姓名：薛桂凤学号：132015200300 实验报告（二） 一、实验目的： 1.掌握大鼠的抓取和固定。 2.掌握大鼠的编号与标记方法。 3.掌握大鼠的常用实验方法。 4.掌握大鼠的常用麻醉方法。 5.掌握大鼠的安死术。 6.掌握大鼠的釆血方法。 7.了解小鼠的采尿、粪的方法。 8.了解小鼠各种脏器标本的采集方法。 二、实验器材：SD大鼠、电子称、手套、实验托盘、固定板、烧杯、注射器（3支）、 剪刀、镊子、灌胃针头、毛细管、酒精棉球、5%水合氯醛、生理盐水 三、实验内容 1.抓取：两种方法。第一种方法：右手食指和中指夹住大鼠颈部，使其头部固定，右 手拇指及无名指分别在大鼠前爪下抓住大鼠身体。第二种方法类似单手抓取小鼠的 方法，用右手拇指及其余四指并捏住大鼠颈部背部皮肤。 2.称重：小鼠放在烧杯中称重（去除烧杯重量），记录小鼠体重210g。 3.鉴别大鼠性别：观察生殖器雄性大鼠的阴囊非常明显。 4.编号：染色法：逆毛方向涂上有色斑点，顺序由左到右，由上向下，用两种颜色 可标记99只动物。 5.给药： （1）皮下注射小于1ml/100g（俯卧固定，左手拇指和食指捏住皮肤提起，右手持针沿纵轴方向刺入皮肤，阻力消失后回抽无血注入药物，拔针）（2）皮内注射小于0.1ml （麻醉后进行，先备皮）（俯卧固定，与皮肤平行刺入捏起的皮肤，阻力大，注射药物局部有皮丘后停留片刻后拔针）（3）腹腔注射0.01-0.02ml/g（仰面固定，在腹正中线两侧腹股沟平行的位置30-45°进针，挑起皮肤和肌肉，回抽无血，注药） （4）灌胃1-2ml/100g （大鼠固定身体呈一条直线，灌胃针头顺着上颚插入咽部，先少量注药证明未入气管后继续给药） 6.釆血：尾尖釆血法、眼眶静脉丛釆血法、心脏釆血法(麻醉后) 。 7.大鼠的采尿、粪的方法 （1）少量采集：在抓取固定时受到刺激排出少量尿液和粪便 （2）长期大量采集：使用代谢笼 8.麻醉：根据大鼠体重计算麻醉药物用量5%水合氯醛按300mg/kg，给药，计算药 量为 1.26ml，ip 麻醉小鼠，观察小鼠麻醉期。 (1)全身麻醉的第一期（随意兴奋期）：出现运动和运动失调；35秒 (2)全身麻醉的第二期（不随意兴奋期）：是由意识完全丧失至深而规则的自动 呼吸开始时止;2分30秒 (3)全身麻醉的第三期：角膜反射由迟钝渐趋消失，翻正反射消失，疼痛反射 消失； 9.安死术：颈椎脱臼法：用左手按住动物的头部于实验台上，右手抓住尾根部，快速、 不间断地向后、略向上使劲拉，以致脊椎脱臼，脊髓与脑干断离而死亡。 10.解剖：观察大鼠的脏器解剖结构
实验动物麻醉方法 麻醉（anesthesia）的基本任务是消除实验过程屮所至的疼痛和不适感觉，保障实验动物的安全，使动物在实验屮服从操作，确保实验顺利进行。 一、常用的麻醉药 （一）常用局部麻醉剂：普鲁卡因，此药毒性小，见效快，常用于局部浸润麻醉，用时配成0.5 % 1%；利多卡因，此药见效快，组织穿透性好，常用 1 %?2%溶液作为大动物神经干阻滞麻醉， 也可用0. 25 %-0. 5 %溶液作局部浸润麻醉。 （二）常用全身麻醉剂： 1. 乙醯乙瞇吸入法是最常用的麻醉方法，各种动物都可应用。其麻醉量和致死量相差大，所以其安全度大。但由于乙瞇局部刺激作用大，可刺激上呼吸道粘液分泌增加；通过神经反射还可扰乱呼吸、血压和心脏的活动，并且容易引起窒息，在麻醉过程屮要注意。但总起来说乙醛麻醉的优点 多，如麻醉深度易于掌握，比较安全，而且麻醉后恢复比较快。