微生物限度检查记录(常规法)

JL—5.6—17—2011药品微生物限度检查实验记录（口服）检品编号_____________________________ 室温_____℃湿度_____% 第___页检品名称_____________________________ 规格数量____________________________ 批号_____________________________ 包装____________________________ 生产单位_____________________________ 检验目的____________________________ 供养单位_____________________________ 检验日期____________________________ 检验依据《中国药典年版部》报告日期____________________________①供试液制备: ⒈常规法: 供试品称(吸)取_________g(ml) 0.9%无菌氯化钠溶液______ml②45℃水浴/振荡_____分钟②研钵法③匀浆仪_____r/分钟_____分钟⒉非水溶性: 供试品_______g(ml) 加乳化剂______g(ml)⒊抑菌性: 供试品_______g(ml) 0.9%无菌氯化钠溶液______ml处理方法: A.稀释法B.离心沉淀集菌法C.薄膜过滤法 D.中和法 E.沉降法计数测定方法: 平皿法（________ml/皿）薄膜法（冲洗量_______ml/膜）编号: _______________ 批号: _____________规定: 不得过__________cfu/g或ml 规定: 不得过_________cfu/g或ml规定: 不得检出规定: 不得检出规定: 不得检出活螨检查规定: 不得检出检验者: __________ 校对者: __________JL—5.6—17—2011 药品微生物限度检查实验记录（局部用药）检品编号_____________________________ 室温_____℃湿度_____% 第___页检品名称_____________________________ 规格数量____________________________ 批号_____________________________ 包装____________________________ 生产单位_____________________________ 检验目的____________________________ 供养单位_____________________________ 检验日期____________________________ 检验依据《中国药典年版部》报告日期____________________________③供试液制备: ⒈常规法: 供试品称(吸)取_________g(ml) 0.9%无菌氯化钠溶液______ml④45℃水浴/振荡_____分钟②研钵法③匀浆仪_____r/分钟_____分钟⒉非水溶性: 供试品_______g(ml) 加乳化剂______g(ml)⒊抑菌性: 供试品_______g(ml) 0.9%无菌氯化钠溶液______ml处理方法: A.稀释法B.离心沉淀集菌法C.薄膜过滤法 D.中和法 E.沉降法规定: 不得过__________cfu/g或ml 规定: 不得过_________cfu/g或ml 金黄色葡萄球菌检查铜绿假单胞菌检查规定: 不得检出规定: 不得检出梭菌检查白色念珠菌检查定: 不得检出检验者: __________ 校对者: __________。

