在消化道中存在各种蛋白酶会对饲料用酶进行消化分解-创腾科技
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细胞培养中消化的定义细胞培养中的消化是指利用消化酶将细胞培养基中的胶原蛋白和其他细胞外基质降解为可溶性小分子物质的过程。
消化在细胞培养中起着至关重要的作用,它能够为细胞提供必需的营养物质,促进细胞的生长和繁殖。
下面将为大家介绍细胞培养中消化的具体含义及其实施方法。
在细胞培养的过程中,消化是一个必须进行的步骤,因为许多培养基中的组分是以胶原形式存在的,而细胞无法直接利用这些胶原蛋白。
因此,借助特定的消化酶,可以将这些不可利用的胶原蛋白降解为可以被细胞吸收利用的小分子物质,为细胞提供能量和营养。
消化酶在细胞培养中具有重要的作用。
常用的消化酶有胰蛋白酶、胶原酶等。
这些消化酶能够识别特定的化学结构,并通过切割或酶解胶原蛋白的肽键来降解胶原蛋白。
通过消化酶的作用,细胞可以充分利用培养基中的胶原蛋白和其他细胞外基质,以便获取所需的营养物质。
实施细胞培养中的消化通常有以下几个步骤:首先,将培养基中的消化酶加入到细胞培养体系中。
可以根据实验的需要选择合适的消化酶和浓度。
通常,消化酶在细胞培养体系中的浓度应该适度,过高的浓度可能对细胞造成损伤。
其次,进行适当的消化时间。
消化时间的长短可以根据实验目的和细胞类型进行调整。
一般来说,消化时间过短可能导致未能完全消化,影响细胞的生长和繁殖;而过长的消化时间则可能导致细胞过度消化,影响细胞的活力。
细胞培养中消化的最后一步是停止消化的过程。
这一步骤是非常关键的,因为消化酶的过度作用可能会对细胞产生不利影响。
通常采用添加特定抑制剂的方法来停止消化,如加入抑制剂或使用抑制剂处理培养体系。
细胞培养中的消化对于细胞培养的成功至关重要。
通过适当的消化步骤,可以将不利于细胞生长的胶原蛋白和其他细胞外基质转化为细胞所需的营养物质。
因此,在进行细胞培养实验时,我们应该高度重视消化步骤的实施,确保细胞能够获得最佳的生长环境。
同时,我们也应该根据实验的需要和细胞的特性,选择合适的消化酶和控制消化的时间和方法,以保证实验结果的准确性和可靠性。
动物营养学报2015,27(2):541⁃550ChineseJournalofAnimalNutrition㊀doi:10.3969/j.issn.1006⁃267x.2015.02.026大豆酶解蛋白对仔猪生长性能㊁矿物质利用及消化道健康的影响张爱民1㊀唐㊀玲2㊀尹㊀佳2㊀肖伟伟2∗(1.中国食品集团公司,北京100801;2.成都美溢德生物技术有限公司,成都610222)摘㊀要:本试验旨在研究大豆酶解蛋白(ESM)对仔猪生长性能㊁矿物质利用及消化道健康的影响㊂试验将120头 杜长大 (DLY)仔猪[(10.79ʃ1.59)kg]随机分为6个组,每个组4个重复,每个重复5头猪㊂6个组分别饲喂19%粗蛋白质(CP)饲粮㊁18%CP饲粮和在18%CP饲粮基础上分别用1.0%㊁1.5%㊁2.0%㊁2.5%ESM等量替换玉米的饲粮㊂试验期为36d㊂结果表明:1)与18%CP组对比,18%CP+1.0%和1.5%ESM组仔猪平均日采食量㊁平均日增重提高,但无显著差异(P>0.05);18%CP+1.5%ESM组饲粮有机物和CP㊁粗灰分㊁钙和磷表观消化率显著提高(P<0.05);18%CP+1.0%和2.0%ESM组骨骼钙㊁磷含量显著提高(P<0.05);18%CP+2.0%ESM组空肠㊁18%CP+2.5%ESM组回肠绒毛高度显著提高(P<0.05),18%CP+2.0%ESM组十二指肠和空肠的绒毛高度/隐窝深度(V/C)显著增加(P<0.05);18%CP+1.5%ESM组血清二胺氧化酶(DAO)活性极显著降低(P<0.01),回肠黏膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量显著提高(P<0.05);盲肠㊁结肠乳酸杆菌数量和乳酸杆菌/大肠杆菌显著提高(P<0.05)㊂2)与19%CP组对比,18%CP+1.5%ESM组平均日采食量㊁平均日增重和料重比无显著差异(P>0.05);饲粮干物质㊁有机物㊁CP㊁粗灰分㊁磷表观消化率显著提高(P<0.05);血清和骨骼中钙含量显著提高(P<0.05);血清DAO活性显著降低(P<0.05);盲肠和结肠中乳酸杆菌数量㊁乳酸杆菌/大肠杆菌极显著提高(P<0.01)㊂综上,饲粮添加1.0% 