人教版高中生物选修1专题5dna和蛋白质技术复习测教师版

2021年高中生物专题检测专题5 DNA和蛋白质技术（含解析）新人教版选修1A．聚合酶链式反应，是用DNA聚合酶在体外扩增DNA片段的技术B．在用PCR技术扩增DNA时，DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似C．PCR反应需在一定的缓冲溶液中进行，只需提供：DNA模板以及四种脱氧核苷酸D．PCR一般经历三十多次循环，每次循环分为变性、复性和延伸解析PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行，需提供DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，四种脱氧核苷酸，耐热的DNA聚合酶，同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。

答案 C4．PCR利用了DNA热变性的原理，PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器，对PCR 过程中“温度的控制”的说法错误的是( )。

A．酶促反应需要高的温度，是为了确保模板是单链B．延伸的温度必须大于退火温度，而小于变性温度C．DNA聚合酶不能热变性，要用耐高温的聚合酶D．DNA解旋酶不能热变性，为了确保模板是单链解析PCR是体外DNA扩增，DNA双链的解开不需要解旋酶，靠高温使其变性，双螺旋结构解体，双链分开。

在复性后，在耐高温的DNA聚合酶的作用下根据碱基互补配对原则合成新的DNA，因此延伸的温度要大于复性温度小于变性温度。

答案 D5．下图表示DNA变性和复性过程，相关说法正确的是( )。

A．向右的过程为加热(80～100 ℃)变性的过程B．向左的过程是DNA双链迅速致冷复性C．变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同D．图中DNA片段共有4个游离的磷酸基、4个3′端解析变性后的DNA在缓慢降温后才会复性；变性与在生物体内解旋过程的条件不同、实质相同；任一DNA片段都有两个游离的磷酸基(5′端)和两个3′端。

答案 A6．下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有( )。

A．提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水胀破细胞B．用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质C．蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNAD．蛋白质可以用电泳的方法进行分离纯化，但DNA不可用该方法纯化解析DNA也可用电泳法分离纯化；透析只能除去小分子杂质。

专题五ＤＮＡ和蛋白质技术课题一ＤＮＡ的粗提取与鉴定一、提取DNA的溶解性原理包括哪些方面？1.DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精。

①DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点？要使DNA溶解，需要使用什么浓度？要使DNA析出，又需要使用什么浓度？在0.14mol/L时溶解度最小；较高浓度可使DNA溶解；0.14mol/L可使DNA析出。

②在溶解细胞中的DNA时，人们通常选用2mol/LNaCl溶液；将DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中缓慢注入蒸馏水，以稀释NaCl溶液。

酒精是一种常用有机溶剂，但DNA却不能溶于酒精（特别是95％冷却酒精），但细胞中蛋白质可溶于酒精。

2.从理论上分析，预冷的乙醇溶液具有以下优点。

一是抑制核酸水解酶活性，防止DNA降解；二是降低分子运动，易于形成沉淀析出；三是低温有利于增加DNA分子柔韧性，减少断裂。

3.采用DNA不溶于酒精的原理，可以达到什么目的？将DNA和蛋白质进一步分离。

4.提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。

利用该原理时，应选用怎样的酶和怎样的温度值？蛋白酶，因为酶具有专一性，蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。

温度值为60～80℃，因为该温度值蛋白质变性沉淀，而DNA不会变性。

补充：DNA的变性是指DNA分子在高温下解螺旋，其温度在80℃以上，如在PCR技术中DNA变性温度在95℃。

5.洗涤剂在提取DNA中有何作用？洗涤剂将细胞膜上的蛋白质，从而瓦解细胞膜。

6.当鉴定提取出的物质是否是DNA时，需要使用什么指示剂进行鉴定？在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺呈现蓝色。

原理总结：通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA，可以从细胞中提取和提纯DNA；再利用酒精进一步将DNA与蛋白质分离开来，达到提纯的目的；最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。

二、实验材料的选取不同生物的组织中DNA含量不同。

专题综合测评(五) DNA和蛋白质技术(满分：100分时间：90分钟)一、选择题(每题2分，共25题，共50分)1．“DNA的粗提取与鉴定”实验中，提取鸡血细胞的核物质和析出含DNA 的黏稠物这两步中都用到了蒸馏水，其作用分别是()A．防止鸡血细胞失水皱缩和稀释NaCl溶液至0.14 mol/L使DNA析出B．防止鸡血细胞失水皱缩和溶解DNAC．使鸡血细胞吸水涨破和稀释NaCl溶液至0.14 mol/L使DNA析出D．使鸡血细胞吸水涨破和溶解DNAC[第一次加蒸馏水的目的是使鸡血细胞涨破，释放出核DNA，第二次加蒸馏水的目的是将NaCl溶液浓度降低到0.14 mol/L，使DNA析出。

] 2．某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验，操作错误的是()A．加入洗涤剂后用力进行快速、充分地研磨B．用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC．加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D．加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热A[加入洗涤剂后，搅拌动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作；用蛋白酶分解过滤后的研磨液中的蛋白质，可纯化过滤后研磨液中的DNA；加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌的目的是保证DNA分子不断裂，保持其完整性；加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热才能出现颜色反应。

] 3．对“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是()A．利用DNA能溶于冷酒精溶液，而蛋白质不溶于酒精溶液，可将DNA与蛋白质分离B．在用菜花作实验材料时，研磨过程中加入食盐的目的是瓦解细胞膜C．在DNA滤液中加入嫩肉粉，通过木瓜蛋白酶的作用，可提高DNA纯度D．利用DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最大的特点，可将DNA与杂质分离C[DNA不溶于冷酒精，蛋白质可以；加食盐的目的是溶解DNA；DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最小。

]4．下列关于DNA的粗提取与鉴定实验的相关叙述，错误的是()A．可以选择DNA含量较高的生物组织为材料，如鸡的血细胞B．DNA不溶于酒精，且在0.14 mol/L的氯化钠溶液中析出C．可以利用嫩肉粉把杂质多糖和RNA去除D．洗涤剂可以瓦解细胞膜，从而获得含有DNA的滤液C[鸡血细胞中含有DNA，可作为提取DNA的生物材料，不可选用哺乳动物成熟的红细胞；DNA不溶于酒精，且NaCl溶液浓度为0.14 mol/L时DNA溶解度最小，两者均可将DNA大量析出；嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶，可将蛋白质水解，从而除去蛋白质；洗涤剂可以瓦解细胞膜，从而获得含有DNA的滤液。

专题5 DNA和蛋白质技术【课题目标】本课题通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取，了解DNA的物理化学性质，理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理。

