氯霉素残留检测方法研究进展

氯霉素的不良反应及其残留检测方法研究进展高林【摘要】氯霉素存在严重的毒副作用,能抑制人体骨髓造血功能,引起人类的再生障碍性贫血,粒状白细胞缺乏症,新生儿、早产儿灰色综合症等疾病.低浓度的药物残留还会诱发致病菌的耐药性,对人类健康和环境构成严重危害.随着国际社会对氯霉素残留的高度关注,氯霉素的检测方法得到了广泛的研究,从最初的利用微生物进行定性检测到目前的各种先进检测技术的联用,如LC-MS等,氯霉素的检测限、精密度和回收率等技术都得到了极大提高.先进的检测技术不仅为人体的健康提供了安全保障,同时为我国的食品对外贸易发挥了巨大作用.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2010(031)004【总页数】6页(P90-95)【关键词】氯霉素;副作用;残留;检测【作者】高林【作者单位】通标标准技术服务,上海,有限公司,上海,200233【正文语种】中文【中图分类】Q81氯霉素(chloramphenicol,CAP),分子式为C11 H 12 C12 N2 O5,于 1947年从委内瑞拉链霉菌(Streptom yces venezuela)的培养滤液中分离出的结晶性抗菌素。

氯霉素的脂溶性高,可通过弥散进入细菌细胞内,可逆地结合在细菌核糖体的50 S 亚基上,阻断转肽酰酶的作用,干扰带有氨基酸的胺基酰-tRNA终端与50 S亚基结合,使肽链增长受阻,抑制肽链的形成,从而阻止蛋白质的合成。

氯霉素也可与70 S 核糖体进行可逆性结合,抑制线粒体的蛋白合成,对人体产生毒性。

因此氯霉素残留问题已引起国际组织和世界上许多国家和地区的高度重视,欧盟、美国等均在法规中规定CAP残留限量标准为“零允许量”[1]。

氯霉素残留检测方法的建立始于20世纪70年代,随着新技术的不断出现,氯霉素的检测方法有很多种,可分别为微生物法、化学分析法、免疫学检测法及其他分析方法。

1 氯霉素的不良反应1.1 对血液系统的影响氯霉素可引起骨髓造血机能紊乱。

一、实验目的本次实验旨在通过液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）对奶粉中的氯霉素残留进行定量检测，以确保奶粉的安全性，为消费者提供安全放心的乳制品。

二、实验原理氯霉素是一种广谱抗生素，主要用于治疗细菌感染。

但由于其潜在的毒副作用，我国对食品中氯霉素残留量有严格的限制。

液相色谱-串联质谱法是一种高效、灵敏、准确的检测方法，能够对奶粉中的氯霉素进行定量分析。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）市售奶粉；（2）氯霉素标准品（纯度≥99%）；（3）甲砜霉素标准品（纯度≥99%）；（4）氟甲砜霉素标准品（纯度≥99%）；（5）氯霉素氘代同位素内标（CAP-D5）标准溶液（浓度100微克/毫升）；（6）甲醇、乙腈（色谱纯）；（7）HLB固相萃取柱（200毫克，6毫升）；（8）0.22微米/13毫米尼龙针式滤头；（9）YP5002电子天平；（10）XEVO-TQ Scronos串联质谱联用仪；（11）Multi Vortex多样品涡旋混合器；（12）FV64全自动智能样品处理仪。

2. 实验仪器：（1）高效液相色谱仪（HPLC）；（2）串联质谱仪（MS/MS）；（3）超声波清洗器；（4）旋转蒸发仪；（5）固相萃取装置；（6）涡旋混合器；（7）电子天平；（8）高压恒温水浴锅。

四、实验方法1. 样品前处理（1）称取5.0g奶粉样品，加入10mL甲醇溶液，涡旋混合5min，超声提取30min；（2）过滤，取滤液5.0mL，加入2.0mL乙腈溶液，涡旋混合5min；（3）加入1.0g无水硫酸钠，涡旋混合1min；（4）过滤，取滤液，过0.22微米滤膜；（5）用HLB固相萃取柱净化，依次用5mL水和5mL甲醇溶液洗脱，收集洗脱液；（6）旋转蒸发至近干，用1.0mL甲醇溶液复溶解，涡旋混合5min，过0.22微米滤膜。

2. 标准曲线绘制（1）取氯霉素、甲砜霉素、氟甲砜霉素标准品，分别用甲醇溶液配制浓度为 1.0、5.0、10.0、20.0、50.0、100.0ng/mL的标准溶液；（2）取氯霉素氘代同位素内标标准溶液，用甲醇溶液配制浓度为1.0ng/mL的内标溶液；（3）将标准溶液与内标溶液按比例混合，涡旋混合5min；（4）取混合溶液，过0.22微米滤膜，按实验方法进行HPLC-MS/MS分析；（5）以氯霉素浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。

