实验酵母菌的形态观察及
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实验七酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定一、实验目的1.观察酵母菌的形态特征、出芽生殖方式,并掌握酵母菌与细菌形态特征的区别。
2.学习鉴别死活细胞的实验方法。
二、实验原理酵母菌是单细胞的真核微生物,菌体比细菌大而且不运动。
酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种,以无性繁殖为主。
芽殖是酵母菌普遍的无性繁殖方式,少数为裂殖;有性繁殖是产生子囊和子囊孢子。
本实验是通过美蓝染液水浸片和水一碘液水浸片来观察酵母的形态和芽殖方式。
美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。
用美蓝对酵母活细胞染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型,而对代谢作用微弱或死细胞,无此还原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。
因此,不仅用此法可观察酵母细胞形态,也可用来鉴别酵母菌的死细胞和活细胞。
三、实验器材1.材料:酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或卡尔酵母(Saccharomyces calsbergensis)培养2天左右的麦芽汁(或豆芽汁)液体培养物。
2.试剂:O.1%吕氏碱性美蓝染色液、革兰氏染色用的碘液。
3.器材:显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、洒精灯等。
四、实验步骤1.美蓝浸片观察(1)在载玻片中央加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染色液,然后按无菌操作接种环挑去少量酵母菌放在染液中,混合均匀,染液不宜过多。
注:染液不宜过多或过少,否则,在盖上盖玻片时,菌液会溢出或出现大量气泡。
(2)用镊子取一块盖玻片,先将一边与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上。
注:盖玻片不宜平着放,以免产生气泡。
(3)将制片放置约3min后镜检,先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况,并根据颜色来区别死活细胞。
(4)染色约0.5h后再次观察,注意死细胞数量是否增加。
2.水-碘浸片观察在载玻片中央滴一滴碘液,然后在其上加3小滴水,取少许酵母菌苔放在水-碘液中混匀,盖上盖玻片后镜检。
酵母菌的形态观察实验报告实验目的:
通过对酵母菌的形态观察,了解其形态特征及生长繁殖形式。
实验原理:
酵母菌属于真菌门,以单细胞的形态存在。
酵母菌的生活方式非常简单,只需水分、适宜温度和营养物质,就能进行无性生殖和有性生殖,产生大量的孢子。
在孢子的形态、颜色、质量等方面均有明显差异。
实验步骤:
1. 取一定量的酵母菌液,加入蒸馏水中制成适量的悬浮液。
2. 取平底草皮片,用火烤热并消毒。
3. 用灭菌的牙签蘸取酵母菌悬浮液在草皮片上均匀涂抹。
4. 将涂有酵母菌悬浮液的草皮片放入培养皿中,加入适量的固
体培养基。
5. 放入恒温培养箱中进行培养,在适宜温度下孵育。
6. 发现酵母菌长出后,取出草皮片,用显微镜观察其形态。
实验结果:
通过实验观察,我们发现酵母菌为基于球形的单细胞菌体,颗
粒细小,染色颜色不均匀。
在液体营养平板上培养时,酵母菌形
成了一个类似于小球的珠状体,称为酵母珠。
实验结论:
酵母菌为单细胞植物,无色透明,小而细,球形或椭球形。
在
液体中生长时,形态呈现球状;在固体中生长时,呈白色且有臭味。
酵母菌的营养特别简单,只要有水分、适宜温度和营养物质,就能进行无性生殖和有性生殖,产生大量的孢子。
实验总结:
通过本次实验,我对酵母菌的形态特征及生长繁殖形式有了更
深入的了解。
