纯化水试液配制方法

纯化水ChunhuashuiPurified Water[修订]本品为饮用水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜的方法制得的制药用水，不含任何添加剂。

【检查】总有机碳不得过0.50mg/L（附录Ⅷ R）。

易氧化物取本品100ml，加稀硫酸10ml，煮沸后，加高锰酸钾滴定液(0.02mol/L)0.10ml，再煮沸10分钟，粉红色不得完全消失。

以上总有机碳和易氧化物两项可选做一项。

重金属取本品100ml，加水19ml，蒸发至20ml，放冷，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml 与水适量使成25ml，加硫代乙酰胺试液2ml,摇匀，放置2分钟，与标准铅溶液1.0ml加水19ml用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.000 01%）。

[增订]【检查】电导率应符合规定（附录）总有机碳不得过0.50mg/L（附录Ⅷ R）。

铝盐（供透析液生产用水需检查）取本品400ml，置分液漏斗中，加醋酸盐缓冲液（pH 6.0）10ml和水100ml，用0.5% 8-羟基喹啉三氯甲烷溶液提取3次（20ml，20ml，10ml），合并三氯甲烷提取液于50ml量瓶中，加三氯甲烷至刻度，摇匀，即得供试品溶液；另取标准铝盐溶液[称取硫酸铝钾0.352g，置100ml量瓶中，加1mol/L硫酸溶液10ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。

临用前，精密量取贮备液1ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于2μg的Al)]2.0ml，置分液漏斗中，加醋酸盐缓冲液（pH 6.0）10ml和水98ml，同法操作，即得标准溶液；取醋酸盐缓冲液（pH 6.0）10ml和水100ml，置分液漏斗中，同法操作，作为空白溶液。

取上述溶液，照荧光分析法（附录Ⅳ E），在激发光波长392nm与发射光波长518nm处分别测定荧光强度。

供试品溶液的荧光强度不得大于标准溶液的荧光强度（0.000 001%）。

[删除]【检查】氯化物、硫酸盐与钙盐取本品，分置三支试管中，每管各50ml,第一管中加硝酸5滴与硝酸银试液1ml，第二管中加氯化钡试液5ml，第三管中加草酸铵试液2ml，均不得发生浑浊。

纯化水检测项目一、酸碱度1.试剂a .甲基红指示液：取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4ml使溶解，再加水稀释至200ml。

变色范围PH4.2-6.3（红→黄）b .0.05mol/L氢氧化钠溶液：取0.2g分析纯氢氧化钠，用水稀释至100ml。

c .溴麝香草酚蓝指示液：取溴麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2ml使溶解，再加水稀释至200ml。

变色范围pH6.0—7.6(黄→蓝)。

2、操作取纯化水10ml，加甲基红指示液2滴，不得显红色；另取纯化水10ml，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，不得显蓝色。

二、硝酸盐1.试剂a. 10％氯化钾溶液：取氯化钾10g，加水使溶解成100ml，即得。

b. 0.1％二苯胺硫酸溶液：取二苯胺0.1g，加硫酸100ml使溶解，即得。

c. 标准硝酸盐溶液：取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，摇匀，再精密量取10ml，加水稀释成100ml，摇匀，即得（每1ml相当于1µg NO3）。

2、操作取本品5ml置试管中，于冰浴（0℃）中冷却，加10％氯化钾溶液0.4ml与0.1％二苯胺硫酸溶液0.1ml，摇匀，缓缓滴加硫酸5ml，摇匀，将试管于50℃水浴中放置15分钟，溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液0.3ml，加无硝酸盐的水4.7ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深(0.000 006%)。

三、亚硝酸盐1、试剂a. 稀盐酸溶液：取盐酸234ml，加水使稀释至1000ml，即得。

本液含HCl应为9.5%-10.5%。

b. 对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（1→100）：取氨基苯磺酰胺1g，加稀盐酸溶液使溶解成100ml。

c. 盐酸萘乙二胺溶液（0.1→100）：取盐酸萘乙二胺0.1g，加水使溶解成100ml。

d. 标准亚硝酸盐溶液：取亚硝酸钠0.750g（按干燥品计算），加水溶解，稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，摇匀，再精密量取1ml，加水稀释成50 ml，摇匀即得(每1ml相当于1µgNO2) 。

纯化水检测方法取本品50ml，加碱性碘化汞钾试液2ml，放置15分钟；如显色，与氯化铵溶液（取氯化铵31.5mg，加无氨水适量使溶解并稀释成1000ml）1.5ml，加无氨水48ml与碱性碘化汞钾试液2ml制成的对照液比较，不得更深（0.000 003%）。

纯化水检测方法本品为蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜的方法制得供药用的水，不含任何附加剂。

【性状】本品为无色的澄明液体；无臭，无味。

【检查】酸碱度取本品10ml，加甲基红指示液2滴，不得显红色；另取10ml，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，不得显蓝色。