其缺点是需要专人负责管理麻醉，在麻醉初期岀现强烈的兴奋现象，对呼吸道又有较强的刺激作用，因此，需在麻醉前给予一定量的吗啡和阿托品（基础麻醉），通常在麻醉前20- 30分钟，皮下注射盐酸或硫酸吗啡（每公斤体重5-10mg）及阿托品（每公斤体重0. lmg）。盐酸吗啡可降低屮枢神经系统兴奋性，提高痛阈，还可节省乙醯用量及避免乙醸麻醉过程中的兴奋期。阿托品可对抗乙醸刺激呼吸道分泌粘液的作用，可避免麻醉过程中发生呼吸道堵塞，或手术后发生吸入性肺炎。 进行手术或使用过程中，需要继续给予吸入乙醯，以维持麻醉状态。慢性实验预备手术的过程屮， 仍用麻醉口罩给药，而在一般急性使用，麻醉后可以先进行气管切开术，通过气管套管连接麻醉瓶继续给药。在继续给药过程屮，要时常检查角膜反射和观察瞳孔大小（如发现角膜反射消失，瞳孔 突然放大，应立即停止麻醉。万一呼吸停止，必须立即施行人工呼吸。待恢复自动呼吸后再进行操作。 2. 苯巴比妥钠此药作用持久，应用方便，在普通麻醉用量情况下对于动物呼吸、血压和其它功能 无多大影响。通常在实验前半至一小时用药。使用剂量及方法为：狗腹腔注射80-100mg/kg体重，静脉注射70-120mg/kg体重（一般每公斤体重给70-80mg即可麻醉，但有的动物要100-120mg才能麻醉，具体用量可根据各个动物的敏感性而定）。兔腹腔注射150-200mg/kg体重。 3. 戊巴比妥钠此药麻醉时间不很长，一次给药的有效时间可延续3-5小时,所以十分适合一般使 用要求。给药后对动物循环和呼吸系统无显著抑制作用，药品价格也很便宜。用时配成1-3% 生理盐水溶液，必要时可加温溶解，配好的药液在常温下放置1~2月不失药效。静脉或腹腔注 射后很快就进入麻醉期，使用剂量及方法为：狗、猫、兔静脉注射30-35mg/kg体重，腹腔注射 40 ^45mg/kg 体重。 4. 硫喷妥钠为黄色粉末，有硫臭，易吸水。其水溶液不稳定，故必须现用现配，常用浓度为 5%o此药作静脉注射时，由于药液迅速进入脑组织，故诱导快，动物很快被麻醉。但苏醒也很快， 一次给药的麻醉时效仅维持半至一小时。在时间较长的实验过程中，可重复注射，以维持一定的麻醉深度。
姓名：薛桂凤学号： 实验报告（二） 一、实验目的： 1.掌握大鼠的抓取和固定。 2.掌握大鼠的编号与标记方法。 3.掌握大鼠的常用实验方法。 4.掌握大鼠的常用麻醉方法。 5.掌握大鼠的安死术。 6.掌握大鼠的釆血方法。 7.了解小鼠的采尿、粪的方法。 8.了解小鼠各种脏器标本的采集方法。 二、实验器材：SD大鼠、电子称、手套、实验托盘、固定板、烧杯、注射器（3支）、 剪刀、镊子、灌胃针头、毛细管、酒精棉球、5%水合氯醛、生理盐水 三、实验内容 1.抓取：两种方法。第一种方法：右手食指和中指夹住大鼠颈部，使其头部固定，右 手拇指及无名指分别在大鼠前爪下抓住大鼠身体。第二种方法类似单手抓取小鼠的 方法，用右手拇指及其余四指并捏住大鼠颈部背部皮肤。 2.称重：小鼠放在烧杯中称重（去除烧杯重量），记录小鼠体重210g。 3.鉴别大鼠性别：观察生殖器雄性大鼠的阴囊非常明显。 4.编号：染色法：逆毛方向涂上有色斑点，顺序由左到右，由上向下，用两种颜色 可标记99只动物。 5.