【课题重点与难点】课题重点：DNA的粗提取和鉴定方法。

课题难点：DNA的粗提取和鉴定方法。

【知识要点】1.DNA的物理化学性质，尤其是DNA的溶解性；2. 2.二苯胺法鉴定DNA的方法和原理。

[学习导航]DNA和蛋白质技术，包括DNA的提取、蛋白质的提取、DNA片段的扩增等，是开展分子生物学研究的基本技术。

本专题将从基础入手，学习DNA的粗提取、PCR技术和血红蛋白的提纯。

学习这些技术，不仅能够帮助学生初步了解分子生物学的基本实验方法，而且能够巩固必修课中学习的有关DNA和蛋白质的理论知识。

本专题的3个课题相对独立，没有严格的先后顺序。

课题1的操作难度不高，学生比较容易获得结果。

课题2的操作难度也不高，但PCR技术的原理是难点，学生要充分利用教材的图文资料，并且在教师的引导下进行实验操作。

课题3的操作难度比较大，所以学生一定要在教师的精心指导下完成操作。

专题知识归纳基础知识：提取DNA的方法实验材料的选取实验设计破碎细胞，获取含DNA的滤液去除滤液中的杂质DNA的粗提取DNA的析出与鉴定与鉴定以血液为材料要防止血液凝固DNA和蛋白质技术操作提示加入洗涤剂后，动作要轻缓；加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓二苯胺试剂要现配现用结果分析与评价课题延伸PCR原理基础知识PCR的反应过程多聚酶链式反实验操作应扩增DNA 操作提示片段结果分析与评价课题延伸凝胶色谱法血红蛋白的提基础知识缓冲溶液取和分离电泳样品处理实验操作凝胶色谱操作SDS—聚丙烯酰凝胶电泳红细胞的洗涤实验操作色谱主填料的处理凝胶色谱柱的装填蛋白质的分离结果分析与评价课题延伸专题知识检测一、选择题1．DNA的溶解度最低时，NaCl的物质的量浓度为（ C ）A. 2mol/LB.0.1mol/LC. 0.14mol/LD.0.015mol/L 2．DNA不溶解于（C ）A.NaCl溶液B.KCl溶液C.酒精溶液D.MgCl2溶液3．鉴定DNA的试剂是（D ）A.斐林试剂B苏丹Ⅲ染液 C.双缩脲试剂 D.二苯胺试剂4．在向溶解DNA得NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（C ）A.加快溶解DNA的速度 B.加快溶解杂质的速度 C.减小DNA 的溶解度，加快DNA析出 D.减小杂质的溶解度，加快杂质的析出5．在DNA的粗提取过程中，初步析出DNA和提取较纯净的DNA 所用的药品的浓度及其名称分别是（B ）①0.1g/ml柠檬酸钠溶液②2mol/LNaCl溶液③0.14mol/LNaCl溶液④体积分数为95%的酒精溶液⑤0.015mol/LNaCl溶液⑥0.04mol/LNaCl 溶液A.①③⑤B.③④C.②④D.②③④6．关于DNA的粗提取与鉴定实验的表达哪项是错误的（C ）A.离心沉淀的血细胞中加水是为了提取DNAB.NaCl溶液的物质的量浓度为2mol/L时，DNA溶解C.向溶解的DNA烧杯中加蒸馏水是漂洗DNAD.离心后除去血液中的上清液是为了除去杂质7．下列关于实验现象的正确描述是（C ）A.向盛有果糖溶液的试管中加入斐林试剂，产生转红色沉淀B.纸层析法分离叶绿体中的色素时，滤纸条上最宽的色素带呈黄绿色C.DNA的粗提取中，第二次加入蒸馏水并搅拌，能析出含DNA的黏稠物D.同一叶片受SO2危害的顺序是先叶柄后叶片8．关于DNA在NaCl溶液中的溶解度，下面的叙述哪一个是正确的（D ）A.随着NaCl溶液浓度增大，DNA在NaCl溶液中的溶解度也增大B.随着NaCl溶液浓度的减小，DNA在NaCl溶液中的溶解度也减小C.DNA在NaCl溶液中的溶解度与NaCl溶液的浓度无关D.当NaCl溶液的浓度为0.14M时，DNA的溶解度最低9．某DNA分子共有a个碱基，其中含胞嘧啶m个，则该DNA分子利用PCR技术循环了3次，需要游离的胸腺嘧啶脱氧核苷酸数为（C ）A.7（a-m）B.8(a-m)C.7（1/2a-m）D.8（2a-m）10．卵原细胞在进行DNA复制时，细胞中不可能出现的是（D ）A.解旋 B.蛋白质合成 C.基因突变 D.基因重组11．在一个密闭的容器中，利用PCR技术用含有同位素13C的脱氧核苷酸合成一个DNA分子，然后再加入普通的含12C的脱氧核苷酸，经n次循环后，所得DNA分子中含12C的脱氧核苷酸链数与含13C 的脱氧核苷酸链数之比是（D ）A.2n：1B.（2n-2）：nC.（2n-2）：2D.（2n-2）：112．在PCR技术中，能打开DNA双链的酶是（C ）A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶C.解旋酶D.DNA酶13．某DNA分子有2000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A：G：T：C=1：2：3：4，若利用PCR技术使该分子循环了一次，则需要腺嘌呤脱氧核苷酸的数量是（C ）A.200个B.300个C.400个D.800个14．某些药物可以抑制肿瘤细胞DNA的复制，从而达到控制癌症的目的。