同时,本次实验也让我了解了实验操作的基本要领
和注意事项。
只有正确选择实验条件并且严格按照实验步骤操作,才能获得准确可靠的实验结果。
实验十酵母菌形态观察及死活细胞鉴定一.目的要求:1. 观察酵母菌的形态及出芽生殖。
2掌握酵母菌的死活细胞的鉴别。
3.掌握酵母子囊孢子的观察方法。
二.实验原理1.形态观察酵母菌是不运动的单细胞真核微生物,其大小通常比常见细菌大几倍甚至几十倍。
大多数酵母菌以出芽方式进行无性繁殖,有的分裂繁殖;有性繁殖是通过结合产生子囊孢子。
本实验通过美蓝染液水浸片和水—碘液水浸片来观察酵母菌的形态和出芽生殖方法。
2.死活鉴定本实验通过用美蓝染色制成水浸片,来观察生活的酵母形态和出芽生殖方式。
美蓝是一种无毒性染料,它的氧化型是蓝色的,而还原型是无色的,用它来对酵母的活细胞进行染色,由于细胞中新陈代谢的作用,使细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝从蓝色的氧化型变为无色的还原型,所以酵母的活细胞无色,而对于死细胞或代谢缓慢的老细胞,则因它们无此还原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。
因此,用美蓝水浸片不仅可观察酵母的形态,还可以区分死、活细胞。
3.子囊孢子子囊孢子是子囊菌类真菌有性生殖产生的有性孢子。
在酵母菌中,能否形成子囊孢子及其形态是酵母菌分类鉴定的重要依据之一。
酵母菌形成子囊孢子需要一定的条件,所以对不同种属的酵母菌要选择适合形成子囊孢子的培养基。
麦氏培养基(葡萄糖—醋酸钠培养基)有利于酿酒酵母子囊孢子的形成。
三.实验器材1.菌种:酿酒酵母培养约2d的酵母合成培养基和麦氏琼脂斜面。
2.溶液或试剂:0.05%和0.1%吕氏碱性美蓝染液,革兰氏染色用碘液。
5%的孔雀绿水溶液,0.5%的番红水溶液,95%的乙醇3.仪器或其他用具:显微镜,载玻片,盖玻片等。
四.操作步骤1.酵母合成培养基的配制按配方称取酵母合成培养基各组分,配置3瓶60ml的培养液各装入250ml锥形瓶中,再用六层纱布封口,用牛皮纸包扎后121℃灭菌20min。
灭菌后置于摇床上震荡。
2.麦氏琼脂的配制按配方称取麦氏琼脂各组分,制成10只斜面,每只内培养液为5至10ml,按常规方法包扎后121℃灭菌20min。
【生物课件】实验四酵母菌形态及菌落特征的观察实验目的通过观察酵母菌的形态和菌落特征,了解酵母菌的生长形态、菌落特征及其对应的属种。
实验器材显微镜、玻璃片、盖玻片、移液管、培养基、酵母菌培养液、灭菌针实验步骤1.制备酵母菌培养液:取1g葡萄糖、0.5g酵母粉、0.1g硫酸镁在100mL蒸馏水中溶解,用自制的无菌培养瓶煮沸30分钟,灭菌后保存备用。
2.取一支酵母菌液体菌种,在无菌条件下采取少量菌液接种到培养基上,再将其存放在恒温培养箱中,温度为25℃,在培养过程中要注意对无菌操作方法的规范性。
3.观察菌落特征:观察24小时、48小时、72小时3个时期的菌落形态,比较菌落的大小、形状、颜色等特征,并记录下来。
4.观察酵母菌形态:用无菌的显微镜玻片将酵母菌液体培养液中的酵母菌移涂到玻璃片上,再用盖玻片把酵母菌压扁。
然后观察酵母菌的形态,比较细胞的大小、形状和细胞壁的厚度等特征,并记录下来。
实验结果1.菌落特征观察:在培养液表面,经过24小时,酵母菌的菌落直径为2mm-3mm,呈白色,球状,边缘清晰;经过48小时,酵母菌的菌落直径为4.5mm-5mm,呈白色,球状,边缘模糊;经过72小时,酵母菌的菌落直径为8mm-10mm,呈乳白色,规则圆形,边缘模糊。
2.酵母菌形态观察:酵母菌细胞呈椭圆形或卵圆形,直径约2μm,细胞壁厚度约为0.1μm。
在显微镜下,酵母菌细胞明显可见且呈现圆形,且细胞壁能被观察到。
讨论分析本实验通过对酵母菌菌落特征、形态的观察,初步确定酵母菌种类。
在进行观察时,需要注意培养温度、培养基的组成以及无菌操作等因素的影响,这些因素都可能对菌落和细胞形态产生一定的影响。
在实验过程中,还可以尝试采用不同的培养基,探究培养基成分对酵母菌的生长和菌落形态的影响,这样可以更加深入地了解酵母菌的生理特性和形态特征。
