微小染色体维持蛋白5(MCM5)在胃癌中的表达和其临床意义

激光生物学报ACTA　LASER　BIOLOGY　SINICAVol. 31 No. 2Apr. 2022第31卷第2期2022年4月收稿日期：2021-12-19；修回日期：2022-01-22。

基金项目：河北省卫健委重点科技研究计划项目（20200449）。

作者简介：贾如江，主任医师，主要从事消化系统肿瘤的基础与临床研究。

* 通信作者：尹清臣，主任医师，主要从事消化系统肿瘤的基础与临床研究。

E-mail: jiarujiang@ 。

MCM2、MCM4、MCM10在胰腺癌中的表达和预后价值及其作用机制贾如江，赵树山，尹清臣*，刘秀丽，杨龙龙，温桂海（邯郸市中心医院普一科，邯郸 056102）摘　要：基于生物信息学分析MCM2、MCM4、MCM10在胰腺癌中的表达及其与患者预后的关系，胰腺癌组织MCM2、MCM4、MCM10的表达明显高于正常胰腺组织（P <0.05），MCM2、MCM4、MCM10 mRNA 表达水平与胰腺癌患者的无病生存率（DFS ）、总生存率（OS ）显著相关（P <0.05）。

高表达MCM2、MCM4、MCM10的胰腺癌患者总生存期较差（P <0.05）。

进一步探讨MCM2、MCM4、MCM10参与胰腺癌发生发展的机制，发现MCM2、MCM4、MCM10表达与胰腺癌的发生具有明显的相关性，与其具有相互作用的蛋白有MCM 5、MCM 6、RPA 3、RPA 1、POLA 2、ORC 2、ORC 3、DBF 4、CDC 6、GINS 2等。

MCM2、MCM4、MCM10主要富集在前复制复合体的活化、DNA 复制、DNA 合成、DNA 复制的启动、细胞核DNA 的复制、CDC 6相关的复制起点识别复合物、皮瓣转移、介导通路、体温自动调节通路等信号通路中。

MCM2、MCM4、MCM10在胰腺癌组织中呈现高表达，与患者预后显著相关。

MCM2、MCM4、MCM10表达具有明显相关性，其构成功能模块，通过前复制复合体的活化、DNA 复制、DNA 合成、DNA 复制的启动、细胞核DNA 的复制、CDC 6相关的复制起点识别复合物等生物过程参与胰腺癌细胞的发生与发展。

MCM5在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义班媛媛;李道胜;李晓梅;庞宇;叶红【摘要】目的探讨MCM5在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达及与其临床病理特征的关系.方法采用免疫组织化学SP法,检测78例原发性非小细胞肺癌组织、40例正常肺组织中MCM5的表达水平.结果非小细胞肺癌组MCM5阳性率高于正常肺组织组(P＝0.000).Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期非小细胞肺癌组织中MCM5阳性率比较,差异有统计学意义(P＝0.031);淋巴结转移者MCM5表达率与无淋巴结转移者比较也有统计学差异(P＝0.015).结论 MCM5可能参与了非小细胞肺癌的发生和发展过程;可能成为判断非小细胞肺癌发生发展和评价预后的有效参考指标之一,对于非小细胞肺癌的早期预测可能具有重要的临床意义.【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2011(026)004【总页数】3页(P362-364)【关键词】非小细胞肺癌;MCM5蛋白;免疫组织化学【作者】班媛媛;李道胜;李晓梅;庞宇;叶红【作者单位】271000,泰安市中心医院老年病一科;271000,泰安市中心医院病理科;271000,泰安市中心医院病理科;271000,泰安市中心医院病理科;271000,泰安市中心医院病理科【正文语种】中文【中图分类】R734.2肺癌为当前世界病死率最高的恶性肿瘤，其中非小细胞肺癌所占比例高达85%。

微小染色体维持蛋白(minichromosomemaintenance proteins，MCM)家族，是一组与DNA复制和细胞增生密切相关的蛋白家族，许多研究发现它的mRNA 水平在细胞周期中呈周期性变化，只在增殖细胞中表达，在静止细胞中不表达，而且每个细胞周期只表达一次。

