三种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果比较
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ICR小鼠下颌第一磨牙牙胚发育的动态组织学观察董宁;刘岩;张田田;阮建平【摘要】Objective This study aims to understand the characteristics of the time sequence of ICR mouse first mandibular molar tooth germ development through dynamic observation.Methods Tooth germ of Embryos (E11.5,E12.5,E13.5,E14.5,E15.5,E16.5,E17.5 and E18.5) and postnatal (PN1,PN2) mice were obtained.The heads (E11.5-E15.5) and mandibles (E16.5-PN2) of mice were dissected,fixed and embedded for serial sections and HE staining.All the results were assessed under light microscopy.Results The tooth germ underwent various development stages including the bud,cap and bell stages.Mouse odontogenesis was initiated at E11.5.Proliferation of oral epithelium formed the bud stage at E13.5.Then the cap stage was observed at E14.5-E15.5 and the bell stage was appeared beginning from E16.5.The pre-dentin was observed atPN1,as well as the dentin at PN2.Conclusions Establishing the regular development pattern of the first mandibular molar of ICR mice will provide a reliable basis for the future use in the specific tooth germ developmental research.%目的了解ICR小鼠下颌第一磨牙牙胚的发育时序特点,为使用小鼠研究牙齿发育机制和相关影响因素提供实验基础. 方法分别取E(胚胎)11.5、E12.5、E13.5、E14.5、E15.5、E16.5、E17.5和E18.5 d的胎鼠和PN(出生后)2 d的新生小鼠的头部或下颌骨,固定脱钙包埋后行连续切片,进行HE染色,在显微照相系统下进行观察记录,分析ICR小鼠磨牙牙胚发育的动态变化规律. 结果 E11.5 d为牙胚发育始动,E12.5 d牙胚向蕾状期过渡,E13.5 d进入蕾状期,帽状期为E14.5~E15.5 d,钟状期开始于E16.5 d,出生后2 d牙体硬组织开始逐渐形成.【期刊名称】《中国比较医学杂志》【年(卷),期】2017(027)004【总页数】6页(P63-68)【关键词】牙齿发育;ICR小鼠;下颌第一磨牙【作者】董宁;刘岩;张田田;阮建平【作者单位】陕西省颅颌面精准医学研究重点实验室,西安交通大学口腔医学院口腔预防科,西安,陕西 710004;陕西省颅颌面精准医学研究重点实验室,西安交通大学口腔医学院口腔预防科,西安,陕西 710004;陕西省颅颌面精准医学研究重点实验室,西安交通大学口腔医学院口腔预防科,西安,陕西 710004;陕西省颅颌面精准医学研究重点实验室,西安交通大学口腔医学院口腔预防科,西安,陕西 710004【正文语种】中文【中图分类】R-33牙齿的发育是外胚层来源的上皮细胞及颅神经脊来源的间充质细胞相互作用的结果,因此牙齿是研究上皮-间充质反应的重要器官模型之一,也是研究器官发育分子机制的一个经典模型系统[1]。
菌斑染色标准牙位及牙面
菌斑染色标准牙位及牙面有以下几种:
1. 上前牙区:这个区域可以观察到菌斑分布情况,同时也可以观察到患者口腔卫生情况,是菌斑染色显示效果最好的区域。
2. 下前牙区:下前牙区的菌斑染色效果仅次于上前牙区,同样可以观察到菌斑分布和口腔卫生情况。
3. 上下颌第一、二磨牙:这些牙齿的菌斑染色效果也比较好,但是相对于前牙区来说,观察难度可能会稍大一些。
4. 上下颌第一、二前磨牙:这些牙齿的菌斑染色效果也比较好,但是因为它们的位置比较靠后,观察起来可能会有一些困难。
需要注意的是,在进行菌斑染色时,应该按照医生的指导正确使用染色剂,避免误食或误咽,同时注意不要在短时间内反复进行菌斑染色,以免对牙齿造成损害。
Cdc42在小鼠磨牙牙胚发育过程中的表达张文菲;李明伟;赵泽;相豆豆;田甜甜;孙雪飞;马亮;余擎【摘要】AIM:To study the expression changes of Cdc42 in the development of mouse molar. METHODS:The paraffin tissue sections ofthe molar and molar germ of mice were examined with HE and immunohis-tochemical methods from 14-,16-,18-day-old mouse embryos (E14,E16,E18),and 1 -,4-,and 14-day-old mice (D1 ,D4 and D14).RESULTS:The Cdc42 was expressed in the whole development progressof mouse molar germ, and showed different degrees of expression in the molar germ-forming cells and in the surrounding cells.with typical polarized distribution in the process ofodontoblast’maturation.CONCLUSION:Cdc42 is expressed play a role in the development of mouse molar.%目的:研究极性相关分子Cdc42(cell division cycle 42)在小鼠磨牙发育过程中的表达变化。
方法:取胚胎期14、16、18 d及出生后1、4、14 d的小鼠组织样本,经处理获得磨牙牙胚及牙的石蜡组织切片,用组织化学染色、组织免疫荧光法观察Cdc42在小鼠磨牙发育分化过程中的表达变化。
