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Agilent 1200高效液相色谱培训材料使用说明书

Agilent 1200高效液相色谱培训材料使用说明书

Agilent 1200 LC[Agilent Chemstation B.04.02 Classic (中文)]现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部一、 目录二、 培训目的 (3)三、 培训准备 (3)1. 仪器准备 (3)2. 溶剂准备 (3)四、 方法建立 (3)1. 开机准备 (3)2. 数据采集方法编辑 (5)9 G1310A(单元泵) (5)9 G1312A，G1312B XL(二元泵)/G1311A(四元泵)： (7)9 G1313A(标准型自动进样器)，G1329A/B(自动控温自动进样器) (8)9 G1367B/C/D(高性能自动进样器) (9)9 G1328A(手动进样器) (11)9 G1316A,G1316B XL(柱温箱) (11)9 G1314A/B/D/E,G1314C XL(可变波长紫外检测器) (13)9 G1315B/D ,G1315C XL(二极管阵列检测器)/ G1365B/D ,G1365C XL(多波长紫外检测器) (15)9 G1362A(示差检测器) (17)9 G1321A(荧光检测器) (19)9 G4218A(蒸发光散射检测器) (23)3. 数据分析方法编辑 (25)9 谱图优化 (25)9 积分参数优化 (25)9 校正 (27)9 打印报告 (28)9 光谱 (29)4. 建立全新完整方法向导 (31)9 新建完整方法： (32)9 保存方法： (36)9 保存即时改变的方法 (36)9 调用方法： (36)5. 进样 (36)9 单针进样 (36)9 序列进样 (37)五、 关机 (37)1. 关闭检测器的灯 (41)2. 冲洗系统 (41)3. 封存色谱柱 (41)4. 关闭电脑 (41)5. 关闭模块 (41)六、 RRLC(快速液相)注意事项 (41)七、 Agilent 1200保养维护 (43)八、 Agilent 1200常见问题解决方法 (45)二、 培训目的9基本了解1200LC硬件操作。

安捷伦1100培训手册

安捷伦1100培训手册
使用均一的载体 仔细填充柱子 选择粒度小的载体 优化流速 减小进样量 降低系统死体积 降低输出回路响应时间
No.24
第二章 HPLC 仪器工作原理
本章内容：
•往复活塞泵的结构及工作原理 •手动进样器（六通阀）结构及工作原理 •常见检测器检测原理
No.25
溶剂传输系统
往复活塞泵(单向阀)
Gold Seal Sapphire Insert Ruby Ball Spring Insert
60℃
0
5 Time in Minutes
10
No.14
柱效
Detector Response Inject
低柱效
高柱效
Time
No.15
计算柱效
tR
Inject
W 1/2
W Time
B
N = 16
t R WB L N
2 = 5.54
t R W 1/2
2
HETP =
No.16
扩散
范德姆特方程 The Van Deemter Equation
150 4.0
100 3.0 2.0
50
1.0
10
No.6
高效液相色谱 (HPLC)
进样口 混合器 泵 色谱图 色谱柱
检测器
溶剂
No.7
液相色谱类型
Types of Compounds Separated Neutrals Weak Acids Weak Bases
Mode
Stationary Phase
No.31
Necessity for More than One Detector
Selectivity
Flecainide in Serum

安捷伦液质联用培训教材(中文版)

安捷伦液质联用培训教材(中文版)

=安捷伦 G6300 系列LC/MSD Trap现场培训教材质谱数据系统毛细管电泳液相色谱气相色谱注意包含在该文件中的信息将可能在未通知的情况下改变。

安捷伦科技有限公司不对与该材料有关的任何活动做担保。

这些活动包括但不仅限于为了某特殊目的而进行的销售和适应性。

安捷伦科技有限公司将不会对包含在材料里的与装备，表现和材料使用有关的错误或导致的损失负责。

这份文件中的任何部分都不得拷贝或复制或未经安捷伦科技公司的预先允许进行翻译。

安捷伦科技有限公司售后服务电话：800-8203278手机用户：400-8203278中文网站：/chem/cn2007年6月G6300A 系列离子阱软件概述以及开机关机操作仪器硬件概述1.1典型配置1.2仪器原理简介1.2.1离子阱的主体包含一个环电极和两个端电极，环电极和端电极都是绕Z轴旋转的双曲面，并满足r20=2Z20（ r0为环形电极的最小半径，Z0为两个端电极间的最短距离）。