它的检测水平的增高不但标志着恶性细胞的增殖，而且标志着非典型细胞的增生和潜在癌性细胞的增生。

因此，MCM可以作为肿瘤有效标志物的候选因子。

C-myc和p15基因蛋白在胃间质瘤中的表达及意义【摘要】目的探讨c myc和p15基因蛋白在胃间质瘤(gastric stromal tumor, GST)中的表达及其临床意义。

方法用免疫组化S P法结合临床病例特征检测48例GST组织中c myc和p15基因蛋白的表达。

结果c myc和p15基因蛋白表达与GST的良恶性以及患者的预后有关(P＜0.05)：c myc基因蛋白阳性表达率及其强度随着肿瘤恶性程度的增加而增加，即c myc基因蛋白的表达与肿瘤的恶性程度呈正相关(P＜0.05)；而p15基因蛋白的表达与肿瘤的恶性程度呈负相关(P＜0.05)。

结论c myc的过度表达和p15抑癌基因的缺失可能对GST的发生发展有协同作用，有利于判断GST的恶性程度和预测其预后。

【关键词】胃肿瘤；c-myc蛋白；p15蛋白；免疫组化胃间质瘤的发生、发展是由多基因协同作用的结果［1］。

有研究表明bcl-2、p53等多种基因蛋白在胃间质瘤中的表达与其恶性程度常正相关。

已经证实c-myc、p16、bcl2和p53基因在肿瘤的发生、发展中起着重要作用［2,3］，但是p15与c-myc基因蛋白在胃间质瘤中的表达情况研究很少。

本研究应用免疫组织化学方法检测观察c-myc和p15基因蛋白在16例良性胃间质瘤、17例交界性胃间质瘤和15例恶性胃间质瘤中的表达并探讨其意义，取得了较好效果，现分析如下。

1 资料与方法1.1 一般资料本研究的48例研究对象为2006年1月至2011年1月期间，在我院手术后经病理检查及免疫组化确诊为胃间质瘤的患者，其中男29例，女19例；年龄24～78岁，平均53.5岁；所有患者随访8~68个月，所有患者标本均为石蜡包埋的存档标本，病理诊断标准均靠常规和免疫组化参照王卓才等的胃间质瘤的诊断标准［4］，其中胃良性间质瘤有16例，胃交界性间质瘤有17例，胃恶性间质瘤有11例。

其中经胃镜检查的患者见胃黏膜隆起及黏膜溃疡并经活检证实的有18例；X线钡餐示胃蠕动功能障碍及胃充盈缺损的有16例；B超提示胃占位的有14例。

胃癌组织中MAT1及MCM2表达的临床病理意义王艳华;付华珍;傅爱荣【摘要】目的探讨胃癌组织中相关基因1(MAT1)以及微小染色体维持蛋白2(MCM2)的表达及其临床意义.方法选取95例胃癌患者,采用免疫组化法检测所有患者癌组织以及癌旁组织MAT1、MCM2的表达情况,分析胃癌组织表达中MAT1、MCM2与患者各临床指标的相关性.结果①胃癌组织表达MAT1、MCM2的阳性率显著高于癌旁组织,差异有统计学意义(P＜0.05).②MAT1表达与年龄、性别、体质指数、肿瘤分化程度无显著相关性(P＞0.05),与浸润深度、淋巴结转移、远处转移有显著相关性(P＜0.05).③MCM2表达与年龄、性别、体质指数、远处转移无显著相关性(P＞0.05),与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移有显著相关性(P＜0.05).结论胃癌组织中MAT1、MCM2表达与其临床指标密切相关,从而进一步影响患者的预后.【期刊名称】《实用癌症杂志》【年(卷),期】2016(031)011【总页数】3页(P1770-1772)【关键词】胃癌;转移相关基因1;微小染色体维持蛋白2【作者】王艳华;付华珍;傅爱荣【作者单位】330029 江西省肿瘤医院;336400 上高县中医院;330029 江西省肿瘤医院【正文语种】中文【中图分类】R735.2胃癌是目前临床上最常见的消化系统恶性肿瘤之一，其发生是1个多阶段、进行性的过程，但是该过程中的具体机制尚未完全明确，因此胃癌发生、发展的分子机制一直以来就是胃癌肿瘤学研究的重要方向[1-2]。