一、实验目的本实验旨在通过胶体金免疫层析法对食品中的氯霉素残留进行快速、准确的检测，为食品安全监管提供技术支持。

二、实验原理氯霉素残留检验实验采用胶体金免疫层析法，该方法基于抗原抗体特异性结合的原理。

当氯霉素样品与标记有抗氯霉素单克隆抗体的胶体金颗粒混合时，如果样品中含有氯霉素，则氯霉素会与抗氯霉素单克隆抗体结合，形成抗原抗体复合物。

复合物在层析膜上通过毛细作用向前移动，与固定在层析膜上的抗氯霉素抗体结合，形成金标记的抗原抗体复合物，最终在层析膜上形成两条色带：控制线（C）和测试线（T）。

如果样品中氯霉素浓度超过检测限，则在测试线上形成明显的色带；如果样品中氯霉素浓度低于检测限，则测试线上无色带。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）氯霉素标准品（2）阴性对照样品（3）阳性对照样品（4）氯霉素残留样品（5）胶体金免疫层析试纸条（6）试剂：缓冲液、洗涤液、封闭液等2. 实验仪器：（1）电子天平（2）恒温培养箱（3）移液器（4）微量加样器（5）一次性无菌手套四、实验方法1. 样品处理（1）准确称取氯霉素残留样品0.1g，加入1ml缓冲液，涡旋混匀，室温下放置10min。

（2）取1ml样品溶液，加入1ml洗涤液，涡旋混匀，室温下放置5min。

（3）重复步骤（2）两次。

2. 检测（1）取一条胶体金免疫层析试纸条，将样品加样孔浸入样品溶液中，室温下放置5min。

（2）取出试纸条，观察结果。

五、实验结果与分析1. 阳性对照实验阳性对照样品在测试线上形成明显的色带，说明试纸条的性能良好。

2. 阴性对照实验阴性对照样品在测试线上无色带，说明试纸条对阴性样品具有良好的检测效果。

3. 样品检测根据实验结果，氯霉素残留样品在测试线上形成明显的色带，说明样品中氯霉素残留量超过检测限。

六、实验结论本实验采用胶体金免疫层析法对食品中的氯霉素残留进行检测，结果表明该方法具有快速、简便、准确的特点，适用于食品中氯霉素残留的现场快速检测。

氯霉素在畜禽体内残留问题的研究进展作者：王秀杨新立孟勇来源：《湖南饲料》 2010年第5期王秀杨新立孟勇（山东省无棣县畜牧局251900）摘要：氯霉素是第一个人工合成的广谱抗生素，因其效价高，价格低廉，在我国畜牧业中得到广泛应用，成为畜禽疾病防治的重要药物。

随着氯霉素的广泛应用和研究，发现其有毒、副作用。

这就使其在动物组织中的残留引起极大重视。

本文就目前此类药物残留的研究情况作一综述。

关键词：氯霉素；畜禽；残留1．概述1.1 氯霉素简介氯霉素(chloramphenicol，CAP)是对革兰氏阳性、阴性细菌均有抑制作用的广谱抗生素，1947年首次从链丝菌的培养液中提取而得到的抗生素。

氯霉素的化学名称为D-苏式一对硝基苯基-1-二氯乙酰基-1-3丙二醇，分子式为CIIH12CI4N205，分子量为323.13。

氯霉素是白色的针状或片状晶体，味极苦，性质极稳定。

水中微溶(0.25%)，但易溶于甲醇、丙醇、乙酸乙酯等有机溶剂水溶剂呈中性反应，在pHl0以上可失去活性。

本品耐热，水溶液煮沸5h也不失效，由于其结构中有发色基团存在，在275-280nm处有最大吸收峰，故可直接用紫外检测器检测。

1.2氯霉素的作用 1948-1949年确定其结构后，即通过化学合成方法大量生产，它是第一个可用人丁合成的抗生素。

对其敏感的细菌有大肠杆菌、产气杆菌、伤寒杆菌、流感杆菌、沙门氏菌、布氏杆菌、巴氏杆菌、克雷伯氏杆菌、胎．孤菌等，大部分敏感菌株可被l-lOug/ml的浓度所抑制。

