大鼠劲动脉球囊损伤模型步骤及说明

国产球囊导管制作大鼠主动脉损伤血管内膜增生模型及特性的研究摘要：目的探讨国产2.0F球囊导管取代进口2F Fogarty球囊导管致大鼠主动脉损伤血管内膜增生模型的特点及可行性。

方法用国产2.0F球囊导管建立大鼠主动脉内皮剥脱模型，分别采用组织形态学和免疫组织化学方法，观察大鼠血管内皮剥脱后内膜增生的情况及血管平滑肌细胞(VSMC)表型标志基因SM-肌动蛋白(SMα-actin)、增殖细胞核抗原(PCNA)及Ⅰ型胶原(collagenI)的表达活性。

结果与假手术组比较，术后模型7天组内膜增生不明显，SMα-actin及PCNA表达也均不明显；14天内膜有轻度增厚，SMα-actin及PCNA表达均明显增强；21天内膜呈进行性弥漫性增厚，SMα-actin表达仍明显增高，但PCNA表达不明显。

模型7天、14天、21天组collagenⅠ表达与假手术组比较，差异无显著性(p＞0.05)。

结论国产2.0F球囊导管致大鼠主动脉损伤后，血管内膜增生引起再狭窄以14～21天较为明显，细胞增殖也明显，表明其可以取代进口2F Fogarty球囊导管运用于血管内膜实验。

关键词：球囊导管；血管平滑肌细胞；形态计量学；SM-肌动蛋白；增殖细胞核抗原；Ⅰ型胶原经皮冠状动脉成形术(percutaneous transluminal coronary angioplasty, PTCA)能明显减轻心血管疾病的症状，给患者带来福音。

但术后的再狭窄(restenosis, RS)发生率仍然居高不下，影响了PTCA的远期疗效。

球囊扩张后再狭窄的发生机制包括血管弹性回缩，损伤部位血栓形成，血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell, VSMC)增殖、迁移和细胞外基质积聚等[1]，这些都是PTCA后再狭窄重要的病理生理学基础。

目前，有关防治PTCA后再狭窄的发生发展是心血管疾病领域的热点问题。

由于进口的球囊导管价格十分昂贵，且很难匹配应用于小动物模型，为建立可靠、价廉的方法，我们采用国产2.0F球囊导管取代进口的球囊导管，建立大鼠主动脉损伤血管内膜增生模型，并对该模型的特点及可行性进行了研究。

构建颈动脉损伤模型大鼠早期生长反应因子1及组织因子的表达张希;苗驰【摘要】BACKGROUND: DNA enzyme targeting early growth response factor 1 (Egr-1) mRNA (ED5) can inhibit expression of downstream target genes by specificaly inhibiting expression of early growth response factor 1. OBJECTIVE:To investigate the effects of ED5 on the expression of plasma tissue factor after vascular baloon injury in rats and the mechanism of inhibiting neointimal hyperplasia. METHODS: Intimal injury models of the left carotid artery were made in rats. Then, ED5, MgCl2 and FuGene6 were injected into the injured vascular segment. RESULTS AND CONCLUSION:At days 3, 7, 14, 21, the expression levels of Egr-1 and tissue factor in plasma were significantly down-regulated in the ED5 transfection group compared with the MgCl2 and FuGene6 groups (P < 0.01); and neointimal hyperplasia was significantly inhibited by ED5 at days 7, 14 and 21 after modeling (P < 0.01). ED5 may inhibit neointimal hyperplasia folowing baloon injury of rat common carotid artery through down-regulation of tissue factors.%背景：脱氧核酶 ED5可通过特异性抑制早期生长反应因子1的表达来阻遏下游靶基因的表达。