本研究即旨在探讨胃癌组织表达转移相关基因1(MAT1)以及微小染色体维持蛋白2(MCM2)的临床病理意义，现报告如下。

1.1 研究对象选取2012年9月至2015年11月江西省肿瘤医院收治的95例胃癌患者作为研究对象，所有患者均经病理组织学检查确诊，且既往未接受针对胃癌的任何治疗，其中男性63例，女性32例；年龄27～65岁，平均(59.3±14.2)岁；体质指数22.4～29.7 kg/m2，平均(24.6±4.3)kg/m2；分化程度：低分化21例、中分化29例、高分化45例；浸润深度：T1～T2 30例、T3～T4 65例；淋巴结转移：阴性56例、阳性39例；远处转移：阴性77例、阳性18例。

MCM5和Ki-67在前列腺癌组织中的表达及意义刘馨莲;殷舞【摘要】目的探讨微小染色体维持蛋白5(MCM5)和细胞增殖核抗原(Ki-67)在前列腺癌发生、发展中的作用.方法选择穿刺及手术切除的前列腺癌组织标本50份(肿瘤组)及良性前列腺增生组织15份(增生组),采用免疫组化技术检测两组MCM5、Ki-67的阳性表达情况[以标记指数(LI)表示],并分析两者间及与前列腺癌临床病理参数的相关性.结果肿瘤组MCM5、Ki-67的LI均明显高于增生组,P均＜0.05；MCM5、Ki-67阳性表达与前列腺癌病理分级、临床分期均有相关性；前列腺癌组织中MCM5与Ki-67阳性表达呈正相关.结论 MCM5蛋白是前列腺癌组织的一种新的可靠增殖标志物,其表达水平与前列腺癌的发生、发展密切相关.【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2012(052)019【总页数】2页(P66-67)【关键词】前列腺肿瘤,前列腺癌;微小染色体维持蛋白5;细胞增殖核抗原;免疫组织化学【作者】刘馨莲;殷舞【作者单位】成都医学院病理学教研室,成都610083;广西壮族自治区人民医院【正文语种】中文【中图分类】R737.25微小染色体维持蛋白(MCMs)是一组与DNA复制和细胞增生密切相关的蛋白家族［1］，其能与复制子结合，使DNA复制成为可能，是DNA复制启动和延伸的必需因子之一，属于一种与DNA复制有关的解链酶［2］。

细胞增殖核抗原(Ki-67)是目前公认的评价细胞增殖状态的指标，其在病理诊断中应用最为广泛。

2005年9月～2009年9月，我们观察了前列腺癌组织中MCM5和Ki-67的表达，旨在进一步探讨前列腺癌的发生机制。

1 材料与方法1.1 材料选择广西壮族自治区人民医院病理科前列腺癌组织标本50份(肿瘤组)，患者年龄52～86(73±8.4)岁，均经病理检查确诊，其中高分化12例、中分化15例、低分化23例;Jewett分期为A期8例、B期16例、C期17例、D期9例。

Mcm7、mcm5及cyclin E蛋白在直肠癌中的表达
及临床意义的开题报告
背景和目的：直肠癌作为常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率
不断增加。

因此，研究直肠癌的发病机制，探讨与癌症的相关蛋白在直
肠癌中的表达和临床相关性，有助于帮助发现直肠癌的诊断和治疗方法。

本研究旨在探讨Mcm7、Mcm5和Cyclin E在直肠癌中的表达和临床意义。

方法：通过电子检索数据库PubMed、CNKI、Embase、Web of Science等，检索关于直肠癌和Mcm7、Mcm5、Cyclin E的文献，综合筛选，对相关文献进行分析、综述并总结。