1.5%ESM一方面可以促进肠道绒毛发育㊁维持肠道结构完整㊁优化肠道菌群,从而保证仔猪消化道健康;另一方面可以提高仔猪对钙㊁磷的吸收与沉积,从而促进骨骼生长发育㊂关键词:大豆酶解蛋白;仔猪;生长性能;矿物质利用;消化道健康中图分类号:S816.42;S828㊀㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀㊀文章编号:1006⁃267X(2015)02⁃0541⁃10收稿日期:2014-08-29作者简介:张爱民(1967 ),男,北京人,工程师,本科,研究方向为动物营养与饲料㊂E⁃mail:zhangaimin28@sina.com∗通信作者:肖伟伟,博士研究生,E⁃mail:xww@mytech.sc.cn㊀㊀大豆蛋白是猪饲粮主要的蛋白质原料,常见仔猪饲粮中总用量达到15% 20%[1]㊂但大豆蛋白分子质量大,需经过仔猪胃肠道复杂的消化过程才能被吸收利用[2-3];另外,其抗营养因子含量高,极易损害仔猪肠道健康[4-5]㊂因此,大豆蛋白在仔猪上的消化利用率低,成为影响仔猪饲粮蛋白质利用效率的主要因素,使仔猪的生长受到抑制㊂研究发现,将大豆蛋白降解不仅可以提高大豆蛋白的可消化性[5-7],还能产生部分大豆活性肽[7-8]㊂肽在动物体内具有以下功能:1)促进氨基酸吸收,加速蛋白质合成[9-10];2)提高矿物元素利用效率[11-13];3)促进肠道生长发育,维持肠道健康[14]等㊂因此,饲粮应用大豆蛋白降解物能够提高仔猪生长性能[15-18],提高饲粮钙(Ca)㊁磷(P)的表观消化率[19-21],促进肠道绒毛发育[20,22-23]等㊂㊀㊀目前,大豆蛋白降解以发酵[5]或酶解[7]工艺生产,降解程度主要通过酸溶蛋白(分子质量<2000u)和抗营养因子含量评价,从而进一步判断㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报27卷其可消化利用性;但由于生产工艺条件不同,产品质量参差不齐[16-27]㊂调查发现,市场以发酵大豆蛋白为主,仅有部分酶解大豆蛋白,其产物中酸溶蛋白含量低于10%,抗营养因子清除率低于50%,且鲜有功能肽的报告[28]㊂因此,提高大豆蛋白降解物中肽含量,降低抗营养因子,增加功能肽是提高大豆蛋白利用的关键㊂根据猪生理需求,结合大豆蛋白结构特点,经组合液态酶解形成的大豆酶解蛋白(enzymolyticsoybeanmeal,ESM),其酸溶蛋白含量达到28%以上,抗营养因子清除率90%以上,同时富含肠道修复和抗氧化的功能肽㊂它不仅为仔猪提供了直接吸收㊁高效沉积的氮,同时,还可以提高仔猪的消化吸收能力,从而改善生长性能㊂本试验旨在仔猪饲粮中添加不同水平的ESM,探索ESM最适添加水平,研究ESM对仔猪矿物质利用和消化道健康的影响,为生产应用提供理论参考依据㊂1㊀试验材料与方法1.1㊀试验材料㊀㊀ESM由成都美溢德生物技术有限公司(商品名 富力肽 )提供㊂ESM采用大豆蛋白为原料,经组合液态酶解工艺生产,粗蛋白质(CP)含量在45%以上,使用三氯乙酸沉淀法测定酸溶蛋白即小肽含量在28%以上(其中二肽和三肽占小肽的87%以上),同时富含部分生物活性肽,原料中抗营养因子被有效清除㊂ESM营养成分与抗营养因子组成见表1㊂表1㊀大豆酶解蛋白营养成分与抗营养因子组成Table1㊀Compositionofnutrientsandanti⁃nutritionalfactorsofESM项目Items含量Content项目Items含量Content水分Moisture/%ɤ8.00赖氨酸Lys/%2.86粗蛋白质CP/%ȡ45.00蛋氨酸Met/%0.74粗脂肪EE/%2.00 4.00色氨酸Trp/%0.60粗灰分Ash/%ɤ15.00胰蛋白酶抑制因子Trypsininhibitor/(mg/g)ɤ2.00酸溶蛋白Acidprotein/%ȡ28.00寡聚糖Oligosaccharides/%ɤ1.00钙Ca/%3.50大豆球蛋白Glycinin/(mg/g)ɤ6.00磷P/%1.00β-伴球蛋白β⁃conglycinin/(mg/g)ɤ3.001.2㊀试验动物与饲粮㊀㊀试验采用单因素试验设计,选择120头体重为(10.79ʃ1.59)kg健康 杜长大 (DLY)仔猪,随机分为6个组,每组4个重复,每个重复5头㊂6个组分别饲喂饲粮1 