一、实验目的本次实验旨在通过观察酵母菌的形态、生长特点以及繁殖方式,了解酵母菌的基本生物学特性,并探究酵母菌在不同环境条件下的生长情况。
二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌,属于真核微生物。
在适宜的条件下,酵母菌能够进行出芽生殖,即通过产生新的细胞壁和细胞膜,使子细胞从母细胞上分离出来。
此外,酵母菌在发酵过程中,可以将糖类物质转化为酒精和二氧化碳,这一过程在食品、酿酒和生物工程等领域有着广泛的应用。
三、实验材料与方法1. 实验材料- 酵母菌培养基- 培养皿- 显微镜- 显微镜玻片- 接种环- 酒精- 美蓝染液- 碘液2. 实验方法(1)酵母菌培养将酵母菌接种于培养基中,在适宜的温度和湿度条件下培养,使其生长繁殖。
(2)酵母菌形态观察用显微镜观察酵母菌的形态,包括细胞大小、形状、细胞壁结构、细胞质结构等。
(3)酵母菌繁殖方式观察观察酵母菌的出芽生殖过程,记录子细胞从母细胞上分离出来的时间、数量和速度。
(4)酵母菌生长情况观察在不同环境条件下(如温度、pH值、营养物质等),观察酵母菌的生长情况,记录其生长曲线。
四、实验结果1. 酵母菌形态观察酵母菌呈椭圆形或卵圆形,细胞壁厚,细胞质均匀。
在显微镜下,可见细胞核位于细胞中央,细胞质内含有一定数量的内质网、线粒体等细胞器。
2. 酵母菌繁殖方式观察酵母菌主要通过出芽生殖进行繁殖。
在适宜的条件下,母细胞在细胞壁上形成新的细胞壁和细胞膜,子细胞从母细胞上分离出来。
观察结果显示,子细胞从母细胞上分离出来的时间为10-15分钟,平均每10分钟产生一个子细胞。
3. 酵母菌生长情况观察(1)温度对酵母菌生长的影响在不同温度条件下,酵母菌的生长速度存在差异。
实验结果显示,在28-30℃的温度范围内,酵母菌生长速度最快;当温度低于15℃或高于35℃时,酵母菌生长速度明显减慢。
(2)pH值对酵母菌生长的影响酵母菌在pH值为4.5-5.5的环境中生长最佳。
实验结果显示,当pH值低于4.5或高于5.5时,酵母菌生长速度明显减慢。
酵母菌的形态观察实验报告酵母菌的形态观察实验报告引言:酵母菌是一类单细胞真菌,广泛存在于自然界中的土壤、水体和植物表面等环境中。
酵母菌具有重要的经济和科学价值,不仅可以用于食品发酵和酿造业,还是许多生物学研究的模式生物。
本实验旨在通过对酵母菌的形态观察,了解其基本特征和结构。
材料与方法:1. 酵母菌培养基:将酵母菌培养基粉末溶解于适量的蒸馏水中,加热煮沸,冷却后倒入培养皿中。
2. 酵母菌培养物:取一小块酵母菌培养物,用无菌的棉签将其涂抹在培养基表面。
3. 显微镜:使用高倍显微镜观察酵母菌的形态。
结果与讨论:在显微镜下观察酵母菌的形态,可以发现其具有以下特征和结构。
1. 细胞形态:酵母菌的细胞形态呈椭圆形或圆形,直径约为5-10微米。
在培养基上,酵母菌会形成白色或乳白色的圆形菌落。
2. 细胞壁:酵母菌的细胞壁是由多种多糖和蛋白质组成的,具有保护细胞的作用。
在显微镜下观察,可以看到酵母菌细胞表面有一层透明的薄膜,即细胞壁。
3. 细胞核:酵母菌的细胞核位于细胞的中央,呈椭圆形或圆形。
细胞核内含有遗传物质DNA,控制着酵母菌的生长和繁殖。
4. 胞质:酵母菌的胞质是细胞核周围的胶状物质,其中包含了许多细胞器。
通过显微镜观察,可以看到胞质内有颗粒状的物质,这是酵母菌的细胞器。
5. 酵母菌的繁殖:酵母菌的繁殖方式有两种:无性繁殖和有性繁殖。
无性繁殖是通过酵母菌细胞的分裂和芽生产生新的酵母菌。
有性繁殖则需要两个酵母菌细胞进行配子体的形成和融合。
通过本次实验,我们对酵母菌的形态有了初步的了解。
酵母菌的单细胞结构和繁殖方式使其成为许多研究领域的理想模式生物。
酵母菌的细胞壁和细胞核等结构对其生存和功能发挥起着重要作用。
进一步的研究可以探索酵母菌在食品工业、生物制药和基因工程等领域的应用潜力。
结论:通过对酵母菌的形态观察实验,我们对酵母菌的细胞形态、细胞壁、细胞核和胞质等结构有了初步的认识。
酵母菌作为一种常见的单细胞真菌,具有重要的经济和科学价值。
酵母菌形态观察及死活鉴别
一、实验目的
1.认识并观察酵母菌的形态特征,并掌握酵母菌与细菌形态特征的区别。
2.学习鉴别死活细胞的实验方法。
二、实验原理