2023-2024学年人教版高中生物单元测试班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________一、选择题（本大题共计19小题每题3分共计57分）1.下列说法错误的是（）A. 凝胶色谱法分离蛋白质时相对分子质量大的蛋白质不能进入凝胶内部故移动速度较快B. 使用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的过程中不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小C. 血红蛋白提取实验中需要加入5倍体积的蒸馏水对红细胞进行洗涤以去除杂蛋白D. 凝胶色谱柱内的气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序所以一旦发现有气泡必须重装色谱柱【答案】C【解析】解 A.凝胶色谱法分离蛋白质时相对分子质量大的蛋白质不能进入凝胶内部故移动速度较快 A正确B.在SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳方法中不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于分子的大小 B正确C.洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白需加入五倍体积的生理盐水进行洗涤 C错误D.凝胶色谱柱内的气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序所以一旦发现有气泡必须重装色谱柱 D正确故选 C2.图甲为凝胶色谱法分离蛋白质示意图图乙为凝胶电泳示意图下列叙述错误的是（）A. 装填图甲凝胶色谱柱时若出现气泡会搅乱蛋白质的洗脱次序B. 在凝胶色谱操作过程中一定不能让洗脱液流干露出凝胶颗粒C. 电泳槽的①②处接通电源后带电粒子在凝胶中发生定向移动D. 图乙的凝胶中加入SDS后蛋白质的移动速率取决于电荷大小【答案】D【解析】解 A.装填凝胶色谱柱时色谱柱内不能有气泡存在因为气泡会扰乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序使得到的红色带歪曲、散乱降低分离效果 A正确B.在凝胶色谱操作过程中一定不能让洗脱液流干露出凝胶颗粒 B正确C.电泳槽的①处接电源负极②处接电源正极带电粒子在凝胶中发生定向移动 C正确D.图乙的凝胶中加入SDS后蛋白质的移动速率取决于分子大小 D错误故选 D3.下列关于PCR技术的叙述正确的是（）A. PCR技术建立在对扩增的目的基因序列完全已知的基础上B. 该技术需要解旋酶和热稳定的DNA聚合酶C. 该技术需要一对特异性的引物要求一对引物的序列是互补的D. 该技术应用体内DNA双链复制原理也需要模板、原料、能量、酶等条件【答案】D【解析】4.某中学生物兴趣小组进行DNA的粗提取与鉴定时选取如下实验材料新鲜花椰菜、体积分数95%的冷酒精、研磨液（含表面活性剂SDS、DNA酶抑制剂EDTA、适量的NaCl）、 0.015mol \cdot L^-1的NaCl溶液、二苯胺试剂、蒸馏水以及其他必要实验器材有关实验材料选择理由的叙述错误的是（）A. 新鲜的花椰菜DNA含量丰富易获取B. SDS具有瓦解植物细胞膜的作用C. DNA溶于冷酒精而蛋白质等杂质不溶D. EDTA可减少提取过程中DNA的降解【答案】C【解析】解 A.新鲜的花椰菜DNA含量丰富易获取 A正确B.SDS可以瓦解细胞膜 B正确C.DNA不溶于冷酒精会在酒精溶液中析出 C错误D.EDTA是DNA酶抑制剂可以减少提取过程中DNA的降解 D正确故选 C5.下列属于PCR技术的条件的是（）①单链的脱氧核苷酸序列引物②含目的基因的DNA片段③脱氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA连接酶⑥热稳定的DNA聚合酶⑦限制性核酸内切酶A. ①②③⑤B. ①②③⑥C. ①②③⑤⑦D. ①②④⑤⑦【答案】B【解析】PCR需要一对引物即一对单链的脱氧核苷酸序列①正确PCR需要模板即目的基因所在的DNA片段②正确PCR需要脱氧核苷酸作为原料③正确核糖核苷酸是合成RNA的原料而PCR合成的是DNA ④错误采用PCR技术合成DNA时不需要DNA连接酶但需要热稳定的DNA聚合酶⑤错误⑥正确体外合成DNA时不需要限制性核酸内切酶⑦错误因此 B项正确 A、C、D项错误故选B6.甲、乙两图为“DNA的粗提取与鉴定”实验中涉及的两个操作装置图相关叙述正确的是（）A.图甲的烧杯中为NaCl溶液目的是使DNA析出B.图乙的试管中所用溶剂为酒精溶液其中A试管起对照作用C.图甲操作需用玻璃棒缓慢搅拌以使DNA析出并缠绕在玻璃棒上D.图乙操作中鉴定DNA所用试剂为双缩脲试剂【答案】D【解析】图甲的烧杯中为酒精溶液 A错误图乙的试管中为NaCl溶液 A试管起对照作用 B错误用酒精析出DNA时在试管中加入冷却的酒精静置2~3分钟溶液中会析出白色丝状物用玻璃棒沿一个方向缓慢搅拌卷起丝状物 C正确鉴定DNA所用的试剂是二苯胺试剂 D错误故选C7.在DNA粗提取与鉴定实验中将获得的含有DNA的黏稠物（含较多物质）分别处理如下其中杂质所处的位置在（）A. ①④⑤B. ①③⑥C. ①④⑥D. ②④⑥【答案】C【解析】DNA在2mol/L的氯化钠溶液中的溶解度较高因此杂质在①中DNA在0.14mol/L的氯化钠溶液中的溶解度很低因此杂质在④中DNA不溶于冷却的95%的酒精溶液因此杂质在⑥中故选C8.下列有关在凝胶柱上加入样品和洗脱的操作不正确的是（）A. 加样前要使柱内凝胶面上的缓冲液下降到与凝胶面平齐B. 让吸管管口沿管壁环绕移动贴壁加样至色谱柱顶端不要破坏凝胶面C. 打开下端出口待样品完全进入凝胶层后直接连接缓冲液洗脱瓶开始洗脱D. 待红色的蛋白质接近色谱柱底端时每5mL收集一管连续收集流出液【答案】C【解析】A．加样前打开色谱柱下端的流出口使柱内凝胶面上的缓冲液缓慢下降到凝胶面平齐时关闭出口故A项正确B．加样时用吸管小心的将1mL透析后的样品沿管壁环绕移动贴壁加样至色谱柱顶端不要破坏凝胶面故B项正确C．打开色谱柱下端出口使样品渗入凝胶床内等样品完全进入凝胶层后关闭下端出口加入磷酸缓冲液到适当的高度然后连接缓冲液洗脱瓶打开下端出口进行洗脱故C项错误D．待红色的蛋白质接近色谱柱底端时开始收集血红蛋白每5mL收集一管连续收集流出液故D项正确故选C9.将经处理破裂后的红细胞混合液以2000r/min速度离心10min后离心管中溶液分为4层血红蛋白位于从下至上的（）A. 第一层B. 第二层C. 第三层D. 第四层【答案】B【解析】解分离血红蛋白溶液时将搅拌好的混合液转移到离心管中经过中速长时离心后可明显看到试管中溶液分为四层从下往上数第一层为杂质沉淀层第二层为血红蛋白水溶液第三层为脂溶性物质的沉淀层第四层为甲苯层因此血红蛋白位于从下至上的第二层故选 B10.下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述正确的是（）A. DNA在NaCl溶液中的溶解度与蛋白质不同B. 沸水浴条件下 DNA与二苯胺反应呈紫色C. 洗涤剂可瓦解细胞膜但对DNA有影响D. 向DNA滤液中加入酒精会使杂蛋白析出【答案】A【解析】11.在表达融合蛋白时可以利用融合PCR技术把两个不同的基因片段连接起来其原理如图所示下列分析正确的是（）A. 该过程使用的引物P2和P3的碱基完全互补配对所以不能放在一个系统中工作B. 融合PCR的第一步是不需要引物的可能是因为两条链重叠的部位互为另一条链的引物C. 融合PCR的第一步需要加入耐高温DNA聚合酶、DNA连接酶等D. 若融合PCR的第二步获得了64个融合基因则该过程消耗了128个引物【答案】B【解析】解 A.该过程使用的引物P2和P3存在互补配对片段所以不能放在一个系统中工作否则会发生结合而失去作用 A错误B.融合PCR的第一步是不需要引物的可能是因为两条链重叠的部位互为另一条链的引物 B正确C.融合PCR的第一步需要加入耐高温DNA聚合酶不需要DNA连接酶 C错误D.若融合PCR的第二步获得了64个融合基因则该过程消耗了256个引物 D错误故选 B12.在向溶解DNA的NaCl溶液中不断加入蒸馏水的目的是（）A. 加快溶解DNA的速度B. 加快溶解杂质的速度C. 减小DNA的溶解度加快DNA析出D. 减小杂质的溶解度加快杂质的析出【答案】C【解析】解在DNA粗提取实验中向在溶解DNA的NaCl溶液中不断加入蒸馏水会使NaCl溶液的浓度降低进而减少DNA的溶解度使DNA分子逐渐析出．故选 C．13.下列是关于血红蛋白的提取和分离实验中关键步骤其中正确的是（）A. 蛋白质的提取和分离一般可分为粗分离、样品处理、纯化、纯度鉴定等4步B. 蛋白质的提取和分离实验可以以猪、牛、鸡、蛙等动物的血液为材料分离血红蛋白C. 对样品的处理过程分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、透析和分离血红蛋白等D. 对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳【答案】D【解析】解 A、蛋白质提取和分离的实验步骤一般包括样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定等4步 A错误B、蛋白质的提取和分离实验一般用哺乳动物的成熟的红细胞作为实验材料分离血红蛋白一般不要鸡、蛙等动物血液为材料分离血红蛋白 B错误C 、样品处理的一般步骤分为为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白、透析等 C错误D、对蛋白质的纯化和纯度鉴定的方法使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳D正确．故选 D．14.下列与教材实验相关的叙述错误的是（）A. 向蛋白质样液中加入蛋白酶用双缩脲试剂检测样液仍能产生紫色反应B. 提取绿叶中的叶绿素和类胡萝卜素时至少需要破坏细胞膜和叶绿体膜C. 经健那绿染液处理的洋葱鳞片叶内表皮细胞中的线粒体依然保持生活状态D. 可用过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响用淀粉酶探究pH对酶活性的影响【答案】D【解析】解 A.向蛋白质样液中加入蛋白酶后蛋白质水解但蛋白酶的化学本质是蛋白质因此用双缩脲试剂检测样液仍能产生紫色反应 A正确B.提取绿叶中的叶绿素和类胡萝卜素时至少需要破坏细胞膜和叶绿体膜使叶绿体中的色素出来 B正确C.经健那绿染液处理的洋葱鳞片叶内表皮细胞中的线粒体依然保持生活状态 C正确D.高温会使过氧化氢分解因此不能利用过氧化氢和过氧化氢酶探究温度对酶活性的影响淀粉可以在酸性条件下分解所以不能利用淀粉、淀粉酶探究pH对酶活性的影响 D错误故选 D15.下图凝胶色谱法分离蛋白质示意图和SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳示意图分析错误的是（）A. 在装填图甲中凝胶色谱柱时一旦发现柱内有气泡存在就需要重装B. 图甲中大分子蛋白质因阻力大而移动慢所以最后从层析柱中流出来C.图乙中凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小D. 凝胶中的SDS带负电则应在电泳槽的①处接电源负极②处接电源正极【答案】B【解析】解 A.在装填凝胶色谱柱时凝胶装填在色谱柱内要均匀不能有气泡存在因为气泡会影响蛋白质洗脱的次序 A正确B.图甲中大分子蛋白质因不容易进入凝胶内部的通道路程短移动速度快所以最先从层析柱中流出来 B错误C.图乙凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小 C正确D.凝胶中的SDS带负电所以电泳槽的①处接电源负极②处接电源正极 D正确故选 B16.下列关于DNA和血红蛋白的提取与分离实验的叙述不正确的是（）A. 提取动物细胞中的DNA和蛋白质都可以采用蒸馏水涨破细胞的方法B. 