射频电压V rf加在环电极上，两个端电极都处于零电位。

1.2.2与四极杆分析器类似，离子在离子阱内的运动遵循马修方程，也有类似四极杆分析器的稳定图。

在稳定区内的离子，轨道振幅保持一定大小，可以长时间留在阱内，不稳定区的离子振幅很快增长，撞击到电极而消失。

离子阱的操作只有射频RF电压，没有直流DC电压，因此离子阱的操作只对应于稳定图上的X轴。

对于一定质量的离子，在一定V rf下，不同质量数的离子按照m/z由小到大在稳定图的X轴上自右向左排列。

当射频电压从小到大扫描时，排在稳定图上的离子自左向右移动，振幅逐渐加大，依次到达稳定图右边界，从离子阱中抛出，经过高能打拿极然后由电子倍增器检测。

1.3仪器硬件概述1.3.1离子源1.3.2离子源原理1.3.3仪器构造-示意图1.3.4 仪器构造-实物离子阱整体离子阱分解图1.3.5 LC-MSD Trap 的典型操作模式（以MS2为例）：首先样品组分通过LC 进行分离，然后通过大气压电离源电离产生离子，离子阱在电场作用下，通过离子电荷控制（ICC ）在阱中进行离子累积存储一定数量的离子，然后通过扫描隔离掉低于目标离子质量数的离子，通过在端电极上施加附加电场排除掉阱中高于目标质量数的离子，这个过程为Isolation ，接下来通过在端电极上施加特定离子的共振波形，使其与He 碰撞导致离子内能增加而使离子碎裂，此过程称之为Fragmenation 或CID ，最后在离子阱上扫描Rf 电压得到二级质谱。

安捷伦液质联用培训教材(中文版)

安捷伦液质联用培训教材(中文版)

=安捷伦 G6300 系列LC/MSD Trap现场培训教材质谱数据系统毛细管电泳液相色谱气相色谱注意包含在该文件中的信息将可能在未通知的情况下改变。

安捷伦科技有限公司不对与该材料有关的任何活动做担保。

这些活动包括但不仅限于为了某特殊目的而进行的销售和适应性。

安捷伦科技有限公司将不会对包含在材料里的与装备，表现和材料使用有关的错误或导致的损失负责。

这份文件中的任何部分都不得拷贝或复制或未经安捷伦科技公司的预先允许进行翻译。

安捷伦科技有限公司售后服务电话：800-8203278手机用户：400-8203278中文网站：/chem/cn2007年6月G6300A 系列离子阱软件概述以及开机关机操作仪器硬件概述1.1典型配置1.2仪器原理简介1.2.1离子阱的主体包含一个环电极和两个端电极，环电极和端电极都是绕Z轴旋转的双曲面，并满足r20=2Z20（ r0为环形电极的最小半径，Z0为两个端电极间的最短距离）。

射频电压V rf加在环电极上，两个端电极都处于零电位。

1.2.2与四极杆分析器类似，离子在离子阱内的运动遵循马修方程，也有类似四极杆分析器的稳定图。

在稳定区内的离子，轨道振幅保持一定大小，可以长时间留在阱内，不稳定区的离子振幅很快增长，撞击到电极而消失。

离子阱的操作只有射频RF电压，没有直流DC电压，因此离子阱的操作只对应于稳定图上的X轴。

对于一定质量的离子，在一定V rf下，不同质量数的离子按照m/z由小到大在稳定图的X轴上自右向左排列。

当射频电压从小到大扫描时，排在稳定图上的离子自左向右移动，振幅逐渐加大，依次到达稳定图右边界，从离子阱中抛出，经过高能打拿极然后由电子倍增器检测。

1.3仪器硬件概述1.3.1离子源1.3.2离子源原理1.3.3仪器构造-示意图1.3.4 仪器构造-实物离子阱整体离子阱分解图1.3.5 LC-MSD Trap 的典型操作模式（以MS2为例）：首先样品组分通过LC 进行分离，然后通过大气压电离源电离产生离子，离子阱在电场作用下，通过离子电荷控制（ICC ）在阱中进行离子累积存储一定数量的离子，然后通过扫描隔离掉低于目标离子质量数的离子，通过在端电极上施加附加电场排除掉阱中高于目标质量数的离子，这个过程为Isolation ，接下来通过在端电极上施加特定离子的共振波形，使其与He 碰撞导致离子内能增加而使离子碎裂，此过程称之为Fragmenation 或CID ，最后在离子阱上扫描Rf 电压得到二级质谱。

最新安捷伦高效液相色谱工作站高级操作培训ppt课件

最新安捷伦高效液相色谱工作站高级操作培训ppt课件
• 从 Integration 菜单选择积分或自动积分 • 选择积分工具。 • 运行一个包括数据分析的完整方法。
Slide 54
自动积分
•检查开始和结束区域，确定噪音。 •赋予初始Slope Sensitivity和Height Reject值. •对第一次积分赋予一个临时峰宽值。 •设置Area Reject为0。 •执行测试性积分，有可能重复几次。 •基于较早洗脱出的色谱峰宽计算峰宽值。 •优化Slope Sensitivity和Height Reject。 •从初始的峰宽和噪音水平计算Area Reject。
Slide 34
泵的辅助功能
选择Instrument More Pump Auxiliary…菜单，即 可弹出下图窗口。
在该窗口可以设置泵 的最大升流速率、泵 冲程大小以及设置溶 剂的压缩补偿因子。
Slide 35
自动进样器的扩展功能
Slide 36
色谱柱信息的输入
Slide 37
VWD停泵扫描采集光谱
Slide 59
Peak width: (半峰宽)
如果没有设置半峰宽的时间积分表，半峰宽在整个积分过程中自动变化，变化 遵从0.75×exiting peak + 0.25×current peak。
Timed Events :(时间性积分事件)
•Area Sum ON or OFF:设定某一时间段内进行峰面积加和，加和后保 留时间被分配到第一个峰的保留时间上。
使用VWD停泵扫描的功能，可以采集样品的吸收光谱， 主要操作步骤如下： 1.在Online工作站界面的View菜单下打开VWD Scans窗口； 2.按照正常的进样方式采集样品色谱数据，并保证能够在
Online Signal窗口中观测到色谱信号； 3.进样后，色谱图上出现基线时，扫描空白吸收光谱