细胞牙骨质发育的组织形态学观察于西佼;杜言梅;姜欢;杜毅【摘要】AIM:To observe the histological and cellular activity changes during cellular cementum develop-ment in BALB/c mice.METHODS:Post-natal 15, 19 and 25d BALB/c mice (8 in each group) were sacrificed and cellular cementum of mandibular first molar was taken.Cytokeratin 14( CK14 ) expression in epithelial cells of Hertwig′s epithelial root sheath( HERS) was examined by PV two-step immunohistological method.The morphology and distribution of epithelial cells and cellular cementum were examined by light and transmission electron microscope ( TEM) .Apoptosis was identified by the terminal deoxy-transferase ( TdT)-mediated dUTP-biotin nick end labeling ( TUNEL) method.RESULTS:During cellular cementogenesis, some cells were incorporated in the cementum and positive CK14 expression can be observed.Following the disintegration of HERS, cementum matrix was rapidly deposi-ted around cementoblasts.Epithelial cells and cementoblasts on the root surface were embedded as cementocytes. CONCLUSION:Epithelial cells from disintegrated HERS may directly participate in cellular cementogenesis.%目的:通过追踪观察小鼠细胞牙骨质发育过程中的组织形态和细胞活性改变,探讨源于上皮根鞘断裂的上皮性细胞是否参与细胞牙骨质的发育。
Abi3bp在小鼠下颌骨发育中的表达变化林雨恒; 欧阳宁鹃; 赵闫; 卢陈佩; 代杰文; 沈国芳【期刊名称】《《口腔颌面外科杂志》》【年(卷),期】2018(028)001【总页数】4页(P10-13)【关键词】Abi3bp; 小鼠; 下颌骨; 表达变化【作者】林雨恒; 欧阳宁鹃; 赵闫; 卢陈佩; 代杰文; 沈国芳【作者单位】上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颅颌面科上海市口腔医学重点实验室上海 200011【正文语种】中文【中图分类】R782Abi3bp基因又称Tarsh,其在人类位于3q12.2染色体。
人Abi3bp编码的蛋白质由1 075个氨基酸组成,相对分子量约为118 642 Da。
Abi3bp广泛表达于骨髓、大脑、心脏和肺等正常组织中,其在调控细胞的衰老、抑制肿瘤的发生、调控间充质干细胞及心肌祖细胞生物学行为等方面具有重要作用。
Abi3bp蛋白含有III 型纤连蛋白结构域,这种结构能够促进细胞黏附以及组装形成细胞外基质。
以往研究表明,Abi3bp与大骨关节病的发生密切相关,但其对下颌骨的作用研究尚未见报道。
下颌骨作为全身骨骼发育中较为特殊的组织,主要是通过颅神经嵴细胞迁移至第一鳃弓组织后进一步增殖、分化,通过膜内成骨及软骨内成骨分别形成下颌体以及下颌支[1]。
本研究通过免疫组织化学方法,观察了Aabi3bp蛋白在小鼠下颌骨发育过程中的表达特点,为进一步探究其在口腔颌面部发育过程中可能发挥的调控作用提供基础。
1 材料和方法1.1 实验动物与标本8~10周龄C57BL/6J成年雌鼠10只、雄鼠5只,饲养于SPF级动物房(上海交通大学医学院附属第九人民医院动物实验中心),体重27~30 g(平均体质量为29.10 g)。
雌雄小鼠按2:1合笼,以阴道栓出现的当日中午定为胚胎发育的第0.5天(简写为E0.5),新生小鼠鼠龄以出生当日中午定为出生后0.5 d(简写为P0.5)。
取胚胎第 14.5、18.5 天小鼠(简写为 E14.5、E18.5)各 3 只,出生后第 1、14、28 天小鼠(简写为 P1、P14、P28)各 3只,断颈法处死小鼠,分离小鼠头部用以制备下颌骨标本。
[文章编号]1674-8603(2011)03-0131-061,25二羟维生素D3在小鼠下颌骨矿化作用机制研究刘洪1,丁风云1,颜成东1,管铨成1,郑阳玉2*(1.盐城卫生职业技术学院,江苏盐城224005;2.南京医科大学口腔医学研究所,江苏南京210029)[摘要]目的:探讨1,25二羟维生素D3(1,25(OH )2D 3)在小鼠下颌骨矿化中的作用机制。
方法:利用组织学、免疫组织化学和实时定量RT-PCR 比较分析了6周龄野生型和1α羟化酶基因敲除(1α(OH )ase -/-)小鼠下颌骨矿化的差异。
结果:与野生型小鼠相比,1α(OH )ase -/-小鼠的类骨质的比例明显增加,骨钙素(osteocalcin ,OCN )在下颌骨沉积面积和在成骨细胞表达水平均明显降低,碱性磷酸酶(ALP )在下颌骨成骨细胞的活性和表达水平明显降低,而Biglycan 在下颌骨的沉积面积和在成骨细胞表达水平则明显增加。
结论:1,25(OH )2D 3通过调节OCN 、ALP 和Biglycan 的基因表达水平和蛋白质沉积水平促进小鼠下颌骨的矿化。
[关键词]1,25二羟维生素D 3;1α羟化酶基因敲除;下颌骨矿化[中图分类号]R349.6[文献标识码]A[doi ]10.3969/j.issn.1674-8603.2011.03.005The research of mechanism of 1,25(OH )2D 3in the mandible mineralization of miceLIU Hong 1,DING Feng-yun 1,YAN Cheng-dong 1,GUAN Quan-cheng 1,ZHENG Yang-yu 2.