采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白质等杂质C. 用二苯胺试剂鉴定DNA时在沸水浴条件下溶液呈蓝色D. 血红蛋白只能采用凝胶色谱法纯化 DNA则可采用电泳、盐析等方法纯化【答案】D【解析】A项 DNA和蛋白质存在于细胞内用动物细胞作材料提取DNA和蛋白质都要用蒸馏水处理使细胞吸水涨破释放出其中的蛋白质或DNA A项正确B项 DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同因此采用不同浓度的NaCl溶液反复溶解与析出DNA的方法可去除蛋白质等杂质 B项正确C项用二苯胺试剂鉴定DNA时在沸水浴条件下溶液呈蓝色 C项正确D项凝胶色谱法纯化血红蛋白只是很多纯化方法中的一种蛋白质的纯化也可以采用电泳、盐析等方法 D项错误故选D17.下列关于生物学实验的叙述正确的是（）A. 用显微镜直接观察新鲜的藓类小叶装片可看到扁平的椭球形叶绿体B. 在电子显微镜下拍摄到的线粒体的结构照片属于物理模型C. 经染色后的洋葱根尖直接在显微镜下可看到处于有丝分裂各时期的细胞D. 用淀粉酶探究pH对酶活性的影响实验中可用碘液检验实验结果【答案】A【解析】解 A.由于新鲜的藓类叶片是单层细胞可以用显微镜直接观察叶绿体叶绿体为绿色、扁平的椭球形或球形 A正确B.在电子显微镜下拍摄到的线粒体的结构照片是实物的写照不属于模型 B错误C.经染色后的洋葱根尖的细胞绝大多数处于分裂的间期不一定可以观察到有丝分裂的各时期 C错误D.若探究pH对酶活性的影响不宜选用淀粉水解因为淀粉酶催化的底物淀粉在酸性条件下也会发生水解反应 D错误故选 A18.下列关于血红蛋白的提取和分离的叙述中错误的是（）A. 红细胞的洗涤效果与洗涤次数、离心速度和离心时间有关B. 凝胶柱中适量气泡的存在会提高分离的效果C. 凝胶色谱法是一种根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的方法D. 判断纯化的蛋白质是否为血红蛋白可采用电泳法鉴定【答案】B【解析】解 A.红细胞的洗涤效果与洗涤次数、离心速度和离心时间有关 A正确B.凝胶柱中适量气泡的存在会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序降低分离效果 B错误C.凝胶色谱法是一种根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的方法 C正确D.判断纯化的蛋白质是否为血红蛋白可采用电泳法鉴定 D正确故选 B19.下列操作正确的是（）A. 分离红细胞时采用低速长时间离心B. 红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可C. 分离血红蛋白溶液是低速短时间离心D. 透析时要用20mmol/L的磷酸缓冲液透析12h【答案】D【解析】A、分离红细胞时采用低速短时间离心 A错误B、红细胞释放出血红蛋白需要加入蒸馏水和甲苯还需要在磁力搅拌器上充分搅拌 B 错误C、分离血红蛋白溶液是中速长时间离心 C错误D、透析时要用20mmol/L的磷酸缓冲液透析12h D正确二、解答题（本大题共计4小题每题10分共计40分）20.（1）要想构建基因组文库必须获得该生物体内的全部DNA 用________对全部DNA 进行片段化将获得的片段与________连接起来通常导入到原核细胞中最常用的受体细胞是________ 最常用的方法是________ 再通过________鉴别和筛选含目的基因的受体菌20.（2）如果用某种生物发育的某个时期的所有mRNA反转录产生的多种互补DNA片段构建成cDNA文库一般只包含该生物的部分基因原因是________________________________________________20.（3）构建了基因文库并不等于完成了目的基因的分离因此必须用各种方法将目的基因从文库中筛选出来下列不能为筛选目的基因提供依据的是________20.（4）利用PCR技术扩增目的基因这一过程中需要加入一种特殊的酶即________ 【答案】（1））限制酶, 运载体, 大肠杆菌, 感受态转化法, 标记基因【解析】解（1）基因文库包括基因组文库和部分基因文库要想构建基因组文库必须获得该生物体内的全部DNA 用限制酶对全部DNA进行片段化将获得的片段与运载体连接起来通常导入到原核细胞中最常用的受体细胞是大肠杆菌最常用的方法是感受态转化法标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因从而将目的基因筛选出来故可通过标记基因鉴别和筛选含目的基因的受体菌【答案】（2）基因的选择性表达在某个时期只表达了部分基因【解析】（2）由于基因的选择性表达在某个时期只表达了部分基因所以如果用某种生物发育的某个时期的所有mRNA反转录产生的多种互补DNA片段构建成cDNA文库一般只包含该生物的部分基因【答案】C【解析】（3）筛选目的基因可以依据目的基因的功能、目的基因的mRNA及目的基因表达产物蛋白质的氨基酸序列由于碱基种类并没有特异性所以不能作为筛选目的基因的依据故选 C【答案】（4）热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）【解析】（4）PCR过程包括变性、复性和延伸三步变性过程需要用90℃以上的高温使双链DNA解聚为单链故利用PCR技术扩增目的基因需要加入热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）21.（1）将实验流程补充完整 A．________ B．________ 步骤B的目的是________ 21.（2）洗涤红细胞的目的是________ 此过程中若离心速度过高和时间过长会导致________ 在________的作用下红细胞会破裂释放出血红蛋白21.（3）在利用凝胶色谱法纯化血红蛋白的过程中色谱柱不能有气泡存在原因是________ 如果________ 说明色谱柱制作成功待蛋白质接近凝胶色谱柱底端时用试管连续收集流出液先收集到的蛋白质与后收集到的蛋白质的区别是________21.（4）在判断纯化的蛋白质是否达到要求需要对蛋白质进行纯度鉴定在鉴定的方法中使用较多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳加入SDS 使电泳迁移率完全取决于________ 【答案】（1）血红蛋白的释放, 粗分离（或透析）, 去除样品中分子量较小的杂质【解析】解（1）蛋白质的提取与分离的一般步骤为样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定样品处理分为红细胞的洗涤、血红蛋白的释放、分离血红蛋白液显然流程图中步聚A、B分别为血红蛋白的释放和粗分离步骤B粗分离是通过透析完成的透析的目的是去除样品中分子量较小的杂质【答案】（2）去除杂蛋白（或血浆蛋白）, 白细胞一同沉淀达不到分离的效果, 蒸馏水和甲苯【解析】（2）洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白此过程中需要低速短时离心若离心速度过高和时间过长会导致白细胞一同沉淀达不到分离的效果在蒸馏水和甲苯的作用下红细胞会破裂释放出血红蛋白【答案】（3）气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序降低分离效果, 红色区带均匀一致地移动, 先收集到的蛋白质相对分子质量大后收集到的蛋白质相对分子质量小【解析】（3）在利用凝胶色谱法纯化血红蛋白的过程中色谱柱不能有气泡存在因为气泡的存在会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序降低分离效果如果红色区带均匀一致地移动说明色谱柱制作成功相对分子质量较大的蛋白质在凝胶外部移动而先流出相对分子质量较小的蛋白质在凝胶内部移动而后流出【答案】（4）分子大小【解析】（4） SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中 SDS能使蛋白质完全变性其带有的负电荷的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量因而掩盖了不同蛋白质间的电荷差别使电泳迁移率完全取决于分子的大小22.（1）通过肿瘤疫苗激活的免疫应答归类正确的是（）①细胞免疫②体液免疫③人工免疫④天然免疫⑤特异性免疫⑥非特异性免疫22.（2）下列可做为肿瘤抗原的是（）（多选）22.（3）如图所示①﹣⑤过程需要使用限制酶的是________过程22.（4）图中所用的生物技术有（）（多选）22.（5）据已有知识判断图中筛选的 CAR﹣T细胞具备特点是（）（多选）22.（6）放疗是用放射性元素对人体肿瘤的部位进行局部方面的扫描和照射通过辐射杀死瘤细胞化疗是通过药物的手段使药物进入人体血液并去除人体中的癌细胞放疗和化疗对人体正常细胞也有杀伤作用相对于放疗化疗肿瘤疫苗治疗法的优点有________A. ①②⑥B. ②④⑥C. ①③⑤D. ①④⑥【答案】C2、A、衰老肿瘤细胞可以作为肿瘤抗原引起免疫反应 A正确B、肿瘤相关蛋白或多肽可以作为肿瘤抗原引起免疫反应 B正确C、肿瘤细胞内的脱氧核糖不能作为肿瘤抗原 C错误D、含有肿瘤抗原基因的质粒不能直接作为抗原其表达产物可以作为肿瘤抗原 D错误故选 AB3图中①获取目的基因、②构建基因表达载体均需要限制酶4由图可知 CAR﹣T疗法通过转基因技术把CAR基因导入T细胞使其表达另外对获得的成功表达CAR的T细胞通过动物细胞培养进行增殖综上所述 BC不符合题意 AD符合题意故选AD5、A、只有浆细胞可以分泌抗体 T细胞不能分泌抗体 A错误B、由图可知获得目的基因的T细胞经体外培养可表达CAR受体 B正确C、图中筛选的 CAR﹣T细胞可以激活体内T淋巴细胞监控清除肿瘤细胞 C正确D、CAR﹣T细胞具有特异性不能识别不同种类的癌细胞D错误故选BC6、相对于放疗化疗肿瘤疫苗治疗法疗效高、特异性强、副作用小故答案为【解析】肿瘤疫苗会激活细胞免疫通过细胞免疫杀死肿瘤细胞该过程属于人工免疫细胞免疫属于特异性免疫综上所述 ABD不符合题意 C符合题意故选 C2、A、衰老肿瘤细胞可以作为肿瘤抗原引起免疫反应 A正确B、肿瘤相关蛋白或多肽可以作为肿瘤抗原引起免疫反应 B正确C、肿瘤细胞内的脱氧核糖不能作为肿瘤抗原 C错误D、含有肿瘤抗原基因的质粒不能直接作为抗原其表达产物可以作为肿瘤抗原 D错误故选 AB3．图中①获取目的基因、②构建基因表达载体均需要限制酶4．由图可知 CAR﹣T疗法通过转基因技术把CAR基因导入T细胞使其表达另外对获得的成功表达CAR的T细胞通过动物细胞培养进行增殖综上所述 BC不符合题意 AD符合题意故选AD5、A、只有浆细胞可以分泌抗体 T细胞不能分泌抗体 A错误B、由图可知获得目的基因的T细胞经体外培养可表达CAR受体 B正确C、图中筛选的 CAR﹣T细胞可以激活体内T淋巴细胞监控清除肿瘤细胞 C正确D、CAR﹣T细胞具有特异性不能识别不同种类的癌细胞 D错误故选 BC6、相对于放疗化疗肿瘤疫苗治疗法疗效高、特异性强、副作用小故答案为【答案】C【解析】C【答案】①②【解析】A B【答案】【解析】①②【答案】A, D【解析】AD【答案】疗效高、特异性强、副反应小【解析】BC（1）疗效高、特异性强、副反应小23.为探究生长素的极性运输科学家筛选出与其相关的基因P 请论述利用分子生物学的方法对基因P可进行的研究说出有关的分子生物学技术预测相关结果说明基因P的功能【答案】对基因P进行基因敲除或将编码抑制P基因表达产物的基因整合到载体中导入受体细胞若实验组生长素分布呈均匀状态说明P基因表达产物参与IAA极性运输可能为受体蛋白【解析】解为探究生长素的极性运输科学家筛选出与其相关的基因P 可设计以下实验对基因P进行基因敲除或将编码抑制P基因表达产物的基因整合到载体中导入受体细胞若实验组生长素分布呈均匀状态说明P基因表达产物参与IAA极性运输可能为受体蛋白试卷第11页，总11页。