结果：现有研究显示Mcm7、Mcm5和Cyclin E在直肠癌中高度表达，并且其表达水平与直肠癌的不同临床特征有关。

Mcm7和Cyclin E的高表达水平与不良预后指标相关，如清扫状态差、淋巴结转移和生存时间短。

而Mcm5的高表达似乎与直肠癌的预后无关。

结论：Mcm7、Mcm5、Cyclin E蛋白在直肠癌中高度表达，这表明
这些蛋白有可能作为直肠癌的潜在治疗 targets。

高Mcm7和Cyclin E的
表达水平与不良预后的直肠癌患者的相关度增强，这提示Mcm7和Cyclin E能作为直肠癌临床治疗和预后评估的生物标志物。

这项研究结果提出了可能的方案，助力临床医生更好地识别和预测直肠癌患者的预后，为标
准化直肠癌治疗的临床实践提供了基础资料。

探讨MCM5、p16蛋白在肺腺癌组织中表达的改变及其在癌发生发展中的作用摘要：目的：检测微小染色体维持蛋白5（mcm5）、p16蛋白在肺腺癌组织中表达的改变及其在癌发生发展中的作用。

方法：采用免疫组织化学sp法检测60例肺腺癌、30例支肺脓肿等非癌病变旁正常肺组织中mcm5、p16蛋白的表达情况。

结果：60例肺腺癌组织中mcm5蛋白的阳性表达率为100%，与正常对照组的表达差异有高度显著性（p0.05）。

mcm5与p16蛋白的表达与肺腺癌的年龄、肿瘤大小、组织学类型及tnm分期无关（p>0.05）。

mcm5蛋白的阳性表达与p16的表达呈负相关（r=-0.4920，p70%为（+++）。

1.4 统计学方法。

应用spss10.0统计学软件对所得数据行x2检验、秩和检验和spearman等级相关分析。

2 结果2.1 mcm5、p16蛋白在肺组织中的表达情况。

mcm5蛋白在肺腺癌组织中阳性表达呈棕黄色且定位于细胞核，灶状或弥漫性分布；而正常肺组织中仅在各级支气管上皮偶见个别或小灶状细胞核阳性表达，但阳性数0.05）。

mcm5和p16蛋白的表达均与肺腺癌的性别、年龄、肿瘤大小、组织学类型、tnm分期无关（p>0.05）。

2.3 肺腺癌mcm5与p16表达的相互关系。

在p16（-）标本中mcm5（+）者共17例，p16（+）而mcm5（+）者43例。

经统计学处理，mcm5蛋白的阳性表达与p16的表达呈负相关（r=-0.4920，p3 讨论细胞周期调控异常是肿瘤发生的内在原因，在细胞周期中，g1/s的调控点是细胞内外信号经过传递、整合到细胞核，对细胞的增殖进行调控的关键点，它的异常与肿瘤的发生、发展关系密切[3]。

细胞增殖调控异常与肿瘤的发生关系密切，而肿瘤细胞增殖活性与肿瘤生物学行为更是密切相关，是用于反映肿瘤良恶性及恶性程度的重要指征。

mcm蛋白与细胞周期密切相关，是启动真核细胞dna 复制、调控细胞由g1期进入s期的关键蛋白，其本质是一种核蛋白复合物，目前发现mcm2～7等6种，它们是一组在序列上高度同源、功能上密切相关的蛋白，在静止/分化细胞中mcm蛋白不表达，而在增殖/肿瘤细胞中高表达，是近年来发现的一种较好地反映细胞增殖活性的新指标。

微小染色体维持蛋白5在甲状腺肿瘤中的表达与意义【摘要】目的：检测微小染色体维持蛋白5(Mcm5)在甲状腺肿瘤组织中的表达，探讨Mcm5在甲状腺癌诊断中的辅助作用。

方法：采用免疫组织化学法检测10例结节性甲状腺肿、15例甲状腺腺瘤(FA)和49例甲状腺癌组织中Mcm5蛋白的表达。

结果: Mcm5只在甲状腺未分化癌(UTC)、髓样癌(MTC)和乳头状癌(PTC)中表达，其标记指数(LI)分别为±，±，±，Mcm5在甲状腺肿、FA中未见表达。

