中药制剂含量测定(精)

3.连续回流提取法
样品置于索氏提取器中，利用低沸点的 有机溶剂进行连续回流提取 节省溶剂，提高提取效率
特点
适宜受热稳定的药物
费时
保和丸（陈皮等）中橙皮甙测定
+甲醇，加热回流至提取液无色为止
4.超声提取法
利用超声波的助溶作用进行提取。
超声波振荡器（超声波清洗器） 简便 省时 提取率高
保济丸（厚朴等）中厚朴酚测定 +石油醚（30-60℃），超声处理（功率500W，频率33kHz） 2次，每次30min
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精密度（precision）
系指在规定测试条件下，同一均匀供试品，经 多样取样测定所的结果之间接近的程度。 精密度是考察分析方法在不同的时间、操作人 员、实验室，所获得结果之间的重现性和重复 性。 在药物分析中，常用相对偏差(RD)、标准偏差 （S）和相对标准差（RSD）表示。 至少 6 次结果进行评价
分离的原理：吸附色谱、分配色谱、离子交换
色谱、 凝胶色谱 按操作方式：柱色谱、薄层色谱、纸色谱 装柱方法：湿法装柱、干法装柱 微柱色谱（固相萃取）
柱的大小：长5～15cm，内径0.5～1cm
柱填料：硅胶、氧化铝、活性炭、聚酰胺、大孔
树脂、硅藻土、离子交换树脂、键合相硅胶C8、 C18等
第二节 常用含量测定方法
热水浸泡（70℃~80 ℃）
部分测定法——等量测定法 全部测定法——总量测定法
2.回流提取法
采用回流装置，用单一溶剂或混合溶剂 于水浴上加热回流提取 加快溶出速度，省时
特点
（每次提取时间0.5~2h，提取次数1~3次）
适宜受热稳定的药物 适宜较难溶出的组分
万应胶囊（黄连等）中盐酸小檗碱测定
+HCl-70%乙醇溶液，加热回流1h
取本品适量，研细，取约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加石油醚 （60-90℃）4ml，浸泡1小时，滤过，滤渣及滤纸挥去溶剂，放回锥形 放置或指定25℃ 瓶中，精密加入冰醋酸无水乙醇溶液（1 → 10）15ml，摇匀，密塞， 温浸（ 40℃~5012 ℃） 称定重量，浸泡 小时，再称定重量，用冰醋酸无水乙醇溶液（1 → 10） 补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
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专属性（specificity）
是指在样品介质中有其他组分（如杂质、降解 产物、辅料等）可能存在下，采用的方法能准 确测定出被测物的特性。
第四章 中药制剂含量测定
学生:07级药事管理
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第一节 样品处理
样品处理的目的
——使其符合所选定的分析方法的要求 1. 释放被测组分，制成稳定试样 2. 除去杂质，纯化 3. 浓缩或衍生化
4. 试样形式符合测定的要求
一、样品的粉碎
目的——取样均匀，提取完全
粉碎设备——粉碎机、研钵、匀浆机
弱亲脂性的溶剂，如乙酸乙酯、正丁醇等
多次萃取（3-4次） 调整水相酸度，提取有机酸、有机碱 利用盐析作用，提高提取率
离子对萃取法
BH+（水相）+ In-(水相)
BH+· In-（水相）
BH+· In（有机相）
适合于高度电离的有机酸、碱化合物的萃取
水相酸度的控制 离子对试剂的选择
4. 色谱法（层析法）
5.超临界流体萃取法（SFE）
以超临界流体（常用CO2）作溶剂的样品提取新技术。
当压力和温度超过气体的临界点时所形成的单一相态
超临界流体——特殊的物质状态 密度 d ~ 液体 → 溶解能力强 粘度 ~ 气体 → 传质快，有利于待测组分的扩散 表面张力几乎为 0 → 浸润性能好 密度受压力、温度的影响大→ 改变对溶质的溶 解能力，加入甲醇、氯仿、苯等改变极性→ 提 取不同极性的成分 优点：速度快、萃取效率高、方法准确度高、选择 性较高
二、样品的分离净化
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关键——保留有效成分
1.沉淀法
复方益母草口服液中水苏碱的含量测定
利用雷氏盐（硫氰酸铬铵）作沉淀剂，在酸性介质中可与大部 分有机碱生成难溶于水的配合物与其它杂质分离。
2.蒸馏法
适用于具挥发性的待测组分，如挥发油、
小分子的生物碱、丹皮酚等
3. 液—液萃取法
直接萃取法
萃取剂的选择 亲脂性有机溶剂，如苯、氯仿或乙醚
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精密度验证内容包括重复性、中间精密度 和重现性
1.重复性 在较短时间间隔内，在相同的操作条件下由 同一分析人员测定所得结果的精密度。 2.中间精密度 在同一实验室，由于实验室内部条件的 改变，如不同时间由不同分析人员用不同设备测定所得 结果的精密度。 3.重现性 在不同实验室由不同分析人员测定结果的精 密度。
用已知纯度的对照品做加样回收测定，即于已知被测成分 含量的供试品中再加入已知纯度的被测成分对照品。
回收率计算公式为：
回收率%= C-A B ×100%
A 供试品所含被测成分量 B 加入对照品量 C 实测值
要求至少测定高、中、低三个浓度，每个浓度测定三次， 共提供9个数据进行评价。 中药制剂含量回收率一般为95%~105%，RSD一般应为2 ％以内。
注意：粒度大小合适 防止污染或损失
二、样品的提取
关键——提取完全
溶剂的选择
水、酸水、碱水 亲水性的有机溶剂：乙醇（酒精）、甲
醇（木精）、丙酮
亲脂性的有机溶剂：石油醚、苯、氯仿、
乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷
1.浸泡提取法
冷浸法
优点：操作简单，适于热不稳定的样品，且提取杂质少 缺点：费时（ 12-24 h）、费溶剂（10-50倍） 灵宝护心丹（牛黄、麝香等）中胆酸的含量测定

制剂中所选被测成分主要是：
化学结构已经明确的有效成分； 能大致明确的某类主要活性物质； 能反映某味主要药物特征的指标性成分；
剧毒性成分或贵重药材的成分。

常用方法： 高效液相色谱法； 气相色谱法； 薄层色谱法； 紫外可见分光光度法； 化学分析法 重量分析法
容量分析法
第三节 含量测定方法验证
分析方法验证的目的
是证明采用的方法适合于相应的检测要求。
需验证的分析项目
鉴别试验、杂质检查、原料药及制剂中有效成分含 量测定及其它成分测定
验证内容
准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、 范围和耐用性
准确度（Ａccuracy）
准确度是指测得结果与真实值或参考值接 近的程度，表示分析方法测量的正确性。 由于“真实值”无法准确知道，因此，通 常采用回收率（%）来表示。