GAgilent 1100制备液相现场培训教材

GAgilent 1100制备液相现场培训教材

Agilent 1100 LC制备液相　现场培训教材　安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部　一、　培训目的：　 ● 基本了解１１００ＬＣ硬件操作。

　 ● 掌握化学工作站的开机，关机，参数设定，学会数据采集，数据分析的基本操作。

二、　培训准备：　１、仪器设备：　Ａｇｉｌｅｎｔ　１１００制备液相　● Ｇ１３６１Ａ　：（单元泵）；Ｇ１３９１Ａ（梯度泵）。

　● Ｇ１３１３Ａ（自动进样器）。

　● Ｇ１３１６Ａ（柱温箱）。

　● Ｇ１３１５Ａ／Ｂ　（ＤＡＤ／ＭＷＤ检测器）。

　● Ｇ１３６４Ａ／Ｂ／Ｃ／Ｄ（馏份收集器）。

　● 色谱柱： ２、溶剂准备：　● 色谱级纯或优级纯乙腈（ＡＣＮ）或甲醇。

　● 二次蒸馏水　第　2　页基本操作步骤：　　（一）、开机：　 １、打开计算机，进入Ｗｉｎｄｏｗｓ　ＮＴ　（或Ｗｉｎｄｏｗｓ　２０００）画面，并运行Ｂｏｏｔｐ　Ｓｅｒｖｅｒ程序。

２、打开　１１００　ＬＣ　各模块电源。

　３、待各模块自检完成后，双击Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ　１　Ｏｎｌｉｎｅ图标，化学工作站自动与１１００ＬＣ通讯，进入的工作站画面如下所示。

　 ４、从“Ｖｉｅｗ”菜单中选择“Ｍｅｔｈｏｄ　ａｎｄ　Ｒｕｎ　ｃｏｎｔｒｏｌ”画面，　单击”Ｖｉｅｗ”菜单中的“Ｓｈｏｗ　Ｔｏｐ　Ｔｏｏｌｂａｒ”，“Ｓｈｏｗ　ｓｔａｔｕｓ　ｔｏｏｌｂａｒ”，“Ｓｙｓｔｅｍ　ｄｉａｇｒａｍ”，”Ｓａｍｐｌｉｎｇ　ｄｉａｇｒａｍ”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。

　 ５、把流动相放入溶剂瓶中。

　 ６、打开Ｐｕｒｇｅ阀。

（工作站软件上打开Ｐｕｒｇｅ阀）　 ７、单击Ｐｕｍｐ图标，出现参数设定菜单，单击Ｓｅｔｕｐ　ｐｕｍｐ选项，进入泵编辑画面。

　 ８　、设Ｆｌｏｗ：５ｍｌ／ｍｉｎ，单击ＯＫ。

　 ９、单击Ｐｕｍｐ图标，出现参数设定菜单，单击Ｐｕｍｐ　ｃｏｎｔｒｏｌ选项，选中Ｏｎ，单击ＯＫ，则系统开始Ｐｕｒｇｅ，直到管线内（由溶剂瓶到泵入口）无气泡为止，切换通道继续Ｐｕｒｇｅ，直到所有要用通道无气泡为止。

(2024年)安捷伦气相色谱仪7890b培训精品课件

(2024年)安捷伦气相色谱仪7890b培训精品课件
数据处理中的疑难问题解答
解答在数据处理过程中遇到的疑难问题，如基线漂移、峰形异常等 。
软件操作技巧与优化建议
分享软件操作的高级技巧和优化建议，帮助用户更熟练地使用软件 并提高工作效率。
15
04
实验设计与优化策略探讨
2024/3/26
16
样品前处理方法研究
样品前处理的目的和意义
去除干扰物质，提高检测灵敏度和准确性。
详细讲解检测器的使用注意事项、日常维护和故 障排除方法，以确保检测器的稳定性和可靠性。
2024/3/26
11
03
软件操作与数据处理方法
2024/3/26
12
软件安装及界面介绍
2024/3/26
软件安装步骤详解
01
包括安装前的准备工作、安装过程中的选项设置以及安装后的
配置和测试。
界面布局与功能介绍
3
气相色谱仪发展历史
1950年代
气相色谱仪的雏形出现，主要应用于 易挥发有机化合物的分离和分析。
1960-1970年代
1980年代至今
计算机技术的引入使得仪器自动化、 智能化程度不断提高，同时多维色谱 、联用技术等的发展进一步拓展了气 相色谱仪的应用范围。
随着填充柱和毛细管柱技术的发展， 气相色谱仪的分离效能和检测灵敏度 得到显著提高。
2024/3/26
8
进样系统结构及功能
进样器类型
介绍7890b配备的进样器类型， 如自动进样器和手动进样器，以
及各自的特点和适用范围。
2024/3/26
进样针与进样口
详细讲解进样针的选择、清洗和更 换方法，以及进样口的结构、功能 和温度控制等要点。
进样参数设置
阐述如何根据实验需求设置进样量 、进样速度、进样口温度等关键参 数，以确保分析的准确性和重复性 。