Mcm5蛋白表达在UTC与FA 间，MTC与FA间，PTC与FA间差异均有显着性()；Mcm5蛋白表达与甲状腺癌恶性进展有关，与患者的淋巴结转移无关。

结论: Mcm5可反映UTC、MTC和PTC中细胞的增殖活性，是辅助诊断甲状腺未分化癌、髓样癌及乳头状癌的有效指标。

【关键词】甲状腺肿瘤微小染色体维持蛋白5 免疫组织化学Mcm5 protein expression in thyroidcarcinoma【ABSTRACT】 Objective: To investigate the expression of minichromosome maintenance protein 5 (Mcm5) in thyroid tumor tissues. Methods: The expressions of Mcm5 in 10 cases of thyroid nodular goiter, 15 cases of thyroid adenoma and 49 cases of thyroid carcinoma were detected by S-P immunohistochemical techniques. Results: Label Indexes of Mcm5 in undifferentiated carcinoma of throid (UTC), medullary carcinoma (MTC) and papillary carcinoma(PTC) were ±, ±，±, respectively. Mcm5 wa s negative in other tumor tissues. Mcm5 protein had significant difference between UTC and thyroid adenoma (FA), MTC and FA, and PTC and FA (). The expression of Mcm5 was related to the malignant progression of thyroid tumors but was not correlated with the lymph nodes metastasis．Conclusion: Mcm5 might beregarded as a parameter in diagnosis of UTC, MTC and PTC for evaluating the degree of proliferating activity. 【KEY WORDS】 Thyroid carcinoma·Minichromosome maintenance protein 5·Immunohistochemistry细胞的恶性增殖失调导致肿瘤的发生，目前对细胞生长调控机制的研究提出DNA复制起始调控在细胞生长调控中占有核心作用。

MCM5和Ki-67在非小细胞肺癌组织中的表达及意义刘振峰;刘建英;郑洪;邱丹【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2008(048)005【摘要】目的探讨微染色体维持蛋白5(MCM5)和Ki-67在非小细胞肺癌(NSCLC)发生中的作用及机制.方法采用免疫组化EnVision二步法检测MCM5和Ki-67在50份NSCLC组织中的表达,并分析其与NSCLC临床病理特征的关系.结果 NSCLC 组织MCM5、Ki-67表达水平均高于肺良性病变组织和不典型增生组织;MCM5表达明显高于Ki-67,两者表达呈正相关;MCM5的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、临床病理分期和核分裂指数显著相关(P均<0.005),与患者年龄及组织学类型无明显相关性.结论 MCM5在NSCLC的发生、发展中起重要作用,其作为NSCLC病理诊断的参考指标较Ki-67有更强的敏感性.【总页数】3页(P6-8)【作者】刘振峰;刘建英;郑洪;邱丹【作者单位】遵义医学院,贵州遵义,563003;遵义医学院第三附属医院;遵义医学院附属医院;遵义医学院第三附属医院【正文语种】中文【中图分类】R734.2【相关文献】1.VEGF、Ki-67和P53在非小细胞肺癌组织中的表达及意义 [J], 王艳;刘杰;白淑平;李乐静;冯军;王晓红;王梅;刘静蕾2.非小细胞肺癌组织中EGFR与Ki-67的表达及意义 [J], 邓荣辉;许健斌;全开明3.MCM5和Ki-67在前列腺癌组织中的表达及意义 [J], 刘馨莲;殷舞4.PCNA和Ki-67在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义 [J], 李英杰;于长海;李捷;刘颖;杨毅5.非小细胞肺癌组织中Skp2的表达及其与p27^(kip1)和Ki-67蛋白表达的关系[J], 曾艳;朱润庆;马华玲;夏和顺;夏东;黄娟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

MCM5和p16蛋白在肺腺癌组织中的表达及其临床意义【摘要】目的检测微小染色体维持蛋白5(MCM5)、p16蛋白在肺腺癌组织中表达的改变及其在癌发生发展中的作用。

方法采用免疫组织化学SP法检测60例肺腺癌、30例支肺脓肿等非癌病变旁正常肺组织中MCM5、p16蛋白的表达情况。

结果 60例肺腺癌组织中MCM5蛋白的阳性表达率为100%，与正常对照组的表达差异有高度显著性（P＜0.01）。

肺腺癌组织中p16蛋白阳性表达率为71.67%（43/60），显著低于100%阳性表达的正常对照组（P＜0.01）。

肺腺癌组中MCM5、p16蛋白的阳性表达与组织学分级有关（P＜0.01）；癌组中MCM5蛋白的阳性表达与淋巴结转移有关（P＜0.01），而p16蛋白的阳性表达与淋巴结转移无关（P＞0.05）。