(1.Yancheng Health Vocational &Technical College ,Yancheng 224005,China ;2.Insititute of Stomatology ,School of Stomatology ,Nanjing Medical University ,Nanjing 210029,China )Corresponding author :ZHENG Yang-yu ,Email :yangyu_zheng@yahoo.com.cn ,Tel :0086-25-86862843[Abstract ]Objective :To determine the role of 1,25(OH )2D 3in mandible mineralization of mice.Methods :The differences of the mandible mineralization between the wild-type and 1-α-hydroxylase gene knockout mice at 6weeks old were assessed by histology ,im-munohistochemistry and real-time RT-PCR.Results :The ratio of osteoid volume was increased significantly ,the deposition of osteocalcin (OCN )in mandible and the expressions of osteocalcin in the osteoblasts were reduced significantly ,the active and the expression of al-kaline phosphatase (ALP )in osteoblasts were also reduced significantly in 1-α-hydroxylase gene knockout mice compared to that in the wild-type littermate.But the deposition of Biglycan in the mandible and the expression of Biglycan in the osteoblasts were increased in 1-α-hydroxylase gene knockout mice.Conclusions :These results suggest that 1,25(OH )2D 3promote mineralization of mandible of mice by regulating OCN ,ALP and Biglycan genes expression and protein deposition.[Key words ]1,25(OH )2D 3;1-α-hydroxylase gene knockout ;Mandible mineralization 基金项目:盐城市医学科技发展计划项目资助(YK2010112)*通信作者:郑阳玉Tel :(025)86862843Email :yangyu zheng@yahoo.com.cn1,25二羟维生素D3(1,25(OH )2D 3)作为维生素D3的活性形式,不仅能够调节血液中钙、磷的水平,还对全身骨骼的矿化起重要的作用。
几种细菌芽孢染色方法的对比分析摘要:通过研究几种细菌芽孢染色方法, 对不同方法的优缺点进行比较, 根据实际的实验室条件和诸多因素, 本着方法简易、结果可靠、学生易掌握、成功率高、环保安全等原则, 选出适合教学和科研应用的芽孢染色方法。
关键词:芽孢; 染色; 明显; 安全;Abstract:By studying several methods of bacterial spore stain and comparing the advantages and disadvantages of different methods, according to the actual laboratory conditions and many factors, on the basis of simple method, reliable results, easy to master, high success rate, environmental protection and security some suitable spore stain methods were selected for teaching and research application.Keyword:spore; dyeing; obvious; security;芽孢(endospore)是一些革兰氏阳性细菌在生长发育后期形成的休眠保护结构,芽孢的着生位置、形状、大小等因素对细菌有分类学意义。
芽孢染色法也是微生物学实验教学和相关科研的一个最基本的实验技术。
而芽孢的结构非常复杂,用常规的染色方法很难将其染上颜色。
芽孢的染色方法至少有Schaeffer-Fulton法、改良的Schaeffer-Fulton法、Bartholomew-Mittwer法、Moeller法、改良Moeller法、Modified Ziehl-neelsen法、Abbott 方法、Doner法及改良Doner法等。
两种利用micro-CT测量小鼠牙周炎模型牙槽骨吸收的方法比较崔迪;张杨珩;张婷;魏挺力;闫福华【摘要】Objective To evaluate two methods measuring alveolar bone loss by micro computed tomography (micro-CT)based on periodontitis model in mice.Methods The silk ligatures were tied around the right maxillary second molars of mice to induce periodontitis model.The right half maxillaries of mice model were harvested for micro-CT analysis.Three dentists were recruited for the measurement with two different methods:Modified tomography (T) method and reconstruction (R) method.Accuracy and consistency of each method were estimated by standard deviation (SD).Results The SDs of R method managed by the same operator (measurement for 3 times) or different operators (3 operators) were 34.87μm and 35.67 μm respec tively,while that of T method was 7.82 μm and 14.24 μm respectively.The SDs of T method were significantly lower than those of R method (both P<0.05).Conclusion T method is more accurate and consistent than R method for evaluating alveolar bone loss in mice periodontitis model.%目的比较两种利用微计算机断层扫描(micro-CT)测量小鼠牙周炎模型牙槽骨吸收的方法.方法结扎小鼠右侧上颌第二磨牙建立牙周炎模型,分离其右侧上颌骨后进行micro-CT扫描.由3名医师分别采用重建法(R法)和改良的断层测量法(T法)进行牙槽骨测量,分析比较两种测量方法的一致性和稳定性.结果不同测量者采用R法进行测量的标准差(SD)为35.67μm,采用T法的SD为14.24 μm,差异有统计学意义(P<0.05);同一测量者采用R法测量3次所得结果之间的SD为34.87μm,采用T法的SD为7.82 μm,差异有统计学意义(P<0.05).结论采用T法测量小鼠牙周炎模型牙槽骨吸收的一致性和稳定性均优于R法.【期刊名称】《中国介入影像与治疗学》【年(卷),期】2017(014)003【总页数】5页(P173-177)【关键词】牙槽骨吸收;牙周炎;体层摄影术,X线计算机【作者】崔迪;张杨珩;张婷;魏挺力;闫福华【作者单位】南京大学医学院附属口腔医院牙周科,江苏南京 210008;南京大学医学院附属口腔医院牙周科,江苏南京 210008;南京大学医学院附属口腔医院牙体牙髓科,江苏南京 210008;南京大学医学院附属口腔医院口腔种植科,江苏南京210008;南京大学医学院附属口腔医院牙周科,江苏南京 210008【正文语种】中文【中图分类】R816.98牙槽骨吸收是牙周炎的典型病理改变,也是判定患牙愈后的重要依据之一[1]。
