制成孢子悬浮液。
4、涂布
取孢子悬浮液1-2滴在培养基表面,并用接种环涂布。
5、培养
定期观察孢子萌发情况,有染菌的及时挑出,挑选萌发早,萌发后长势好的菌丝进行转管。
多孢子分离比组织分离更加容易染菌,成功率较低,因此要做很多个重复才能成功。
多孢子分离出现变异的可能性更大,必须做出菇实验,鉴定性能正常才可以使用。
- 1 -。
孢子分离法菌种分离即是进行蘑菇菌丝的纯化过程,它是制种工作的重要环节,通俗讲是把蘑菇菌丝从自然界中单独分离出来进行纯培养,从而获得纯蘑菇菌丝生长的菌种。
蘑菇菌种的分离方法有三种:即孢子分离、组织分离和基质菌丝分离法。
一、孢子分离法蘑菇孢子分离法,是利用成熟子实体的有性担孢子能自动从子实体层中弹射出来的特征,在无菌条件下和适宜的培养基上,使孢子萌发成菌丝,获得纯种的一种方法。
孢子分离可分为单孢分离和多孢分离法两种,由于是从有性担孢子(是指其细胞核已经地核配过程)分离纯菌丝体,因此生产上多采用多孢分离法来保持菌株的原有特性,而单孢分离法主要应用于菌株的筛选和杂交育种等工作,孢子分离主要分为两个步骤,首先是采集孢子,其次进行单孢或多孢子分离。
(一)采集孢子1、种菇的选择采集孢子首先要选好种菇即分离用的子实体。
一般蘑菇种菇要求是第一潮菇,出菇较早,单生,个体健壮,特征典型的子实体,经过仔细的观察筛选后在菇床上做个记号,让种菇充分生长,直至即将破膜时将菇采摘进行孢子弹射。
2、孢子弹射收集种菇采收后可浸入0.1%升汞溶液中消毒约一分钟,用镊子取出后经无菌水冲洗数次,再用无菌滤纸把表面水吸干,或直接用75% 酒精棉球轻轻控拭菌盖及菌柄进行表面消毒。
随后用无菌刀切掉多余菌柄(约留下1.5-2cm即可),把菇直立,菇柄朝下插入铝线制作的支持物上,放入了先准备好铺有无菌滤纸条的平皿上,盖上钟罩(如图所示)。
这套孢子收集装置需事先进行高压灭菌消毒。
把装好子实体的孢子弹射收集器放在温度为15-20℃的室内,经24-48小时左右,可见到无菌滤纸上有褐色的蘑菇孢子印。
在无菌操作下把收集到蘑菇孢子的滤纸条装入无菌的空试管中,并在温度下进行真空干燥,之后放入冰箱可长期保存备用。
(二)孢子分离1、多孢分离法即把多个孢接种在同一培养基上,让它们萌发共同生长交错在一起,从而获得纯种的一种方法,由于多个孢子间的种性互补,基本上可以保持亲本的稳定性,此法比较简易,在过去的蘑菇制种中应用较为普遍。
菌类分离鉴定开题报告1. 引言在生物学研究领域中,菌类的分离和鉴定是一项基础而重要的技术。
菌类是一类广泛存在于自然界中的生物,对环境和人类健康具有重要影响。
通过对菌类的分离和鉴定,可以进一步了解其生态学、生物学特性以及对人类的影响。
因此,本项目旨在开展菌类分离鉴定的研究。
2. 研究目的本研究的主要目的是通过分离和鉴定菌类,深入了解菌类的多样性、物种间的差异以及其在环境中的分布情况。
该研究将为环境保护、生物学研究、医学领域等提供理论和实际依据。
3. 研究方法3.1 菌类分离菌类的分离是研究菌类的基础工作,本研究将采用以下步骤进行菌类的分离:1.采集样品:选取适当的环境样品,如土壤、水体等,并确保样品的新鲜度和质量。
2.样品处理:对采集的样品进行处理,包括筛选、研磨等,以提取菌类。
3.菌类分离培养:将处理后的样品接种于适当的培养基中,利用培养基中菌类生长的特性,分离出单个菌落。
4.单菌落分离:将单个菌落转移到新的培养基上,确保菌类的纯度。
5.菌类保存:对分离得到的菌株进行保存,并建立菌株库以备进一步研究使用。
3.2 菌类鉴定菌类鉴定是根据菌种的不同特性,通过一系列方法进行对菌类进行分类和确定其物种的过程。
本研究将采用以下方法进行菌类的鉴定:1.形态学观察:对分离得到的菌株进行形态学特征观察,包括菌落形态、色素等。
2.生理生化特性检测:通过一系列生理生化实验,包括碳源利用测试、氧需求测试等,确定菌株的生物学特性。
3.分子生物学鉴定:采用PCR扩增技术,通过对菌株基因组水平的比较分析,确定其基因组序列差异,进而确定其物种分类。
4. 预期结果通过以上的分离和鉴定方法,我们期望得到以下结果:1.菌类的多样性研究:鉴定出不同样品中的菌类种类和数量,深入了解环境中菌类的多样性。
2.菌类的生态学研究:通过对菌落的形态学观察和生理生化特性检测,了解菌类的生态学特性,包括营养需求、生境适应性等。
3.物种鉴定和分类:通过分子生物学鉴定方法,确定菌株的物种归属,为菌类分类学和系统发育学的研究提供数据支持。
