反相高效液相色谱法测定酸枣仁颗粒中酸枣仁皂苷A与酸枣仁皂苷B的含量

高效液相色谱法蒸发光散射检测器测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A及B的含量摘要】目的：探究高效液相色谱法蒸发光散射检测器测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A及B的含量。

方法：采用高效液相色谱法（HPLC），并用蒸发光散射检测器（ELSD），以Allspere ODS-2为色谱柱，将甲醇-水-冰醋酸作为流动相，对酸枣仁中的酸枣仁皂苷A和酸枣仁皂苷B含量予以测定。

结果：通过对6个批次的商品药材进行测定分析，发现酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷回收率均较高。

结论：将高效液相色谱法蒸发光散射检测器用于测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A及B的含量，不仅方法简便，而且重现性较好，便于对酸枣仁药材质量予以有效控制。

【关键词】高效液相色谱法蒸发光散射检测器；测定；酸枣仁；酸枣仁皂苷A及B含量【中图分类号】R284 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）08-0311-02酸枣仁是一种鼠李科植物酸枣干燥成熟种子，有养心安血及镇静安神的作用，可以有效治疗失眠，是临床上常见的一类镇静催眠药物[1]。

本文主要研究高效液相色谱法蒸发光散射检测器测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A及B的含量，并总结如下。

1.试剂与仪器采用法国的SEDEX55型蒸发光散射检测及日本LC-10AD液相色谱仪，由杭州英谱科技开发有限公司的HS色谱数据工作站，对各地区的酸枣仁药材样品予以检测。

酸枣仁皂苷A、B对照品主要由中国药品生物制品检定所提供，其纯度≥98%。

试验用水均为高纯净水；甲醇主要为色谱纯；而其他试剂均由黑龙江省药学研究所提供。

2.方法2.1 色谱测定条件色谱柱主要为Allspere ODS-2柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相为甲醇-水-冰醋酸，其比例为70:30:1，流速控制在1mL·min-1左右；填充剂使用的是十八烷基硅烷键合硅胶；预柱为Pellicular C18柱（7.5mm×4.6mm），其柱温在20℃左右；氮气压力为0.21MPa，而ELSD的气化室温度为75℃。

食品研究与开发F ood Research And DevelopmentDOI ：10.3969/j.issn.1005-6521.2019.09.006基金项目：云南省科学技术厅-云南中医学院应用基础研究联合专项（2015FB205-001）作者简介：黄之镨（1983—），男（汉），实验师，硕士，研究方向：中药资源开发与应用研究。

*通信作者：陈海丰（1978—），男，副教授，博士，研究方向：中药活性筛选及作用机制。

酸枣仁萌发期酸枣仁皂苷A 、B 及斯皮诺素的含量变化黄之镨1，何志明1，张雯洁2，马伟光1，袁玉鲜1，陈海丰1，*（1.云南中医药大学中药学院，云南昆明650500；2.云南省食品药品监督检验研究院，云南昆明650000）摘要：采用高效液相色谱法，探讨萌发对酸枣仁皂苷A 、B 及斯皮诺素的含量影响。

结果显示：酸枣仁皂苷A 随着萌发时间的延长含量明显降低；酸枣仁皂苷B 萌发时间延长含量明显升高，并在萌发第7天达到峰值，然后又稍有减低；斯皮诺素含量则先降低随后升高到原药材水平（萌发第6天），然后随萌发时间延长而降低。