β-catenin在小鼠下颌第一磨牙发育过程中的表达陈蔚婷;叶远舟;蔡昀;蒋备战【摘要】目的检测β-catenin在小鼠下颌第一磨牙牙冠形成的表达,探讨其在小鼠牙胚发育过程中的作用.方法取孕11天(E11.5)、孕13.5天(E13.5)、孕14.5天(E14.5)、孕16.5天(E16.5)、孕18.5天(E18.5)的ICR胎鼠及出生后24h、出生后3天及出生后7天(PN0、PN3、PN7)的小鼠,常规组织学处理并制备下颌第一磨牙冠状或矢状切片,用免疫组织化学实验方法检测β-catenin在下颌第一磨牙相关组织中的表达情况.结果β-catenin在小鼠下颌第一磨牙早期发育不同阶段呈现特异性的表达模式.在E11.5,上皮层可检测到β-catenin的表达;在E13.5,β-catenin的表达集中在向下方间充质凹陷的牙蕾上皮;在E14.5,在内釉上皮层及釉结节可以检测到β-catenin的强阳性表达;在E16.5、E18.5,在内外釉上皮、第二釉结节及邻近上皮的成牙本质细胞层可检测到β-catenin的表达.从出生后开始,在冠方的成牙本质细胞层、成釉细胞层,以及根方邻近上皮根鞘和上皮隔的牙乳头中的成牙本质细胞层内,可观察到β-catnein的阳性表达.结论在牙胚发育过程中,β-catenin在牙源性上皮、釉结节及成牙本质细胞、成釉细胞中强表达,与牙冠形态发育及间充质细胞向成牙本质细胞分化密切相关.%Objective To detect the expression pattern of β-catenin in the first mandibular molar tooth germs of mice and its relation to early tooth development.Methods Serial paraffin sections of the first mandibular molars at different development stages ofmice(E11.5,E13.5,E14.5,E16.5,E18.5,PN0,PN3,PN7)were made.The expression of β-catenin was analyzed by immunohistochemistry.Results The expression patterns of β-catenin in the first lower molars varied among the mice with different development stages.It was positivelyexpressed in the dental epithelium at tooth initiation stage;and it was detected in the central areas of the tooth bud during the bud stage, while the immunostaining was focused on the inner and outer enamel epithelium, especially on the enamel knot, during the cap stage.At the bell stage, the β-catenin was strongly expressed in the outer and inner enamel epithelium and the second enamel knot.During the early postnatal stage, the expression of β-catenin was detected in the areas where the ameloblasts or the odontoblasts were located.Conclusion The expression of β-catenin was in a temporal-spatial specific pattern;particularly, it is strongly expressed in the dental epithelial, enamel knot and odontoblasts with the development of tooth germ.This result indicates that-catenin may be involved in tooth morphogenesis of the mouse molars and the biological process of the odontoblast differentiation.【期刊名称】《同济大学学报(医学版)》【年(卷),期】2017(038)003【总页数】6页(P19-24)【关键词】β-catenin;Wnt信号通路;牙胚发育;磨牙;小鼠【作者】陈蔚婷;叶远舟;蔡昀;蒋备战【作者单位】同济大学附属口腔医院口腔预防医学教研室-上海牙组织修复与再生工程技术研究中心,上海 200072;同济大学附属口腔医院口腔预防医学教研室-上海牙组织修复与再生工程技术研究中心,上海 200072;同济大学附属口腔医院口腔预防医学教研室-上海牙组织修复与再生工程技术研究中心,上海 200072;同济大学附属口腔医院口腔预防医学教研室-上海牙组织修复与再生工程技术研究中心,上海200072【正文语种】中文【中图分类】R780.1牙齿的生长发育是牙源性上皮和其下方间充质之间相互作用的结果[1]。
脂褐素三种染色方法比较
董愉;张芬芬;吴惠群;梁英杰
【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》
【年(卷),期】2016(025)006
【摘要】目的比较显示脂褐素的3种特殊染色方法,探讨哪一种方法更适合应用于临床病理诊断.方法分别采用三氯化铁-铁氰化钾、醛品红和PAS 3种特殊染色方法,检测HE染色石蜡切片中呈浅棕色或金黄色的颗粒是否为脂褐素.三氯化铁-铁氰化钾染色的脂褐素呈蓝黑色颗粒,醛品红染色的脂褐素呈深紫色颗粒,PAS染色的脂褐素呈红色颗粒.结果通过3种染色结果的比较,发现三氯化铁-铁氰化钾染色对比清晰,定位准.结论三氯化铁-铁氰化钾、醛品红、PAS三种染色均可用于显示脂褐素,但三氯化铁铁氰化钾染色方法优于其他两种.