慢病毒载体在大鼠颈动脉球囊损伤模型中的应用及观察杨简;江洪;李万强;陈思思;陈静;徐盛开;王继春【期刊名称】《心肺血管病杂志》【年(卷),期】2010(029)002【摘要】目的:研究携带绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的慢病毒转染球囊损伤大鼠颈动脉的效率和可行性,为利用慢病毒载体介导的基因治疗预防血管再狭窄奠定基础.方法:将携带GFP的慢病毒载体(pGC-LV-GFP载体)和慢病毒包装质粒供转染293T细胞,完成慢病毒颗粒包装及滴度测定.包装产生的慢病毒Lenti-GFP转染至球囊损伤的大鼠颈动脉.术后28 d,损伤及病毒转染血管段标本分别行荧光显微镜、光镜检查,评估慢病毒的转染效率及内膜增生情况,并与假手术组(Sham组)、PBS对照组进行比较.结果:经包装产生的Lenti-GFP滴度为2×109Tu/mL;术后28 d,Sham组与PBS组血管中膜弹力层仅见微弱的自发性绿色荧光,而Lenti-GFP组动脉壁全层可见较强的绿色荧光分布;PBS组与Lenti-GFP转染组大鼠损伤的颈动脉均可见明显内膜增生,内膜和中膜面积之比差异无统计学意义.结论:Lenti-GFP成功转染至球囊损伤的大鼠颈动脉,并能维持目的基因稳定长期的表达,是血管再狭窄基因治疗的理想载体.【总页数】4页(P145-147,156)【作者】杨简;江洪;李万强;陈思思;陈静;徐盛开;王继春【作者单位】430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学心血管病研究所;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学心血管病研究所;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学泌尿外科;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学心血管病研究所;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学心血管病研究所;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学心血管病研究所;430060,武汉,武汉大学人民医院心内科-武汉大学心血管病研究所【正文语种】中文【中图分类】R543.4【相关文献】1.颈动脉球囊损伤模型大鼠核转录因子κB变化与颈动脉血管内膜增生的关系 [J], 姜昕;董少红;廖玉华;刘华东2.人参皂苷Rg3对大鼠颈动脉球囊损伤模型PCNA、CyclinD1及CDK4表达的影响 [J], 陈文明;蹇明辉;赵然尊;石蓓3.大鼠颈动脉球囊损伤模型内膜增生过程中连接蛋白的变化 [J], 潘乐门; 陈帆风; 苏翔; 杨法镜4.低分子肝素对颈动脉球囊损伤模型大鼠AngⅡ、HB-EGF表达及内膜增生的影响[J], 赵治涛;肖珂青5.大鼠颈动脉球囊损伤模型的建立和损伤血管的组织学观察 [J], 王晓军;崔连群;刘继东;王敏;盖玉生;李峰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

17--AAG对颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞增
殖的影响的开题报告
题目：17-AAG对颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响
研究背景：颈动脉球囊损伤是一种常见的心血管疾病，会导致血管狭窄、血栓形成等症状，严重时甚至会引起中风。

目前，治疗该疾病的主要方法是使用血管内支架，但是该方法会导致血管再狭窄和血栓形成等并发症。

因此，寻找一种新的治疗方法对于治疗颈动脉球囊损伤非常重要。

研究目的：探究17-AAG对颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制。

研究方法：采用体外培养颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞，并添加不同浓度的17-AAG，使用MTT法检测细胞增殖情况。

同时，采用Western blot法检测17-AAG对PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响。

预期结果：研究结果预计表明17-AAG可以抑制颈动脉球囊损伤大鼠血管平滑肌细胞的增殖，同时通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路的活性实现其抑制作用。

结论和意义：本研究有望为寻找一种新的治疗方法提供实验基础，为治疗颈动脉球囊损伤提供理论和实践依据。

大鼠动脉粥样硬化模型的复制——腹主动脉球囊损伤术1．模型目的和背景目的：动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是危害人类健康的一类疾病，是导致人类死亡的头号杀手，因此，国内外医学界对AS关注程度也日益增长。

长期以来，国内外学者对AS 的发病机制进行研究，学说甚多，但确切病因尚未完全阐明。

传统的学说如脂质渗入学说、血栓源学说、中层平滑肌细胞增生学说、巨噬细胞受体缺失学说、血流动力学学说、内皮细胞损伤学说及损伤应答和炎症学说等，其中任意一种学说均不能全面解释AS的发生与发展。

AS发病机制和治疗对策的探究成了医学研究的热点。

选择合适的动物成功建立动物模型是研究AS发病机制及探讨治疗措施的重要条件。

因此，在本模型的建立过程中，力求更贴切的模拟临床病变，为AS发病机制探讨和治疗方法的改进研究提供与临床病例最为相似的实验对象。

背景：AS是一种全身性疾病，主要累及大中动脉，基本病变是动脉内膜的脂质沉积、内膜灶状纤维化及平滑肌细胞和结缔组织增生，引起内膜灶性纤维性增厚及粥样斑块形成，使动脉壁变硬，管腔狭窄，并引起继发性病变，特别是心、脑血管等器官的缺血性病变。

动脉内膜损伤是促使AS形成的最重要危险因素，所以可以用机械性损伤动脉内膜联合高脂饮食来建立AS模型。

目前报道的机械性内膜损伤方法有两种：球囊损伤术及空气干燥术。

球囊损伤术主要造成内皮细胞的即刻剥脱，弹力板及中膜严重损伤。

2．材料与设备SD大鼠，眼科剪，眼科镊，手术剪，辅料镊，玻璃分针，手术缝合线，缝合针，止血钳，持针器，2mm球囊，大鼠手术台，棉球，纱布块，注射器，碘酒棉球，酒精棉球。

3．手术概述1）术前准备：选择健康大鼠作为实验对象，手术器械和敷料均经过121℃，30min高压灭菌，球囊采取75%酒精浸泡消毒。

2）麻醉用药：麻醉选择10%水合氯醛，剂量为0.35ml/100g体重，给药途径为腹腔注射。

3）自制拉钩：将订书钉一端和橡皮筋钩在一起并固定，订书钉另一端做45度弯曲，用于钩挂组织，将橡皮筋另一端以蛙钉固定在手术台上，可以任意调节蛙钉位置而改变牵拉的力度。