6㊂饲粮1(19%CP)以进口鱼粉㊁豆粕㊁膨化全脂大豆为主要蛋白质源,豆油为主要脂肪源,并添加维生素和矿物元素预混料配制而成㊂饲粮2(18%CP)在饲粮1的基础上降低1%CP,通过调整蛋白质原料和能量原料的用量,保证营养物质供给平衡㊂饲粮3 6在饲粮2的基础上分别以1.0%㊁1.5%㊁2.0%㊁2.5%的ESM替代等量玉米(表2)㊂1.3㊀饲养管理㊀㊀试验地点在四川成都新益洲养殖有限公司㊂每日饲喂4次(07:00㊁12:00㊁16:00㊁20:00),每天07:00饲喂前记录余料量之后清干净料槽再饲喂㊂每晚饲喂后,根据当日投喂量估算第2天采食量并将料称好放于相应的料桶中㊂每天观察仔猪的采食情况,如果有突发异常情况使采食下降,及时找出原因并采取相应措施㊂饲养期准确记录各重复的体重㊂其他饲养管理按照养殖场正常程序进行㊂试验期共计36d㊂1.4㊀样品采集和处理㊀㊀饲料样:配制饲粮时,6个组的饲粮在每袋相同位置各取150g,混匀后按四分法收集饲料样,-20ħ保存,用于测定水分㊁有机物㊁粗灰分㊁CP㊁Ca㊁P㊁酸不溶灰分含量㊂㊀㊀粪样:饲养试验进行到第3周开展为期4d的消化试验㊂采用内源指示剂法,用酸不溶灰分为指示剂,部分收粪㊂消化试验期间每天早㊁中㊁晚喂料后收集新鲜未污染粪样,按照粪样重量5%比例加入10%浓盐酸㊂以重复为单位,各重复试验猪群的粪样混匀,取样10%,在65ħ烘箱中烘至恒重,室温下回潮24h,称重,记录,粉碎过40目筛,装密封袋保存于-20ħ,用于测定水分㊁有机物㊁粗灰分㊁CP㊁Ca㊁P㊁酸不溶灰分含量㊂2452期张爱民等:大豆酶解蛋白对仔猪生长性能㊁矿物质利用及消化道健康的影响表2 试验饲粮组成及营养水平(风干基础)Table2㊀Compositionandnutrientlevelsofexperimentaldiets(air⁃drybasis)%项目Items饲粮Diets123456原料Ingredients玉米Corn29.2031.2030.2029.7029.2028.70膨化玉米Extrudedcorn29.0029.0029.0029.0029.0029.00膨化全脂大豆Extrudedfull⁃fatsoybean10.0010.0010.0010.0010.0010.00去皮豆粕Dehulledsoybeanmeal17.0016.0016.0016.0016.0016.00进口鱼粉Importedfishmeal3.002.002.002.002.002.00大豆酶解蛋白ESM1.001.502.002.50高蛋白质乳清粉Wheypowder4.004.004.004.004.004.00葡萄糖Glucose2.002.002.002.002.002.00豆油Soybeanoil1.801.801.801.801.801.80L-赖氨酸L⁃Lys(98%)0.400.400.400.400.400.40DL-蛋氨酸DL⁃Met(99%)0.100.100.100.100.100.10L-色氨酸L⁃Try(98%)0.020.020.020.020.020.02L-苏氨酸L⁃Thr(99%)0.120.120.120.120.120.12预混料Premix1)3.363.363.363.363.363.36合计Total100.00100.00100.00100.00100.00100.00营养水平Nutrientlevels2)消化能DE/(MJ/kg)14.5114.5014.3614.2914.2214.12粗蛋白质CP19.1718.1718.5518.7318.9219.09粗纤维CF1.961.961.992.012.022.04粗脂肪EE6.216.186.186.186.186.17粗灰分Ash2.882.692.832.902.973.03钙Ca0.710.660.700.710.730.75总磷TP0.610.580.580.590.590.59有效磷AP0.410.390.390.390.400.40赖氨酸Lys1.451.371.401.411.421.44蛋氨酸Met0.420.400.400.410.410.41㊀㊀1)预混料为每千克饲粮提供Thepremixprovidedthefollowingperkgofdiets:氯化胆碱cholinechloride(50%)1g,NaCl2.5g,CaHPO411g,CaCO36g,抗氧化剂antioxidant200mg,酸化剂acidifier2g,甜味剂sweetener100mg,防霉剂moldinhibitor400mg,甘氨酸铁Fe⁃Gly(15%)300mg,FeSO4400mg,甘氨酸锌Zn⁃Gly(15%)200mg,ZnSO4200mg,甘氨酸锰Mn⁃Gly(15%)80mg,MnSO4100mg,甘氨酸铜Cu⁃Gly(10%)60mg,Cu2(OH)2CO3(58%)30mg,Na2SeO3(1%)34mg,HIO3(5%)24mg,CoCl2(5%)4mg,VA(50%)95mg,烟酰胺nicotinamide90mg,VE75mg,VK333mg,泛酸钙pantothenicacid32mg,VB22mg;VD315mg,VB614mg,VB1210mg,生物素biotin10mg,VB17mg,叶酸folicacid1mg㊂㊀㊀2)营养水平均为计算值㊂Nutrientlevelswereallmeasuredvalues.㊀㊀血清样:试验结束时,每个重复随机选1头猪进行空腹采血,用真空采血管从前腔静脉采非抗凝血10mL,室温下倾斜放置30min,3500r/min离心10min后,分离血清,置于-20ħ冷冻保存,用于血清二胺氧化酶(DAO)活性和Ca㊁P含量测定㊂㊀㊀内脏样:饲养试验结束后,禁食12h后称重㊂在屠宰前1h喂料,每个重复选取1头中等体重猪只进行放血处死㊂迅速打开腹腔分离及结扎肠段将十二指肠㊁空肠㊁回肠㊁盲肠㊁结肠分段取下(所有猪只取相同位置)㊂采集盲肠和结肠食糜,立即进行菌群数量测定㊂取十二指肠㊁空肠㊁回肠中段约3cm肠段放入4%甲醛溶液中做组织切片测定绒毛高度和隐窝深度㊂取左侧股骨测定骨骼中345㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报27卷Ca㊁P含量㊂将采集的样品液氮迅速冷冻,再转入-20ħ冰箱中保存备用㊂1.5㊀测定指标及方法1.5.1㊀生长性能㊀㊀试验期间每日记录给料量和余料量,计算采食量㊂试验开始前1天和试验结束前1天,猪空腹12h称重,计算平均日采食量㊁平均日增重及料重比㊂平均日增重(ADG,kg/d)=(试验结束体重-试验初始体重)/试验天数;平均日采食量(ADFI,kg/d)=(试验期内给料量-试验期内余料量)/试验天数;料重比(F/G)=平均日采食量/平均日增重㊂1.5.2㊀营养物质表观消化率㊀㊀饲料和粪便中CP㊁粗脂肪㊁粗灰分含量的测定参照张丽英主编‘饲料分析及饲料质量检测技术(第2版)“;Ca含量参照GB/T6436 2002用乙二胺四乙酸(EDTA)络合滴定法测定;P含量参照GB/T6437 2002用钼黄比色法测定㊂酸不溶灰分含量按照GB/T23742 2009㊂某营养物质消化率按以下公式计算:某营养物质消化率(%)=100-100ˑbˑc/(aˑd)㊂㊀㊀式中:a为饲料中某营养物质含量(%);b为粪中某营养物质含量(%);c为饲料中酸不溶灰分含量(%);d为粪中酸不溶灰分含量(%)㊂1.5.3㊀血清和股骨Ca㊁P含量㊀㊀血清Ca㊁P含量测定均采用南京建成生物工程研究所检测试剂盒,Ca含量采用甲基百里香酚蓝比色法,P含量采用磷钼酸法㊂㊀㊀股骨的前处理参照Gao等[29]的方法进行,股骨经蒸煮㊁去肉和筋腱,烘干后再在乙醇ʒ苯(2ʒ1)混合液中浸泡7d后脱脂,于105ħ烘干到恒重后称得脱脂干股骨重,继而在550ħ灰化后称得粗灰分重,股骨Ca㊁P含量与饲料和粪便Ca㊁P含量测定方法相同㊂1.5.4㊀肠道绒毛高度和隐窝深度㊀㊀将甲醛溶液固定的十二指肠㊁空肠㊁回肠肠段用酒精脱水后,再用石蜡切片包埋,切片厚度6μm,苏木素-伊红(HE)染色㊂采用图像分析处理系统,每个样品观察3张不连续性切片(保存相片)㊂每个样品各测10个绒毛高度和隐窝深度,测量后统计其平均值,计算绒毛高度/隐窝深度(V/C)㊂1.5.5㊀肠道分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量和血清DAO活性㊀㊀回肠黏膜sIgA含量㊁血清DAO活性使用南京建成生物工程研究所检测试剂盒,sIgA含量用酶联免疫法㊁DAO活性用酶解法测定㊂1.5.6㊀盲结肠乳酸杆菌和大肠杆菌数量㊀㊀乳酸菌数量测定用MRS培养基,大肠杆菌数量测定用伊红-美蓝培养基㊂乳酸菌㊁大肠杆菌数量的测定采用点种法㊂首先用灭菌生理盐水对食糜进行倍比稀释;然后每个样品取3个稀释度点样,每个稀释度点3个重复,取其平均值作为最终结果㊂培养相应时间后,分别对其进行菌落计数,结果以lg(CFU/g)表示㊂1.6㊀数据处理分析㊀㊀试验数据先采用Excel2007处理,再采用SPSS17.0软件进行统计分析,结果用平均值ʃ标准差表示㊂试验2 