氯化物、硫酸盐与钙盐取本品，分置三支试管中，每管各50ml。

第一管中加硝酸5滴与硝酸银试液1ml，第二管中加氯化钡试液2ml，第三管中加草酸铵试液2ml，均不得发生浑浊。

硝酸盐取本品5ml置试管中，于冰浴中冷却，加10%氯化钾溶液0.4ml与0.1%二苯胺硫酸溶液0.1ml，摇匀，缓缓滴加硫酸5ml，摇匀，将试管于50℃水浴中放置15分钟，溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液[取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，再精密量取10ml，加水稀释成100ml，摇匀，即得（每1ml相当于1μg NO3）]0.3ml，加无硝酸盐的水4.7ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.000 006%）。

亚硝酸盐取本品10ml，置纳氏管中，加对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（1→100）1ml及盐酸萘乙二胺溶液（0.1→100）1ml，产生的粉红色，与标准亚硝酸盐溶液[取亚硝酸钠0.750g（按干燥品计算），加水溶解，稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，摇匀，再精密量取1ml，加水稀释成50ml，摇匀，即得（每1ml相当于1μg NO2）]0.2ml，加无硝酸盐的水9.8ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.000 002%）。

纯化水检测项目一、酸碱度1.试剂a .甲基红指示液：取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4ml使溶解，再加水稀释至200ml。

变色范围PH4.2-6.3（红→黄）b .0.05mol/L氢氧化钠溶液：取0.2g分析纯氢氧化钠，用水稀释至100ml。

c .溴麝香草酚蓝指示液：取溴麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2ml使溶解，再加水稀释至200ml。

变色范围pH6.0—7.6(黄→蓝)。

2、操作取纯化水10ml，加甲基红指示液2滴，不得显红色；另取纯化水10ml，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，不得显蓝色。

二、硝酸盐1.试剂a. 10％氯化钾溶液：取氯化钾10g，加水使溶解成100ml，即得。

b. 0.1％二苯胺硫酸溶液：取二苯胺0.1g，加硫酸100ml使溶解，即得。

c. 标准硝酸盐溶液：取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，摇匀，再精密量取10ml，加水稀释成100ml，摇匀，即得（每1ml相当于1µg NO3）。

2、操作取本品5ml置试管中，于冰浴（0℃）中冷却，加10％氯化钾溶液0.4ml与0.1％二苯胺硫酸溶液0.1ml，摇匀，缓缓滴加硫酸5ml，摇匀，将试管于50℃水浴中放置15分钟，溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液0.3ml，加无硝酸盐的水4.7ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深(0.000 006%)。

三、亚硝酸盐1、试剂a. 稀盐酸溶液：取盐酸234ml，加水使稀释至1000ml，即得。

本液含HCl应为9.5%-10.5%。

b. 对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（1→100）：取氨基苯磺酰胺1g，加稀盐酸溶液使溶解成100ml。

c. 盐酸萘乙二胺溶液（0.1→100）：取盐酸萘乙二胺0.1g，加水使溶解成100ml。

d. 标准亚硝酸盐溶液：取亚硝酸钠0.750g（按干燥品计算），加水溶解，稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，摇匀，再精密量取1ml，加水稀释成50 ml，摇匀即得(每1ml相当于1µgNO2) 。

微生物限度检查方法验证——纯化水的微生物限度检查方法验证验证方案制定人：部门：日期：验证方案审核人：部门：日期：验证方案批准人：部门：日期：1验证目的：当建立纯化水的微生物限度检查法时，应进行细菌、霉菌和酵母菌检查方法的验证，以确认所采用的方法适合于纯化水的细菌、霉菌和酵母菌检查。

2验证方案：照《中国药典》2005版二部附录Ⅺ J 方法。

2.1仪器与试药2.1.2仪器：STV3无菌检查薄膜过滤器（浙江宁海白石药检仪器厂），微孔滤膜（孔径0.45um,直径50mm）。

2.1.3试药：2.1.4培养基：营养琼脂培养基，玫瑰红钠琼脂培养基，营养肉汤培养基。

来源：北京三药科技开发公司生产中国药品生物制品检定所监制2.1.5试液：生理盐水，pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液。

（均按照《中国药典》2005版二部附录Ⅺ H、J要求配制）2.1.6对照菌株：大肠埃希菌[CMCC(B) 44 102]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B) 26 003]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B) 63 501]、白色念珠菌[CMCC(F) 98 001]、黑曲霉 [CMCC(F) 98 003]。

来源：广州药物研究中心2.2对照菌液的制备：取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的营养琼脂斜面新鲜培养物各1环分别接种于15ml 营养肉汤培养基内，于30～35℃培养18～24小时后，稀释至1：105～1：107，，取1ml注入平皿中，注入约45℃的营养琼脂培养基约15ml，混匀，凝固后置30～35℃培养48h，进行活菌计数。