MCM5与p16蛋白的表达与肺腺癌的年龄、肿瘤大小、组织学类型及TNM分期无关（P＞0.05）。

MCM5蛋白的阳性表达与p16的表达呈负相关（r=-0.4920，P<0.01）。

结论 MCM5蛋白的高表达可能涉及了人肺腺癌的发生、发展过程，MCM5蛋白的高表达与癌细胞的增殖、侵袭和转移有关，MCM5的检测可作为评价肺腺癌癌细胞的增殖状态、预测肺腺癌临床预后、指导临床治疗的重要生物学指标。

p16基因改变在肺腺癌的发生中起重要作用，p16蛋白是肺腺癌早期诊断的有用指标。

【关键词】肺肿瘤 MCM5 p16 免疫组织化学Abstract: Objective To outline the significance of minichromosome maintenance proteins 5 (MCM5) and p16 protein expression and to evaluate their correlations with carcinogenesis and tumor progression in lung adenocarcinoma. Methods The SP immunohistochemical technique was used to detect the expression of MCM5 and p16 in 60 cases of lung adenocarcinoma， and 30 cases of normal lung tissues of non-cancerous lung disease (bronchial pulmonary abscess， etc). Results The expression of positive MCM5 in 60 cases of lung adenocarcinoma was100.00%， it was significantly higher than that in normal lung tissues (P<0.01). The expression of positive p16 in lung adenocarcinoma was71.67% (43/60)， this was significantly lower than that in normal lung tissues (100.00%) (P<0.01). The expressions of positive MCM5 and p16 protein were associated with histological grading in lung adenocarcinoma (P<0.01)， MCM5 protein positive expression was associated with axillary lymph node metastasis in lung adenocarcinoma (P<0.01) ， and p16 protein was not (P＞0.05) . MCM5 and p16 protein positive expressions had no correlation with age， tumor size， histological classification and TNM stage (P＞0.05). MCM5 was negatively correlated with the expression ofp16 (r=-0.4920， P<0.01). Conclusions High expression of MCM5 proteinmay play an important role in the pathogenesis and development of lung adenocarcinoma. The high expression of MCM5 was associated with cell proliferation， invasiveness and metastasis of lung adenocarcinoma. The detection of MCM5 protein may be a useful predictor of cellproliferation， biological behavior and prognosis of lung adenocarcinoma. p16 gene mutation plays an important role in pathogenesisof lung adenocarcinoma， and p16 protein may be an early event.Key words: lung neoplasms; MCM5; p16; immunohistochemistry肺癌是人类常见的恶性肿瘤之一，肺癌的发生、发展是一个多因素共同参与的多阶段复杂生物学过程，与细胞增殖和凋亡之间的动态失衡相关。

MCM家族在DNA复制及肿瘤发生发展中的研究进展
邓志霖;裴煜;黄四洲
【期刊名称】《成都医学院学报》
【年(卷),期】2024(19)3
【摘要】微小染色体维持蛋白(minichromosome maintenance protein, MCM)是DNA复制起始和基因组稳定性维持的重要因素,在DNA复制过程中,MCM的调控作用对维持细胞正常的生理活动至关重要,特别是在DNA复制的起始和延伸阶段。

MCM高度保守,从古老低等生物到真核生物都广泛存在。

在20世纪80年代早期,MCM从出芽酵母中分离出来,用于DNA复制起始缺陷突变体的遗传筛选。

【总页数】4页(P534-537)
【作者】邓志霖;裴煜;黄四洲
【作者单位】泸州市人民医院超声科;成都医学院基础医学院;成都医学院发育与再生四川省重点实验室;成都医学院人体解剖与组织胚胎学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R73
【相关文献】
1.人DNA甲基转移酶家族与肿瘤发生发展关系的研究进展
2.驱动蛋白超家族20A 在恶性肿瘤发生和发展中的作用研究进展
3.肿瘤坏死因子α诱导蛋白8家族在肿瘤发生发展中作用的研究进展
4.WASP家族在肿瘤发生发展中作用的研究进展
5.DNA复制调控与肿瘤发生发展的研究进展
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重组人微小染色体维持蛋白MCM5的原核表达和纯化【关键词】MCM5蛋白；原核表达；纯化0 引言MCM5蛋白是一种DNA复制调控蛋白，属于MCM蛋白质家族［1］。