6组采用(one⁃wayANOVA)单因素方差分析,差异显著者采用Duncan氏法多重比较检验;试验第1组和第4组采用独立样本t检验㊂以P<0.05作为差异显著性判断标准㊂2㊀结㊀果2.1㊀ESM对仔猪生长性能的影响㊀㊀从表3可知,与18%和19%CP组相比,添加ESM的18%CP饲粮对仔猪增重㊁平均日采食量和平均日增重的影响差异均不显著(P>0.05),但在18%CP+1.0%和1.5%ESM组仔猪增重㊁平均日采食量和平均日增重都高于其他组㊂2.2㊀ESM对饲粮营养物质表观消化率的影响㊀㊀从表4可知,与18%组相比,ESM显著提高了饲粮干物质㊁有机物㊁CP㊁粗灰分表观消化率(P<0.05),当ESM添加到1.5%时达到最大值㊂与19%CP组相比,18%CP+1.5%ESM组干物质㊁有机物㊁CP㊁粗灰分表观消化率显著提高(P<0.05)㊂㊀㊀与18%CP组对比,18%CP+1.5%和2.0%ESM组饲粮Ca表观消化率显著提高(P<0.05),18%CP+1.0%㊁1.5%和2.0%ESM组饲粮P表观消化率显著提高(P<0.05)㊂与19%CP组相比,18%CP+1.5%ESM组显著提高了饲粮P表观消化率(P<0.05)㊂4452期张爱民等:大豆酶解蛋白对仔猪生长性能㊁矿物质利用及消化道健康的影响表3㊀大豆酶解蛋白对仔猪生长性能的影响Table3㊀EffectsofESMongrowthperformanceofpiglets组别Groups初始体重IW/kg结束体重FW/kg增重GW/kg平均日增重ADG/(kg/d)平均日采食量ADFI/(kg/d)料重比F/G19%CP10.80ʃ2.2128.30ʃ6.2117.50ʃ4.110.486ʃ0.1140.849ʃ0.1861.75ʃ0.0518%CP10.70ʃ2.1528.05ʃ5.3917.35ʃ3.510.482ʃ0.0980.845ʃ0.1841.75ʃ0.0618%CP+1.0%ESM10.80ʃ1.8030.05ʃ3.6119.25ʃ1.990.535ʃ0.0550.927ʃ0.1401.73ʃ0.1218%CP+1.5%ESM10.80ʃ1.4629.85ʃ4.1119.05ʃ2.900.529ʃ0.0810.922ʃ0.1511.74ʃ0.0318%CP+2.0%ESM10.80ʃ1.4628.30ʃ4.7417.50ʃ3.310.486ʃ0.0920.843ʃ0.1411.74ʃ0.1118%CP+2.5%ESM10.85ʃ1.3928.74ʃ3.2917.89ʃ2.220.497ʃ0.0620.873ʃ0.1111.76ʃ0.08㊀㊀x㊁y表示19%CP组和18%CP+1.5%ESM组的差异显著性,a㊁b㊁c㊁d表示除19%CP组之外5组的差异显著性㊂同列数据肩标无字母或相同字母表示差异不显著(P>0.05),肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),肩标不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)㊂下表同㊂㊀㊀x,ymeanthedifferencebetween19%CPand18%CP+1.5%ESMgroups,anda,b,c,dmeanthedifferenceofthe5groupsexcept19%CPgroup.Inthesamecolumn,valueswithnoletterorthesamelettersuperscriptsmeannosignificantdiffer⁃ence(P>0.05),whilewithdifferentsmalllettersuperscriptsmeansignificantdifference(P<0.05),andwithdifferentcapitallet⁃tersuperscriptsmeansignificantdifference(P<0.01).Thesameasbelow.