控制菌检查实验报告

微生物控制菌检查方法(薄膜过滤法)验证方案微生物控制菌检查方法(薄膜过滤法) 验证方案编码：表一、验证方案的起草与批准1.验证方案起草起草人：起草时期：年月日2.验证小组成员：3.验证方案审核4.验证方案批准批准人：批准日期：二、验证方案1.验证目的和原理1.1验证目的本实验是关于的微生物控制菌检查试验的验证。

验证结果应显示的微生物控制菌试验方法，对检品中可能存在的微生物没有抑制作用，符合验证要求。

1.2原理按照已建立的药品微生物控制菌检查方法，通过已知菌数试液的对照菌的培训对照，验证其操作方法适合该药品的微生物控制菌的检测的正确性。

2.验证方法步骤2.1验证前的准备：将所有的平皿和稀释剂都应该严格按照相关的灭菌程序消毒，以确保其对试验的结果没有影响。

试验菌应选择相应的阴性对照菌。

2.2验证试验的操作计划：用3个不同批号产品按照微生物控制菌检测方法进行平行试验，通过观测是否长菌来判断。

2.3试验结果可接受标准：用标准菌株评价方法“”的微生物控制菌检查试验对检品中微生物的抑菌性。

试验结果应显示；阴性菌对照组不得检出阴性对照菌，试验组应检出试验菌。

3.试验实施3.1试验前的准备3.1.1主要仪器设备：恒温培养箱、生化培养箱、电子天平、高压蒸汽灭菌器、净化工作台。

3.1.2操作环境：操作间应该安装空气除菌过滤层装置。

环境洁净度不应低于10000级，局部洁净度为100级（或放置同等级净化工作台）。

操作间或净化工作台的洁净空气应该保持对环境形成正压，不低于5pa。

3.1.3试验样品：批号：批号：批号：3.1.4培养基：3.1.5稀释液：PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液以上经115℃高压蒸汽灭菌30min。

3.1.6验证用微生物名称及其编号实验菌株的来源：编号由菌名首字母—传代代数—制备日期组成。

3.1.7器具：无菌薄膜过滤器：（孔径0.45um直径50mm）、无菌培养皿（直径90mm）、无菌移液管（5ml）4.验证方法4.1试验菌种的制备和稀释接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌的新鲜培养物至相应的营养肉汤或BL增菌液10ml中,30～35℃培养18～24小时。

控制菌耐胆盐革兰阴性菌的检查该检查项下收载了"定性试验"和"定量试验"两部分内容，若标准规定为“不得检出耐胆盐革兰阴性菌”则选择"定性试验"检验，若标准规定为"胆盐革兰阴性茵应小于10n cfu /g(ml) "，则选择"定量试验"检验。

耐胆盐革兰阴性菌的检验流程如下:样品制备成1: 10的胰酪大豆胨液体培养基（TSB ）供试液后，在20 - 25℃预培养不超过2小时使细菌苏但不增殖，再进行选择性增菌，最后通过VRBG 筛耐胆盐革兰阴性菌。

美同药典36规定TSB 供试液的预培养时间为2- 5小时。

刘洪祥等通过实验证明，大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、阪崎肠杆菌和沙门菌在TSB 中，微生物数量在2- 5小时呈增殖趋势。

因此，建议减少预培时间以控制菌体增殖，降低定量试验的偏差，中国药典2015年版中规定预培不超过2小时。

这也是中国药典与国外药典在技术要求上的差异之一。

肠道增菌液体培养基( EE )对革兰阴性菌具有良好的选择性，经EE 选择性增菌后革兰阳性菌应不长，故若在随后的紫红胆盐葡萄糖琼脂(VRBG)上无菌生长，则表明样品中未污染有耐胆盐革兰阴性菌。