1、酵母菌是单细胞的真核微生物,菌体比细菌大而且不运动。
2、本实验是通过美蓝染液浸片和碘液浸片来观察酵母的形态
美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。
用美蓝对酵母活细胞染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型,而对代谢作用微弱或死细胞,无此还原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。
因此,不仅用此法可观察酵母细胞形态,也可用来鉴别酵母菌的死细胞和活细胞
三、实验器材
酵母悬液、美蓝染色液、革兰氏染色用的碘液、显微镜、载玻片、盖玻片
四、实训步骤
1、水-碘浸片观察
在载玻片中央滴一滴碘液,取一滴酵母悬液放在碘液中混匀,盖上盖玻片后镜检。
2、美蓝浸片观察
(1)在载玻片中央加一滴美蓝染色液,滴加一滴酵母菌放在染液中,混合均匀,染液不宜过多。
注:染液不宜过多或过少,否则,在盖上盖玻片时,菌液会溢出或出现大量气泡。
(2)将制片放置约3min 后镜检,先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母的形态和出芽情况,并根据颜色来区别死活细胞。
五、实验报告
绘图说明你所观察到的酵母菌的形态特征
六、注意事项
1、染色液不宜过多或过少,否则在盖上盖玻片时,菌液会溢出或出现大量的气泡,影响观察。
2、盖片时斜着放不易产生气泡。
1。
实验三酵母菌、霉菌形态观察及微生物大小测定一、酵母菌的形态观察★母菌细胞一般成圆形、卵圆形、圆柱形或柠檬形。
每种酵母细胞有其一定的形态大小。
大多数酵母菌在平板培养基上形成的菌落较大而厚,湿润、较光滑,颜色较单调(多为乳白色,少有红色,偶有黑色)。
酵母菌细胞核与细胞质有明显的分化,个体直径比细菌大几倍到十几倍。
繁殖方式也较复杂,无性繁殖主要是出芽生殖。
菌落平板分离的酵母菌★个体形态及出芽观察酵母菌细胞较大,观察时可不染色,用水浸片法观察,即在载玻片中央滴加一小滴无菌水或滴加0.1% 美蓝液一小滴,无菌操作用接种环取酿酒酵母少许,置于无菌水或美蓝液中,使菌体与其混合均匀。
将盖玻片斜置轻轻盖在液滴上。
制片先用低倍镜,再换高倍镜观察酵母菌细胞的形状及出芽方式。
酵母菌芽痕★死活细胞观察1)染色:在干净的载玻片中央加一小滴0.1%美蓝染色液,然后再加一小滴预先稀释至适宜浓度的酿酒酵母液体培养物,混匀后从侧面盖上盖玻片,并吸去多余的水分和染色液(注意染色液和菌液不宜过多或过少,并应基本等量,而且要混匀)。
2)镜检:将制好的染色片置于显微镜的载物台上,放置约3min后进行镜检,先用低倍镜,后用高倍镜进行观察,根据细胞颜色区分死细胞(蓝色)和活细胞(无色),并进行记录。
3)比较:染色约30min后再次进行观察,注意死细胞数量是否增加。
★液泡的活体染色观察在洁净的载玻片上加一滴中性红染液,用接种环取少许酿酒酵母与染液混匀,染色4—5min,加盖玻片在显微镜下观察。
中性红是液泡的活体染色剂,在细胞处于生活状态时,液泡被染成红色,细胞质及核不着色。
若细胞死亡,液泡染色消失,细胞质及核呈现弥散性红色失,细胞质及核呈现弥散性红色。
★脂肪粒染色观察方法1:在载玻片上加一滴无菌水,用接种环取少许酿酒酵母制成涂片,自然干燥后滴加苏丹黑染色5min,水洗,自然干燥,滴加二甲苯脱色至涂片透明,干燥后滴加0.5%蕃红染液复染30s, 水洗,自然干燥后显微镜观察。
实验7酵母菌的形态观察、大小测定和直接计数一、实验目的酵母菌的形态及出芽生殖,学习区分酵母菌死活细胞的实验方法;学习并掌握用测微尺测定微生物大小和使用血球计数板进行微生物计数的方法。
二、实验原理1.酵母菌形态观察酵母菌个体较大,常规涂片方法可能损伤细胞,因此用美蓝染液水浸片法观察其出芽生殖。
美蓝染液的氧化形式蓝色,还原形式无色。
活细胞由于新陈代谢,细胞内还原性物质还原美蓝而呈现无色,死细胞或代谢能力弱的细胞不能将美蓝还原呈现蓝色。
2.细胞大小测量微生物大小的测定需借助测微尺:目镜测微尺和镜台测微尺。
镜台测微尺用于矫正目镜测微尺,总长1mm,分100个小格,每小格10μm。