高二生物选修1 专题5 DNA和蛋白质技术测试题第Ⅰ卷选择题 (共70分)一、单选题（2分×20=40分）。

1.本实验中有三次过滤：§1⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液⑵过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液⑶过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液以上三次过滤分别为了获得（）A含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液B含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、含DNA的滤液C含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、纱布上的DNAD含较纯的DNA滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液2.洗涤剂能够瓦解（），但对DNA没有影响。

§1A.细胞壁B.细胞膜C.细胞核D.细胞质3.在沸水浴的条件下，DNA遇（）会被染成蓝色。

§1A.斐林试剂B.苏丹Ⅲ染液C.双缩脲试剂D.二苯胺4．在DNA提取过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是（）§1A.不易破碎B.减少提取过程中DNA的损失C.增加DNA的含量D.容易洗刷5．DNA的粗提取中，将与滤液体积相等的、冷却的（），静置2—3min，溶液中会出现白色丝状物。

§1A.0．9%的NaClB.0.14mol/L的NaCl溶液C.质量分数15%的HClD.体积分数为95%的酒精溶液6. 以血液为实验材料时，需要向血液中加入（），防止血液凝固。

A.醋酸钠B.龙胆紫C.柠檬酸钠D.醋酸洋红7.在向溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（）§1A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解杂质的速度C.减少DNA的溶解度，加快DNA析出D.减小杂质的溶解度，加快杂质的析出8.在一个密闭的容器中，利用PCR技术用含有同位素13C的脱氧核苷酸合成一个DNA分子，然后再加入普通的含12C的脱氧核苷酸，经n次循环后，所得DNA分子中含12C的脱氧核苷酸链数与含13C的脱氧核苷酸链数之比是（）§2A.2n：1B.（2n-2）：nC.（2n-2）：2D.（2n-1）：19.具有x个碱基对的一个DNA分子片段含有m个腺嘌呤，该片段利用PCR技术完成了第n 个循环后需要多少个游离的胞嘧啶脱氧核苷酸？（）A.（2n-1）（x-m )B.2n(x-m)C. （2n-1）(x/2-m)D.2n(x/2-m)10.下列关于DNA复制过程的正确顺序是（）§2①互补碱基对之间氢键断裂②互补碱基对之间形成氢键③DNA分子在解旋酶的作用下解旋④以解旋后的母链为模板进行碱基互补配对⑤子链与母链盘旋成双螺旋状结构A①③④②⑤ B ①④②⑤③ C ①③⑤④② D ③①④②⑤11.实验室内模拟生物体DNA的复制必需的一组条件是（）①酶②游离的脱氧核苷酸③A TP④DN分子⑤mRNA⑥tRNA⑦适宜的温度⑧适宜的酸碱度A①②③④⑤⑥ B ②③④⑤⑥⑦ C ②③④⑤⑦⑧ D ①②③④⑦⑧12. DNA的合成方向总是（）延伸。