尽管药典未明确说明VRBG 培养基的抑菌能力，但该培养基通过脱氧胆酸钠和结晶紫等成分仍对革兰阳性菌具有较强的抑制能力。

因此，VRBG 琼脂上有菌生长，且经革兰染色判断为革兰阴性菌，则表明样品已被耐胆盐革兰阴性菌污染;若为革兰阳性菌，则反映培养体系的选择性抑菌能力不足。

预培养选择性增菌分离1:10 TSB,20到25℃，小于等于2h 定性:取相当于1g 至N mol EE VRBG 30到35℃，18到24h 。

定量：取相当于0.1g ，0.01g ，0.001g 至N mol EE培养条件：30到35℃，24到25℃大肠埃希菌的检查各国药典均采用选择性培养筛选大肠埃希菌2015年版药典选择麦康凯液体 (MacB) 作为选择性增菌培养基，向其中添加结 晶紫后得到麦康凯琼脂 (MacA)进一步增强了其选择性。

细菌抑制真菌实验报告摘要真菌是一类常见的微生物，它们广泛存在于我们周围的环境中。

为了研究细菌对真菌的抑制作用，我们进行了一系列实验。

通过观察不同细菌种类对真菌生长的影响，我们发现某些细菌具有抗真菌的能力。

这一发现有助于进一步探索细菌在真菌治疗中的潜力。

简介真菌感染在农业和医学领域都造成了严重的问题。

随着抗生素的滥用，真菌对抗生素产生了耐药性，需要寻找新的治疗方法来应对真菌感染。

细菌抑制真菌的能力被认为是一种潜在的治疗方法，因此我们开展了这项实验。

实验材料与方法1. 实验细菌：选取了常见的革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌，包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。

2. 实验真菌：使用了常见的真菌菌株，包括白色念珠菌、曲霉菌等。

3. 培养基：使用了适合细菌和真菌生长的培养基。

4. 实验设备：包括培养皿、试管、移液管等。

实验步骤：1. 将细菌和真菌分别接种到培养基上。

2. 制备细菌菌液，分别将不同细菌培养物离心沉淀，用无菌生理盐水洗涤后制成10^5 CFU/mL的细菌悬液。

3. 在培养皿上制作琼脂平板。

4. 在琼脂平板上分别划线，将不同细菌的悬液均匀涂布在划线上。

5. 将真菌孢子均匀撒在琼脂平板上。

6. 打孔实验：使用洗过的取样器，将细菌菌液取样涂抹到琼脂平板上形成孔洞，然后将真菌孢子均匀撒在孔洞附近。

7. 控制组：只加入细菌悬液或只加入真菌孢子的琼脂平板分别作为对照组。

8. 所有琼脂平板在恒温培养箱中培养，观察菌落生长情况。

实验结果与讨论在实验中，我们观察到不同细菌对真菌的抑制作用差异较大。

其中，金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的抑制效果最显著，真菌在与这两种细菌接触后的生长明显受到影响。

而大肠杆菌对真菌的抑制作用相对较弱。

这些结果表明，不同细菌种类可能具有不同的抑制真菌的能力。

这可能与细菌的代谢产物、生理状态以及相互作用等因素有关。

金黄色葡萄球菌和白色念珠菌的抑菌作用可能与它们的抗菌肽分泌相关，而大肠杆菌则可能缺乏相关抗真菌物质。

1106非无菌产品微生物限度检查：控制菌检查法控制菌检查法系用于在规定的试验条件下，检查供试品中是否存在特定的微生物。

当本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料是否符合相应的微生物限度标准时，应按下列规定进行检验，包括样品取样量和结果判断等。