安捷伦6400系列液相色谱-三重串联四级杆质谱联用仪 现场培训手册-201006x

安捷伦6400系列液相色谱-三重串联四级杆质谱联用仪 现场培训手册-201006x
3. 基本操作 ..................................................................................................................................9 1) 开机 ......................................................................................................................................9 2) 关机 ......................................................................................................................................9 3) Masshunter 采集软件介绍................................................................................................12 4) 调谐 ....................................................................................................................................15 5) LCMS 方法设定（1200 部分） .........................................................................................17 6) LCMS 方法设定（1290 部分） .........................................................................................18 7) LCMS 方法设定（QQQ 部分） .........................................................................................22 8) 运行单个样品 ....................................................................................................................24 9) 运行序列样品 ....................................................................................................................25 10) 定性分析........................................................................................................................29 11) 定量分析........................................................................................................................34

安捷伦内部工作液相色谱讲座ppt

安捷伦内部工作液相色谱讲座ppt
终止漏液传感器检测功能agilent110012001260柱温箱器日常维护故障诊断59agilent11001200dad紫外检测器g1315agilent110012001260紫外检测器工作原理agilent11001200可变波长紫外检测器g131460agilent110012001260紫外检测器工作原理agilent11001200dad紫外检测器g131561反射镜1反射镜2光源透镜滤光片钬玻璃遮光入射狭缝光栅分光器参比光电二极管数模转换板样品光电二极管数模转换板流通池agilent110012001260紫外检测器工作原理agilent11001200可变波长紫外检测器g131462泄漏在检测器中出现泄漏检漏系统利用两个温度传感器泄漏传感器和安装在主板上的温度补偿传感器进行泄漏运算以此发出的信号来判断是否存在泄漏
为重力流出，脱气机或溶剂过滤头堵塞时，溶剂会流出不畅或不流出。
－查看过滤器是否变色． －临时取下过滤器，检查柱前压力是否正常． 清洁溶剂过滤器 －将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。先用水冲洗残留之溶剂然后将过滤 器放在装有浓硝酸 （35％）的烧杯里浸一小时。 －用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器。建议不使用超声波清洗机清洗。 －将过滤器重新装好。 －建议定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶，每三个月至少清洗一次。 注意：不要使用没有安装溶剂过滤器的系统．可能会严重堵塞系统
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Agilent 四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断
当泵头安装有冲洗附件时，由于该附件中也有密封垫，这样就会增加 活塞杆运动时的阻力。所以开泵前一定要用10％异丙醇，并将其流速 调至约20滴/分钟使这溶液流过冲洗装置。
10％异丙醇有助于降低水的表面张力，并有抑菌作用。不要用其它溶 剂代替。 当泵头安装有冲洗附件而不使用，会使密封垫及活塞杆的寿命减短。

安捷伦液相操作培训

安捷伦液相操作培训

色谱的优点（HPLC vs GC）
分离机理
HPLC •固定相和流动相都 参与
检测器
HPLC •大多数常见的紫外-可 见光检测器 •宽范围的非破坏性的检 测器 •三维检测器 •灵敏度达到f克（取决于 检测器） GC •通常使用FID检 测器，常用于有 机化合物
GC •流动相只作为样 品的载体
HPLC分类
• 高效液相色谱 High Performance Liquid Chromatography (HPLC) • 气相色谱 Gas Chromatography (GC)
• 薄层色谱
Thin-Layer Chromatography (TLC) • 毛细管电泳 Capillary Electrophoresis(CE)
安捷伦液相色谱操作培训
---基础知识
杨毅青Biblioteka 第一部分 色谱基础知识色谱的起源
色谱的定义
• 色谱法：利用组分在两相间分配系数不同而进行 分离的技术 • 流动相：携带样品流过整个系统的流体 • 固定相：静止不动的一相，色谱柱
色谱是一种分离技术 色谱的主要目的是对混合物中的
目标物分离和定量
色谱的分类
色谱的优点（HPLC vs GC）
样品挥发性
HPLC •不需要具有挥发性 •样品必须溶解于流 动相中 GC •样品必须具有挥发 性
样品极性
HPLC •既能分离极性化 合物也能分离非 极性化合物 GC •样品是极性或非极 性
色谱的优点（HPLC vs GC）
样品的热不稳定性
HPLC •必须在室温或室温 以下分析 GC •样品必须能够通 过高温进样口和色 谱柱
色谱类型 固定相 流动相 主要适用范围
正相色谱