脑缺血大鼠模型具体步骤及详细说明实验分组随机分组：对照组，模型组，阳性药物组，受试药物组(三个浓度梯度组)实验周期24 hours, 3 days or 7 days建模方法1.15%水合氯醛麻醉大鼠，颈部备皮，消毒，插入肛温探头，保持体温在37±0.5℃。

2.颈部正中切口，暴露右侧颈总动脉，颈内动脉和颈外动脉。

使用6-0丝线在距离颈总动脉分叉4mm处结扎颈外动脉远心端，在颈外动脉穿入另一根6-0丝线，在靠近颈总动脉分叉处打一个活结。

3.使用动脉夹夹闭颈总动脉。

在距离颈总动脉分叉处3mm处的颈外动脉上剪一个小口，将一根头端处理过的0.33mm直径的尼龙线从小口中插入，进入颈内动脉，并向内插入大脑中动脉，尼龙线的插入深度距离颈总动脉分叉处约16±1mm。

4.缺血后90min拔掉线栓，用6-0丝线结扎外动脉近心端，用3-0丝线缝合颈部伤口，活力碘消毒伤口，将大鼠放在加热垫上，待清醒后放入恒温抚养箱饲养。

5.术后24h，对小鼠进行神经功能评分，然后腹腔注射15%水合氯醛麻醉大鼠，取大脑进行TTC染色和病理染色应用用于研究脑梗死的发病机制、病理生理过程和溶栓治疗1.神经功能缺失体征评分参考Longa及Bederson的5分制法在动物麻醉清醒后24h进行评分，分值越高,说明动物行为障碍越严重。

0分:无神经损伤症状1分:不能完全伸展对侧前爪2分:向对侧转圈3分:向对侧倾倒4分:不能自发行走,意识丧失2.TTC染色麻醉大鼠后，取大鼠脑组织，放入-20℃冰箱冷冻30min。

用PBS配置1% TTC（W/V），37℃水浴至TTC溶解，将冻好的脑组织切片，置于10ml TTC 溶液中，37℃恒温孵育10min。

不时翻动脑片，使组织均匀染色。

正常脑组织染色后呈鲜红色，而梗死区呈苍白色。

取脑后用4%多聚甲醛溶液固定，蔗糖溶液脱水后，经OCT包埋做冰冻切片，切片10um，做尼氏染色，可做梗死面积的评价。

尼可地尔对大鼠颈总动脉球囊拉伤模型损伤血管再内皮化的影响王宁远;赖图雅;王鑫焱;李慧颖;王威【期刊名称】《实验动物科学》【年(卷),期】2024(41)2【摘要】目的研究尼可地尔对大鼠颈总动脉球囊拉伤模型损伤血管再内皮化的影响。

方法将18只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3组,分别为假手术组、对照组、实验组,每组6只,对照组和实验组行颈总动脉球囊拉伤,假手术组仅分离颈总动脉,术后对照组给予0.9%氯化钠溶液(0.5 mL/100 g),每日1次;实验组和假手术组给予尼可地尔(2 mg/100 g)灌胃,每日1次,连续14 d,取大鼠颈总动脉血管标本。

伊文氏蓝染色观察各组血管内膜损伤面积及血管再内皮化的情况,HE染色观察各组血管内膜增生及管腔狭窄程度。

结果假手术组血管内膜光滑,内皮层完整,血管内膜未见增生。

对照组球囊损伤14 d后内膜增生明显,新生内膜面积显著高于假手术组,差异具有统计学意义(P<0.05)。

实验组球囊损伤14 d后新生内膜面积显著低于对照组,损伤血管再内皮化区域占比显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。

结论尼可地尔可能抑制大鼠颈总动脉球囊拉伤后的内膜增生,促进损伤血管再内皮化。

【总页数】5页(P1-5)【作者】王宁远;赖图雅;王鑫焱;李慧颖;王威【作者单位】中国人民解放军总医院第六医学中心心血管病医学部;内蒙古自治区鄂尔多斯市乌审旗蒙医综合医院心脏病科;中国人民解放军93658部队;中国人民解放军总医院第二医学中心心血管内科;中国人民解放军医学院【正文语种】中文【中图分类】Q95-3【相关文献】1.粒细胞集落刺激因子对高脂血症大鼠颈总动脉球囊损伤后再内皮化的影响2.缺氧预处理间充质干细胞对兔颈动脉球囊损伤后血管内皮生长因子水平及再内皮化的影响3.大鼠颈总动脉球囊拉伤所致血管狭窄模型的建立4.依维莫司对大鼠颈总动脉球囊损伤后血管再狭窄的影响5.^(188)铼液体球囊血管内照射对血管损伤后再内皮化影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。