2023-2024学年人教版高中生物单元测试学校 __________ 班级 __________ 姓名 __________ 考号 __________注意事项1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息;2．请将答案正确填写在答题卡上;一、选择题（本大题共计13小题每题3分共计39分）1.如图表示PCR扩增某个目的基因的基本过程有关叙述正确的是（）A. PCR技术的主要原理是DNA复制解旋酶和DNA聚合酶分别在图中①、③两步中起作用B. 据图分析PCR操作过程中使用的DNA聚合酶至少要能忍受72\^circ C 的高温C. PCR技术使用的前提是能够利用目的基因的部分序列合成至少1种引物D. 因为引物不能重复使用所以在第n轮扩增过程中至少消耗2^n个引物【答案】C【解析】 A 、PCR技术的主要原理是DNA复制 PCR过程中通过高温变性而得到解旋的目的不需要解旋酶 A错误B、图分析PCR操作过程中使用的DNA聚合酶至少要能忍受94^\circ C 的高温 B错误C 、PCR技术的原理是DNA的复制而DNA复制方式为半保留复制因此使用的前提是能够利用目的基因的部分序列合成至少1种引物 C正确D、因为引物不能重复使用所以在第n轮扩增过程中至少消耗(2^n-2)-(2^n-1-2)= 2^n-1个引物 D错误2.如图是PCR技术扩增中引物对与模板结合的示意图则由一个该模板DNA片段扩增n 次后可获得 2^n个子代DNA片段下列有关叙述正确的是（）A. 该过程需要的原料是核糖核苷酸B. 该过程中至少需要引物的数量是\ 2^n-2C. 该过程需要解旋酶和热稳定DNA聚合酶D. 两条链等长的子代DNA数量是\ 2^n-2n【答案】D【解析】解 A.该过程需要的原料是脱氧核糖核苷酸 A错误B.该过程中至少需要引物的数量是 2^n+1-2 B错误C.该过程需要热稳定DNA聚合酶但不需要解旋酶因为该过程通过高温使DNA分子变性从而使双链打开 C错误D.两条链等长的子代DNA数量是 2^n-2n D正确故选 D3.如图表示在微生物M产生的脂肪酶作用下植物油与甲醇反应能够合成生物柴油的过程下列相关叙述中错误的是（）A. 用于生产生物柴油的植物油不易挥发宜选用压榨法或萃取法从油料作物中提取B. 筛选产脂肪酶的微生物M时选择培养基中添加的植物油为微生物的生长提供碳源C. 为降低生物柴油的生产成本可利用固定化酶技术使脂肪酶能够重复使用D. 若需克隆脂肪酶基因可应用耐热DNA聚合酶催化的蛋白质工程技术【答案】D【解析】解 A.由于植物油不易挥发所以可以用压榨法和萃取法从油料作物中提取 A正确B.筛选能合成脂肪酶的微生物需要使用选择培养基选择培养基中要将植物油作为唯一的碳源 B正确C.将酶固定后可以重复使用从而降低生产成品 C正确D.克隆基因的技术是PCR技术而不是蛋白质技术 D错误故选 D4.关于血红蛋白的提取和分离操作不正确的是（）A. 血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定”的顺序进行B. 蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNAC. 可经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定D. 在血红蛋白提取过程中不断用磷酸缓冲液处理是让血红蛋白处在稳定的pH范围内维持其结构和功能【答案】B【解析】解 A.血红蛋白提取和分离的程序可分为四步样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定 A正确B.血红蛋白溶液的粗分离采用的方法是透析即将收集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析去掉分子量较小的杂质 B错误C.通过凝胶色谱法将样品进一步纯化最后经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定 C 正确D.血红蛋白提取过程中不断用磷酸缓冲液处理是让血红蛋白处在稳定的pH范围内维持其结构和功能 D正确故选 B5.下列关于凝胶色谱法的叙述错误的是（）A. 可根据相对分子质量的大小分离蛋白质B. 多数凝胶由多糖类化合物构成C. 相对分子质量较大的蛋白质优先离开色谱柱D. 所用的凝胶是一些微小的无孔球体【答案】D【解析】略6.下列关于“血红蛋白的提取和分离”实验的叙述正确的是（）A. 使用凝胶色谱法分离蛋白质的前提是混合液中的蛋白质分子的大小差别不大B. 为加快分离红细胞的速度需高速短时间离心再用蒸馏水重复洗涤三次C. 向洗涤好的红细胞中加入生理盐水和甲苯使红细胞破裂释放血红蛋白D. 在血红蛋白的提取过程中用磷酸缓冲液处理的目的是维持血红蛋白的结构和功能【答案】D【解析】解 A.使用凝胶色谱法分离蛋白质的前提是混合液中的蛋白质分子的大小差别较大 A错误B.分离红细胞时需低速短时间离心再用蒸馏水重复洗涤三次 B错误C.向洗涤好的红细胞中加入蒸馏水和甲苯使红细胞破裂释放血红蛋白 C错误D.在血红蛋白的提取过程中用磷酸缓冲液处理的目的是维持血红蛋白的结构和功能 D 正确故选 D7.如图是“血红蛋白提取和分离”实验的操作流程下列描述正确的是（）A. 洗涤红细胞时为了尽量洗去杂质应该使用蒸馏水B. 分离血红蛋白时离心之后血红蛋白主要位于从上往下数的第二层C. 透析只能除去小分子杂质D. 纯化可使用SDS—聚丙烯院胺凝胶电泳【答案】C【解析】解 A.应用生理盐水重复洗涤红细胞利用蒸馏水会使细胞吸水涨破 A错误B.分离血红蛋白溶液时将搅拌好的混合液转移到离心管中经过中速长时离心后可明显看到试管中溶液分为4层从上往下数第1层为甲苯层第2层为脂溶性物质的沉淀层第3层为血红蛋白水溶液第4层为杂质沉淀层因此血红蛋白位于从下至上的第二层 B 错误C.透析只能除去小分子杂质 C正确D.纯度鉴定使用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳 D错误故选 C8.将经处理破裂后的红细胞混合液以2000r/min的速度离心10min后离心管中的溶液分为四层从上到下的顺序依次是（）A. 血红蛋白、甲苯层、脂类物质层、沉淀层B. 甲苯层、沉淀层、血红蛋白、脂类物质层C. 脂类物质层、血红蛋白、甲苯层、沉淀层D. 甲苯层、脂类物质层、血红蛋白、沉淀层【答案】D【解析】解血红蛋白溶液离心后分为4层从上到下第1层为无色透明的甲苯层第2层为白色薄层固体是脂溶性物质的沉淀层第3层是红色透明液体这是血红蛋白的水溶液第4层是其他杂质的暗红色沉淀物故选 D9.为防止血液凝固在采血容器中要预先加入抗凝血剂（）A. NaClB. 甲苯C. 蒸馏水D. 柠檬酸钠【答案】D【解析】解采集到新鲜的血液时要加入柠檬酸钠目的是防止血液凝固．故选 D．10.与析出 DNA黏稠物有关的叙述不正确的是（）A. 操作时缓缓滴加蒸馏水降低DNA的溶解度B. 在操作时用玻璃棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整性C. 加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度两者均可析出D. 当丝状黏稠物不再增加时此时NaCl溶液的浓度相当于0.14mol/L【答案】C【解析】11.以下实验选材不能达到实验目的是（）A. 利用鸡红细胞进行DNA的粗提取B. 利用蛙红细胞观察细胞有丝分裂C. 利用猪红细胞制备纯净的细胞膜D. 利用羊红细胞进行细胞吸水失水实验【答案】B【解析】解 A.鸡属于鸟类其红细胞中具有细胞核（DNA）因此利用鸡红细胞可以进行DNA的粗提取 A错误B.蛙红细胞只能进行无丝分裂因此不能利用蛙红细胞观察细胞有丝分裂 B正确C.猪属于哺乳动物哺乳动物和人成熟的红细胞没有细胞核和具有膜结构的细胞器因此可以利用猪红细胞制备纯净的细胞膜 C错误D.羊属于哺乳动物因此可以利用羊红细胞进行细胞吸水失水实验 D错误12.在PCR过程中一般进行自动控制的是（）A. 引物的设计B. 反应成分的配制C. 移液器枪头的更换D. 温度由94\^circ C rightarrow 55\^circ C rightarrow 72\^circ C 的调整【答案】D【解析】解 PCR过程中一般进行自动控制的是温度即由 94^\circ C \rightarrow 55^\circ C \rightarrow 72^\circ C 的调整．故选 D．13.用 ^32P标记的 T_2噬菌体侵染某个未标记的大肠杆菌时该大肠杆菌裂解释放出来的 T_2噬菌体有4个含 ^32P 下列相关叙述错误的（）A. DNA复制时双链解螺旋需要能量供应和解旋酶的作用B. \ T_2噬菌体的DNA复制时消耗的脱氧核苷酸由宿主提供C. 该大肠杆菌裂解前注入的\ T_2噬菌体DNA至少有4个D. 一个子代\ T_2噬菌体的DNA最多有一条链含有\ ^32P【答案】C【解析】解 A.DNA复制时首先利用细胞提供的能量在解旋酶的作用下将两条螺旋的双链解开 A正确B. T_2噬菌体DNA复制消耗的原料只能由宿主细胞提供 B正确C.该大肠杆菌不含 ^32P 其裂解释放出来的 T_2噬菌体有4个含 ^32P 原因是注入的 T_2噬菌体DNA被 ^32P标记再根据DNA具有半保留复制的特点可知该大肠杆菌裂解前注入的 T_2噬菌体DNA至少有2个 C错误D.DNA复制为半保留复制大肠杆菌中无 ^32P 所以一个子代 T_2噬菌体的DNA最多有一条链含有 ^32P D正确故选 C二、解答题（本大题共计8小题每题10分共计80分）14.（1）甘蔗大多数同学喜欢吃也是制造蔗糖的原料而蔗糖没有还原性他们用甘蔗汁进行还原性糖的鉴定结果出现了砖红色沉淀由此得出结论甘蔗汁中的糖类除了蔗糖外还有________14.（2）他们利用花生种子进行脂肪的鉴定试验如图是他们在光学显微镜下观察到的被________染液染成橘黄色脂肪颗粒的图象14.（3）他们利用猕猴桃进行DNA的粗提取实验提取了一团絮状物他们把部分絮状物溶于物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液的试管中同时设置对照试验分别加入________试剂沸水浴几分钟后加入絮状物的试管溶液的颜色变为________ 说明絮状物含有DNA成分他们又把部分絮状物溶于蒸馏水中加入双缩脲试剂溶液颜色变为紫色说明絮状物还含有________成分【答案】还原性糖（或葡萄糖）【解析】斐林试剂可用于鉴定还原糖在水浴加热的条件下产生砖红色沉淀用甘蔗汁进行还原性糖的鉴定结果出现了砖红色沉淀说明甘蔗汁中的糖类除了蔗糖外还有还原性糖（如葡萄糖、麦芽糖、果糖）【答案】苏丹Ⅲ【解析】脂肪需要使用苏丹Ⅲ（苏丹Ⅳ）染色使用50%酒精洗去浮色以后在显微镜下观察可以看到橘黄色（红色）的脂肪颗粒【答案】二苯胺, 蓝色, 蛋白质【解析】在沸水浴条件下 DNA遇二苯胺会被染成蓝色因此二苯胺可以作为鉴定DNA 的试剂蛋白质可与双缩脲试剂产生紫色反应15.（1）要想构建基因组文库必须获得该生物体内的全部DNA 用________对全部DNA进行片段化将获得的片段与________连接起来通常导入到原核细胞中最常用的受体细胞是________ 最常用的方法是________ 再通过________鉴别和筛选含目的基因的受体菌15.（2）如果用某种生物发育的某个时期的所有mRNA反转录产生的多种互补DNA片段构建成cDNA文库一般只包含该生物的部分基因原因是________________________________________________15.（3）构建了基因文库并不等于完成了目的基因的分离因此必须用各种方法将目的基因从文库中筛选出来下列不能为筛选目的基因提供依据的是________15.（4）利用PCR技术扩增目的基因这一过程中需要加入一种特殊的酶即________ 【答案】（1））限制酶, 运载体, 大肠杆菌, 感受态转化法, 标记基因【解析】解（1）基因文库包括基因组文库和部分基因文库要想构建基因组文库必须获得该生物体内的全部DNA 用限制酶对全部DNA进行片段化将获得的片段与运载体连接起来通常导入到原核细胞中最常用的受体细胞是大肠杆菌最常用的方法是感受态转化法标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因从而将目的基因筛选出来故可通过标记基因鉴别和筛选含目的基因的受体菌【答案】（2）基因的选择性表达在某个时期只表达了部分基因【解析】（2）由于基因的选择性表达在某个时期只表达了部分基因所以如果用某种生物发育的某个时期的所有mRNA反转录产生的多种互补DNA片段构建成cDNA文库一般只包含该生物的部分基因【答案】C【解析】（3）筛选目的基因可以依据目的基因的功能、目的基因的mRNA及目的基因表达产物蛋白质的氨基酸序列由于碱基种类并没有特异性所以不能作为筛选目的基因的依据故选 C【答案】（4）热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）【解析】（4）PCR过程包括变性、复性和延伸三步变性过程需要用90℃以上的高温使双链DNA解聚为单链故利用PCR技术扩增目的基因需要加入热稳定DNA聚合酶（或Taq酶）16.（1）利用PCR技术扩增干扰素基因时设计引物的前提是已知鸡干扰素基因两端的部分_______________________ 扩增所用的酶为______________________ 为保证鸡干扰素基因与农杆菌Ti质粒连接需要用相同的____________剪切鸡干扰素基因和_______________________16.（2）图中的抗四环素基因在步骤②中作为____________________ 步骤③中需先用_______________处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞16.（3）步骤④中科研人员证实鸡干扰素基因成功导入后可用____________________技术鉴定目的基因是否转录用____________________技术鉴定目的基因是否翻译【答案】（1）核苷酸序列, Taq酶（热稳定DNA聚合酶）, 限制酶, 农杆菌Ti质粒【解析】解（1）利用PCR技术扩增干扰素基因时已知鸡干扰素基因两端的部分核苷酸序列是设计引物的前提扩增所用的酶为Taq酶（热稳定DNA聚合酶）为保证鸡干扰素基因与农杆菌Ti质粒连接需要用相同的限制酶剪切鸡干扰素基因和农杆菌Ti质粒【答案】（2）标记基因, \ Ca^2+【解析】（2）基因表达载体必需具备的成分有目的基因、标记基因、启动子、终止子和复制原点图中的抗四环素基因在步骤②中作为标记基因步骤③中需先用 Ca^2+处理农杆菌以便将基因表达载体导入细胞【答案】（3）分子杂交, 抗原—抗体杂交【解析】（3）步骤④中科研人员证实鸡干扰素基因成功导入后可用分子杂交技术鉴定目的基因是否转录用抗原—抗体杂交技术鉴定目的基因是否翻译17.（1）血红蛋白粗分离阶段透析的目的是___________________ 若要尽快达到理想的透析效果可以__________________________（写出一种方法）17.（2）血红蛋白的纯化是通过____________法将相对分子质量大的杂质蛋白除去图乙中往色谱柱中加样的正确操作顺序____________（用序号表示）在进行④操作前应该等样品____________ 且要____________（填“打开”或“关闭”）下端出口17.（3）电泳利用了待分离样品中各种分子的_________________________等的差异而产生不同迁移速度实现各种分子的分离17.（4）一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示由图可知携带者有____________种血红蛋白从分子遗传学的角度作出的解释是___________________________________________【答案】（1）除去小分子杂质, 增加缓冲液的量或及时更换缓冲液【解析】解（1）血红蛋白粗分离阶段透析的目的是除去小分子杂质若要尽快达到理想的透析效果可以增加缓冲液的量或及时更换缓冲液【答案】（2）凝胶色谱, ②③④①, 完全进入凝胶层, 关闭【解析】（2）血红蛋白的纯化是通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去图乙中往色谱柱中加样的正确操作顺序②③④① 在进行④操作前应该等样品完全进入凝胶层且要关闭下端出口【答案】（3）带电性质以及分子大小、形状【解析】（3）电泳利用了待分离样品中各种分子的带电性质以及分子大小、形状等的差异而产生不同迁移速度实现各种分子的分离【答案】（4）2, 携带者具有一对等位基因可以控制合成两种不同的蛋白质【解析】（4）由图示信息可知正常人和镰刀型细胞贫血症患者都只有1种血红蛋白但其携带者有2种血红蛋白因而从分子遗传学的角度作出的解释是携带者具有一对等位基因可以控制合成两种不同的蛋白质18.（1）利用PCR技术进行新冠病毒核酸检测的前提是________ 新冠病毒是RNA病毒所以需对样本进行________处理后再PCR扩增如果样本存在目标病原体则会因为________的特异性扩增出相应的目标基因片段由此判断是否为阳性18.（2）荧光PCR法又称qPCR法是指在在反应体系中加入________ 通过专门仪器实现实时荧光检测以________来测定PCR循环后产物中核酸水平18.（3）IgM和IgG均属于免疫球蛋白家族是机体在抗原物质刺激下由浆细胞产生的抗体 lgM/lgG检测试剂盒的原理是________ 通过检测人体内相应抗体间接证明感染与否被病毒感染后机体会产生一系列的变化来抵御这种入侵其中IgM 和IgG的含量会发生如图所示变化要通过对COVID-19患者研究发现病毒侵入人体后大约需要5~7天产生IgM抗体 IgG 抗体在感染后10~15天时产生通过检测外周血中IgM和IgG 不仅可以鉴别感染与否还可以辨别检测者是近期感染或者是既往感染当核酸检测结果为阳性 lgM（+）lgG（-）时可判断检测者为________ 已治愈的患者检测结果应为________【答案】（1）新冠病毒的核酸序列已知, 反（逆）转录, 引物【解析】解（1）PCR扩增技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列则利用PCR技术进行新冠病毒核酸检测的前提是新冠病毒的核酸序列已知新冠病毒为RNA病毒需要先通过逆转录处理获得目的基因再进行PCR扩增若样本存在目标病原体根据引物的特异性扩增相应目的基因片段由此判断是否为阳性【答案】（2）荧光物质, 荧光强度【解析】（2）荧光PCR法是指在反应体系加入荧光物质通过专门仪器实现实时荧光检测以荧光强度来测定PCR循环后产物中核酸水平【答案】（3）抗原抗体特异性结合, 近期感染, 核酸检测为阴性 lgM（-）和lgG（+）【解析】（3）根据题述 lgM/lgG联合检测是新冠病毒抗体检测试剂盒主要技术其原理是抗原抗体特异性结合当核酸检测为阳性 lgM（+）lgG（-）时可判断出患者体内有病毒存在为近期感染已治愈的患者核酸检测为阴性 lgM（-）和lgG（+）19.（1）获得某种病毒的蛋白质外壳基因可以使用限制酶处理该酶的作用是____________________________________________________ 在获取病毒的蛋白质外壳基因后为了增加其数量可以采用_____________技术该技术的原理是_________________________19.（2）利用病毒的蛋白质外壳基因和农杆菌的________质粒构建基因表达载体在将病毒的蛋白质外壳基因导入马铃薯细胞之前可以在细胞周围施用酚类化合物该物质的作用是___________________________________________________________19.（3）在检测马铃薯细胞是否转入病毒的蛋白质外壳基因时可以采用如图所示的方法进行检测该检测方法称为______________技术所使用的基因探针为利用___________________基因的一条链进行放射性同位素标记如果出现图中所示的结果则说明_________________________________【答案】（1）能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开, PCR, DNA双链复制【解析】解（1）一种限制酶能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开在体外可以采用PCR技术对目的基因进行扩增【答案】（2）Ti, 吸引农杆菌移向马铃薯细胞以便农杆菌的Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞【解析】（2）农杆菌转化法是利用农杆菌的Ti质粒作为目的基因的载体酚类化合物能吸引农杆菌移向马铃薯细胞以便农杆菌的Ti质粒上的T-DNA转移至受体细胞【答案】（3）DNA分子杂交, 病毒的蛋白质外壳（或“目的”）, 受体细胞中已经成功导入了病毒的蛋白质外壳基因【解析】（3）图示检测目的基因的方法为DNA分子杂交法20.（1）叶绿体基因工程的核心是构建基因表达载体表达载体中除目的基因外还必须有启动子、终止子、复制原点、________等启动子的作用是________ 叶绿体DNA上的基因在结构和表达方式等方面有原核细胞基因的特性若目的基因来源于真核生物则往往选用目的蛋白对应的cDNA片段而不是基因组DNA片段作为目的基因原因是________20.（2）将目的基因导入烟草细胞叶绿体时要穿过多层生物膜因而常将包裹在金属颗粒表面的表达载体轰击进入叶绿体提高转化效率该方法称为________20.（3）检测目的基因是否成功导入受体细胞的叶绿体时实验组以待测的样本DNA为模板使用目的基因的特异性引物进行PCR扩增同时将以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组将以________为模板的组别作为阴性对照组若________ 则说明目的基因导入成功20.（4）转入叶绿体中的基因________（填“会”或“不会”）随花粉传递给子代理由是________【答案】（1）标记基因, RNA聚合酶识别和结合的位点驱动基因转录, cDNA无内含子在结构和表达方式等方面与原核细胞基因相似【解析】解（1）基因表达载体包括且的基因、终止子、启动子、标记基因等启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点驱动基因转录叶绿体DNA上的基因在结构和表达方式等方面有原核细胞基因的特性若目的基因来源于真核生物则往往选用目的蛋白对应的cDNA片段而不是基因组DNA片段作为目的基因因为cDNA无内含子在结构和表达方式等方面与原核细胞基因相似【答案】（2）基因枪法【解析】（2）基因枪法是用压缩气体动力产生一种冷的气体冲击波进入轰击室把粘有DNA的细微金粉打向细胞穿过细胞壁、细胞膜、细胞质等层层构造到达细胞核完成基因转移【答案】（3）导入空载体的叶绿体DNA, 实验组与阳性对照组的结果一致且阴性对照组无扩增产物【解析】（3）如果其将目的基因导入了受体那待测DNA中就会含有目的基因就可以通过PCR扩增形成相应的条带同时将以目的基因片段为模板的组别作为阳性对照组将以导入空载体的叶绿体DNA为模板的组别作为阴性对照组若实验组与阳性对照组的结果一致且阴性对照组无扩增产物则说明目的基因导入成功【答案】（4）不会, 叶绿体基因属于细胞质基因只通过母本遗传给后代【解析】（4）叶绿体基因属于细胞质基因只通过母本遗传给后代转入叶绿体中的基因不会随花粉传递给子代21. （1）本实验材料选用鸡血细胞液而不是鸡全血主要原因是鸡血细胞液中________含量较高21. （2）图A所示加入蒸馏水的目的是________21. （3）通过图B所示步骤取得滤液后再向滤液中加入2mol/L NaCl溶液的目的是________21. （4）图C所示加入蒸馏水的目的是________21.（5）鉴定实验所得丝状物的主要成分是DNA 可用________试剂进行检验在沸水浴条件下可以看到颜色反应为________【答案】【解析】【答案】【解析】【答案】【解析】【答案】【解析】【答案】【解析】。