微生物限度检验方法验证记录1.适用范围本方案适用于本公司各品种微生物限度检验方法的验证。

2.目的通过验证确认所采用的方法适合于该药品的微生物限度检查，确保该产品微生物限度检查结果的正确性。

3.职责项目责任人:负责验证方案的起草及具体实施。

验证管理员:负责验证工作的组织、协调及管理。

QA现场监控员:负责验证实施过程中的监督检查，取样，确保结果的可靠性。

QC负责人:负责验证方案中检验方法的审核及按照规定的取样计划对标准检验操作程序的准确执行，负责组织实施。

QC检验员:负责验证方案的起草与参与实施，并对所测数据准确性负责。

质量部经理:负责验证方案及报告的审核和批准。

4. 概述通过验证以确认所采用的方法适合于该药品的微生物限度检查。

根据样品特性制订检验方法和检验条件，按制定的方法进行实验，根据实验结果判断是否符合验证标准。

若符合，按验证的方法和条件进行药品的微生物限度检查;若不符合，重新建立制订检验方法和检验条件，再进行验证，直至验证结果符合设立的验证标准。

5.检查和确认5.1微生物限度检验室，洁净级别1万级;超净工作台，局部100级(确认方法:审阅相关的验证资料)。

微生物限度检验室(洁净级别1万级)验证报告超净工作台(洁净级别100级)验证报告检查结论:验证资料完整，符合相应洁净度要求且在有效期内。

检查人: 日期:5.2与验证相关的文件(确认方法:检索)。

微生物限度检查法操作规程和检定菌传代操作规程净化工作台使用操作规程微生物限度检验室清洁消毒规程培养箱标准操作规程检查结论:验证所需资料齐全、完整，符合验证要求。

检查人: 日期:5.3检验用仪器设备(确认方法:检查、核对)。

符合3Q(IQ、OQ、PQ)要求。

5.3.1 培养箱型号: HP400S生产厂家: 武汉瑞华仪器设备有限公司校验有效期至: 年月日设定温度: 32.5?型号: PYX-280S-A生产厂家: KELI 科力仪器校验有效期至: 年月日设定温度: 25.5?5.3.4超级净化层流台型号: YJ-875生产厂家: 苏州市姑苏空调净化有限公司验证有效期至: 年月日检查结论: 符合要求检查人: 日期:5.4检验用菌种、培养基和试液(确认方法:检查、核对)金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003] 批号生产厂: 中检所枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63501] 批号生产厂: 中检所大肠埃希菌[CMCC(B)44102] 批号生产厂: 中检所白色念珠菌[CMCC(F)98001] 批号生产厂: 中检所黑曲霉菌[CMCC(F)98003] 批号生产厂: 中检所β-内酰胺酶:2ml(大于200单位/ml)批号生产厂: 中检所硫乙醇酸盐流体培养基批号: 生产厂: 北京三药科技开发公司改良马丁培养基批号: 生产厂: 北京三药科技开发公司营养肉汤培养基批号: 生产厂: 北京三药科技开发公司改良马丁琼脂培养基批号: 生产厂: 北京三药科技开发公司检查结论: 符合要求检查人: 日期:6. 菌液制备(1)金黄色葡萄球菌新鲜肉汤培养物1ml 9ml0.9%无菌NaCl溶液至_______含菌量_______CFU/ml [CMCC(B)26003] 第_____代 10倍系列稀释(2)枯草芽孢杆菌新鲜肉汤培养物1ml 9ml0.9%无菌NaCl溶液至_______含菌量_______CFU/ml [CMCC(B)63501]第_____代 10倍系列稀释(3)大肠埃希菌新鲜肉汤培养物1ml 9ml0.9%无菌NaCl溶液至_______含菌量_______CFU/ml [CMCC(B)44102]第_____代 10倍系列稀释(4)白色念珠菌新鲜改良马丁培养物1ml 9ml0.9%无菌NaCl溶液至_______含菌量_______CFU/ml [CMCC(F)98001]第_____代 10倍系列稀释(5)黑曲霉新鲜孢子洗脱液1ml 9ml0.9%无菌NaCl溶液至_______含菌量_______CFU/ml [CMCC(F)98003]第_____代 10倍系列稀释7. 实验方案7.1无抑菌活性的供试品供试液的制备7.1.1稀释剂:pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液7.1.2液体供试品:供试品10ml置锥形瓶中，加入90ml稀释剂，混匀，作为供试液(1:10)。

（2020版）药品片剂微生物限度检查法验证记录文件编号：XXX-XX-XXXXXX制药有限责任公司XX年XX月XX日XX片微生物限度检查法标准起草说明XX片由XXXXXXXX药材制成，有XXXXX作用。

根据其用药途径和处方，应进行需氧菌总数、霉菌数和酵母菌总数的测定及控制菌大肠埃希菌检查。

本品参照2015版药典进行过方法适用性验证没有发现抑菌性，所以确定需氧菌总数、霉菌数和酵菌总数及大肠埃希菌采用常规法测定。

经对所采用的方法适用性进行试验，符合《中国药典》2020版四部1105非无菌产品微生物限度检查的微生物计数法和1106非无菌产品微生物限度控制菌检查法与1107非无菌药品微生物限度标准，方法可行。

XX片微生物限度检查法标准正文微生物限度：按微生物限度检查法（《中国药典》2020版四部1105非无菌产品微生物限度检查的微生物计数法和1106非无菌产品微生物限度控制菌检查法与1107非无菌药品微生物限度标准。

取样品10克，加PH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液稀释至100ml，制备成溶解均匀的1：10供试液。

需氧菌总数、霉菌与酵母菌总数取本品1：10供试液1ml，注皿，平行制备平皿(2个平皿需氧菌总数和2个平皿霉菌与酵母菌总数)，按平皿法测定。

大肠埃希菌取本品1：10供试液10ml直接接至100ml胰酪大豆胨液体培养基中，依法检查。

《中国药典》非无菌制剂项下标准规定：需氧菌总数103cfu/g ; 霉菌和酵母菌总数102cfu/g ; 不得检出大肠埃希菌(1g)。

XX片生物限度检查方法适用性试验1、样品名称：XX片批号XXX、XXX、XXX2、验证用菌种：铜绿假单胞菌CMCC﹙B﹚10104、、枯草杆菌CMCC﹙B﹚63501、金黄色葡萄球菌CMCC﹙B﹚26003、白色念珠菌CMCC﹙F﹚98001、黑曲霉CMCC ﹙F﹚98003 大肠埃希菌CMCC﹙B﹚44102.3．实验方法：《中国药典》2015版四部微生物限度方法适用性检查验证实验。