实验一、平菇多孢分离育种技术(一)(二)一、实验目的1.了解多孢分离制作母种与组织分离制母种的区别及意义2.掌握平菇多孢分离技术二、实验原理食用菌子实体生长健壮,八成熟时,可散发大量有性孢子,这些孢子在一定条件下,可相互配合,形成双核菌丝体,从而制取母种。
多孢子分离技术是有性繁殖过程。
通过这种方式可以选育出优良菌种,有时还可使退化的菌种复壮。
三、实验步骤(一)制备培养基马铃薯200g,葡萄糖20g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5g,VB1微量,琼脂18g,水1000mL,pH 值自然。
按常规方法制试管斜面或三角瓶底面0.5㎝厚的琼脂板。
(二)选择种菇选取生长健壮,八成熟,无病虫害的平菇一朵待用。
(三)收集有性担孢子在无菌条件下,拨出斜面试管口或瓶口的棉塞,在菌褶(猴头菇用菌刺)前端的五分之二处剪取约1.5~2㎝2的菌褶,用镊子挑取一片菌褶,贴附在已灭菌的斜面培养基正上方,迅速塞好棉塞。
于24-26℃条件下恒温培养6-24小时后取出。
(四)孢子萌发培养及菌丝体纯化在酒精灯火焰附近去掉棉塞,用消毒小钩钩出管内的小片菇种,将棉塞连同试管口在火焰上灼烧后,迅速塞上棉塞,于24~26℃恒温培养1周,待孢子萌发,井长成成片菌丝后,切取生长迅速、无杂菌污染的菌丝团转管纯化,待菌丝长满管后便可扩大繁殖备用。
四、作业1.多孢分离育种操作应注意什么?(种菇选择及整个过程无菌操作)2.多孢分离制作母种与组织分离制母种各自有什么优缺点?(多孢子分离制作母种优点:是有性繁殖过程,通过这种方式可以选育出优良菌种。
其缺点操作繁琐,成功率低。
组织分离制母种优点:是无性繁殖过程,操作简单,成功率高。
缺点:多次组织分离制得的菌种易退化。
)。
一种马勃属野生真菌分离鉴定及生物学特性研究作者:***来源:《安徽农业科学》2021年第13期摘要采用形态鉴定与ITS分子序列鉴定相结合的方法,对采集的一株马勃属野生真菌进行鉴定,并对该菌种菌丝生物学特性进行研究。
结果表明,初步通过形态鉴定法鉴定为梨形马勃,后进一步用ITS分子序列鉴定法鉴定,分离株rDNA ITS 片段长度为697 bp,测序结果登录NCBI与GenBank中已知菌种进行BLAST比对,采用MEGA 2.0软件构建系统发育树,鉴定分离菌种为网纹马勃,结合形态特征,最终鉴定该菌种为网纹马勃(Lycoperdon perlatum)。
生物学特性研究结果表明,可溶性淀粉为该菌丝生长的最适碳源,硝酸铵为最适氮源,7.0为最适pH,菌丝最适温度为25 ℃。
关键词网纹马勃;分离;鉴定;生物学特性中图分类号 S-646 文献标识码 A 文章编号 0517-6611(2021)13-0120-04doi:10.3969/j.issn.0517-6611.2021.13.029开放科学(资源服务)标识码(OSID):Study on Identification and Biological Characteristics of a Wild Lycoperdon perlatumZHANG Yan(Liaoning Provincial Institute of Poplar, Gaizhou, Liaoning 115213)Abstract A wild macrofungi fruiting body was isolated by tissue isolation method, identified by morphological identification and its molecular sequence identification, and the biological characteristics of the mycelium were studied. The results showed that the strain was identified as Lycoperdon pyriforme Schaeff.:Pers by morphological identification and ITS molecular sequence identification. The length of ITS fragment of rDNA was 697 bp. The sequencing results were registered in NCBI and compared with the known strains in GenBank by blast, the ITS sequence with similar height was downloaded and compared with cluster