给药： （1）皮下注射小于1ml/100g（俯卧固定，左手拇指和食指捏住皮肤提起，右手持针沿纵轴方向刺入皮肤，阻力消失后回抽无血注入药物，拔针）（2）皮内注射小于（麻醉后进行，先备皮）（俯卧固定，与皮肤平行刺入捏起的皮肤，阻力大，注射药物局部有皮丘后停留片刻后拔针） （3）腹腔注射（仰面固定，在腹正中线两侧腹股沟平行的位置30-45°进针，挑起皮肤和肌肉，回抽无血，注药） （4）灌胃1-2ml/100g （大鼠固定身体呈一条直线，灌胃针头顺着上颚插入咽部，先少量注药证明未入气管后继续给药） 6.釆血：尾尖釆血法、眼眶静脉丛釆血法、心脏釆血法(麻醉后) 。 7.大鼠的采尿、粪的方法 （1）少量采集：在抓取固定时受到刺激排出少量尿液和粪便 （2）长期大量采集：使用代谢笼 8.麻醉：根据大鼠体重计算麻醉药物用量5%水合氯醛按300mg/kg，给药，计算药 量为，ip 麻醉小鼠，观察小鼠麻醉期。 (1)全身麻醉的第一期（随意兴奋期）：出现运动和运动失调；35秒 (2)全身麻醉的第二期（不随意兴奋期）：是由意识完全丧失至深而规则的自动 呼吸开始时止;2分30秒 (3)全身麻醉的第三期：角膜反射由迟钝渐趋消失，翻正反射消失，疼痛反射 消失； 9.安死术：颈椎脱臼法：用左手按住动物的头部于实验台上，右手抓住尾根部，快速、 不间断地向后、略向上使劲拉，以致脊椎脱臼，脊髓与脑干断离而死亡。 10.解剖：观察大鼠的脏器解剖结构
家兔基础实验操作及注意事项总结
基本技能操作经验总结 （一）家兔的给药、基本手术及相关仪器的初步使用 1.家兔的捉拿 【实验方法】先轻轻打开笼门，勿使其受惊，随后手伸入笼内，从头前阻拦其跑动，一只手迅速抓住兔的颈背部的皮毛，慢慢提起家兔，然后用另一只手轻轻托住臀部，尽量使兔处在舒适、放松的状态。 【注意事项】避免抓住耳朵提拿家兔，这样不但会损伤家兔的耳朵，而且易引起家兔的紧张并激起挣扎和反抗。抓取动物时手法不当，动作过激导致家兔惊吓，产生强烈挣扎而长时间处于激动状态，大脑皮层细胞兴奋阈值增加，肾上腺素的释放，大脑中枢电位频率增高，大脑皮层运动区过度兴奋，导致麻醉效果不佳。 2.家兔的称重与放置 【实验方法】兔笼放置在电子秤上，去皮。将兔子脖子卡住兔笼头端的凹槽，盖上兔笼盖，使兔子呈趴伏状，记录数据。压住兔笼盖和后座，将兔笼转移到操作台准备实验。 【注意事项】兔笼重量提前去皮；尽量避免头尾不对应；时刻注意压住兔笼盖，避免转移途中兔子挣脱。 3.耳缘静脉麻醉 【实验方法】穿刺前准备工作：穿刺前应拔除待穿刺血管部位的兔毛，轻柔或以手指轻弹待穿刺的血管使其充血扩张，或用酒精
棉球涂擦待穿刺的血管使血管扩张。 穿刺手法：左手食指和中指夹住静脉的近端，拇指绷紧静脉的远端，无名指及小指垫在下面，右手持头皮针尽量从静脉的远端刺入。若回抽注射器有暗红色血液流出或注射时若无阻力、无隆起现象，说明针头在血管内。移动拇指于针头上以固定针头，放开食指和中指，将药液缓慢注入，然后拔出针头，用手压迫针眼片刻。 注：本实验所用麻醉药——乌拉坦用药剂量为1000 mg/Kg。【注意事项】1. 进针部位宜选择在耳缘静脉远心端的血管段，若穿刺失败，可向近心端前移一段再进行穿刺； 2.可利用酒精棉球擦拭使耳缘静脉血管扩张，便于操作； 3. 静脉注射必须缓慢（大概每分钟推送5ml ），同时观察家兔肌肉紧张、角膜反射和对皮肤夹捏的反应，当这些活动明显减弱或消失时，应立即停止注射。在注射麻醉药物时，可先用麻醉药物总量的三分之二，密切观察动物生命体征的变化，若已达到预计麻醉效果剩余药液可暂不注射，以避免麻醉过深抑制呼吸中枢导致动物死亡； 4.实验动物的固定 【实验方法】将动物麻醉后，仰卧位固定于手术台上，颈部伸直，口腔与气管成一直线，保持气管畅通。用粗麻绳打类蝴蝶结固定家兔四肢，用棉麻线套住家兔上切牙固定在兔台头端，使家兔四肢和头部伸展并固定。