本检查法可采用替代的微生物检查法，包括自动检测方法，但必须证明替代方法等效于药典规定的检查方法。

供试液制备及实验环境要求同“非无菌产品微生物限度检查：微生物计数法”（通则1105）。

如果供试品具有抗菌活性，应尽可能去除或中和。

供试品检查时, 若使用了中和剂或灭活剂，应确认有效性及对微生物无毒性。

供试液制备时如果使用了表面活性剂，应确认其对微生物无毒性以及与所使用中和剂或灭活剂的相容性。

培养基适用性检查和控制菌检查方法适用性试验供试品控制菌检查中所使用的培养基应进行适用性检查。

供试品的控制菌检查方法应进行方法适用性试验，以确认所采用的方法适合于该产品的控制菌检查。

若检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时，控制菌检查方法应重新进行适用性试验。

菌种及菌液制备菌种 试验用菌株的传代次数不得超过5代（从菌种保藏中心获得的干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)〔CMCC（B）26 003〕铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)〔CMCC（B）10 104〕大肠埃希菌(Escherichia coli)〔CMCC（B）44 102〕乙型副伤寒沙门菌(Salmonella paratyphi B)〔CMCC（B）50 094〕白色念珠菌(Candida albicans)〔CMCC（F）98 001〕生孢梭菌（Clostridium sporogenes）〔CMCC（B）64 941〕菌液制备 将金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、沙门菌分别接种于胰酪大豆胨液体培养基中或在胰酪大豆胨琼脂培养基上，30～35℃培养18～24小时；将白色念珠菌接种于沙氏葡萄糖琼脂培养基上或沙氏葡萄糖液体培养基中，20～25℃培养2～3天；将生孢梭菌接种于梭菌增菌培养基中置厌氧条件下30～35℃培养24～48小时或接种于硫乙醇酸盐流体培养基中30～35℃培养18～24小时。

抗生素软膏控制菌检验方法研究[摘要]目的：研究和分析抗生素软膏控制菌检验的方法。

方法：联合应用薄膜过滤法及离心沉淀法实施抗生素软膏控控制菌检验，观察和分析检验结果。

结果：铜绿假单细胞菌及金黄色葡萄球菌阳性对照试验均可见菌落生长且具有典型性。

结论：联合应用薄膜过滤法及离心沉淀法实施抗生素软膏控制菌检验具有较强的可行性，能够使干扰项得到排除，有助于提高检验准确率，值得推广应用。

关键词：抗生素软膏；控制菌检验；薄膜过滤法；离心沉淀法作为外用型抗菌抗生素，抗生素软膏在临床上有着非常广泛的应用范围，能够有效抑制细菌繁殖和生长，使机体抗感染能力得到增强。

但是，部分患者应用抗生素软膏后出现病情加重等异常反应，不良反应与铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌感污染等存在一定的关联，因此，有必要对抗生素安全性进行检验以充分保证抗生素应用的有效性及安全性。

本次研究特就抗生素软膏控制菌检验方法与效果进行分析，现将研究结果进行汇总并报告如下：1资料与方法1.1一般资料供试品共计包括盐酸金霉素眼膏1批、红霉素眼膏1批、四环素眼膏1批、金霉素眼膏1批、四环素眼膏1批、红霉素软膏8批。

1.2方法1.2.1仪器设备电子天平（产自上海光正医疗仪器有限公司），最大重量：200g，分度值：0.1g，确保精确度满足研究需要；离心机（产自长沙湘仪离心机仪器有限公司，最大转速：4000r/min、可用容量：12ml×10ml、4ml×100ml。

）；负压过滤装置（产自天津市津腾实验设备有限公司）；试药包括单硬脂酸甘油酯、十四烷酸异丙酯、吐温-80、司盘-80；菌株均选择铜绿假单胞菌及金黄色葡萄球菌。

进行检验前对各种器械与试剂进行消毒以保证检验结果的精确性，向烧杯中放入单硬脂酸甘油酯3g、吐温-80 5g、司盘-80 5g，将烧杯置于恒温环境中（115℃）3min，确保检验物品安全准确，防止出现误差。