取白色念珠菌的玫瑰红钠琼脂斜面新鲜培养物1环接种于改良的马丁琼脂培养基内，于25～28℃培养24～48小时后稀释至1：105～1：106，取1ml注入平皿中，注入约45℃的玫瑰红钠琼脂培养基约15ml，混匀，凝固后置25～28℃培养72h，进行活菌计数。

取黑曲霉的玫瑰红钠琼脂新鲜培养物1环接种于改良的马丁琼脂培养基内斜面中，于25～28℃培养5～7天后，用3～5ml0.9%的无菌氯化钠溶液洗脱。

纯化水Chunhuashui Purified waterH2O 18.02本品为饮用水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其他适宜的方法制得的制药用水，不含任何添加剂。

【性状】本品为无色的澄清液体；无臭、无味。

【检查】酸碱度取本品10ml加甲基红指示液2滴，不得显红色；另取10ml，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，不得显蓝色。

硝酸盐取本品5ml置试管中，于冰浴中冷却，加10%氯化钾溶液0.4ml与0.1%二苯胺硫酸溶液0.1ml,摇匀，缓缓滴加硫酸5ml，摇匀，将试管于50℃水浴中放置15分钟，溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液〔取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，再精密量取10ml，加水稀释成100ml，摇匀，即得（每1ml相当于1μgNO3）〕0.3ml，加无硝酸盐的水4.7ml,用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.000 006%）亚硝酸盐取本品10ml,置纳氏管中，加对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液（1→100）lml与盐酸萘乙二胺溶液（0.1→100）lml，产生的粉红色，与标准亚硝酸盐溶液〔取亚硝酸钠0.750g(按干燥品计算)，加水溶解，稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释至100ml，摇匀，再精密量取1ml，加水稀释成50ml，摇匀，即得（每1ml相当于1μgNO2 ）〕0.2ml，加无亚硝酸盐的水9.8ml,用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.000 002%）氨取本品50ml,加碱性碘化汞钾试液2ml，放置15分钟；如显色，与氯化铵溶液（取氯化铵31.5mg,加无氨水适量使溶解并稀释成1000ml）1.5ml，加无氨水48ml与碱性碘化汞钾试液2ml制成的对照液比较，不得更深（0.000 03%）电导率应符合规定（附录ⅧS）总有机碳不得超过0.50mg/l（附录ⅧR）易氧化物取本品100ml,加稀硫酸10ml，煮沸后，加高锰酸钾滴定液（0.02mol/L）0.10ml，再煮沸10分钟，粉红色不得完全消失。

纯化水检验标准操作规程目的：制定纯化水检验的标准操作规程，确保检验结果准确可靠。

适用范围：纯化水责任人：质量管理部主任、检验员标准来源：《中国药典二部》内容：1 标准来源：2010年版中国药典二部。

2 技术质量标准：本品为蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其它适宜方法制得的供药用的水，不含任何附加剂。

3 性状取本品50毫升于纳氏比色管中，摇匀。

在管外壁贴一白纸条，目光平视，应为无色的澄清液体；从管口嗅水的气味，同时尝水的味道，应为无臭、无味。

4 检查4.1 酸碱度：4.1.1 试剂及配制4.1.1.1 甲基红指示液：取甲基红0.1g，加入0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4ml 使溶解，再加水稀释至200ml，即得。

变色范围：PH4.2-6.3（红→黄）。

4.1.1.2 溴麝香草酚蓝指示液：取溴麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。

变色范围：PH6.0-7.6（黄→蓝）。

4.1.2 检查法取本品10ml，加甲基红指示液2滴，不得显红色，另取10ml，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，不得显蓝色。

4.2 硝酸盐4.2.1 试剂及配制4.321.1 10%氯化钾取氯化钾10g，加水使溶解成100ml，即得。

4.2.1.2 0.1%二苯胺溶液取二苯胺0.1g，加硫酸100ml使溶解，即得。

4.2.1.3 标准硝酸盐溶液取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，再精密量取10ml，加水稀释成100ml，摇匀，即得（每1ml相当于1μgNO3）。

4.2.1.4 无氨水取纯化水1000ml，加稀硫酸1ml与高锰酸钾试液1ml蒸馏，即得。

[检查：取本品50ml，加碱性碘化汞钾试液1ml，不得显色。

]4.2.1.5 无硝酸盐的水取用无氨水即得。

4.2.2 检查法取本品5ml置试管中，于冰浴中冷却，加10%氯化钾溶液0.4ml与0.1%二苯胺硫酸溶液0.1ml，摇匀，缓缓滴加硫酸5ml，摇匀，将试管于50℃水浴中放置15分钟，溶液产生的蓝色与标准硝酸盐溶液0.3ml加无硝酸盐的水4.7ml，用同一方法处理后的颜色比较，不得更深（0.000006%）。