表4㊀大豆酶解蛋白对仔猪饲粮营养物质表观消化率的影响Table4㊀EffectsofESMontheapparentdigestibilityofdietarynutrientsofpiglets%组别Groups干物质DM有机物OM粗蛋白质CP粗灰分Ash钙Ca磷P19%CP84.45ʃ0.28x87.66ʃ0.21x82.95ʃ1.02x42.40ʃ4.31x49.88ʃ5.1350.50ʃ3.40x18%CP80.75ʃ0.32a84.33ʃ0.46a78.13ʃ0.80a30.56ʃ5.32a46.49ʃ3.82a43.88ʃ2.89a18%CP+1.0%ESM85.19ʃ1.02c87.91ʃ0.76c82.53ʃ1.49b46.18ʃ5.58c51.85ʃ3.66ab56.86ʃ3.15b18%CP+1.5%ESM87.73ʃ0.45dy90.15ʃ0.42dy86.27ʃ0.29cy57.88ʃ0.82dy54.17ʃ4.25b57.37ʃ1.47by18%CP+2.0%ESM85.91ʃ0.16c88.74ʃ0.29c83.45ʃ0.48b49.45ʃ2.87d54.01ʃ2.12b55.48ʃ1.32b18%CP+2.5%ESM82.51ʃ1.25b85.63ʃ1.17b79.84ʃ2.16a40.77ʃ1.81b53.27ʃ3.88ab44.94ʃ4.98a2.3㊀ESM对仔猪血清Ca㊁P含量和骨骼粗灰分㊁Ca㊁P含量的影响㊀㊀从表5可知,随ESM添加水平增加,血清Ca㊁P先增后减,其中18%CP+1.5%和2.0%ESM组Ca含量高于其他组,而18%CP+1.0%ESM组P含量高于其他组,但与18%CP组差异不显著(P>0.05)㊂与19%CP组相比,18%CP+1.5%ESM组显著提高了血清Ca含量(P<0.05)㊂㊀㊀骨骼粗灰分㊁Ca㊁P含量随ESM添加水平增加而先增后减,与18%CP组相比,18%CP+1.0%和2.0%ESM组显著提高了Ca㊁P含量(P<0.05)㊂与19%CP组相比,18%CP+1.5%ESM组骨骼Ca含量显著提高(P<0.05),粗灰分㊁P含量无显著差异(P>0.05)㊂2.4㊀ESM对仔猪肠道绒毛高度㊁隐窝深度及V/C的影响㊀㊀从表6可知,与18%CP组相比,ESM对十二肠绒毛高度无显著影响(P>0.05),但18%CP+2.0%ESM组空肠㊁18%CP+2.5%ESM组回肠绒毛高度显著提高(P<0.05);ESM对仔猪各小肠道隐窝深度无显著影响(P>0.05)㊂仔猪各小肠道V/C随ESM呈先增后减趋势,与18%CP组相比,18%CP+2.0%ESM组十二指肠和空肠的V/C显著增加(P<0.05),18%CP+1.5%ESM组回肠V/C显著增加(P<0.05)㊂与19%CP组相比,18%CP+1.5%ESM组十二指肠绒毛高度显著降低(P<0.05),但各肠道隐窝深度和V/C无显著变化(P>0.05)㊂2.5㊀ESM对仔猪血清DAO活性和回肠黏膜sIgA含量的影响㊀㊀从表7可知,与18%CP组对比,18%CP+1.5%㊁2.0%和2.5%ESM组显著降低了血清DAO含量(P<0.05),其中18%CP+1.5%ESM组极显著降低(P<0.01)㊂回肠黏膜sIgA含量随ESM添加水平增加而提高,与18%CP组对比,18%CP+545㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报27卷1.5%㊁2.0%和2.5%ESM组回肠黏膜sIgA含量显著提高(P<0.05)㊂与19%CP组相比,18%CP+1.5%ESM组DAO活性显著降低(P<0.05)㊂表5㊀大豆酶解蛋白对仔猪血清Ca㊁P含量和骨骼粗灰分㊁Ca㊁P含量的影响Table5㊀EffectsofESMonthecontentsofCaandPinserumandash,CaandPinboneofpigletsmmol/L组别Groups血清Serum钙Ca磷P骨骼Born粗灰分Ash钙Ca磷P19%CP2.41ʃ0.18x3.21ʃ0.1953.06ʃ0.0420.48ʃ0.40x8.80ʃ0.0618%CP2.61ʃ0.243.45ʃ0.32ab52.80ʃ0.04b20.50ʃ0.03b8.65ʃ0.02a18%CP+1.0%ESM2.65ʃ0.143.69ʃ0.35b53.04ʃ0.03b21.03ʃ0.49c8.82ʃ0.08b18%CP+1.5%ESM2.82ʃ0.16y3.41ʃ0.34ab52.87ʃ0.20b20.94ʃ0.21bcy8.87ʃ0.07b18%CP+2.0%ESM2.85ʃ0.193.09ʃ0.27a53.97ʃ0.27c21.19ʃ0.36c9.03ʃ0.10c18%CP+2.5%ESM2.64ʃ0.103.04ʃ0.15a52.32ʃ0.45a20.03ʃ0.11a8.63ʃ0.02a表6㊀大豆酶解蛋白对仔猪肠道绒毛高度㊁隐窝深度及V/C的影响Table6㊀EffectsofESMonvillusheight,cryptdepthandtheratioofvillusheighttocryptdepthinintestinesofpiglets组别Groups绒毛高度Villusheight/μm十二指肠Duodenum空肠Jejunum回肠Ileum隐窝深度Cryptdepth/μm十二指肠Duodenum空肠Jejunum回肠Ileum绒毛高度/隐窝深度V/C十二指肠Duodenum空肠Jejunum回肠Ileum19%CP635.5ʃ41.6y467.1ʃ75.3344.2ʃ49.8295.5ʃ69.7376.5ʃ65.5290.0ʃ41.92.25ʃ0.601.30ʃ0.471.19ʃ0.0718%CP572.9ʃ36.3460.5ʃ40.0a318.4ʃ39.2a331.4ʃ62.1383.1ʃ33.1333.9ʃ31.31.77ʃ0.32a1.20ʃ0.01a0.96ʃ0.12a18%CP+1.0%ESM566.8ʃ17.5473.1ʃ55.2a333.7ʃ22.6a293.9ʃ47.4341.0ʃ66.1308.4ʃ35.61.97ʃ0.35a1.45ʃ0.43ab1.09ʃ0.09ab18%CP+1.5%ESM568.1ʃ34.8x483.8ʃ39.8a353.0ʃ23.8ab266.8ʃ49.0349.4ʃ57.2287.9ʃ78.02.17ʃ0.26ab1.42ʃ0.32ab1.28ʃ0.27b18%CP+2.0%ESM602.6ʃ37.8553.1ʃ20.3b344.9ʃ12.1a258.5ʃ57.2306.9ʃ86.5342.7ʃ56.72.43ʃ0.66b1.90ʃ0.47b1.03ʃ0.20ab18%CP+2.5%ESM550.8ʃ34.6495.2ʃ27.7ab358.1ʃ19.6b314.8ʃ19.2378.1ʃ39.5371.7ʃ66.41.76ʃ0.17ab1.32ʃ0.07a1.05ʃ0.14ab表7㊀大豆酶解蛋白对仔猪血清二胺氧化酶活性㊁回肠黏膜分泌型免疫球蛋白A含量的影响Table7㊀EffectsofESMonDAOinserumandsIgAinileummucosaofpiglets组别Groups血清二胺氧化酶SerumDAO/(U/mL)回肠黏膜分泌型免疫球蛋白AIleummucosasIgA/(μg/mL)19%CP6.28ʃ0.80x145.33ʃ11.8218%CP7.33ʃ0.75Bc144.85ʃ11.65Aa18%CP+1.0%ESM6.54ʃ0.71Bbc154.88ʃ5.65ABab18%CP+1.5%ESM4.88ʃ0.63Aay160.30ʃ3.26Bbc18%CP+2.0%ESM5.82ʃ0.72ABab167.30ʃ11.53Bc18%CP+2.5%ESM6.02ʃ0.77ABab165.98ʃ4.70Bbc6452期张爱民等:大豆酶解蛋白对仔猪生长性能㊁矿物质利用及消化道健康的影响2.6㊀ESM对仔猪盲肠和结肠菌群的影响㊀㊀从表8可知,与18%CP组相比,ESM可提高盲肠㊁结肠乳酸杆菌数量及乳酸杆菌/大肠杆菌,其中18%CP+1.5%㊁2.0%和2.5%ESM组均达到显著水平(P<0.05)㊂与18%CP组相比,18%CP+1.0%和1.5%ESM组盲肠㊁结肠大肠杆菌数量无显著差异(P>0.05)㊂与19%CP组相比,18%CP+1.5%ESM组盲肠和结肠乳酸杆菌数量㊁乳酸杆菌/大肠杆菌极显著提高(P<0.01)㊂表8㊀大豆酶解蛋白对仔猪盲肠和结肠菌群的影响Table8㊀EffectsofESMonmicrofloraincecumandcolonofpiglet组别Groups盲肠Cecum乳酸杆菌Lactobacillus/[lg(CFU/g)]大肠杆菌Escherichiacoli/[lg(CFU/g)]乳酸杆菌/大肠杆菌Acidophilus/Escherichiacoli结肠Colon乳酸杆菌Lactobacillus/[lg(CFU/g)]大肠杆菌Escherichiacoli/[lg(CFU/g)]乳酸杆菌/大肠杆菌Acidophilus/Escherichiacoli19%CP9.29ʃ0.06X9.60ʃ0.000.97ʃ0.01X9.79ʃ0.03X9.57ʃ0.011.02ʃ0.01X18%CP9.42ʃ0.04a9.