目镜测微尺是一块可放入目镜的圆形玻片,有50小格和100小格2种。
由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同,目镜测微尺每小格代表的实际长度也不一样。
因此,用目镜测微尺测量微生物大小时,必须先用镜台测微尺进行校正,以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度,然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数,计算出细胞的实际大小。
3.细胞计数血细胞计数板,大格1.0mm,体积0.1m3。
三、步骤1.酵母菌观察1)在载玻片中央加一滴0.05%吕氏碱性美蓝染色液,用滴管取1滴酵母菌菌液于染液中,混合均匀。
2)加盖玻片。
3)将制片放置约3min后镜检,先用低倍镜然后用高倍镜观察酵母菌的形态和出芽情况,并根据颜色区别死、活细胞。
4)染色约0.5h后再次进行观察,观察死细胞数量是否增加。
5)形态记录,计算0.5h后酵母菌的死亡率。
2.细胞大小测量1)装目镜测微尺:把目镜上的透镜旋下,将目镜测微尺刻度朝下放在目镜镜筒内的格板上,然后旋上目镜透镜,再将目镜插入镜筒内。
2)校正目镜测微尺:将镜台测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上。
校正:先用低倍镜观察,将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央,调节焦距,当清晰地看到镜台测微尺的刻度后,转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。
酵母菌观察实验报告酵母菌观察实验报告引言:酵母菌是一种单细胞真菌,广泛存在于自然界中,对于人类的生活有着重要的意义。
本次实验旨在观察酵母菌在不同条件下的生长情况,并探究酵母菌的生长与环境因素之间的关系。
实验材料与方法:本次实验所需材料包括:酵母菌培养基、培养皿、显微镜、显微镜玻片、盖玻片、显微镜盖玻片夹、恒温箱、显微镜台、计时器等。
1.准备工作:首先,将酵母菌培养基均匀地倒入培养皿中,待其凝固后将其放入恒温箱中,保持温度在25℃左右。
同时,将显微镜台调整到适合观察的高度,并将显微镜置于台上。
2.观察酵母菌的生长情况:将培养皿取出,用显微镜盖玻片夹取一小部分酵母菌涂抹在显微镜玻璃片上,再将盖玻片盖在上面。
将玻璃片放置在显微镜台上,调整显微镜的倍数,通过显微镜观察酵母菌的形态和数量。
实验结果与讨论:在观察过程中,我们发现了一些有趣的现象。
首先,酵母菌的形态呈现为圆形或椭圆形,直径约为5-10微米。
其细胞壁坚韧,颜色呈现为淡黄色。
在培养基中,酵母菌呈现出快速生长的特点,数量迅速增加。
接下来,我们进行了一系列的实验,探究了酵母菌生长与环境因素之间的关系。
首先,我们改变了培养基的酸碱度。
将酵母菌培养基分为三组,分别调整为酸性、中性和碱性。
结果显示,酵母菌在中性培养基中生长最为迅速,而在酸性和碱性培养基中生长较为缓慢。
这说明酵母菌对于酸碱度有一定的敏感性,适宜的酸碱度有利于其生长。
其次,我们改变了培养基中的营养成分。
将培养基分为两组,一组为富含营养的培养基,另一组为贫含营养的培养基。
结果显示,富含营养的培养基中酵母菌生长迅速,而贫含营养的培养基中生长缓慢。
这说明酵母菌对于营养成分的需求较高,充足的营养有利于其生长繁殖。
最后,我们探究了温度对酵母菌的影响。
将培养皿放入恒温箱中,分别设置不同的温度条件。
结果显示,酵母菌在25℃的温度下生长最为迅速,而在较高或较低的温度下生长较为缓慢。
这表明酵母菌对温度有一定的适应性,适宜的温度有利于其生长发育。
实验七酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定一、实验目的1.观察酵母菌的形态特征、出芽生殖方式,并掌握酵母菌与细菌形态特征的区别。
2.学习鉴别死活细胞的实验方法。
二、实验原理酵母菌是单细胞的真核微生物,菌体比细菌大而且不运动。
酵母菌的繁殖方式分为无性繁殖和有性繁殖两种,以无性繁殖为主。