MCM5蛋白的表达作为一种增殖细胞的标记物受到关注，抗MCM5蛋白的抗体可以用来检测肿瘤细胞［2－3］。

MCM5蛋白在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达，通过洗涤、层析可以得到纯度较高的MCM5包涵体蛋白［4］。

本研究的成功为进一步进行相应抗体的制备奠定了基础。

1 材料与方法1.1 材料大肠杆菌pBAD/Thio TOPO菌株和pBAD载体均购自Invitrogen公司。

L Arabinose为Sigma公司产品，NI NTA HisBind Superflow亲和层析柱为Novagen公司产品。

其余为国产分析纯试剂。

1.2 方法1.2.1 人MCM5蛋白的cDNA重组质粒pBAD/Thio TOPO MCM5的克隆与测序（略）1.2.2 细胞转化与原核表达将经DNA测序验证的pBAD/Thio TOPO MCM5转化感受态表达菌pBAD/Thio TOPO，当A600为0.8～1.0h，加L Arabinose(终浓度1mM)诱导表达，4h后收获细菌，称湿重，于-20℃冻存备用。

1.2.3 人MCM5蛋白表达菌的提取将1000 ml培养菌离心后(约6g)加50 ml缓冲液A(50mM Tris HCL，pH 8.5，2mM EDTA,100mM Nacl,0.5% Triton X100)，同时以1∶1 000加入蛋白酶抑制剂(终浓度0.1mM)于冰浴中超声破碎，DNaseⅠ水解DNA。

以12 000 r/min，4℃离心30 min,弃上清。

沉淀用含4M脲的TE洗液（10mM Tris Hcl pH 8.0,1mM EDTA ,4M脲）洗涤。

4℃离心弃上清。

用变性液（0.1M Tris Hcl pH 8.0，6M盐酸胍，2mM EDTA,0.5% βMe）溶解包涵体，室温放置2h。

微小染色体维持蛋白5在甲状腺肿瘤中的表达与意义引言甲状腺肿瘤是一种常见的内分泌系统肿瘤，其中最常见的是甲状腺乳头状癌。

微小染色体维持蛋白5（mini-chromosome maintenance complex component 5，MCM5）是一个与DNA复制有关的蛋白质，其在细胞分裂中起着重要的作用。

最近的研究表明，MCM5的异常表达与多种肿瘤的发生和发展密切相关，包括甲状腺肿瘤。

本文将探讨MCM5在甲状腺肿瘤中的表达和意义。

MCM5的功能和表达调控MCM5是MCM蛋白复合体的一个成员，MCM蛋白复合体是DNA复制的重要组成部分。

MCM5可以结合到DNA双链上，在DNA复制时帮助解旋DNA，从而使其他的蛋白质能够顺利参与到DNA复制过程中。

除了在DNA复制中发挥作用外，MCM5还可以调控基因表达、细胞周期和DNA损伤修复等过程。

MCM5的表达调控受到多种因素的影响。

研究发现，miRNA-29、miR-155等miRNA可以直接调控MCM5的表达。

此外，转录因子C/EBPβ、E2F1、c-Myc等也可以通过调控MCM5的转录来影响其表达水平。

MCM5在甲状腺肿瘤中的表达研究表明，MCM5在甲状腺肿瘤中的表达水平显著上调。

在一项研究中，研究者分别检测了滤泡性甲状腺瘤、乳头状癌和间变性甲状腺瘤中MCM5的表达水平，发现乳头状癌和间变性甲状腺瘤中MCM5的表达水平均高于滤泡性甲状腺瘤，且MCM5的表达水平与甲状腺癌的分化程度和淋巴结转移有关。

另一项研究也得出了类似的结论，即MCM5在甲状腺癌中高表达，并且高表达的MCM5与患者预后不良相关。

此外，还有研究表明，MCM5可以作为甲状腺瘤的诊断和预后评估的潜在标记物。

MCM5在甲状腺肿瘤中的意义MCM5在甲状腺肿瘤中的高表达与肿瘤的发生、发展密切相关。

一方面，MCM5参与到DNA复制和细胞周期中，其高表达可能促进了癌细胞的增殖和生存，从而加速肿瘤的发展。