安捷伦液相高级操作培训课件

安捷伦液相高级操作培训课件
化学工作站Views菜单
显示当前日记本，察 看错误信息等内容
Full menu/short menu切换
2005-3-212020/3/28
Slide 5
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
化学工作站的Change Access Level功能
如果要使用密码保护化学工作 站，请选中此选项。
化学工作站Scheduler的使用
Result栏中可以显示化学工作站执行 Command的结果
2005-3-212020/3/28
Slide 8
文档仅供参考，不能作为科学依据，请勿模仿；如有不当之处，请联系网站或本人删除。
选择在线信号
从 View菜单, 选择 Online Signals, 单击 Change，在Edit Signal Plot窗
第一章 化学工作站各个工作界面介绍
2005-3-212020/3/28
Slide 3
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化学工作站各个工作界面的切换
切换工作界面
2005-3-212020/3/28
Slide 4
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第三天
上午：1 个性化报告的设定与编辑 2 工作站故障诊断功能的应用 3 结业考试
结业午餐
下午：1 化学工作站的重新安装、配置及启动(选修) 2 发结业证 3 自由练习、讨论
2005-3-212020/3/28
Slide 2
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2005-3-212020/3/28

安捷伦气相色谱仪培训教材

安捷伦气相色谱仪培训教材

Agilent 7890/5975-GC/MSD (For 1701E02系列工作站)现场培训教材1安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部2培训目的● 初步了解Agilent 7890气相色谱仪和5975质谱仪的操作。

● 正确地执行仪器的开机、关机；初步掌握软件中有关仪器参数设定、分析方法的编辑、谱库检索及报告的打印。

注意事项:1.老化柱子分段老化。

按温度从低到高分段，程序升温老化。

这是最好的老化方法。

如HP-5柱，5-6℃/min至250℃，反复数次；再升至280℃，反复数次；接到MS上看基线情况。

270℃以后基线提高为正常。

再老化到300℃半小时。

无论何种方式，载气必须充足。

2.进样口用红色或灰色隔垫，可减少隔垫流失。

3.GC/MS接口处使用的垫圈是85%vesper材质 (5062-3508)。

注意安装方向(大的一端朝向质谱)。

4.新柱子安装时无方向性,但一旦使用过,不要再改变方向。

保存柱子时注意将两端密封好,避免水和空气破坏柱子内涂层仪器配置:341. 在操作系统桌面双击Config/配置图标进入仪器配置界面2. 如下图所示点击所要配置的仪器。

配置MSD 及GC ：以下采用中文工作站界面，英文工作站请参考相应位置及图标在出现的画面中输入仪器名称、序列号等信息后，在质谱仪一栏中选择MSD 的型号，并输入MSD 的IP 地址，选择DC 极性（标注于MSD 侧板的中部金属上部）；同样配置GC 后点击确定退出。

5配置完成后桌面上应出现“GCMS ”和“GCMS Data Analysis ”的图标（名称由配置时输入的仪器名称决定）。

如下图所示:开机1. 打开载气钢瓶（He）控制阀，设置分压阀压力至0.5Mpa2. 打开计算机，登录进入Windows XP系统。

3. 打开7890GC、5975MSD电源（若MSD真空腔内已无负压则应在打开MSD电源的同时用手向右侧推真空腔的侧板直至侧面板被紧固地吸牢），等待仪器自检完毕。

Agilent 1200制备 液相培训手册(操作手册)

Agilent 1200制备 液相培训手册(操作手册)

Agilent 1200 制备液相色谱 现场培训手册捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部培训目的•基本了解1200制备液相色谱硬件构成•了解制备液相色谱原理•掌握化学工作站中关于制备液相色谱部分的参数设定，馏分收集，数据分析等操作培训准备一．仪器设备：Agilent 1200制备液相色谱•分析级制备液相色谱G1322A（脱气机）；G1379B（微池脱气机）G1310A（单元泵）；G1312A，G1312B（二元泵）；G1311A（四元泵）G1329A（标准型自动进样器）；G1367A（微盘自动进样器）G1316A，G1316B（柱温箱）G1314B，G1314C（可变波长紫外检测器）G1315C，G1315D（二极管阵列检测器）G1365C，G1365D（多波长检测器）G1364C（分析级馏分收集器）•制备级制备液相色谱G1361A（制备泵）；G1391A（双制备泵，供梯度进样用）G2260A（标准制备型自动进样器）G2258A（双环自动进样器，可兼作分析/制备使用）G1383A（制备柱挂架）G1315C，G1315D（二极管阵列检测器，配合制备级流通池使用）G1365C，G1365D（多波长检测器，配合制备级流通池使用）G1364B（制备级型馏分收集器）二．色谱柱：•分析级制备液相色谱Zorbax Eclipse XDB-C18 150X4.6, 5um column) or equivalentP/N 993967-902 / 5063-6600•制备级制备液相色谱ZORBAX SB-C18, 50 mm x 9.46mm (846975-202) or equivalent三．溶剂及调试用样品准备：•色谱级纯度乙腈或者甲醇•二次蒸馏纯水•延迟体积校正用染料样品（G1946-85020）•LC用调试样品(01080-68704)注：本手册内涵盖的内容为制备液相模块的内容，其他模块如分析级泵，分析级自动进样器，柱温箱等，请参看安捷伦1200液相色谱现场培训手册等制备液相色谱原理一．什么是制备液相色谱？制备液相这一术语通常是和大容量色谱柱、高流速联系在一起的。