W. Mega 2.0 software was used to construct the system tree, and the isolated strain was identified as Lycoperdon perlatum. The results showed that the suitable carbon source for mycelium growth was soluble starch, the suitable nitrogen source was ammonium nitrate, the suitable pH value was 7.0, and the optimum temperature was 25 ℃.Key words Lycoperdon perlatum;Isolation;Identification;Biological characteristics网纹马勃(Lycoperdon perlatum),马勃菌目马勃菌科马勃属。
与食用菌生产相关脉孢菌的分离鉴定及其生物学特性从食用菌污染袋中分离到Ns-1和Ns-2两株脉孢菌(Neurospora sp),经形态特征及ITS (internal transcribed spacer)序列分析表明,这两株脉孢菌均为好食脉孢菌(N.sitophila)。
生物学特性研究表明,其最适生长pH为4~7,最适温度为35 ℃,培养基最适含水量为60%,在高温干燥环境易产孢子,在潮湿环境孢子易萌发,菌丝生长旺盛。
好食脉孢菌;ITS;生物学特性S646.01A脉孢菌(Neurospora spp)又称链孢霉、红色面包霉或串珠霉,是食用菌制种和代料栽培中最易污染的杂菌之一。
脉孢菌菌丝容易疯长,污染棉花塞,后期大量孢子在瓶口形成孢子团,由于其生活周期短,扩散蔓延快,食用菌栽培中一旦被污染将造成重大损失[1]。
脉孢菌传统的防治主要是采用预防和物理、化学防治[2]。
近年来,利用PCR扩增真菌核糖体ITS基因区段进行真菌鉴定的技术得到了快速的发展。
同时因其快速、准确和简便的优点,越来越受到真菌学家们的重视[ 3,4]。
粗糙脉孢菌(N. crassa)、好食脉孢菌(N. sitophila)是食用菌栽培过程中最常见的脉孢菌,一般会形成成串的红色分生孢子,故称红色链孢霉,但近年来,在菇房中开始出现分生孢子为白色的脉孢菌,白色脉孢菌跟红色脉孢菌是否同种?它们的生物学特性是否相同?我们对此进行了研究。
1 材料与方法1.1样品福建古田银耳污染袋1袋,白色脉孢菌与红色脉孢菌分别长在不同的接种穴口。
1.2培养基PDA培养基:马铃薯200 g,蔗糖20 g,琼脂20 g,水1 L,pH自然。
琼脂培养基:牛肉膏3 g,蛋白胨10 g,NaCl 10 g,水1 L ,pH 7。
棉籽壳麦麸培养基:棉籽壳84%,麸皮15%,石膏1%,含水量60%±2%,pH 7.0。
1.3分离纯化用接种环从污染袋中刮取孢子粉在PDA平板上划线分离,28 ℃培养24 h,在菌落边缘用接种针挑取生长均一、颜色一致的菌丝转到另一个PDA平板上进行培养。
如此重复3次即可得到纯化的脉孢菌。
1.4菌落和显微形态观察观察脉孢菌平板菌落形态。
挑取分生孢子做成水浸片,显微镜观察孢子颜色。
将红色脉孢菌和白色脉孢菌分别划线接种在约0.5 cm厚的琼脂平板上,于28 ℃培养,当长出絮状菌丝时用显微镜观察菌丝分枝情况,当长出分生孢子时观察分生孢子着生情况。
1.5ITS测序及相似性分析两株脉孢菌总DNA的提取采用CTAB法[5],ITS1/5.8SrDNA/ITS2片段用通用引物ITS4和ITS5扩增[6]。
PCR纯化产物送宝生物工程(大连)有限公司进行双向测序。
测序仪:ABIPRISMTM3730XL DNA Analyzer和ABIPRISMTM377XL DNA Sequence。
将测得的序列与用Blast软件从GenBank 中搜索到的相关序列及选定的对照序列进行比较,采用DNAstar软件包中的clustal W进行比对并构建系统发育树。
1.6生物学特性测定1.6.1最适pH值测定用1.0 mol/L的NaOH或HCl 溶液分别调节PDA培养基pH值至2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12。
将培养基倒入直径为9 cm的培养皿中,然后分别接入菌龄为24 h,生长一致的红色和白色脉孢菌一块(直径为4 mm),置28 ℃下培养,24 h后测量菌落直径,计算菌丝生长速度。
每个处理设3次重复。