纯化水检测相关内容讲述准备工作：1.提前一天发微生物限度室送风计划，首先填写送风计划表2.准备纯化水检测用品，其中包括0.9%生理盐水、镊子、滤杯、蒸发皿恒重。

0.9%生理盐水配制300ml，配制方法称取氯化钠2.7g，然后加水300ml制成，制成后放入1L烧杯中用锡箔纸密封，并把镊子用锡箔纸密封。

滤杯由滤杯和滤膜组成，使用前用纯化水清洗滤杯，并且用纯化水煮滤膜至沸腾2-3min，然后将滤膜放入滤杯中适当拧紧（不要太拧紧，防止滤膜破裂）。

周四早上首先打开电热恒温干燥箱，然后将蒸发皿放至干燥箱中（蒸发皿个数应比水点数多3-5个），干燥四小时冷却四十分钟称量，再干燥一小时冷却四十分钟称量。

3.周五早上先打开微生物限度室紫外照射30min（紫外灯电源开关在实验室三对面墙上），把纯化水检测用到的设备提前打开预热，并查看设备参数是否正确。

然后把灭菌的东西送到消毒中心进行灭菌，并填写预计使用时间。

取水部分：1.分别去洗刷间和消毒中心取纯化水取水瓶子和蓝盖瓶。

2.取水时先放水一分钟（冲去管道存水和管口细菌），然后先进行微限检测取水，不涮洗，取水时避免与管口接触，并且尽快接水和封盖。

再进行理化检测取水，取水前将瓶子涮洗三遍。

3.取水结束后先将微限检测用水放入微生物限度室传递窗，并打开灭菌和风淋。

然后关闭房间紫外灯，打开生物安全柜紫外灯。

纯化水检测理化部分：性状、酸碱度、硝酸盐、亚硝酸盐、氨、重金属、不挥发物、电导率、toc以上结束后，开始准备理化实验。

理化实验第一步做不挥发物，先将蒸发皿放置预热过的水浴锅上，然后将水样按顺序置于蒸发皿中，最后记录蒸发皿编号。

其次是TOC，因为空气对水样TOC和电导率检测影响很大，所以先进行TOC和电导率检测，TOC检测时先将水瓶冲洗3次，然后按顺序把各水点放到TOC自动取样装置上。

再进行纯化水电导率检测，电导率检测分两种方法：内插法和温补法。

然后准备重金属，首先取水样各100ml，然后加水19ml（加edi出水），然后进行加热浓缩，剩至20ml时停止加热，因为加热时间较长，所以要提前准备。

化学试剂配制方法说明西安申兰生物医学工程有限公司一、纯化水实验所需试剂：1.甲基红指示液：取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。

2.0.05mol/L氢氧化钠溶液：取氢氧化钠0.2g，加水溶解并稀释至100ml，即得。

3.溴麝香草酚蓝指示液：取溴麝香草酚蓝（溴百里香酚蓝或溴百里酚蓝）0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。

4.10%氯化钾溶液：取氯化钾10g，加水90ml使溶解，即得。

5.0.1%二苯胺硫酸溶液：取二苯胺0.1g，加入浓硫酸使其溶解并稀释至100ml，即得。

6.标准硝酸盐溶液：取硝酸钾0.163g，加水溶解并稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，再精密量取10ml，加水稀释成100ml，摇匀，即得。

7.对氨基苯磺酰胺的稀盐酸溶液：取对氨基苯磺酰胺（磺胺）1g，加稀盐酸溶解至100ml，即得。

8.稀盐酸：取盐酸234ml，加水稀释至1000ml，即得（本液含盐酸应为9.5%-10.5%）。

9.盐酸萘乙二胺溶液：取盐酸萘乙二胺0.1g，加水溶解至100ml，即得。

10.标准亚硝酸盐溶液：取亚硝酸钠0.75g（按干燥品计算），加水溶解，稀释至100ml，摇匀，精密量取1ml，加水稀释成100ml，摇匀，再精密量取1ml，加水稀释成50ml，摇匀，即得。

11.碱性碘化汞钾试液：取碘化钾10g，加水10ml溶解后，缓缓加入二氯化汞的饱和水溶液，随加随搅拌，至生成的红色沉淀不再溶解，加氢氧化钾30g，溶解后，再加二氯化汞的饱和水溶液1ml或1ml以上，并用适量的水稀释使成200ml，静置，使沉淀，即得。

12.二氯化汞的饱和水溶液：在室温20℃下，取二氯化汞8g，加水溶解并稀释至100ml，即得（二氯化汞在20℃下，溶解度为7.5g左右）。

13.氯化铵溶液：取氯化铵31.5mg，加无氨水适量使其溶解并稀释成1000ml，即得。