本品抗革兰氏阳性球菌的作用不如青霉素的四环素类，对绿脓杆菌及真菌无效，但对部分衣原体、立克次氏体有作用。

氯霉素内服吸收良好，约2h达血药峰浓度，有效血药浓度( 5ug/ml)可持续6-lOh。

猪、犬单剂量内服。

50ug/ml，有效血药浓度维持时间可达lOh，若剂量低于30mg/kg则达不到最低有效效果。

肌注给药，吸收较慢，主要在局部滞留。

静脉给药，在各种动物体内的药动力学参数存在较大的种属差异。

动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定引言动物源性食品中的药物残留是一个备受关注的话题，氯霉素类药物残留受到了特别的关注。

氯霉素是一种广谱抗菌药物，常用于动物的治疗和预防疾病。

如果动物身上残留了氯霉素，会对人体健康造成潜在的危害。

对动物源性食品中氯霉素类药物残留量的准确测定具有重要意义。

一、氯霉素类药物残留的危害氯霉素类药物是一类广谱抗菌药物，可以用于预防和治疗动物身上的细菌感染。

如果动物身上残留了氯霉素类药物，会对人体健康构成危害。

长期食用含有氯霉素类药物残留的动物源性食品，可能会导致人体对抗菌素的耐药性增加，从而降低治疗感染的疗效。

氯霉素类药物还可能对人体的造血系统和免疫系统产生负面影响，引起贫血、白细胞减少等症状。

对动物源性食品中氯霉素类药物残留量的监测和控制至关重要。

二、氯霉素类药物残留的测定方法为了准确、快速地测定动物源性食品中的氯霉素类药物残留量，科研人员们进行了大量的工作，研究出了多种灵敏、准确的测定方法。

目前常用的氯霉素类药物残留测定方法包括高效液相色谱法、毛细管电泳法、气相色谱-质谱联用法等。

这些方法能够对动物源性食品中的氯霉素类药物残留进行定量测定，并具有操作简便、快速准确的特点。

三、氯霉素类药物残留的监管和控制针对动物源性食品中的药物残留问题，各国都制定了相关的监管标准和控制措施。

监管部门通常会制定动物源性食品中氯霉素类药物残留的最大残留限量（MRL），以确保食品安全和人体健康。

兽医和畜牧养殖户也需要严格按照兽药使用规范，合理使用药物，避免残留超标的情况发生。

四、结语动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定是食品安全领域的重要课题，对于保障食品安全、维护人体健康具有重要意义。

科研人员们将继续努力，研究出更加灵敏、准确的氯霉素类药物残留测定方法，为监管部门提供科学依据，保障人体健康。

广大兽医和养殖户也需要严格按照相关规定，合理使用药物，做好动物源性食品中氯霉素类药物残留的控制工作。

动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定【摘要】本文主要研究动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定方法。

在介绍了研究背景和研究意义。

在详细阐述了氯霉素类药物的概述、残留量分析方法、样品前处理方法、检测技术和常见的测定技术。

结论部分总结了本研究成果，并展望了未来研究方向。

通过本文的研究，可以为动物源性食品中氯霉素类药物残留量的快速准确检测提供参考，保障食品安全与消费者健康。

【关键词】动物源性食品、氯霉素类药物、残留量、测定、样品前处理、检测技术、研究总结、研究背景、研究意义、未来研究方向1. 引言1.1 研究背景动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定是食品安全领域的重要研究内容。

氯霉素是一类广泛应用于动物养殖中的抗生素，用于治疗疾病和促进生长。

过量的氯霉素残留在食品中会对人体健康造成潜在风险，包括导致抗药性细菌的产生和对人体造成过敏等不良影响。

对动物源性食品中的氯霉素类药物残留量进行准确测定具有重要意义。

目前，随着人们对食品安全的重视程度不断提高，相关部门对氯霉素类药物残留量的监测和控制工作也日益加强。

由于氯霉素类药物的特殊性和复杂性，其残留量的测定仍然存在一定的挑战。

开展对氯霉素类药物残留量测定方法的研究和探索具有重要意义，可以为确保食品安全提供科学依据和监测手段。

1.2 研究意义在动物源性食品中药物残留的问题一直备受关注，而氯霉素类药物残留是其中一个重要的方面。

氯霉素类药物是一类广泛使用的抗生素，其残留会对人体健康造成潜在危害。

对动物源性食品中氯霉素类药物残留量进行准确测定具有重要的意义。

研究氯霉素类药物在动物食品中的残留量可以帮助监管部门对食品安全进行有效监控。

及时发现并控制氯霉素类药物残留超标的食品，可以有效保护消费者的健康。

研究氯霉素类药物在动物食品中的残留量可以帮助提高食品生产者的生产技术水平。

了解残留量的测定方法和技术可以帮助食品生产企业规范生产过程，减少药物残留在食品中的可能性，提高食品的质量。

氯霉素在动物体内残留问题的研究进展作者：张金玲来源：《农业与技术》2013年第06期摘要：随着人们生活质量的提高，以及对氯霉素研究的不断深入，氯霉素抗生素作为饲料添加剂应用于食品动物生产受到了广泛质疑，氯霉素在动物体内残留问题也十分严重。