芽殖是酵母菌普遍的无性繁殖方式,少数为裂殖;有性繁殖是产生子囊和子囊孢子。
本实验是通过美蓝染液水浸片和水一碘液水浸片来观察酵母的形态和芽殖方式。
美蓝是一种无毒性的染料,它的氧化型呈蓝色,还原型无色。
用美蓝对酵母活细胞染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型,而对代谢作用微弱或死细胞,无此还原能力或还原能力极弱,而被美蓝染成蓝色或淡蓝色。
因此,不仅用此法可观察酵母细胞形态,也可用来鉴别酵母菌的死细胞和活细胞。
三、试剂与器材1.材料酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或卡尔酵母(Saccharomyces calsbergensis)培养2天左右的麦芽汁(或豆芽汁)液体培养物。
2.试剂0.05%和O.1%吕氏碱性美蓝染色液、革兰氏染色用的碘液。
3.器材显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、洒精灯等。
四、实验内容1.美蓝浸片观察酵母培养→制片→染色→镜检→30分钟后再镜检2.水-碘浸片观察五、关键步骤及注意事项1.染液不宜过多或过少,否则,在盖上盖玻片时,菌液溢出或出现大量气泡。
2.用镊子取一块盖玻片,先将一侧与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下,使其盖在菌液上,盖玻片不宜平着放下,避免气泡产生。
六、思考题1.吕氏碱性美蓝染液浓度和作用时间的不同,对酵母菌死细胞数量有何影响?试分析其原因。
2.在显微镜下,酵母菌有哪些突出的特征区别于一般细菌? 实验七酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定一、实验目的1.观察酵母菌的形态特征、出芽生殖方式,并掌握酵母菌与细菌形态特征的区别。
实验五酵母菌形态的观察和显微镜下细胞测量和计数刘洋生物101 1002040120一、实验目的1、观察酵母菌的形态,掌握区分酵母菌死活细胞的染色方法。
2、掌握利用显微测微尺测量酵母菌大小的方法。
3、学习利用血球计数板测定微生物细胞数量的原理和方法。
二、实验原理(一)酵母菌的形态观察酵母菌是单细胞真核微生物,细胞呈圆形、椭圆形或柱状。
酵母的细胞比细菌大得多,经过特殊的染色,在高倍镜下就可以观察到。
酵母菌既可无性繁殖,又可有性繁殖。
无性繁殖有芽殖和裂殖两种,芽殖又有单出、双出和多出之分。
酵母菌的有性生殖一般能形成4~8个子囊孢子。
在一定条件下,有的酵母菌进行芽殖后,长大的子细胞不与母细胞立即分离,并继续出芽,细胞成串排列,这种菌丝状的细胞串就称为假菌丝。
假菌丝的各细胞间仅以狭小的面积相连,呈藕节状。
酵母菌的死活细胞可以通过美兰染色加以区分。
美兰是一种无毒性染色剂,其氧化型为蓝色,还原型为无色。
由于活细胞具有较强的还原能力,可以使美兰由蓝色的氧化型转变为无色的还原型。
处于代谢旺盛的细胞还原美兰的能力强,细胞为无色,为代谢缓慢的老细胞、幼嫩芽体为浅蓝色,死细胞为深蓝色。
(二)显微镜下的细胞计数本次实验采用血球计数法测定微生物细胞数。
方法是将经过适当稀释的菌体细胞或孢子悬液,加到血球计数板的计数室内,在显微镜下逐格计数。
因为计数室的容积是固定的(0.1mm3),所以可以将在显微镜下计得的菌数换算成单位体积试样中的菌数。
血球计数板使一块特制的载玻片,中部有H形的沟槽将中部分成上下两个计数室。
计数室方格的边长为3mm,每个方格分为9个大方格,正中央的大方格被分为25个中方格,而每个中方格又被分为16个小方格。
这样正中央的大方格总共分成400个小方格,每个小方格的体积为1/4000 mm3(计数室的高度为0.1mm)。
由此得到如下公式:每毫升的菌数(个)=平均每个中方格内的菌数16×稀释倍数×4000×1000(三)显微镜下细胞大小的测量用来测量微生物大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。
一、实验目的1. 观察酵母菌的细胞形态及出芽生殖方式。
2. 学习掌握区分酵母菌死、活细胞的染色方法。