Agilent 1260 液相现场培训手册

Agilent 1260 液相现场培训手册

Agilent 12Agilent 1260 LC60 LCAgilent 12Agilent 12660 LC0 LC[Agilent OpenLAB 中文中文]中文中文现场培训教材现场培训教材现场培训教材现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部.lsca-c 800-820-3278 Agilent OpenLAB1 Agilent 1260 液相现场培训手册一、目录二、培训目的.................................................. . (3)三、培训准备.................................................. . (3)1. 仪器准备.................................................. . (3)2. 溶剂准备.................................................. . (3)四、方法建立.................................................. . (3)1. 开机准备.................................................. . (3)2. 数据采集方法编辑.................................................. (9)G1310A 单元泵 (9)G1312X 二元泵/G1311X 四元泵 (10)G1313A 标准型自动进样器，G1329B 自动控温自动进样器 (11)G1367E 高性能自动进样器 (12)G1328A 手动进样器 (14)G1316A/C 柱温箱 (15)G1314BC/E/F 可变波长紫外检测器 (15)G1315C/D ,G4212A/B 二极管阵列检测器/ G1365C/D 多波长紫外检测器 (17)G1362A 示差检测器 (18)G1321A 荧光检测器 (19)G4218A 蒸发光散射检测器 (21)3. 数据分析方法编辑.................................................. . (22)谱图优化.................................................. .. (22)积分参数优化.................................................. (23)校正.................................................. . (25)打印报告.................................................. .. (27)光谱.................................................. . (28)4. 建立全新完整方法向导 (30)5. 进样.................................................. . (30)单针进样.................................................. .. (30)序列进样.................................................. .. (31).lsca-c 800-820-3278 Agilent OpenLAB2 Agilent 1260 液相现场培训手册五、关机.................................................. . (33)1. 关闭检测器的灯.................................................. .. (33)2. 冲洗系统.................................................. .. (33)3. 封存色谱柱.................................................. . (33)4. 关闭电脑.................................................. .. (33)5. 关闭模块.................................................. .. (33)六、RRLC 快速液相注意事项.................................................. (33)七、特殊检测器的注意事项 (35)八、Agilent 1260 常见问题解决方法.................................................. . (37)附一、维护知识.................................................. .. (39)附二、注册OpenLAB CDS 许可证的流程.................................................. (41)****注意****注意：：********注意注意：：? ? 本教材仅适用于现场工程师培训讲解参考之用本教材仅适用于现场工程师培训讲解参考之用，，内容为工作站现内容为工作站现本教材仅适用于现场工程师培训讲解参考之用本教材仅适用于现场工程师培训讲解参考之用，，内容为工作站现内容为工作站现场培训的一般要求，场培训的一般要求，请根据用户的仪器配置及现场用户的需求进行相请根据用户的仪器配置及现场用户的需求进行相场培训的一般要求场培训的一般要求，，请根据用户的仪器配置及现场用户的需求进行相请根据用户的仪器配置及现场用户的需求进行相应的培训内容增删。

安捷伦1260高效液相色谱培训课件

安捷伦1260高效液相色谱培训课件
C、一般情况下色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱 可以反冲时，才可以反冲除去柱内杂质，否则反冲会 迅速降低柱效。
D、选择使用适宜的流动相（尤其是PH值），以避免固 定相被破坏。有时候可以在进样器前面连接一预柱， 分析柱是键合硅胶，预柱为硅胶，可是流动相在进入 分析柱之前预先被硅胶饱和，避免分析柱中的硅胶基 质被溶解。
概述
高效液相色谱法（HPLC）是20世纪60年 代末70年代初发展起来的一种新型分离分析技 术，随着不断改进与发展，目前已成为应用极 为广泛的化学分离分析的重要手段。它是在经 典液相色谱基础上，引入了气相色谱的理论， 在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏 度检测器，因而具备速度快、效率高、灵敏度 高、操作自动化的特点。
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E、避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接进入柱内， 需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一 个保护柱，保护柱一般是填有固定相的短柱，保护柱可以 经常更换。 F、经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质 G、保存色谱柱时应将色谱柱中充满乙腈或甲醇，柱接
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2、输液泵的使用和维护注意事项 A、防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其他任何杂质 微粒都能磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先 除去流动相中的任何固体微粒； B、流动相不应含有任何腐性物质含有缓冲液的流动相不应 保留在柱内，尤其是在停泵过夜或更长时间的情况下。如 果含有缓冲溶液的流动相在柱内，由于蒸发或泄漏，甚至 由于溶液的静置，就可能析出盐的微细晶体。这些晶粒将 损坏密封环和柱塞等。因此，仪器在关机前必须将泵清洗 干净，再换成适合色谱柱保存的和有利于泵维护的溶剂。 C、泵工作时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空 泵运转也会磨损柱塞、缸体或密封环，最终产生漏液。 D、输液泵的最高压力不要超过规定的最高压力值，否则会 使高压密封环变形。 E、流动相应该先脱气，以免在泵内产生气泡，影响流量的 稳定。