氯霉素对体内造血系统的毒性极大，能使白细胞减少，特别是杀伤颗粒性白细胞，影响红细胞的成熟，可损害动物的视力，引起急性中毒性表皮松懈症，使眼睑粘连及产生角膜瘢痕。

氯霉素在动物体内残留，无论对于动物自身或是对人类的健康都构成潜在的威胁。

本文主要对饲用氯霉素抗生素在动物体内的残留情况进行研究，试图找到新的突破点。

关键词：氯霉素；体内残留；动物中图分类号：S859.84 文献标识码：A氯霉素（Chloramphenicol，CAP）是一种由委内瑞拉链丝菌产生的广谱抗生素，分子中含有氯，属抑菌性广谱抗生素。

且具有旋光性，白色针状或微带黄绿色的针状、长片状结晶或结晶性粉末，味苦。

在甲醇、乙醇、丙酮、丙二醇中易溶。

药用氯霉素是其左旋体，右旋体无效，在酸性溶液中较稳定，在碱性溶液中易被破坏。

1 资料与方法1.1 一般资料1.1.1 试剂及试样1.1.1.1 试样新鲜无疾病猪肉500g。

1.1.1.2 试剂乙酸乙酯、甲醇、正已烷、高氯酸（0.5mol/L）氯霉素标准品（纯度≥99%）、氯霉素标准溶液。

1.1.2 试验仪器液相色谱仪、匀质器（3000r/min）、离心机（10000r/min）、微量注射器（25μl，100μl）。

1.2 方法1.2.1 试样选取选取无疾病新鲜猪肉500g作为原始样品，加封后标明标记，及时送实验室。

1.2.2 测定程序提取称取试样5g（精确至0.1g）置于50mL离心管中，加入10mL乙酸乙酯，称量后均质1min，10000r/min离心10min。

再称量，补入损失的乙酸乙酯。

移取5.0mL乙酸乙酯提取液，置于带塞尖底离心管中，在45℃水浴中用氮气吹去乙酸乙酯。

对虾中氯霉素残留的分析方法研究一、引言氯霉素（chIoramphenicoI，简称CAP）是1947年首次从微生物中分离出来的一种抗生素[1]，目前用人工合成方法合成。

氯霉素广泛用于动物各种传染性疾病的治疗[2]，被认为是抑制对虾病原弧菌作用最强的药物[3]。

由于氯霉素存在严重的副作用，能引起人的再生障碍性贫血、粒状白细胞缺乏症等疾病，尤其是氯霉素在动物组织中的残留不仅对动物和人体有直接危害，更严重的是低浓度药物残留会诱发致病菌的耐药性，对人类的健康构成巨大的潜在危胁。

许多发达国家相继禁止或严格限制使用氯霉素。

欧盟提出了一些有关虾氯霉素污染的新规定[4]，进口虾中一旦被查出含有氯霉素，立即拒货，甚至销毁。

我国也规定氯霉素在所有动物性产品中的检出量为零[5]。

因此，建立高效、灵敏、经济的氯霉素残留分析方法是很有必要的。

目前已相继建立起气相色谱[6]、液相色谱[7]、薄层色谱[5]、微生物[8]及酶联检测[9]等氯霉素残留分析方法，但这些方法在微量组分定量测定上均有一定的局限性。

本工作建立了高效液相色谱-质谱-质谱联用技术（LC-MS-MS）测定对虾中氯霉素残留的方法。

参考阅读：虾苗的腐鳃病如何防治？二、实验部分1、仪器与条件API3000液相色谱-质谱-质谱联用仪（美国生物应用系统公司）。

液相色谱条件：C18InertsiI5ODS-2色谱柱（5μm，2.1mmX50mm，MetaChemTechnoIegiesInc.）；甲醇（液相色谱纯，TediaCompanyInc.，USA）为流动相，流速为300μL/min，进样量为20μL。

质谱条件：电喷雾电离源（ESI），负离子模式采集。

2、标准样品配制准确称取一定量氯霉素（纯度99.0%，LaborDr.Ehrenstorfers，Germany），用甲醇溶解后配成一定浓度的标准储备液，使用时逐级稀释成浓度为0.56-56.00μg/L的标准溶液。

