微生物药物敏性试验的意义.

微生物药物敏感实验
⏹一、实验目的
⏹1、熟悉和掌握圆纸片扩散法检测细菌对抗菌药物敏感性的操作程序和结果判断方
法。

⏹2、了解药敏试验在实际生产中的重要意义
二、实验原理
⏹将含有定量抗菌药物的纸片（药敏纸片）贴在已接种待检菌的琼脂平板表面特定部
位。

药物借其分子的扩散力向周围琼脂中扩散，形成了随着离纸片距离加大，琼脂中的药物浓度逐渐减少的梯度浓度。

其纸片周围一定区域琼脂内的药物浓度高于抑制待检菌所需浓度时，则该区域内细胞不能生长，形成透明抑制圈。

抑菌圈的大小可以反映待检对测定药物的敏感程度，抑菌圈愈大，说明该菌对此药物越敏感三、实验器材
⏹1．菌种大肠埃希菌。

⏹2．培养基牛肉膏蛋白胨培养基。

⏹3．试剂无菌生理盐水，抗菌药物纸片：
包括青霉素、氨苄西林、土霉素、链霉素等。

⏹4．其他无菌棉拭子、镊子、毫米尺、接种环。

四、实验方法和步骤
⏹1．菌液制备
菌浓合适，一般为106
⏹2．接种
细菌悬液制备后15min内接种至倒好的牛肉膏蛋白胨培养基平板中，接种量0.1-0.2mL。

涂布均匀。

⏹3．贴药敏纸片
⏹涂布后的平板在室温下干燥3~5min，用纸片分配器或无菌镊子将纸片贴于琼脂表面
并轻压，使纸片与琼脂表面完成接触。

各纸片中心相距应大于24mm，纸片贴上后就不能再移动位置。

⏹4．培养
⏹将平板倒置放入37℃培养箱培养，16~18h读取结果。

五、实验结果
六、思考题
⏹ 1.圆纸片药敏试验操作时应注意什么事项？
⏹ 2. 试述药敏试验的意义。

微生物的基础知识一、抗菌药物敏感试验的临床意义及其在国内的现状1、什么是抗菌药物敏感试验？抗菌药物敏感试验（Antibotic Sensitive Test，简称AST）是一种体外试验，用于检测病原菌在体外对各类抗生素的敏感性并向临床报告。

2、药敏试验的目的：指导临床合理用药：对于临床分离株不能预测其敏感性或者已用药物疗效不好需要更换药物时，需要进行药敏试验。

对耐药性的监测：了解该医院和地区的常见病原菌及其耐药性并进行统计学分析，向临床提供报告，以指导经验用药，减少耐药菌株的流行。

流行病学调查：有助于及时发现医院获得性感染，控制和预防多重耐药菌株在医院内的流行。

3、药敏试验在国内外的现状随着抗生素特别是广谱抗生素的广泛使用，细菌的耐药性也日趋严重。

青霉素首次应用于抗感染治疗时，还没有发现耐药菌株，疗效极为满意。

而第三代头孢类自1981年开始使用的4年后即发现耐药菌株。

各种耐药机制和多重耐药菌株不断被发现并能够在不同细菌之间传播，增加了临床治疗的难度，已经引起全球临床的关注，要求合理使用抗生素并防止抗生素滥用的呼声日益高涨。

发达国家已经普遍使用自动化系统进行药敏试验，并取得显著成绩。

国内一些较大医院较早引进自动化的细菌鉴定/药敏分析系统，而更多的医院使用手工法开展微生物学检查。

由于手工法操作繁琐，技术要求高，检测范围不够全面，限制了药敏试验的开展。

部分医院的微生物学检查甚至是个空白，仅能提供涂片镜检的报告，无法满足临床对于药敏试验越来越迫切的要求。

因此，从国内外的发展情况看，药敏实验的自动化是临床微生物学发展的必然趋势。

二、临床微生物学的基本概念1、正常菌群与条件致病菌：人体存在着大量细菌，其中很多对人体无害，即为正常菌群。

也有部分细菌通常对人体无害，但在一定条件下（如人体免疫功能低下、危重病人、慢性病患者、转移至其他器官、抗生素滥用导致菌群失调等等）能够引起感染，称为条件致病菌。

条件致病菌导致的感染在临床感染发生原因中所占比率逐渐增加。

常见细菌药物敏感性试验报告规范中国专家共识微生物学检验为感染性疾病得诊断、治疗与控制提供了必不可少得证据。

因此微生物学检验报告就是临床与实验室等多方共同关注得焦点。

国内临床微生物学检验发展较为薄弱，报告存在着种种不足。

同时，临床与实验室得沟通存在一定不足，密切协作非常必要。

基于实际存在得问题，为规范国内临床微生物学检验药物敏感性试验报告，加强临床与实验室合作，发挥检验医师作用，特制订本共识，以期指导相关报告得规范化，减少错误，增加专业信息，提高服务质量，为临床医学诊、治、控提供坚实得科学依据。