二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌,其细胞结构包括细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等。
酵母菌主要通过出芽生殖进行繁殖,即在母细胞的一端形成芽体,芽体逐渐长大并与母细胞分离,形成新的个体。
美蓝是一种无毒性的染料,其氧化型呈蓝色,还原型无色。
活细胞具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型,因此,活细胞无色,而死细胞或代谢缓慢的老细胞则呈蓝色或淡蓝色。
三、实验器材1. 酿酒酵母或卡尔酵母(Saccharomyces calsbergensis)2. 0.1%吕氏碱性美蓝染液3. 革兰氏染色用的碘液4. 显微镜5. 载玻片6. 盖玻片7. 接种针8. 烧杯9. 火柴四、实验步骤1. 准备酵母菌培养物:取少量酿酒酵母,接种于土豆平板培养基上,28-30℃培养3-5天。
2. 制备美蓝浸片:a. 在载玻片中央滴一滴0.1%吕氏碱性美蓝染液。
b. 用接种针挑取少量酵母菌,均匀涂布在染液上。
c. 盖上盖玻片,轻压使酵母菌与染液充分接触。
3. 制备水浸片:a. 在载玻片中央滴一滴无菌水。
b. 用接种针挑取少量酵母菌,均匀涂布在水中。
c. 盖上盖玻片,轻压使酵母菌与水充分接触。
4. 显微镜观察:a. 将美蓝浸片和水浸片置于显微镜下观察。
b. 观察酵母菌的细胞形态、大小、细胞核、芽体等特征。
c. 比较美蓝浸片和水浸片中酵母菌的形态差异。
5. 死活细胞鉴别:a. 观察美蓝浸片中酵母菌的染色情况。
b. 活细胞呈无色,死细胞或代谢缓慢的老细胞呈蓝色或淡蓝色。
五、实验结果1. 酵母菌细胞形态:a. 酵母菌细胞呈椭圆形、圆形或卵圆形,大小不一。
b. 细胞核位于细胞中央,呈圆形或椭圆形,核膜清晰。
c. 细胞质均匀,无色或淡蓝色。
2. 出芽生殖方式:a. 观察到酵母菌细胞一端形成芽体,芽体逐渐长大。
b. 芽体与母细胞分离,形成新的个体。
一、实验目的1. 了解酵母菌的基本形态和结构;2. 掌握显微镜观察酵母菌的方法;3. 熟悉酵母菌的繁殖方式。
二、实验材料1. 酵母菌菌种;2. 显微镜;3. 载玻片、盖玻片;4. 生理盐水;5. 美蓝染液;6. 碘液;7. 吸管;8. 记录本。
三、实验方法1. 将酵母菌菌种接种于生理盐水中,振荡混匀;2. 取一滴生理盐水滴于载玻片上,用无菌吸管吸取少量酵母菌悬液滴于生理盐水滴中;3. 盖上盖玻片,轻压使酵母菌均匀分布在载玻片上;4. 用显微镜观察酵母菌的形态和结构;5. 分别用美蓝染液和碘液染色,观察酵母菌的死活细胞;6. 记录观察结果。
四、实验步骤1. 准备实验材料;2. 将酵母菌菌种接种于生理盐水中;3. 取一滴生理盐水滴于载玻片上;4. 滴加少量酵母菌悬液于生理盐水滴中;5. 盖上盖玻片,轻压使酵母菌均匀分布在载玻片上;6. 用显微镜观察酵母菌的形态和结构;7. 分别用美蓝染液和碘液染色,观察酵母菌的死活细胞;8. 记录观察结果。
五、实验结果1. 酵母菌呈圆形、椭圆形或卵圆形,细胞壁较厚,细胞核较大,细胞质均匀;2. 酵母菌的死活细胞可通过染色区分,活细胞呈蓝色,死细胞呈紫色。
六、实验讨论1. 酵母菌的形态和结构对其繁殖和代谢具有重要意义;2. 通过显微镜观察,可以直观地了解酵母菌的形态和结构;3. 美蓝染液和碘液染色可以帮助我们区分酵母菌的死活细胞;4. 本实验为观察酵母菌的基本形态和结构提供了有效的方法。
七、实验结论通过本次实验,我们掌握了显微镜观察酵母菌的方法,了解了酵母菌的基本形态和结构,以及酵母菌的死活细胞区分方法。
实验结果表明,酵母菌呈圆形、椭圆形或卵圆形,细胞壁较厚,细胞核较大,细胞质均匀,活细胞呈蓝色,死细胞呈紫色。
这对于我们进一步研究酵母菌的生物学特性具有重要意义。
八、实验建议1. 在实验过程中,应注意无菌操作,避免污染;2. 观察酵母菌时,可适当调整显微镜的焦距,以便更清晰地观察;3. 可增加实验次数,以提高实验结果的可靠性;4. 进一步研究酵母菌在不同生长条件下的形态和结构变化。
一、实验目的1. 认识酵母菌的形态结构,了解其基本特征。