表明酸枣仁萌发时酸枣仁皂苷A 、B 及斯皮诺素的含量变化与萌发时间具有一定的联系，为酸枣仁芽品的质量控制提供了一定的试验依据。

关键词：酸枣仁；萌发；酸枣仁皂苷A ；酸枣仁皂苷B ；斯皮诺素；含量测定Contents Determination for Jujuboside A ，B and Spinosin from Seed ofZiziphus jujuba var.Spinosa during Sprout PeriodHUANG Zhi-pu 1，HE Zhi-ming 1，ZHANG Wen-jie 2，MA Wei-guang 1，YUAN Yu-xian 1，CHEN Hai-feng 1，*（1.College of Traditional Chinese Medicine ，Yunnan University of Chinese Medicine ，Kunming 650500，Yunnan ，China ；2.Yunnan Institute for Food and Drug Control ，Kunming 650000，Yunnan ，China ）Abstract ：The effect on the three contents of jujuboside A ，B and spinosin in seeds of Ziziphus jujuba var.Spinosa were detected during its sprout period by high performance liquid chromatography （HPLC ）.The content of jujuboside A decreased significantly with the prolongation of sprout time ，jujuboside B increased significantly and reached its peak on the 7th day of sprout ，then decreased slightly ，spinosin decreased at first ，thenincreased to the level of the original medicinal material （6th day of sprout ），and then decreased.It showed thatsprout could result in different levels of contents changed for jujuboside A ，B and spinosin and had a certain re -Journal of the Korean Society of I nternational Agriculture,2014,26(4):513-518[18]Tham M W,Kang C L.Influence of different extraction temperaturesand methanol solvent percentages on the total phenols and total flavonoids from the heartwood and bark of Acacia auriculiformis [J].European Journal of Wood &Wood Products,2014,72(1):67-72[19]Lou C W,Lin M C,Lu C T,et al.Manufacturing Technique andBacteriostatic Property Evaluation of Polyvinyl Alcohol/Sodium Al -ginate/Angelicae Dahuricae Radix Fibrous Membrane [J].Applied Mechanics &Materials,2013,457/458:371-374[20]Toma M,Vinatoru M,Paniwnyk L,et al.Investigation of the effectsof ultrasound on vegetal tissues during solvent extraction[J].Ultra -sonics Sonochemistry,2001,8(2):137-142[21]杨丹,郝再彬,胡淑田,等.光照对芦丁稳定性及抑菌活性的影响[J].应用与环境生物学报,2011(2):223-226[22]Puttarak P,Charoonratana T,Panichayupakaranant P.Antimicrobialactivity and Stableility of rhinacanthins-rich Rhinacanthus nasutus extract[J].Phytomedicine,2010,17(5):323-327[23]张强,胡维岗,金新文.壳聚糖-蒲公英提取物的抑菌活性与稳定性研究[J].食品工业科技,2015,36(20):150-154[24]赵磊,林文轩,迟茜,等.甜叶菊废渣提取物抑菌活性及抑菌稳定性研究[J].食品工业科技,2016,37(24):168-172收稿日期：2018-09-25圆园19年5月第40卷第9期基础研究34酸枣仁为枣属植酸枣Ziziphus jujuba Mill .var.Spinosa （Bunge ）Hu ex H.F.Chou 的种子[1]，是一种常用的药食两用物质。

高效液相色谱法蒸发光散射检测器测定酸枣仁中酸枣仁皂苷A 及B 的含量李会军 李 萍(中国药科大学生药学教研室 南京 210038)摘要 目的:建立酸枣仁中酸枣仁皂苷A 及B 的含量测定方法,为该药材提供质量控制标准。

方法:应用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPL C-EL SD),Allspere ODS-2(250mm 4 6mm ,5 m)色谱柱,甲醇-水-冰醋酸(70 30 1)为流动相,测定了酸枣仁中酸枣仁皂苷A 及B 的含量。

结果:分析了11批商品药材。

酸枣仁皂苷A 及B 的平均回收率分别为92 4%(RSD =3 8%)和91 8%(RSD =3 9%)。

结论:方法快速简便,重现性良好,可用于酸枣仁药材的质量控制。

关键词 酸枣仁 高效液相色谱法 蒸发光散射检测器酸枣仁为鼠李科植物酸枣Ziz ip hus j uj uba var sp inosa (Bunge)H u ex H. F.Chou 的干燥成熟种子,具有养心安神的功效,是较为常用的镇静催眠中药。

酸枣仁皂苷A 及B 为其镇静催眠的有效成分之一[1],含量测定方法报道的有一阶导数光谱法[2]及薄层扫描法[3],本文首次采用高效液相色谱法利用蒸发光散射检测器(ELSD)对酸枣仁皂苷A 及B 进行了含量测定研究。

实验结果表明该法灵敏度、稳定性和重现性均能满足要求,是一种检测皂苷类成分的有效方法。

1 仪器与试剂日本岛津LC -10AD 液相色谱仪;法国SEDEX55型蒸发光散射检测器;H S 色谱数据工作站(杭州英谱科技开发有限公司);各地酸枣仁药材样品(见表1)均经作者鉴定;酸枣仁皂苷A 及B 对照品由中国药品生物制品检定所提供,纯度 98 5%;试验用水为上海获特满公司产纯净水;甲醇为淮阴化学试剂厂产色谱纯;其它试剂均为南京化学试剂厂产分析纯。

2 色谱及检测条件色谱柱:Allspere ODS-2(250mm 4 6mm ,5 m );预柱:Pellicular C 18(7 5mm 4 6mm);流动相:甲醇-水-冰醋酸(70 30 1);流速:1mL min-1。

RP-HPLC-ELSD法同时测定保健食品中酸枣仁皂苷A和B的含量朱国健1，魏锋2，林瑞超2（ 1正大青春宝药业有限公司，杭州200023；2中国药品生物制品检定所中药室，北京 100050）摘要目的：建立测定保健食品中酸枣仁皂苷A和B的高效液相含量测定方法。