本共识限于常见细菌得药物敏感性报告。

一、药物敏感性试验得意义与基本原则(一)意义药物敏感性试验可以检测细菌对于抗细菌药物得敏感性，为临床用药、新药研究、监测耐药变迁、发现耐药机制等提供客观证据[1]。

对于经验治疗，依据一方面来自医生自身得经验，一方面就是实验室长期不断提供得数据积累。

临床需要考虑不同感染得病原谱与常见病原对不同药物得敏感性；对于靶向治疗，特定分离株得具体药敏试验结果可以用于判断经验治疗选药合理性、经验治疗效果分析、调整治疗选药依据等。

(二)基本原则1．药敏试验检测获得性耐药，不必测试天然耐药：天然耐药就是细菌菌种固有得特征，耐药基因一般位于染色体，可以长期稳定遗传，表现为对某类或某种药物得天然耐药[2]。

天然耐药信息一般由基础医学与临床文献提供。

部分天然耐药，体外试验条件下可能无法检测出来，因而导致假敏感，如果报告将成为极重要错误，严重误导临床。

常见菌种对各类药物得天然耐药见文献。

实验室全体人员应熟知这些信息，可将其发给临床学习与参考。

2．药敏试验测试得前提条件：实验室应具备相应检测得人员能力、客观条件、结果解释依据。

标本处理、菌株分离鉴定、药敏试验操作等环节规范、标准、结果可信；具备对结果得解释能力，能够提供临床会诊服务。

临床常规工作，分离株(可能)有临床意义而非定植或污染时，才可进行药敏试验。

药敏试验原理
药敏试验是一种用于测试微生物对抗生素或药物的敏感性的实验方法。

它可以帮助医生确定最有效的治疗方法，避免使用对微生物无效的药物，从而减少药物滥用和耐药性的产生。

药敏试验的原理是通过将不同的抗生素或药物加入培养基中，观察微生物在不同药物浓度下的生长情况，从而判断微生物对药物的敏感性。

在进行药敏试验时，首先需要培养待测微生物，使其达到一定的数量和生长状态。

然后将不同浓度的药物加入含有微生物的培养基中，通常会采用双倍稀释法或梯度法来确定不同浓度的药物。

接着将含有药物的培养基与微生物接种于琼脂平板上，培养一定时间后观察微生物的生长情况。

通过比较不同药物浓度下微生物的生长情况，可以确定微生物对药物的敏感性。

药敏试验的结果通常会以最小抑菌浓度（MIC）来表示，MIC是指能完全抑制微生物生长的最低药物浓度。

根据MIC的结果，可以将药物分为对微生物具有杀菌作用和仅具有抑菌作用两种类型。

对于临床治疗来说，通常会选择对微生物具有杀菌作用的药物，以达到最好的治疗效果。

除了MIC外，药敏试验还可以通过观察药物对微生物的杀菌曲线来评估药物的抗菌活性。

杀菌曲线可以反映出药物对微生物的杀菌速度和效果，对于选择治疗方案和判断药物的疗效都具有重要意义。

总的来说，药敏试验是一种非常重要的实验方法，可以帮助医生选择最有效的治疗药物，减少药物滥用和耐药性的产生。

通过了解药敏试验的原理和结果解读，可以更好地理解临床上药物选择的依据，为临床治疗提供更科学的依据。

同时，药敏试验也为药物研发和抗菌药物的选择提供了重要的参考依据，对于推动医学和药学领域的发展具有重要意义。

微生物药敏试验实验报告一、实验目的微生物药敏试验是用于测定病原菌对抗菌药物的敏感性，为临床合理选用抗菌药物提供科学依据。

本次实验旨在通过对常见病原菌进行药敏试验，了解其对不同抗菌药物的耐药情况，为临床治疗提供参考。

二、实验材料1、菌株来源本次实验所使用的病原菌菌株均来自临床送检标本，包括痰液、尿液、血液、脓液等。

经过分离培养和鉴定，确定了菌株的种类。

2、培养基采用 MuellerHinton 琼脂培养基，按照标准操作规程进行配制和灭菌。

3、抗菌药物纸片选用了常见的抗菌药物纸片，包括青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类、磺胺类等，均购自正规生物试剂公司。