中华人民共和国药典2000版二部微生物限度检查法附录Ⅺ J 微生物限度检查法微生物限度检查法系指非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检查方法,包括染菌量及控制菌的检查。

供试品应随机抽样。

一般抽样量为检验用量(2个以上最小包装单位)的3倍量。

检查的全过程,均应严格遵守无菌操作,严防再污染。

除另有规定外,本检查法中细菌培养温度为30~35℃,霉菌、酵母菌培养温度为25 ~28℃,控制菌培养温度为36℃±1℃。

检验结果的报告以1g、1ml或10cm<2>为单位。

培养基及其制备方法除另有规定外,培养基制备的灭菌条件为121℃20分钟。

1.营养琼脂培养基与营养肉汤培养基见无菌检查法(附录Ⅺ H)2.玫瑰红钠琼脂培养基胨 5g 玫瑰红钠 0.0133g葡萄糖 10g 琼脂 15~20g磷酸二氢钾 1g 水 1000ml硫酸镁 0.5g除葡萄糖、玫瑰红钠外,取上述成分,混合,加热溶化后,滤过,加入葡萄糖、玫瑰红钠,分装,灭菌。

3.酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)胨 10g 琼脂 15~20g酵母浸出粉 5g 水 1000ml葡萄糖 20g除葡萄糖外,取上述成分,混合,加热溶化后,滤过,加入葡萄糖,分装,灭菌。

4.胆盐乳糖培养基(BL)胨 20g 磷酸二氢钾 1.3g乳糖 5g 牛胆盐 1.3g氯化钠 5g (或去氧胆酸钠0.5g)磷酸氢二钾 4.0g 水 1000ml除乳糖、牛胆盐外,取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.4±0.2, 煮沸,滤清,加入乳糖、牛胆盐,分装,灭菌。

5.曙红亚甲蓝琼脂培养基(EMB)营养琼脂培养基 100ml 曙红钠指示液 2ml20%乳糖溶液5ml 亚甲蓝指示液 1.3~1.6ml 取营养琼脂培养基,加热溶化后,冷至60℃,按无菌操作加入灭菌的其他3种溶液, 摇匀,倾注平皿。

6.麦康凯琼脂培养基(MacC)胨 20g 1%中性红指示液 3ml乳糖 10g 琼脂 15~20g牛胆盐 5g 水 1000ml氯化钠 5g除乳糖、指示液、牛胆盐及琼脂外,取上述成分,混合,加热使溶解,调节pH值使灭菌后为7.2±0.2,加入琼脂,加热溶化后,再加入其余各成分,摇匀,分装,灭菌,冷至60℃,倾注平皿。

微生物限度检查记录（口服给药）
检验编号： 检品名称： 批号 第 页 共 页
检验者 月 日~ 月 日 校对者： 月 日
培养基名称： 营养琼脂培养基 （批号： 生产单位 ）灵敏度
玫瑰红钠琼脂培养基 批号： 生产单位 ）灵敏度
供试液制备 常规法 取供试品 g(ml),加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至 ml 。

①匀浆仪 转速 转/分钟 min ②研钵法 ③保温振摇法： ℃，保温 min,并适时振摇
细菌数：取本品1：10的供试液1 ml 注入2个平皿（0.5ml/皿），平行制备4个平皿
霉菌（酵母菌）：取本品1：10的供试液1 ml 注入1个平皿，平行制备2个平皿
检查方法：照《中国药典2005年版一部》（附录XIII C ）或二部（附录XI J ）微生物限度检查法检查
细菌数： ℃， hr 霉菌（酵母菌）总数： ℃， hr
控制菌检查 培养温度 ℃
大肠埃希菌检查：对照菌： 大肠埃希菌[CMCC （B ）44102] 沙门菌检查：对照菌： 乙型副伤寒沙门菌[ CMCC （B ）50094]
结论： 本品按《中国药典2005年版 部》检查微生物限度，结果 规定。

一、供试液制备：1、液体供试品：取供试品 ml ，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至 ml, 混匀，作为1：10供试液。

2、固体、半固体或黏稠性供试品：取供试品 g ，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至 ml, 混匀，作为1：10供试液，必要时加适量的无菌聚山梨酯80。

3、需用特殊供试液制备方法的供试品：①肠溶及结肠溶制剂供试品：取供试品 g ，加PH6.8无菌磷酸盐缓冲液至 ml,振摇，使溶解，作为1：10供试液。

②具有抑菌活性供试品：取供试品 g 或 ml 加入PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至 ml ，作为1：10供试液。

供试液处理方法：①培养基稀释法 ②离心沉淀集菌法 ③薄膜过滤法 ④中和法 二、检查法：①平皿法 ②薄膜过滤法大肠埃希菌检查 36±1℃ 24h结论：本品按《中国药典2005年版》微生物限度检查法标准检验，结果：检验员： 复核员：一、供试液制备：1、液体供试品：取供试品ml，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至ml, 混匀，作为1：10供试液。

2、固体、半固体或黏稠性供试品：取供试品g，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至ml, 混匀，作为1：10供试液，必要时加适量的无菌聚山梨酯80。

3、需用特殊供试液制备方法的供试品：①肠溶及结肠溶制剂供试品：取供试品g，加PH6.8无菌磷酸盐缓冲液至ml,振摇，使溶解，作为1：10供试液。

②具有抑菌活性供试品：取供试品g或ml加入PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至ml，作为1：10供试液。

供试液处理方法：①培养基稀释法②离心沉淀集菌法③薄膜过滤法④中和法二、检查法：①平皿法②薄膜过滤法大肠埃希菌检查36±1℃24h结论：本品按《中国药典2005年版》微生物限度检查法标准检验，结果：检验员：复核员：一、供试液制备：1、液体供试品：取供试品ml，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至ml, 混匀，作为1：10供试液。

表：2.1-024微生物限度检查记录（通用）1. 常规法：取供试品10為1,用胰酪大豆胨液体培养基稀释至 100ml ，用匀浆仪等适宜的方法混匀，制成1:10供试液。

2. 薄膜过滤法：取供试品10mi ,用胰酪大豆胨液体培养基稀释至 100ml ，用匀浆仪等适宜的方法混匀，制成1:10供试液。

吸取1:10的供试液10ml ,过滤，加0.1%无菌蛋白胨水溶液 300ml 分 三次冲洗，每次100ml ;冲洗后，将滤膜正贴于胰酪大豆胨固体培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基 上，每种培养基平行制备 2个平皿。

按平皿法测定其菌数。

胰酪大豆胨液体培养基（配制批号:）、麦康凯液体培养基（配制批）麦康凯琼脂培养基（配制批号: ）供试液制备微生物限度检查记录、需氧菌总数检查30〜353〜5）、霉菌、酵母菌总数检查20C〜25C,5〜7天）三糖铁琼脂斜面穿刺接种 （18〜24h ）三、控制菌检查 （30-35 C ）检验者:表：2.1-024号:结论本品经按《中国药典》2015年版“非无菌产品微生物限度检查法”进行检验，结果审核者:微生物限度检查记录（丸剂）供试液制备供试液。

胰酪大豆胨增菌 （18〜24h ）RV 沙门选择培养木糖赖氨酸脱氧胆酸分离培养（18〜48h ）胰酪大豆胨液体培养基（配制批号:）麦康凯琼脂培养基（配制批号:）四、沙门菌检查 （30 °C 〜35C ） 胰酪大豆胨液体培养基（配制批号： ）、RV 沙门增菌液体培养基（配制批号： ）,木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基（配制批号:）、三糖铁琼脂（配制批号：五、耐胆盐革兰阴性菌检杳胰酪大豆胨液体培养基（配制批号：）、肠道菌增菌液体培养基（配制批号：）,紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基（配制批号：审核者：检验者: 表：2.1-024阴性对照阳性对照三、大肠埃希菌检查）、麦康凯液体培养基（配制批结果□检出大肠埃希菌□未检出大肠埃希菌（规定：不得检出/g）四、沙门菌检查（30°C〜35C）胰酪大豆东液体培养基（配制批号：）、肠道菌增菌液体培养基（配制批号：）,紫红胆盐葡萄糖琼脂培养基（配制批号：、表: 2.1-024 微生物限度检查记录（蛇胆川贝液）三、大肠埃希菌检查胰酪大豆胨液体培养基（配制批号：）、麦康凯液体培养基（配制批号：）麦康凯琼脂培养基（配制批号：）胰酪大豆胨液体培养基（配制批号：）、RV沙门增菌液体培养基（配制批号：）,木糖赖氨酸脱氧胆酸盐琼脂培养基（配制批号：）、三糖铁琼脂（配制批号：）审核者：检验者:表：2.1-024 微生物限度检查记录（30〜353〜5天）、霉菌、酵母菌总数检查20C〜25C, 5〜7天）1、 口服液体药用聚酯瓶：取数个试瓶，加入1/2标示容量的氯化钠注射液，将盖旋紧，振摇1分钟，即得供试液。