动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定随着人们对食品安全和健康的关注度越来越高，食品安全问题也逐渐成为社会关注的焦点。

动物源性食品中残留的药物成为了一个备受关注的问题。

氯霉素类药物的残留问题尤为突出。

氯霉素类药物是一类广泛应用于兽药领域的抗生素，它们具有很强的杀菌和抗菌作用，在畜牧养殖时常被用于预防和治疗动物疾病。

过量或长时间滥用氯霉素类药物都可能导致其在食品中残留，对人体健康造成一定的危害。

对动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定成为了必要的工作。

一般来说，动物源性食品中氯霉素类药物的残留量主要通过色谱法、液相色谱法、光谱法等方法来进行测定。

通过这些方法可以确定食品中氯霉素类药物的含量，并依据国家相关法规标准对其残留量是否合格进行判定。

以下将对各种测定方法进行简要介绍。

色谱法是一种常用的氯霉素类药物残留测定方法。

通过色谱法，可以将样品中的氯霉素类药物分离开来，并通过检测器对其进行定量测定。

常用的色谱法有气相色谱法（GC）和液相色谱法（HPLC）。

气相色谱法适用于对氯霉素类药物进行脂溶性物质的分析，它具有分离效果好、灵敏度高等优点。

而液相色谱法则适用于对极性物质的分析，其分离效果也非常好。

借助色谱法，可以准确、快速地测定动物源性食品中氯霉素类药物残留的含量，确保食品的安全性。

光谱法也是一种常用的氯霉素类药物残留测定方法。

其原理是将样品中的氯霉素类药物溶解后，通过特定波长下，利用吸收、荧光、发射等光学现象进行分析。

光谱法具有快速、简便、无需特殊试剂等优点，适用于对动物源性食品中氯霉素类药物残留进行初步快速的检测。

除了以上介绍的方法外，近年来，还出现了一些新型的检测方法，如基于生物技术的检测方法、质谱法等。

这些新方法具有高灵敏度、高选择性、高准确性等优点，被广泛应用于动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定。

尽管有这么多的测定方法，但是动物源性食品中氯霉素类药物残留量的测定仍然存在一定的挑战。

由于氯霉素类药物在动物体内代谢、分布等的复杂性，使得其在动物源性食品中的残留形式各异，因而样品制备方法的选择及操作条件相对更为复杂。

动物源性食品中氯霉素残留检测方法的优化氯霉素是一种广谱抗生素，在兽药中被广泛应用于畜禽养殖。

然而，氯霉素的使用会带来残留问题，对人体健康构成潜在风险。

因此，发展快速、准确、灵敏的氯霉素残留检测方法对于保障食品安全和合规生产至关重要。

目前，常用的氯霉素残留检测方法有高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)等。

针对这些方法，可以从如下几个方面进行优化。

1.样品前处理的优化样品前处理对于提高检测方法的准确度和灵敏度非常重要。

传统的样品前处理方法一般包括溶剂萃取、净化、浓缩等步骤。

然而，这些方法通常操作繁琐、耗时长，且易引入背景干扰物。

因此，需对样品前处理方法进行优化。

一种可行的优化方法是固相萃取(SPE)技术。

该技术使用固定相材料将溶液中的目标物质富集、分离，具有简便、快速和高效的特点。

通过选择合适的固相吸附剂，可以实现氯霉素残留的富集和净化。

例如，可以选择具有亲水性和疏水性区域的反相固相萃取柱，来提高样品的净化效果和氯霉素的富集率。

2.仪器条件的优化在色谱分析方面，选择合适的色谱柱和流动相条件对于提高分离效果和灵敏度至关重要。

针对氯霉素的分析，常用的色谱柱有C18和C8等，可以根据样品特性选择合适的柱型。

流动相条件的优化可以通过改变流动相组成、流速和温度等参数来实现。

此外，应注意对于色谱仪器的保养和维护，以确保仪器的性能稳定性和精确度。

3.检测方法的验证和标准化检测方法的验证和标准化可以确保分析结果的准确性和可重复性。

验证方法包括确定灵敏度、线性范围、恢复率、精密度和特异性等。

标准物质的制备和标准曲线的建立也是验证过程中重要的环节。

此外，还应参照相关标准和指南，确保方法满足国家和国际标准。

4.新技术的应用近年来，一些新兴的技术在氯霉素残留检测领域取得了突破。

例如，表面增强拉曼光谱(SERS)技术、电化学传感器和免疫分析等。

这些技术具有快速、高灵敏度和选择性好的优点，为氯霉素的残留检测提供了新的思路和方法。