2. 掌握酵母菌的观察方法,包括制片、染色、显微镜观察等。
3. 学习酵母菌的繁殖方式,如出芽生殖和有性生殖。
二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌,具有典型的真菌特征。
在显微镜下观察,酵母菌呈卵圆形、圆形或椭圆形,细胞壁厚,细胞核明显,细胞质内有液泡和细胞器。
酵母菌的繁殖方式包括出芽生殖和有性生殖,其中出芽生殖是最常见的繁殖方式。
三、实验器材1. 酵母菌培养物2. 显微镜3. 载玻片、盖玻片4. 接种针5. 美蓝染液、中性红染液、碘液6. 无菌水、生理盐水7. 酒精灯、镊子、滴管四、实验步骤1. 制片(1)用接种针挑取少量酵母菌培养物,置于载玻片上。
(2)用无菌水将酵母菌稀释至适宜浓度。
(3)将稀释后的酵母菌滴在载玻片上,盖上盖玻片。
2. 染色(1)将制片放在染色缸中,用滴管加入适量的美蓝染液。
(2)将染色缸放入酒精灯上加热,使染液沸腾,持续约5分钟。
(3)染色结束后,用滴管加入适量的无菌水,冲洗掉多余的染液。
3. 显微镜观察(1)将染色后的制片放在显微镜下观察。
(2)先低倍镜观察酵母菌的整体形态,如大小、形状、颜色等。
(3)再换用高倍镜观察酵母菌的细胞核、液泡、细胞壁等结构。
4. 酵母菌繁殖方式观察(1)观察酵母菌的出芽生殖过程,记录芽的产生、生长、分离等情况。
(2)观察酵母菌的有性生殖过程,如接合、子囊孢子的形成等。
五、实验结果与分析1. 酵母菌的形态观察结果显示,酵母菌呈卵圆形、圆形或椭圆形,细胞壁厚,细胞核明显,细胞质内有液泡和细胞器。
2. 酵母菌的繁殖方式(1)出芽生殖:观察到酵母菌在细胞的一端产生芽,芽逐渐增大,最终与母细胞分离,形成独立的菌体。
(2)有性生殖:观察到酵母菌通过接合产生子囊孢子,子囊孢子在适宜条件下萌发,形成新的酵母菌。
六、实验结论1. 通过本次实验,我们成功观察到了酵母菌的形态结构,了解了其基本特征。
2. 掌握了酵母菌的观察方法,包括制片、染色、显微镜观察等。
实验二酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别一、实验目的与要求观察酵母菌的形态及出芽生殖方式;学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。
二、基本原理1.单个的酵母菌合同是常见细菌的几倍甚至几十倍。
为单细胞,呈圆形,卵形或椭圆形,内有细胞核,液泡和颗粒体物质。
有的种类能产生子囊孢子或掷孢子、冬孢子、担孢子等。
有的种类一定条件下形成假菌丝或真菌丝。
大多数采取出芽方式进行无性繁殖,也可通过结合产生子囊孢子进行有性生殖。
2.酵母菌在液体培养基中生长时,能利用其中的可发酵型糖,并产生气体,有些产生挥发性的酯香味,菌体可沉于管的底部或悬浮在培养液中,或漂浮在培养液省形成菌膜或菌醭(分析一下为什么)。
当其生长在固体培养基上时,菌落形态与细菌相似,但较大较厚,呈乳白色或红色,表面湿润、粘稠,易被挑起。
随时间延长,菌落颜色往往变暗,有些菌落边缘呈皱褶状。
3. 由于细胞个体大,采取涂片的方法制片有可能损伤细胞,一般通过美蓝染液水浸法或水-碘液浸片法来观察酵母菌形态及出芽生殖方式。
美兰对细胞无毒,其氧化型呈蓝色,还原型呈无色。
由于细胞的新陈代谢,,活细胞内有较强还原能力,使美兰由氧化型转变为无色的还原型,染色后活细胞呈无色。
死细胞或代谢能力微弱的衰老细胞内还原力弱,染色后细胞呈蓝色或淡蓝色。
三、实验材料1.酵母液体培养物和斜面培养物。
2.吕氏碱性美兰染液,革兰氏染色用碘液。
3.仪器和其他用品四、方法步骤1.制片先在载玻片中央滴加一滴0.1%吕氏碱性美蓝染液,再滴加少量水稀释。
无菌操作取试管中培养的酵母菌少许,放在吕氏碱性美蓝染液中,使菌体与染液均匀混合。
用镊子夹盖玻片一块,小心地盖在液滴上。
2.镜检将制好的水浸片放置3分钟后镜检。
先用低倍镜,再用高倍镜,观察酵母菌的形态和出芽情况,同时可以根据是否染上颜色来区别死、活细胞。
染色30分钟后再次观察,注意死活细胞比例是否发生变化。
用0.05%染液作对照同时进行上述实验。
五、注意事项1.用接种环将菌体与染液混合式不要剧烈涂抹,以免破坏细胞。