1.6.2最适温度测定直径为4 mm的脉孢菌接种块接种于直径为9 cm的PDA平板中央,菌饼正面朝下,分别置5 ℃、10 ℃、15 ℃、20 ℃、25 ℃、30 ℃、35 ℃、40 ℃、45 ℃和50 ℃生化培养箱中培养6 h。
测量菌落直径,计算菌丝生长速度。
每个处理3次重复。
1.6.3最适含水量测定采用棉籽壳麦麸培养基,先将培养料于65 ℃烘干,再按比例加水拌料,配成含水量分别为50%、55%、60%、65%、70%和75%的培养基,分装于25 mm×200 mm的试管中,培养料装管的松紧度尽量保持一致,培养料的高度也尽量一致,每管折合干料20 g。
0.15 Mpa灭菌1 h,挑取一块直径8 mm大小,生长一致的脉孢菌于培养料上,置28 ℃培养箱内培养,当菌丝封面并长入料内2~3 cm时,沿着菌丝前端画一条起始生长线,快长满时,画一条终止线。
测量起始线与终止线之间的距离。
每个处理3次重复。
2 结果与分析2.1红色脉孢菌和白色脉孢菌的分类地位2.1.1形态鉴定从菌落形态上看,红色脉孢菌和白色脉孢菌在菌丝生长初期都为白色絮状,匍匐生长,后期红色脉孢菌开始产生红色的分生孢子而白色脉孢菌则形成白色的分生孢子,并在菌丝上层分别产生粉红色和白色粉末。
红色脉孢菌分生孢子颜色为浅红色,大小为7.8 μm×11.2 μm(图1),而白色脉孢菌分生孢子大多为白色,大小为6.5 μm×9.8 μm,个体比红色脉孢菌的分生孢子小(图2)。
红色脉孢菌和白色脉孢菌都产生有隔菌丝,分生孢子梗直接从菌丝上长出,梗顶端形成分生孢子,并以芽生方式形成长链,链可分枝(图3和图4)。
2.1.2ITS分析经引物ITS4、ITS5扩增得到的ITS区段长度约为550 bp,与GenBank中选取的AF 388926 N. sitophila(好食脉孢菌)、AY 681194N. tetrasperma(四孢脉孢菌)、AY 681193 N. crassa(粗糙脉孢菌)和AY 681192 N. intermedia(间型脉孢菌)的比对结果见图5。
ITS分析所测区域为高度保守的ITS1-5.8SrDNA-ITS 2碱基序列,碱基序列在一定程度上可以反映种的特异性。
红色脉孢菌、白色脉孢菌与好食脉孢菌(N. sitophila)三者的序列完全相同;这三者与四脉脉孢菌(N. tetrasperma)在第108位,与间型脉孢菌(N. intermedia)在第108和413位,与粗糙脉孢菌(N. crassa)在第108、180和413位存在差异(表1)。
因此,红色脉孢菌、白色脉孢菌都隶属于子囊菌亚门(Ascomycotina),粪壳霉目(Sordariales),脉孢霉属(Neurospora),好食脉孢菌(N. sitophila)。
2.2脉孢菌的生物学特性2.2.1最适pH值如图6所示,红色脉孢菌和白色脉孢菌的最适生长pH值都在4~7之间,致死pH值都是2和10。
可见,脉孢菌在偏酸性的环境生长较好而在碱性环境生长不好。
2.2.2最适温度如图7红色脉孢菌和白色脉孢菌的最适生长温度在35 ℃左右;白色脉孢菌在5 ℃和50 ℃时菌丝停止生长,而红色脉孢菌在10 ℃和50 ℃时菌丝停止生长;温度高于35 ℃时菌丝生长缓慢但菌丝表面开始形成大量孢子;温度低时菌丝生长缓慢且只有少量孢子产生。
2.2.3最适含水量图8表明,红色脉孢菌和白色脉孢菌菌丝生长的最适含水量都在60%左右。
且不同含水量之间,菌丝生长速度差别不大。
同时还可以观察到,含水量较低的试管中产生大量分生孢子,而含水量高时菌丝生长旺盛。
3 讨论红色脉孢菌和白色脉孢菌的分生孢子颜色存在显著的差异,但两者同属脉孢菌属的好食脉孢菌。
好食脉孢菌一般为红色,白色的较少见,有可能是红色脉孢菌的突变种。
从生物学特性上看,白色脉孢菌和红色脉孢菌所适宜生长的pH值、培养基含水量和温度基本相同。
但在最适生长温度下,白色脉孢菌的生长速度为 6.0 mm/h,而红色脉孢菌的生长速度为5.0 mm/h;红色脉孢菌菌丝的最低致死温度为10 ℃,而白色脉孢菌菌丝的最低致死温度为5 ℃。
了解脉孢菌的生物学特性,有利于更好地控制脉孢菌的大规模爆发。
比如,根据脉孢菌喜酸和不耐碱的特点,可以有意识在食用菌栽培过程中添加一些石灰,提高培养料的pH值,抑制脉孢菌的生长。
环境干燥时特别要注意防止脉孢菌孢子粉大规模传播,而环境潮湿时就要设法控制孢子萌发和菌丝体生长。
由于高温高湿环境最容易造成脉孢菌危害,应尽量避开在高温高湿季节栽培。
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