【总页数】3页(P559-561)
【作者】董愉;张芬芬;吴惠群;梁英杰
【作者单位】中山大学附属第一医院病理科,广州510080;中山大学附属第一医院病理科,广州510080;中山大学附属第一医院病理科,广州510080;中山大学附属第一医院病理科,广州510080
【正文语种】中文
【中图分类】R331
【相关文献】
1.大鼠脑组织高尔基染色三种制备方法的比较 [J], 王蕾;张芳;汤仁仙;张冠群;牛海晨
2.三种特殊染色方法在显示系统性硬化症小鼠肺组织胶原纤维的比较 [J], 胡谋波;吕军影
3.杜氏利什曼原虫前鞭毛体三种不同染色方法的比较 [J], 潘智华;刘亚萍;王蕾;汤仁仙
4.三种不同脂肪染色方法的比较 [J], 陈敬文;游淑源;王天娲;金洪涛;罗金风
5.三种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果比较 [J], 蒋伟东;朱佩琪;周诺
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右下颌第一磨牙的雕刻方法
郝嘉南;陈杰;彭东;杨洁;周锋华;王学辉
【期刊名称】《吉林医药学院学报》
【年(卷),期】2009(030)001
【摘要】@@ 随着医学水平的飞速发展和生活水平的不断提高,人们越来越注意个人口腔健康,这就对口腔医学专业的教学提出了新的要求.以培养实用型人才(即具备扎实的基础理论知识、良好的职业道德、较强的实践技能和具备预防口腔疾病知识的人才)为主要目标,进行口腔解剖生理学课程的创新研究.为了帮助学生对牙体结构的了解,增强实践和动手能力,加强专业技能,为今后临床工作打下坚实的基础,进行牙体的雕刻是行之有效的方法.现在将右下颌第一磨牙的雕刻方法介绍如下.
【总页数】2页(P21-22)
【作者】郝嘉南;陈杰;彭东;杨洁;周锋华;王学辉
【作者单位】吉林医药学院解剖教研室,吉林,吉林,132013;吉林医药学院解剖教研室,吉林,吉林,132013;吉林医药学院解剖教研室,吉林,吉林,132013;吉林医药学院2005级口腔专科活动小组,吉林,吉林,132013;北京市空军总医院涉外病区,北京,100036;北京市空军总医院涉外病区,北京,100036
【正文语种】中文
【中图分类】G782.1
【相关文献】
1.食品雕刻中花卉雕刻教学方法初探 [J], 谢乃强
2.右下颌第一磨牙的雕刻方法 [J], 郝嘉南;陈杰;彭东;杨洁;周锋华;王学辉
3.下颌第一磨牙纵折后暂封方法的临床研究 [J], 祝兰英;姜雪梅;何艳
4.三种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果比较 [J], 蒋伟东;朱佩琪;周诺
5.探究红木雕刻中材料的前期处理方法 [J], 宗玉华
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小鼠下颌第一磨牙根尖周炎及牙髓血运重建模型的建立陈佳婧;吴补领;徐稳安;陈秋月;吕婉瑜;易思;屈茜;吕晓琳【期刊名称】《牙体牙髓牙周病学杂志》【年(卷),期】2016(000)001【摘要】目的:建立小鼠下颌第一磨牙根尖周炎及去髓后血运重建模型。
方法:20只小鼠左侧下颌第一磨牙行牙髓摘除术后进行牙髓血运重建处理;右侧下颌第一磨牙髓腔开放形成实验性根尖周炎;另取10只小鼠未处理磨牙作为空白对照。
术后3周进行影像学、组织学及 qRT -PCR 分析。
结果:牙髓血运重建组表现为根管腔缩窄,根尖部膨大,管腔内有血管化的新生组织长入,根尖部有骨样和软骨样组织沉积,血管内皮生长因子(VEGF)的表达显著高于对照组(P <0.05)。
根尖周炎组可观察到根尖周骨质破坏,根管内含大量坏死物质,根尖周慢性炎症细胞浸润,IL -1β、IL -6、TNF -α的表达显著高于对照组(P <0.05)。
结论:成功建立小鼠下颌第一磨牙根尖周炎及去髓后血运重建模型。
%AIM:To establish an experimental animal model of apical periodontitis and pulp revasculariza-tion in mice.METHODS:The left first mandibular molars of 3 -week C57BL/6 mice underwent pulpectomy,then received pulp revascularization treatment(group PR).While the dental pulp cavity of the right first mandibular molars were exposed to the oral environment(group AP).Untreated normal teeth were served as the blank controls.Animals were killed 3 weeks after surgery for radiographical,histological and qRT -PCR examination.RESULTS:In PR group canal space was narrowed and hard tissue was found in root canal