实验动物麻醉方法 麻醉(anesthesia)的基本任务是消除实验过程中所至的疼痛和不适感觉，保障实验动物的安全，使动物在实验中服从操作，确保实验顺利进行。 一、常用的麻醉药 (一)常用局部麻醉剂：普鲁卡因，此药毒性小，见效快，常用于局部浸润麻醉，用时配成0.5％～1％；利多卡因，此药见效快，组织穿透性好，常用1％～2％溶液作为大动物神经干阻滞麻醉，也可用0.25％～0.5％溶液作局部浸润麻醉。 (二)常用全身麻醉剂： 1. 乙醚乙醚吸入法是最常用的麻醉方法,各种动物都可应用。其麻醉量和致死量相差大,所以其安全度大。但由于乙醚局部刺激作用大,可刺激上呼吸道粘液分泌增加；通过神经反射还可扰乱呼吸、血压和心脏的活动，并且容易引起窒息，在麻醉过程中要注意。但总起来说乙醚麻醉的优点多，如麻醉深度易于掌握，比较安全，而且麻醉后恢复比较快。其缺点是需要专人负责管理麻醉，在麻醉初期出现强烈的兴奋现象，对呼吸道又有较强的刺激作用，因此，需在麻醉前给予一定量的吗啡和阿托品(基础麻醉)，通常在麻醉前20－30分钟，皮下注射盐酸或硫酸吗啡(每公斤体重5～10mg)及阿托品(每公斤体重0.1mg)。盐酸吗啡可降低中枢神经系统兴奋性，提高痛阈，还可节省乙醚用量及避免乙醚麻醉过程中的兴奋期。阿托品可对抗乙醚刺激呼吸道分泌粘液的作用，可避免麻醉过程中发生呼吸道堵塞，或手术后发生吸入性肺炎。 进行手术或使用过程中，需要继续给予吸入乙醚，以维持麻醉状态。慢性实验预备手术的过程中，仍用麻醉口罩给药，而在一般急性使用,麻醉后可以先进行气管切开术,通过气管套管连接麻醉瓶继续给药。在继续给药过程中，要时常检查角膜反射和观察瞳孔大小(如发现角膜反射消失，瞳孔突然放大，应立即停止麻醉。万一呼吸停止，必须立即施行人工呼吸。待恢复自动呼吸后再进行操作。 2. 苯巴比妥钠此药作用持久,应用方便，在普通麻醉用量情况下对于动物呼吸、血压和其它功能无多大影响。通常在实验前半至一小时用药。使用剂量及方法为：狗腹腔注射80～100mg/kg体重，静脉注射70～120mg/kg体重( 一般每公斤体重给70～80mg即可麻醉，但有的动物要100～120mg 才能麻醉,具体用量可根据各个动物的敏感性而定)。兔腹腔注射150～200mg/kg体重。 3. 戊巴比妥钠此药麻醉时间不很长,一次给药的有效时间可延续3-5小时,所以十分适合一般使用要求。给药后对动物循环和呼吸系统无显著抑制作用，药品价格也很便宜。用时配成1～３％生理盐水溶液，必要时可加温溶解，配好的药液在常温下放臵1～2月不失药效。静脉或腹腔注射后很快就进入麻醉期，使用剂量及方法为：狗、猫、兔静脉注射30～35mg/kg体重,腹腔注射40～45mg/kg体重。 4. 硫喷妥钠为黄色粉末，有硫臭，易吸水。其水溶液不稳定，故必须现用现配,常用浓度为1～5％。此药作静脉注射时，由于药液迅速进入脑组织，故诱导快，动物很快被麻醉。但苏醒也很快，一次给药的麻醉时效仅维持半至一小时。在时间较长的实验过程中，可重复注射，以维持一定的