方法：色谱柱Agilent zorbax C18（4.6 mm×250mm,5μm）,柱温 25 ℃；流动相0.5%冰醋酸-甲醇（32：68），流速1.0 mL·min-1；蒸发光散射检测器，飘移管温度105℃,氮气流速2.4 L/min。

结果：酸枣仁皂苷A和B的线性范围分别为 4.37～39.2μg 和 4.25～38.6μg；加样回收率（n =5）分别为96.35%和97.12%。

结论：本方法简便、灵敏、准确，可用于含酸枣仁保健食品中以上两种成分的含量测定和产品质量控制。

关键词：RP-HPLC-ELSD；酸枣仁皂苷A和B；含量测定RP-HPLC-ELSD determination of Jujuboside A and B infunctional foodsZHU Guo-jian1, WEI Feng2，LIN Rui-chao2（1 Chiatai Qingchunbao Pharmaceutical Co., Ltd. ,Hangzhou 200023；2 National Institute for the Control of Pharmaceutical and BiologicalProducts， Beijing 100050）Abstract Objective: To develop an RP-HPLC-ELSD method for determination of A and B in functional foods. Methods: An Agilent zorbax C18 column （4.6 mm×250mm,5μm）was applied; a mobile phase composing of methanol and 0.5% acetic acid (68:32) was used, and the flow rate was 1.0 ml·min-1;A ELSD detector was applied, and the tuber temperature was set at 105 ℃, and the gas flow rate was set at 2.4 L/min. Results：The results wereobtained that quantitative line range of two ingredients was 4.37～39.2μg and 4.25～38.6μg respectively, and the average recovery （n=5）was 96.35% and 97.12% respectively. Conclusion：A specific, sensitive, simple and reproducible RP-HPLC-ELSD method was established for the determination of the two ingredients in functional foods that claimed containing Spina Date Seed (Ziziphus jujuba Mill. var. spinosa (Bunge) Hu ex H. F. Chou).Key words：RP-HPLC-ELSD; Jujuboside A and B; quantitative determination酸枣仁为我国传统中药，具有补肝宁心，敛含生津的功效，常用于虚烦不眠、惊悸多梦等症状。

HPLC法测定酸枣仁配方颗粒中酸枣仁皂苷A含量王昭文【摘要】目的:研究酸枣仁配方颗粒中酸枣仁皂苷A的含量.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Waters C18(250×4.6nm,5μm),流动相为乙腈-水梯度系统;检测器为蒸发光检测器.结果:加样回收率为95.3%;RSD为1.3%;相关系数r=0.9998;五批酸枣仁配方颗粒中酸枣仁皂苷A的含量均值为1.99mg·g-1.结论:酸枣仁配方颗粒中酸枣仁含量以酸枣仁皂苷A含量计算不得少于1.9mg·g-1.【期刊名称】《黑龙江医药》【年(卷),期】2016(029)006【总页数】3页(P1033-1035)【关键词】HPLC;酸枣仁配方颗粒;酸枣仁皂苷A【作者】王昭文【作者单位】黑河市药品检验所黑龙江省黑河市 164300【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R927.2酸枣仁为常用中药。

商品为鼠李科植物乔木酸枣的干燥成熟种子。

味甘、酸，性平。

具有养心补肝、安神宁心、敛汗，生津的功效。

临床用于虚烦不眠、惊悸多梦、体虚多汗、津伤口渴等症[1]。

酸枣仁主要化学成分为三萜皂苷、三萜类、黄酮和氨基酸类等成分，,而酸枣仁皂苷A是酸枣仁中重要活性成分，属于三萜皂苷类，具有镇静催眠、抗心肌缺血、增强免疫等药理作用[2]。

最近几年中药配方颗粒在饮片市场上占有率逐年提升，有着携带服用方便、功效显著等特点，逐渐取代传统的组方饮片煎煮成汤剂服用。

市场上配方颗粒已经从性状上鉴别不出来酸枣仁和滇酸枣仁及非药典品枣仁，但酸枣仁在有效成分中酸枣仁皂苷A含量很高，高出滇酸枣仁及其他枣仁4倍以上[3]。

为了能更有效地控制其质量,本文采用高效液相色法对华润三九医药有限公司酸枣仁配方颗粒进行酸枣仁皂苷A的含量测定，初步制定酸枣仁配方颗粒中酸枣仁皂苷A的含量限度。

日本LC-2010AHT高效液相色谱仪ELSD800型蒸发光检测器乙腈为色谱纯，酸枣仁皂苷A对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号：110734-200407)五批酸枣仁配方颗粒均由华润三九医药有限公司提供。