observed by Micro-CT.Histologic evaluationshowed that in PR group the canal space was filled with connective tissue containing numerous blood vessels,and the apical portion of the root was full of calcification tissue and bone like tissues.VEGF expression was higher in PR group than that in the blank control group(P <0.05).In AP group,the root canal was filled with necrotic tissues.Apical le-sion was present and periapical portion had inflammatory cell infiltration,apical bone resorption was observed by Micro-CT.IL-1 β,IL-6,and TNF-αexpression was higher than that of the blank control group(P <0.05).CON-CLUSION:In this study,the animal models of experimental apical periodontitis and pulp revascularization in mice were established.【总页数】6页(P12-16,44)【作者】陈佳婧;吴补领;徐稳安;陈秋月;吕婉瑜;易思;屈茜;吕晓琳【作者单位】广东广州 510515 南方医科大学南方医院; 广东广州 510515 南方医科大学口腔医学院;广东广州 510515 南方医科大学南方医院; 广东广州510515 南方医科大学口腔医学院;广东广州 510515 南方医科大学南方医院; 广东广州 510515 南方医科大学口腔医学院;广东广州 510515 南方医科大学南方医院; 广东广州 510515 南方医科大学口腔医学院;广东广州 510515 南方医科大学南方医院; 广东广州 510515 南方医科大学口腔医学院;广东广州 510515 南方医科大学南方医院; 广东广州 510515 南方医科大学口腔医学院;广东广州 510515 南方医科大学南方医院; 广东广州 510515 南方医科大学口腔医学院;广东广州510515 南方医科大学南方医院; 广东广州 510515 南方医科大学口腔医学院【正文语种】中文【中图分类】R780.1【相关文献】1.下颌第一磨牙牙髓坏死和慢性根尖周炎一次性根管治疗的临床效果观察 [J], 侯云芳2.根管治疗术一次法治疗下颌第一磨牙牙髓炎、牙髓坏死、根尖周炎术后观察研究[J], 王加昌;王久利;祝荣杰;苟培芳;贺忠琴;谢小艳3.牙髓血运重建术治疗年轻恒牙慢性根尖周炎的临床效果 [J], 高黎; 高静静; 王蕊4.牙髓血运重建术应用于慢性根尖周炎年轻恒牙后牙的疗效分析 [J], 胡晓杰5.一次性根管治疗下颌第一磨牙牙髓坏死与慢性根尖周炎的临床疗效分析 [J], 李思乐;李銶石因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
上游刺激因子1在小鼠牙齿发育过程中表达的原位杂交研究吴礼安;文玲英;杨富生;王小竞【期刊名称】《牙体牙髓牙周病学杂志》【年(卷),期】2007(17)8【摘要】目的:检测小鼠牙齿发育中上游刺激因子1 mRNA的表达及时空分布模式.方法:制备E13, 16, 19, P1, 5, 8, 11, 21 d小鼠第一磨牙石蜡切片,用我们前期实验制备的USF1 cDNA探针,原位杂交方法检测USF1mRNA的表达和分布.结果:原位杂交染色从钟状晚期小鼠牙胚中开始检测到阳性信号,持续至P11 d,阳性信号主要定位于成牙本质细胞与成釉细胞;而蕾状期,帽状期,钟状期牙胚中未检测到阳性信号,并且在牙齿萌出后(P21 d),牙齿中USF1mRNA阳性信号再次消失.结论:牙胚中有USF1mRNA表达,主要位于分泌期的成牙本质细胞和成釉细胞,表达模式具有显著的时空特异性.【总页数】3页(P436-438)【作者】吴礼安;文玲英;杨富生;王小竞【作者单位】第四军医大学口腔医学院,陕西,西安,710032;第四军医大学口腔医学院,陕西,西安,710032;第四军医大学口腔医学院,陕西,西安,710032;第四军医大学口腔医学院,陕西,西安,710032【正文语种】中文【中图分类】R780.2【相关文献】1.同源异型盒基因Msx-1在小鼠牙齿发育生物矿化过程中的表达研究 [J], 王颖莉;王嘉德;高岩;王申五2.小鼠牙胚发育过程中上游刺激因子1蛋白表达与分布模式的研究 [J], 吴礼安;文玲英;杨富生;王小竞3.细胞外基质磷酸糖蛋白在小鼠牙齿发育过程中的表达 [J], 王建;刘宗霞;唐开亮;李纾4.核心结合因子a1在小鼠牙齿发育过程中的表达 [J], 余擎;肖明振;朱庆林;郭婷;李峰5.成牙本质细胞中上游刺激因子1表达的原位杂交研究 [J], 吴礼安;文玲英;杨富生;刘勇因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