大鼠水合氯醛麻醉心得 本人所做的模型需要使用水合氯醛麻醉，所使用的是医院里配制的用于儿科灌肠的10%水合氯醛。在先前的实验中，剂量为0.3mL/100g（这个剂量来自于师姐使用的经验），麻醉完全清醒时间约4h（当初没有记录开始清醒的时间） 现在由于实验方案有所改动，希望麻醉的时间尽量缩短（1~1.5h），而麻醉深度保持不变，这样在侧脑室注射操作后，大鼠能够尽快的恢复清醒状态，便于后续的实验操作。因此，对水合氯醛麻醉的剂量与药效进行了摸索，我把它贴出来，跟大家分享一下。 动物：雄性SD大鼠4只，平均体重356g（这里就不算标准差了），水合氯醛浓度分为4%、7%、10%三个水平。 结果：如下表格所示： 水合氯醛浓度 4% 7% 7% 10% 10% 水合氯醛剂量 0.5mL/100g 0.3mL/100g 0.2mL/100g 0.2 mL/100g 0.3 mL/100g 诱导时间约7min 约4min 约7min 约4min 约4min 麻醉深度浅麻醉水平中度麻醉浅麻醉深度麻醉深度麻醉 麻醉开始清醒时间约90min 约100min 未观察约68min 114min 结论： 1、麻醉的诱导，似乎从4%到（7%、10%），随着浓度的增加，麻醉诱导的时间缩短。但在7%及10%这两个浓度，麻醉时间基本一致。 2、麻醉时间的长度与水合氯醛的总剂量可能成正相关。 3、麻醉的深度跟与水合氯醛的浓度可能成正相关 在之前甲醛《做动物实验前必须给予阿托品吗？》的这篇中，有战友提出“把水合氯醛配成4%的，而不是10%的，这样就拉开了麻醉剂量和致死剂量之间的差距，可安全了”，
我的经验是这样： （1）确实，4%的水合氯醛在实验中比较安全，我们一般用于追加麻醉的时候，4%水合氯醛每次1mL，追加一到两次，安全度颇高。 （2）而水合氯醛的致死剂量，我不是很了解，希望知道的战友能够告知一声。对于10%的水合氯醛，我们用到0.3mL/100g也很安全，应该距离致死剂量还有一段距离，麻醉深度与维持时间也很确切。 （3）据我认识的一位在伦敦大学获得博士学位的解剖学的教授介绍，英国人喜欢用7%的水合氯醛0.5mL/100g，我看过他的博士论文也是用的是这个剂量。 由于样本量太小以及存在动物本身的个体差异，以上结果与结论科学性以及说服力有很大的欠缺。但是，当成实验的心得体会交流，应该也有一定的参考价值。欢迎大家分享关于水合氯醛使用的心得。 我们用5%的0.7ml/100g,感觉还不错。大概在腹腔注射5min之后就进入麻醉状态，麻醉状态可以维持3h左右。 lixiang0526站友所用的方法，使用5%的浓度的话，按照我用4%和7%的经验，麻醉时间是可以维持，但是，恐怕麻醉深度不够。 楼主的剂量偏小，一般水合氯醛的剂量是300~350mg/kg，楼主仅200mg/kg左右，最低140mg/kg。能否达到麻醉效果？值得考虑，当然水合氯醛的质量也有关系，楼主用的水合氯醛的质量、纯度可能很好；也可能是i.v，效果当然好。我们用5%，0.7ml；或3%，1～1.2ml/100g，效果很好，个人推荐3%，1ml/100g，浓度低，相对安全一些。 关于水合氯醛的浓度，3%，4%，5%，7%, 10%都有人用，如果总剂量相同的话，麻醉维持的时间是差不多的，差别就在于麻醉的深度的诱导和维持，我这两天做了3只大鼠水合氯醛麻醉后侧脑室注射，用的是腹腔注射的方法，并非i.v，使用10%，0.3ml/100g （这个剂量应该跟cma1954站友用的3% ，1ml/100g的总剂量相当）才可以保持麻醉的深度，侧脑室注射才可以顺利完成，但在切开皮肤的时候还是有明显的反应，我不知道怎么解释这个现象，真的是总剂量不够？不见得，因为跟cma1954站友推荐的“3%，
大鼠的麻醉 集团企业公司编码：（LL3698-KKI1269-TM2483-LUI12689-ITT289-