反相高效液相色谱法测定酸枣仁颗粒中酸枣仁皂苷A 与酸枣仁皂苷B的含量作者：周庆武，李玲玲，纪标，徐垣义【摘要】目的建立酸枣仁颗粒中酸枣仁皂苷A与酸枣仁皂苷B的含量测定方法。

方法反相高效液相色谱法，采用Hypersil C18柱为分析柱，使用以乙腈和水为流动相的二元梯度洗脱方法，检测波长为201 nm ，流速为1 ml?min-1。

结果酸枣仁皂苷A在50.01～198.2 μg?ml-1与峰面积呈良好的线性关系 (r=0 .999 8,n =5) , 平均回收率为99.41%；酸枣仁皂苷B在66.25～209.0μg?ml-1与峰面积呈良好的线性关系 (r =0.999 8,n =5 )，平均回收率为 99.34 %。

结论该法简便、快速、重现性好，适用于酸枣仁颗粒中酸枣仁皂苷A与酸枣仁皂苷B的定量分析。

【关键词】反相高效液相色谱法；酸枣仁皂苷A；酸枣仁皂苷B；酸枣仁颗粒Abstract:ObjectiveTo develop a method for the determination of Jujubaside A and Jujubaside B in Ziziphus jujuba Mill(ZJM) Granules. MethodsAn RP-HPLC method was set up with Hypersil 18 column.The mobile phase consisted of acetonitrile and water, and a gradient elution program was applied. The DAD detector was set at 201 nm. ResultsThe calibration curve of Jujubaside A was linear in the range of 50.01～198.2 μg?ml-1,the average recovery was 99.41%;the calibration curve of Jujubaside B was linear in the range of 66.25～209.0μg?ml-1,the average recovery was 99.34%.ConclusionThe method is appropriate for the determination of Jujubaside A and Jujubaside B. Key words:RP-HPLC; Jujubaside A； Jujubaside B; Ziziphus jujuba Mill(ZJM) Granules 酸枣仁颗粒是由酸枣仁、茯苓、知母等药材组成，具有养心安神、镇静催眠之功效。

酸枣仁检测方法酸枣仁总皂苷的含量测定操作规程B.1仪器和用具B.1.1紫外-可见分光光度仪B.1.2超声波清洗仪B.1.3分析天平：感量0.00001gB.2试剂和溶液B.2.1甲醇、香草醛、冰醋酸、高氯酸（均为分析纯）。

B.2.2酸枣仁皂苷A对照品。

B.3操作程序B.3.1标准品溶液制备精密称取于60℃减压2.67KPa以下干燥3小时的酸枣仁皂苷A对照品适量，加甲醇溶解，制成每1ml含1mg的溶液。

B.3.2供试品溶液制备精密称取酸枣仁提取物样品约1200mg于25mL容量瓶中，加入甲醇约20ml超声震荡30分钟，冷却至室温，用甲醇定容至刻度，摇匀用0.45μm微孔滤膜过滤，即得。

B.3.3试样的测定精密吸取对照品溶液及供试品溶液各200μL，分别置15ml具塞试管中，60℃水浴中挥干溶剂，精密加入新鲜配制的含5%香草醛冰醋酸溶液与高氯酸（2：8V/V）的混合液2ml，摇匀，密塞，置60℃水浴中加热15分钟，取出，立即放入冰水中冷却2分钟，精密加入冰醋酸定容至10ml，摇匀，以空白溶液作参比，于550nm波长处测定吸收度。

根据外标法依照以上操作数据计算含量。

酸枣仁皂苷A+B的含量测定操作规程C.1仪器和用具C.1.1高效液相色谱仪C.1.2超声波清洗仪C.1.3分析天平：感量0.0001gC.2试剂和溶液C.2.1水：双重蒸馏水。

C.2.2甲醇：分析纯；乙腈：色谱纯。

C.2.3酸枣仁皂苷A、B对照品：98%以上，使用前应在放有五氧化二磷的减压干燥器内干燥24小时。

C.3色谱条件及系统适用性C.3.1色谱柱：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。

C.3.2检测波长：204nm。

流速：1mL/min。

酸枣仁皂苷A峰的理论塔板数不得小于2000。

进样量20微升。

C.3.3流动相：乙腈：水=39：61V/V，用0.45μm滤膜过滤后使用。

C.4操作程序C.4.1对照品溶液的制备精密称取酸枣仁皂苷A、B对照品各约5mg于25mL容量瓶中，加入甲醇溶解定容至刻度。