安捷伦液相色谱培训教材

安捷伦液相色谱培训教材
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意味着本次对该部分内容不进行编辑，使用原方法中设置的参数。还有，仪器参数 设置——四元泵的参数设置。1、停止时间：是仪器停止采集数据的时间，并不是 泵停止工作的时间。本例中工作站仅采集0～10分钟的色谱图，10分钟后，不再采 集数据，但泵仍然继续工作，向系统提供流动相。使用自动进样器
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特别是在VWD设置中更不可选特殊设置中勾选“当关灯时可进行分析”，不然我们 的实验操作就没有意义了。这是为什么，大家一想就知道啦。 还有，在运行时选项表中要注意的问题是，除非有特殊要求，一般不建议选择“保 存GLP数据”、“将方法和数据保存在一起”选项，GLP
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数据是最原始的数据，不允许改动。一般情 况下选择这两种选项只是浪费硬盘空间而已。 泵的设置方面，特别是梯度洗脱设置中建议 先预览一下，看看是不是我们想要的突变或 浙变效果。 数据分析中重点在于图谱的处理，以及如何 建立校正表。 有时我们得到的色谱图并不很理想，
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溶剂切换阀，则两个泵头可分别控制两种溶剂，类似四元比例阀，但并不完全一样， 只能同时混合两种溶剂，不可实现四种溶剂的同时使用。
二元泵为高压泵，为后混合式，精度更高，而且由于为高压混合，产生的气泡 也更少，所以价格也比四元泵贵得多。四元泵为低压泵，流速稳定性相对较差，低压 混合容易产生气泡，在实验中常会遇到这样的问题，多元
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这里还有一点得注意的是流通池的后压力非常重要，一定要使用适当出口连接管， 出口管线要使用专用废液管为系统提供适当的后压，不得私自将废液管截短，以防 气泡进入流通池。但如果压力过高，流通池的石英窗片可能破裂。
在这里我要说的是，对安捷伦1200高效液相色谱仪正确的操作方法和定期的维 护保养的是很重要的。