三种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果比较蒋伟东;朱佩琪;周诺【摘要】目的比较3种染色方法在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期的染色效果,为选择合适的染色方法提供参考.方法选取出生后第5、7、14、21天的ICR 小鼠,制备小鼠下颌第一磨牙冠状切片,采用H-E染色、Masson染色法和Gomori 染色法进行组织形态学研究,比较染色结果 .结果在小鼠出生后第5天(PN5)至PN7为牙根发育起始阶段,H-E染色显示:成牙本质细胞、成釉细胞及上皮根鞘细胞形态最为清晰;Masson染色法显示:图片色彩鲜艳,牙釉质、牙本质及前期牙本质间层次分明;Gomori染色方法显示:细胞核呈单一的蓝黑色,但软、硬组织对比度不佳.从PN14小鼠牙齿开始萌出到PN21牙根发育基本完成阶段,H-E染色显示:成釉细胞、成牙本质细胞及牙周膜成纤维细胞形态最为清晰;Masson染色法显示:牙骨质与牙槽骨间的胶原纤维排列规则,牙槽骨形态清晰;而Gomori染色效果总体不佳.结论在小鼠下颌第一磨牙牙根不同发育时期,3种染色方法各有优势.H-E染色适用于各类细胞形态的观察,Masson染色适用于牙体硬组织及骨组织的观察,Gomori染色法总体效果不佳.【期刊名称】《同济大学学报(医学版)》【年(卷),期】2018(039)006【总页数】5页(P66-70)【关键词】牙根发育;上皮根鞘;H-E染色;Masson染色法;Gomori染色法【作者】蒋伟东;朱佩琪;周诺【作者单位】广西口腔颌面修复与重建研究自治区级重点实验室,广西南宁530021;广西颅颌面畸形临床医学研究中心,广西南宁530021;颌面外科疾病诊治研究重点实验室(广西高校重点实验室),广西南宁530021;广西口腔颌面修复与重建研究自治区级重点实验室,广西南宁530021;广西颅颌面畸形临床医学研究中心,广西南宁530021;颌面外科疾病诊治研究重点实验室(广西高校重点实验室),广西南宁530021;广西口腔颌面修复与重建研究自治区级重点实验室,广西南宁530021;广西颅颌面畸形临床医学研究中心,广西南宁530021;颌面外科疾病诊治研究重点实验室(广西高校重点实验室),广西南宁530021【正文语种】中文【中图分类】R781组织形态学染色方法有助于在微观下研究组织形态[1],对牙根生长发育阶段的研究十分重要。
目前,最常用的染色方法是H-E染色,该染色方法技术成熟,已广泛应用于组织学研究中,但其在运用过程中仍有缺陷,如对组织间隙的染色弱、H-E试剂容易产生沉淀而影响染色结果等[2]。
除H-E染色外,Masson染色法及Gomori染色等方法也广泛应用于组织学的研究,其中Masson染色法常用于胶原纤维及骨组织的染色[3-5],而Gomori染色法能将口腔组织染成对比鲜明的红绿色[6]。
小鼠下颌第一磨牙牙根从出生后第5天(PN5)开始发育,到出生后第21天(PN21)牙根发育基本完成,在这一过程中,牙根及其相关牙周组织发生了一系列的变化[7]。
为了更好的观察到其细致精确的组织学改变,此次研究选取处于牙根不同发育时期的ICR小鼠下颌第一磨牙作为研究对象,采用上述3种染色方法染色,比较其在牙体硬组织、牙周膜胶原纤维、牙槽骨等组织的染色效果,为研究不同发育阶段牙根选择合适的染色方法提供参考。
1 材料与方法1.1 实验动物与材料实验所用ICR小鼠购自上海斯莱克实验动物有限公司;H-E试剂盒(KGA 224)、Masson染色试剂盒(KGMST-8003)购自江苏凯基生物技术有限公司;天青石蓝B、甘油、磷钨酸、冰醋酸、甲基绿、苏木精染液购自美国Sigma公司;硫酸铁铵购自成都麦卡希试剂公司;蒸馏水、变色酸2R购自上海阿拉丁科技股份有限公司。
Gomori染液的制备如下。
(1) 天青石蓝染液:天青石蓝B 0.5g,硫酸铁铵5g,甘油14mL,蒸馏水100mL,将硫酸铁铵溶于蒸馏水中,放置24h后加入天青石蓝,稍加温水煮沸,冷却后过滤再加甘油;(2) 变色酸染液:变色酸2R 0.8g,磷钨酸1g,冰醋酸1mL,蒸馏水100mL;(3) 甲基绿染液:甲基绿0.5g,蒸馏水100mL。
主要实验器材:组织处理仪(STP 120)购自美国Thermo Fisher公司;石蜡包埋机(LEICA EG1150H)、石蜡切片机(LEICA RM2235)、烤片机(LEICA HI 1220)购自德国Leica公司,采用日本Olympus光学显微镜采集系统采集图片。
1.2 标本制备以小鼠出生当日早晨定为0d(postnatal day 0, PN0),分别选取PN5, PN7,PN14, PN21的小鼠各3只,乙醚麻醉后断颈处死,分离下颌骨,用PBS冲洗3次后,置于4%多聚甲醛固定液(pH=7.4)中室温固定24h,10%EDTA脱钙液中脱钙,使用梯度乙醇脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,制成5μm厚的冠状组织学切片,4℃下保存备用。
1.3 H-E染色法常规方法脱蜡至水,滴加苏木精染液染色5min,水洗,返蓝10min,滴加伊红染液20s,水洗2~3s,冲洗掉多余染液后放入梯度乙醇中脱水,置于二甲苯中,封片[6]。