完成灭菌操作后及使用前应再度加热直至融化，然后静置于水中（温度：45℃）进行水浴。

医学免疫学细菌的分布与控制实验报告
本次实验通过对细菌的分布情况和控制方法的探究,对免疫学和医学研究提供一定的参考价值。

一、实验目的
1. 了解细菌在环境中的分布情况；
2. 探究不同控制方法对细菌的影响；
3. 通过实验加深对免疫学和医学研究的理解。

二、实验材料
1. 细菌培养基；
2. 镜片；
3. 硝基酚红；
4. 消毒酒精；
5. 消毒液。

三、实验步骤
1. 取一块无菌的镜片,在表面涂上一层细菌培养基；
2. 将涂有培养基的镜片放在各个环境中,如卫生间、实验室、手术室等；
3. 在培养基表面滴上一滴硝基酚红,观察是否会出现红色的菌落；
4. 对比不同环境中细菌的分布情况；
5. 使用消毒酒精和消毒液进行消毒,观察细菌的消毒效果。

四、实验结果
在实验中我们发现,不同环境中细菌的分布情况存在较大的差异。

在卫生间等污染较重的环境中,硝基酚红很快会出现红色的菌落,说明细菌在此处分布较为密集；而在手术室等需要高度消毒的环境中,硝基酚红的变色时间明显延长,甚至没有出现红色菌落,说明此处的消毒和清洁效果明显优于卫生间等环境。

五、实验结论
1. 细菌在环境中的分布与清洁程度和消毒措施有关；
2. 消毒和清洁措施能够有效地控制细菌分布,减少细菌感染的风险；
3. 在医疗领域和日常生活中,应加强对清洁和消毒措施的执行,提高细菌感染的预防能力。

六、实验注意事项
1. 操作过程注意无菌操作,避免将细菌带入实验中；
2. 实验后要及时清洗手和消毒实验用具,防止污染其他环境；
3. 实验过程中要关注个人和实验室的安全,注意避免化学品的误伤。

实验名称：控制菌检验实验目的：了解和控制菌检验的基本原理和操作方法，提高对药品、食品等样品中微生物污染的检测能力，确保产品质量安全。

实验时间： 2023年X月X日实验地点： XX实验室实验人员： [姓名]、[姓名]、[姓名]实验材料：1. 样品：[样品名称]2. 培养基：[培养基名称]3. 试剂：[试剂名称]4. 仪器：恒温培养箱、无菌操作台、移液器、显微镜等实验方法：1. 样品准备：将样品按照实验要求进行处理，如均质、稀释等。

2. 接种：使用无菌操作技术，将样品接种到相应的培养基上。

3. 培养：将接种后的培养基放入恒温培养箱中，按照实验要求进行培养。

4. 观察：定期观察培养基上的菌落生长情况，记录菌落特征。

5. 鉴定：对疑似控制菌进行分离、纯化，并进行鉴定。

实验步骤：1. 样品处理：- 称取[样品重量]克样品，加入[稀释倍数]倍的无菌生理盐水，充分振荡。

- 取[接种量]mL样品稀释液，接种到[培养基名称]培养基上。

2. 接种：- 使用无菌移液器吸取[接种量]mL样品稀释液，均匀涂布于[培养基名称]培养基上。

- 用无菌镊子夹取[接种量]mL样品稀释液，点种于[培养基名称]培养基上。

3. 培养：- 将接种后的培养基放入[温度]℃恒温培养箱中，培养[时间]小时。

4. 观察：- 观察培养基上的菌落生长情况，记录菌落特征，如颜色、形状、大小等。

5. 鉴定：- 对疑似控制菌进行分离、纯化，采用[鉴定方法]进行鉴定。

实验结果：1. 菌落生长情况：- [培养基名称]培养基上出现[数量]个菌落，其中[数量]个疑似控制菌菌落。

2. 鉴定结果：- 经鉴定，疑似控制菌为[菌种名称]。

讨论与分析：1. 本实验通过控制菌检验，成功检测出样品中的[菌种名称]，为产品质量安全提供了保障。

2. 实验过程中，应严格按照无菌操作规程进行，以避免污染。

3. 在鉴定过程中，应注意观察菌落特征，并结合实验经验进行判断。

结论：通过本次实验，我们掌握了控制菌检验的基本原理和操作方法，提高了对药品、食品等样品中微生物污染的检测能力，为产品质量安全提供了有力保障。