安捷伦液相色谱仪日常和维护和故障诊疗培训课件

安捷伦液相色谱仪日常和维护和故障诊疗培训课件
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Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断
防止堵塞溶剂过滤器
污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命，并且影 响泵的运行。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液 (pH 4 至 7) 中尤其如此。下 列建议 将会延长溶剂过滤器的使用寿命并维持泵的运行。
Agilent 四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断
如何更换活塞杆密封圈
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Agilent 四元／二元/单元泵日常维护,故障诊断
Agilent 1100/1200 系列泵使用须知
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入口主动阀
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Cartridge 8
出口单向阀
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Outlet Ball Valபைடு நூலகம்e
冲洗阀
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Purge Valve
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Active Inlet Valve
(common to all except 1050)
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1100/1200 HPLC 日常维护 & 故障诊断
Agilent 1100/1200系列 HPLC
工作原理 日常维护 故障诊断 技术支持＆服务流程
安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部
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混合中出现流动相不稳定的现象，特别是流动 相配比较低的如小于1%，其多元混合效果难以 达到我们的要求，造成保留时间漂移，甚至得 不到我们预期的色谱峰。明白四元泵的低压混 合的道理，实际操作中我们发现问题时，有助 于我们对原因的分析。
必要时泵可以拆御，更换密封垫及滤芯。 对容易出故障部位及处理方法，比如宝石
Agilent1200 高效液相色谱仪工作站 学习总结
生测室 颜栋林ຫໍສະໝຸດ 开首语本人在2008年1月8日至1月11日参加广州 安捷伦科技有限公司的1200高效液相色谱仪 化学工作站的学习培训，几天学习培训，使 我对1200液相色谱仪的硬件及软件有了更全 面的了解和更多的认识，现在做个总结向大 家介绍如下。
可以利用诊断方式来检测氘灯的能量，当然， 发现氘灯能量降低时不要马上得出氘灯应该更 换的结论，这也许是流通池脏或有气泡造成的 能量降低，所以必须用诊断方式检测流通池。 诊断结果大于0.6说明流通池很干净，小于0.2则 说明流通池该清洗了。更换氘灯后要在诊断日 志中填写更换氘灯，这样氘灯的使用时数便从 零开始。
第二步：使用进样器程 序（U）
第三步：更多信息（功能项）
对于手动进样器，必须了解六通阀的工作原理， 应特别注意的是进样量少于定量环的50%或大 于定量环的3-5倍量是比较准确的，不过，大家 用自动进样器已经习惯了，如果再用回手动进 样器会不会有些郁闷？会不会有一种坐惯了宝 马又要回到踩单车的感觉？
柱温箱，使用安捷伦柱温箱可以保证柱的稳 定性，从而保证了保留时间的重现性。恒定的 柱温特别是日温差大的时候更为必要。
检测器，安捷伦1200系列检测器有，可 变波长检测器G1314B、二极管阵列检测器 G1315B、二极管阵列检测器SL型G1315C、示 差折光检测器G1362A、荧光检测器G1321A。 本所用的是VWD的G1314B型，DAD型及FLD的就 不多说了。对VWD型检测器应了解它的工作原 理，氘灯的使用维护及更换。需要注意的是， 使用中不要频繁的开关氘灯，否则影响氘灯 的寿命。
四元泵的工作原理
二元泵，有两个泵头，特点是高压混合，无需 脱气；对于有强紫外吸收的流动相，使用静态 混合器可以降低基线噪声；可以选择溶剂切换 阀自动进行溶剂切换；对于高盐流动相，可选 择泵头密封垫清洗装置。所以脱气机不是标准 配置，但增加真空脱气机，流量范围可以从 0.5～5ml/min扩展至0.05～5ml/min；加入静态 混合器，使流动相混合更加均匀；如果配置
脱气机G1379B、标准真空脱气机G1322A。原理 基本相同，就是使用半透膜管路，允许气体分 子通过，液体分子无法通过。A型用的是微渗 管，B型用的是滤膜。流路A型是左进右出，而 B型为下进上出，本科室使用的为A型G1322A。 使用真空脱气机可以降低噪声，保证保留时间 的重现性，与He脱气相比，更方便，更节省费 用。
溶剂切换阀，则两个泵头可分别控制两种溶剂， 类似四元比例阀，但并不完全一样，只能同时 混合两种溶剂，不可实现四种溶剂的同时使用。
二元泵为高压泵，为后混合式，精度更高， 而且由于为高压混合，产生的气泡也更少，所 以价格也比四元泵贵得多。四元泵为低压泵， 流速稳定性相对较差，低压混合容易产生气泡， 在实验中常会遇到这样的问题，多元
硬件篇
安捷伦高效液相色谱仪1200由几部分 组成，脱气机，泵、进样器、柱温箱和检测器。 安捷伦1200HPLC系统采用积木式堆积结构，方 便用户按照自己的需要配置不同的的系统，整 个系统的流路自上而下设计、连接，减小了系 统的死体积和延迟体积。
Agilent 1200HPLC系统堆叠方式
脱气机 安捷伦1200系列在线脱气机有，微量真空
真空脱气机脱气原理
泵 安捷伦1200系列泵有： 单元泵：G1310A、 四元泵：G1311A、 二元泵：G1312A、 二元泵SL型：G1212B。
单独一个泵腔无法满足溶剂传输系统的要 求：连续性、稳定性都不符合标准，现在新购 仪器中已很少考虑。
单元泵，按溶剂的传输系统有两种，一种是并 联柱塞泵，另一种是串连柱塞泵。并联柱塞泵 由于两个泵的相位不同，可以补偿流量脉冲， 但由于单向阀的数量增多，所以容易造成泄漏， 增加了维护使用的难度。串连柱塞泵左泵腔的 活塞运动速度为右泵腔活塞的2倍，因此，相同 时间内，左泵提供的流量为右泵的两倍，左泵 提供的溶剂一半直接供给系统，另一半被右泵 吸入，稍后供给液相系统，减少了单向阀的用 量，可以使用压缩因子补偿。
地执行用户的进样程序要求，如多种样品自动 混合，自动进样等高级功能的自由设置，但是， 由于进样针的扩散，所以进样量越小，受到扩 散的影响也越大，所以自动混合的准确度还是 难以达到容量瓶的混合方式。这在做标准由线 时得注意的问题，如为定量则不推荐小样量的 混合方式。
程序进样方式设置如下图：
第一步：设置进样 器
活塞杆是不能超声的部件，泵头密封垫要成对 更换，实验室中至少应备有一付4号泵头密封 垫，部件号为：5663-6589（用于反相色谱）； 0905-1420（用于正相色谱）。同时实验室应备 有5-10个PTFE过滤芯，以备日常所需。判断方 法为，打开冲洗阀，以水为溶剂，流速 5ml/min，系统压力大于10bar就应更换过滤白 头了。
二元泵的工作原理
进样器，安捷伦1200系列进样器有： 标准自动进样器G1329A、 高性能进样器G1367A、 高性能进样器SL型G1367B、 手动进样器G1328B。
自动进样器的特殊功能，洗针功能可以把 样品残留降低到最小限度；多次吸液用于进样 量大于100μl的情况；程序进样可以非常灵活
四元泵，其实就是比单元泵多了四元比例阀。 由单元泵可以升级到四元泵，除了要加上四元 比例阀外，还要更换主板。需要注意的是，当 使用盐溶液和有机溶剂时，建议将盐溶液接到 四元比例阀下面的通道上，有机溶剂接到上面 的通道上。如果经常使用盐溶液，建议定期用 水冲洗所有的通道以去除阀口上可能出现的盐 沉淀。