1.4 Masson染色法切片脱蜡至水,滴加1滴苏木精染色液,染色10min,冲掉染液后流水冲洗5min,滴加1滴复合染色液,染色5min,冲掉染液后滴加1滴磷钼酸40s,甩干后滴加苯胺蓝染液2min,冲掉染液放入60°C烘箱烘干,封片[2]。
1.5 Gomori染色法常规方法脱蜡至水,用天青石蓝染液染色10min,水洗,再用明矾苏木精染液染核,水洗,盐酸乙醇分化,显蓝。
变色酸2R染液染色5min,2%冰醋酸水溶液冲洗3次,观察牙本质以及牙骨质等密质骨呈红色且其他部分无色后,使用亮绿染液复染1min。
使用梯度乙醇脱水,二甲苯透明,封片[6]。
2 结果2.1 PN5时小鼠下颌第一磨牙切片3种染色法效果比较小鼠下颌第一磨牙在PN5时,其牙冠不断发育,牙冠硬组织继续生成,从牙尖向牙颈延伸,开始形成上皮根鞘(Hertwig’s root sheath,HERS)[8]。
3种染色法均可观察到牙釉质、牙本质、前期牙本质、成釉细胞、成牙本质细胞以及HERS等结构,见图1。
H-E染色结果显示:各类细胞以及HERS的形态清晰,细胞核呈鲜明的蓝紫色,牙釉质、牙本质、前期牙本质三者分界明显。
Masson法结果显示:图片色彩鲜艳,牙釉质被染成鲜红色,牙本质呈蓝色,提示其富含胶原。
HERS明显,牙槽骨清晰可见,包绕整个牙胚,较其他两者更为清晰,但成釉细胞与成牙本质细胞形态不太清晰。
Gomori染色法结果显示:牙釉质与牙本质层次分明,牙釉质被染成暗红色,牙本质呈蓝灰色,但各类细胞的形态不够清晰,细胞核呈单一的蓝黑色。
图1 小鼠PN5时下颌第一磨牙3种方法染色结果Fig.1 The result of the mandibular first molar root in postnatal day 5 mice by three differentstaining methodsP:牙髓,A:成釉细胞,O:成牙本质细胞,E:牙釉质,D:牙本质,HERS:上皮根鞘;放大200倍选取的范围为放大100倍中的方框处2.2 PN7时小鼠下颌第一磨牙发育形态学比较小鼠的下颌第一磨牙在PN7时,牙冠发育已经完成,颈环游离端的内外釉上皮细胞增生成双层细胞的HERS。
根鞘内层细胞诱导牙乳头细胞分化,使得HERS不断生长,实现牙根的形成[9]。
在该时期,H-E染色、Masson法、Gomori染色结果与PN5时期基本相同。
Mason法总体染色效果较其他两种方法好,牙釉质、牙本质以及前期牙本质层次分明,色彩鲜艳,特别是包绕牙胚的牙槽骨轮廓清晰可见,但成牙本质细胞与成釉细胞形态在H-E染色中最为清晰,见图2。
图2 小鼠PN7时下颌第一磨牙3种方法染色结果Fig.2 The result of the mandibular first molar root in postnatal day 7 mice by three different staining methodsP:牙髓,A:成釉细胞,O:成牙本质细胞,E:牙釉质,D:牙本质,HERS:上皮根鞘;放大200倍选取的范围为放大100倍中的方框处2.3 PN14时3种染色法效果比较小鼠下颌第一磨牙在PN14时,随着HERS不断生长,牙根继续发育,逐渐形成牙髓腔的形态,同时,在牙本质增厚的过程中,根鞘变性中断,根鞘细胞进入牙囊中,牙囊细胞再移向根部牙本质,与牙本质接触后,分化为成牙骨质细胞,分泌牙骨质基质,矿化形成牙骨质[10]。
这一阶段是牙周组织形成的关键时期,组织学着重观察其HERS以及牙骨质、牙周膜韧带和支持性牙槽骨等。
在3种染色方法结果中,牙釉质因为脱钙,不能观察到。
H-E染色结果显示:HERS细胞形态清晰,牙周膜成纤维细胞及牙槽骨清晰可见,但胶原纤维形态不够分明。
Masson染色结果显示:HERS比较直观;牙周胶原纤维排列整齐、规则;牙槽骨形态也比较清晰,与周边玫瑰红的肌肉组织界限分明,与H-E染色相比效果更好,但牙周膜成纤维细胞染色效果较差。
Gomori染色效果是三者中最差的,细胞形态与组织结构层次均不清晰,见图3。
图3 小鼠PN14时下颌第一磨牙3种方法染色结果Fig.3 The result of the mandibular first molar root in postnatal day 14 mice by three different staining methodsHERS:上皮根鞘,AB:牙槽骨,PDL:牙周纤维,P:牙髓,D:牙本质;放大200倍选取的范围为放大100倍中的方框处2.4 PN21时3种染色法效果比较小鼠的下颌第一磨牙在PN21时,牙根发育基本完成,牙齿已经萌出[11]。
在3种染色方法结果中,牙釉质因经脱钙处理,无法被观察到;该时期牙骨质和牙本质分界不清;但牙槽骨、牙周纤维及牙骨质三者界限分明。
H-E染色结果显示:牙本质与牙骨质呈淡粉红色,牙周组织中,牙周膜纤维细胞呈梭形排列,牙周纤维形态清晰但对比度不强。
Masson染色结果结果显示:牙本质呈靛蓝色,牙周组织中胶原纤维排列规则整齐,但牙周膜成纤维细胞形态不清。
Gomori染色结果中,牙本质、牙骨质以及牙槽骨染色呈灰色;牙周组织中,成纤维细胞核形态清晰,但胶原纤维排列不够清晰,见图4。
3 讨论牙齿的生长发育是一个十分复杂的过程。
研究[12-13]表明,哺乳类动物的牙齿发育是牙源性上皮与牙源性间充质相互作用的结果。