精品文档实用文档2021年高中生物 专题5 DNA 和蛋白质技术 单元测试（含解析）新人教版选修1题号一 二 三 四五总分得分评卷人 得分一、单项选择 D.若用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离样品中的蛋白质分子，则分子甲和分子丙形成的电泳带相距最远2. 用凝胶色谱法分离相对分子质量小的蛋白质时，下列说话正确的是( )A ．路程较长，移动速度较慢B ．路程较长，移动速度较快C ．路程较短，移动速度较慢D ．路程较短，移动速度较快3. 检测遗传多样性的大多数方法，如测定不同亚种、不同种群间的基因组全序列，这些方法十分可靠，但工作量很大．当然也存在一些简单的方法，如（ ） A ．细胞组织培养 B ．胚胎移植 C ．基因重组D ．PCR 技术4. 下列关于凝胶色谱法的原理及操作不正确的是( ) A.是利用凝胶把分子大小不同的物质分离开的一种方法B.在洗脱过程中,大分子不能进入凝胶内部而最先流出,小分子可以进入凝胶内部而流速缓慢,最后流出C.凝胶内部有很微细的多孔网状结构,其空隙大小与被分离的物质分子的大小无相应关系D.一般情况下,凝胶对要分离的物质没有吸附作用,因此所有要分离的物质都应该被洗脱出来5. 多聚酶链式反应(PCR 技术)是体外酶促合成特异DNA 片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA 得以迅速扩增，其简要过程如右图所示。