4、实验仪器恒温培养箱、无菌镊子、游标卡尺等。

三、实验方法1、菌株复苏与培养将保存的病原菌菌株接种于营养琼脂平板上，置于 35℃恒温培养箱中培养 18 24 小时，使其复苏并生长良好。

2、菌液制备挑取单个菌落，用生理盐水制成 05 麦氏浊度的菌液。

3、接种用无菌棉拭子蘸取菌液，在培养基表面均匀涂抹 3 次，每次旋转60°，最后沿平板边缘涂抹一周。

4、贴药敏纸片用无菌镊子将抗菌药物纸片贴在培养基表面，纸片之间的距离应不小于 24mm，纸片中心距离平板边缘应不小于 15mm。

5、培养将接种好的平板倒置放入 35℃恒温培养箱中培养 16 18 小时。

6、结果观察与判定培养结束后，用游标卡尺测量抑菌圈的直径。

根据临床和实验室标准协会（CLSI）制定的标准，判断病原菌对各种抗菌药物的敏感性，分为敏感（S）、中介（I）和耐药（R）。

四、实验结果1、革兰阳性菌药敏结果（1）金黄色葡萄球菌对苯唑西林、万古霉素表现为敏感；对红霉素、克林霉素有一定的耐药率。

（2）肺炎链球菌对青霉素、头孢曲松敏感；对四环素、磺胺类药物耐药率较高。

2、革兰阴性菌药敏结果（1）大肠埃希菌对头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南敏感；对氨苄西林、复方新诺明耐药率较高。

（2）肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物敏感；对头孢噻肟、左氧氟沙星有不同程度的耐药。

微生物药敏实验报告本实验旨在检测微生物对不同抗菌药物的敏感性，以指导临床合理用药，提高治疗效果。

药敏实验是通过测量抗菌药物在体外对微生物的抑制作用，评估药物对病原菌的抗菌活性。

本实验采用纸片扩散法，将含有不同抗菌药物的药敏纸片放置在培养基上，观察细菌生长情况，计算抑菌圈直径，从而判断细菌对药物的敏感性。

细菌接种：将待测细菌接种于固体培养基上，用无菌棉签均匀涂抹。

药敏纸片放置：选择合适药敏纸片，用无菌镊子将其放置在培养基上，间距至少24mm。

培养：将培养皿置于37℃恒温培养箱中培养24小时。

结果分析：根据抑菌圈直径判断细菌对药物的敏感性，如敏感、中介或耐药。

青霉素、阿莫西林、头孢拉定对细菌具有较好的抗菌活性，可作为首选药物。

环丙沙星具有较强的抗菌作用，可作为备选药物。

红霉素、四环素、庆大霉素和克林霉素的抗菌效果较弱，可作为辅助治疗药物。

克林霉素和复方磺胺甲噁唑对细菌不敏感，应避免使用。

根据药敏实验结果，建议使用青霉素、阿莫西林、头孢拉定和环丙沙星治疗该细菌感染。

在使用过程中，应注意观察患者反应情况，及时调整用药方案。

同时，应进行定期药敏实验复查，以避免耐药性的产生。

微生物在自然界中广泛存在，而临床微生物鉴定与药敏试验对于诊断和治疗感染性疾病具有重要意义。

本文将介绍临床微生物鉴定的方法和药敏试验的基本原理及其在感染性疾病治疗中的重要性。

临床微生物鉴定是指通过一系列实验方法对临床标本中分离出的微生物进行种类鉴别和抗菌药物敏感性的测定。

这有助于医生正确选择抗菌药物，提高感染性疾病的治疗效果。

细菌鉴定是通过对细菌的形态、染色特性、生化反应、血清学试验等进行测定，以确定细菌的种类。

例如，革兰染色可以将细菌分为革兰阳性菌和革兰阴性菌，而血清学试验则可以用于鉴定链球菌、肺炎球菌等。

病毒鉴定是通过病毒的分离培养、抗原抗体检测、分子生物学等方法确定病毒的种类。

例如，分离培养可以用于检测水痘-带状疱疹病毒，而抗原抗体检测可以用于检测乙型肝炎病毒等。