下列关于PCR 技术叙述不正确的是（ ）。

A ．PCR 技术制备大量DNA 时引物要被不断消耗B ．PCR 技术能使整个加入体系DNA 片段呈指数扩增C ．PCR 技术中需要4钟脱氧核糖核苷酸作为原料D ．应用PCR 技术与探针杂交技术可以检测基因突变6. “X 基因”是DNA 分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR 技术特异性地拷贝“X 基因”，需在PCR 反应中加入两种引物，两种引物及其与模板链的精品文档实用文档结合位置如图1所示。

2018-2019学年高中生物专题测试卷（五）DNA和蛋白质技术新人教版选修1编辑整理：尊敬的读者朋友们：这里是精品文档编辑中心，本文档内容是由我和我的同事精心编辑整理后发布的，发布之前我们对文中内容进行仔细校对，但是难免会有疏漏的地方，但是任然希望（2018-2019学年高中生物专题测试卷（五）DNA和蛋白质技术新人教版选修1）的内容能够给您的工作和学习带来便利。

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专题测试卷（五) DNA和蛋白质技术(时间：60分钟满分：100分)一、选择题（共15小题，1~10小题每小题3分，11~15小题每小题5分，共55分。

每小题只有一个选项符合题意。

）1．下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述,正确的是（)A．DNA在NaCl溶液中的溶解度与蛋白质不同B．DNA遇二苯胺沸水浴呈紫色C．洗涤剂可瓦解细胞膜，且对DNA有影响D．向DNA滤液中加酒精会使杂蛋白析出解析:DNA在NaCl溶液中的溶解度与蛋白质不同，利用这一特点可将DNA和蛋白质分离,A 正确；沸水浴下DNA遇二苯胺呈蓝色，B错误；洗涤剂可瓦解细胞膜，对DNA没有影响，C错误;DNA不溶于酒精,向DNA滤液中加入酒精会使DNA析出，D错误.答案：A2．如图表示细胞内DNA复制和细胞外PCR扩增两个过程，两反应过程的条件中相同的是（）A．模块B．原料C．酶D．能量供应解析：细胞内的DNA复制和细胞外的PCR扩增过程，需要的原料相同，都是四种脱氧核苷酸。

答案：B3．下列关于血红蛋白的提取和分离的叙述中，错误的是（）A．红细胞的洗涤效果与洗涤次数、离心速度和离心时间有关B．凝胶柱中适量气泡的存在会提高分离的效果C．凝胶色谱法是一种根据相对分子质量的大小来分离蛋白质的方法D．判断纯化的蛋白质是否达到要求可以采用电泳法答案:B4．通常用哺乳动物的血液来提取和分离血红蛋白，下列叙述中正确的是( )A．实验时向新鲜的血液中加入柠檬酸钠的目的是防止血红蛋白变性B．洗涤红细胞的目的是避免细胞粘连在一起C．分离红细胞时要进行较长时间的高速离心D．分离后血红蛋白还要通过凝胶色谱法将样品进一步纯化解析：A错误，实验时向新鲜的血液中加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固；B错误，洗涤红细胞的目的是去除杂蛋白；C错误，分离红细胞时要低速短时间离心；D正确，分离后血红蛋白还要通过凝胶色谱法将样品进一步纯化。

专题5过关检测(时间:60分钟，满分:100分）一、选择题(共25小题，每小题2分，共50分）1、下列叙述中错误的就是( )。

A、改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B、在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色C、用电泳法可分离带电性质、分子大小与形状不同的蛋白质D、用透析法可去除蛋白质样品中的小分子物质解析:在不同浓度的NaCl溶液中DNA的溶解度不同,在物质的量浓度为0、14 m ol/L的NaCl 溶液中溶解度最小，DNA析出，呈丝状物，过滤后存在于黏稠物中；在物质的量浓度为2 mol/L 的NaCl溶液中溶解度最大,所以DNA呈溶解状态，过滤后存在于滤液中。

答案:A2、在DNA提取过程中,最好使用塑料试管与烧杯，目的就是（)。

A、不易破碎B、减少提取过程中DNA的损失C、增加DNA的含量D、容易洗刷解析：玻璃对DNA有吸附作用，如果用玻璃器具,DNA会吸附在管壁上,减少DNA的提取量. 答案：B3、“DNA的粗提取与鉴定”实验中，操作正确的就是( ).A、取制备好的鸡血细胞液5～10 mL,注入烧杯中，迅速加入物质的量浓度为0、14 mol/L 的NaCl溶液20 mL,同时用玻璃棒沿同一方向快速搅拌5 min,可使血细胞破裂,释放出DNAB、整个DNA提取过程中，两次加蒸馏水的目的,都就是为了降低溶液中NaCl的浓度，使DNA 分子的溶解度达到最低,析出DNA分子C、整个DNA提取操作中,两次加入2 mol/L的NaCl溶液，目的都就是使DNA尽可能多地溶解在NaCl溶液中D、DNA鉴定操作中，只要向溶有DNA的NaCl溶液中加入4 mL的二苯胺试剂，即可出现蓝色解析：取制备好的鸡血细胞液注入烧杯中,迅速加入蒸馏水并用玻璃棒沿同一方向搅拌,使血细胞破裂,将DNA释放出来;整个DNA提取过程中，使用两次蒸馏水,第一次就是使血细胞吸水胀破，释放核DNA,第二次就是用来稀释NaCl溶液,使DNA析出；在DNA鉴定操作中，DNA 遇二苯胺试剂呈蓝色需在沸水浴条件下完成。