58ʃ0.010.98ʃ0.01a10.33ʃ0.01a9.60ʃ0.02c1.08ʃ0.00a18%CP+1.0%ESM9.64ʃ0.30bc9.58ʃ0.031.01ʃ0.03a10.55ʃ0.04b9.56ʃ0.01bc1.10ʃ0.00b18%CP+1.5%ESM10.07ʃ0.03cY9.50ʃ0.111.06ʃ0.02bY10.73ʃ0.02cY9.56ʃ0.03bc1.12ʃ0.00dY18%CP+2.0%ESM10.04ʃ0.04c9.54ʃ0.091.05ʃ0.01b10.52ʃ0.04b9.35ʃ0.06a1.12ʃ0.00d18%CP+2.5%ESM10.00ʃ0.07bc9.50ʃ0.011.05ʃ0.01b10.52ʃ0.01b9.48ʃ0.02b1.11ʃ0.00bc3㊀讨㊀论3.1㊀ESM提高仔猪生长性能㊀㊀ESM通过改善仔猪饲粮营养成分表观消化率来提高仔猪采食量和增重㊂本试验中,降低饲粮1%CP同时添加1.5%ESM可以显著提高仔猪饲粮有机物和CP表观消化率,从而提高平均日采食量㊁平均日增重,但差异不显著㊂Sun等[18]用2%酶解豆粕(酸溶蛋白含量20.35%)替代1.2%鱼粉,饲粮保持等能等氮,仔猪平均日增重提高了16.29%㊁平均日采食量提高了15.83%㊂Zhou等[16]在仔猪饲粮添加3%酶解豆粕(酸溶蛋白含量24.57%)平均日增重提高了41.4%㊂付晓等[19]在仔猪饲粮使用7%酶解豆粕(酸溶蛋白含量14.11%)等量替代豆粕,饲粮蛋白质水平提升了0.44%,平均日增重㊁平均日采食量分别提高了72.52㊁61.14g/d,料重比降低了8.86%㊂以上研究结果与本试验结果相似,但改善幅度有差异,这可能有2方面原因㊂第一,不同工艺条件生产的酶解蛋白中肽含量和组成不同,抗营养因子含量有差异㊂本试验采用组合液态酶解工艺,酸溶蛋白含量28%,比以上研究物质肽含量高,因此,生产中使用量低于其他研究也可达到较好生产效果㊂第二,使用方案不同㊂其他研究直接添加或部分替代豆粕㊁鱼粉等蛋白质原料,提高了饲粮CP水平,而本试验降低CP水平增加ESM,以肽形式提供氮源㊂Gibert等[28]研究发现,二肽㊁三肽具有吸收速度快㊁耗能低,能够消除与游离氨基酸吸收之间竞争的特性,肽可提高动物对蛋白质吸收利用;另外,李硕[30]研究发现,大豆产生的小分子肽具有生物活性,增强动物消化功能,提高饲料转化利用率㊂本次试验结果表明,降低饲粮1%CP同时添加1.0% 1.5%ESM可以提高仔猪生长性能㊂3.2㊀ESM促进仔猪对矿物质的利用㊀㊀饲粮矿物质的表观消化率反映机体对Ca㊁P的消化吸收程度,矿物质进入血液后参与合成和分解代谢;血清Ca㊁P含量反映机体Ca㊁P代谢动态状况;骨骼粗灰分㊁Ca和P含量反映机体对Ca㊁P沉积能力[29]㊂ESM通过提高血清和骨骼粗灰分㊁Ca㊁P含量证实了仔猪对饲粮粗灰分㊁Ca㊁P利用程度改善;降低1%CP同时添加ESM可以提高饲料Ca利用㊂结果表明,ESM促进了仔猪对矿物质利用㊂付晓等[26]在仔猪饲粮使用7%酶解豆粕,饲粮Ca和P表观消化率分别提高了34.99%和25.04%㊂王石等[23]选择25日龄断奶仔猪,在断奶后1 21d使用1.5%谷朊粉酶解物等比例替代血浆蛋白粉,仔猪饲粮Ca消化率提高了10.30%㊂体外试验证实,植物蛋白降解物中肽能与Ca㊁Fe㊁锌(Zn)等形成螯合物,如大豆分离蛋白酶解物和大米蛋白酶解物可与Ca㊁Zn等离子螯745㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报27卷合[11-13],从而促进动物对矿物质吸收利用㊂因此,ESM促进矿物质利用与肽具有螯合矿物质特性有关[11-13],一方面ESM含有部分螯合形式的Ca有利于吸收,另一方面ESM中肽与饲粮中矿物质螯合,促进饲粮矿物质利用,在生产上表现为促进仔猪骨骼发育㊂3.3㊀ESM维持仔猪肠道健康3.3.1㊀ESM促进仔猪肠道发育㊀㊀肠道正常发育是仔猪对饲粮消化吸收的基础,小肠道绒毛高度㊁隐窝深度㊁V/C综合反映小肠功能状态[31-32]㊂ESM通过改善仔猪空肠㊁回肠绒毛高度和各小肠段隐窝深度来促进肠道绒毛的发育;同时,通过降低饲粮蛋白质水平同时添加1.5%ESM也提高了C/V,促进肠道绒毛发育㊂表明,ESM可促进肠道绒毛发育,提高仔猪对营养物质消化吸收能力㊂这与王恬等[15]㊁张晶等[20]㊁潘翠玲等[22]研究报道基本一致,ESM促进肠道发育可能是酶解产物中某些活性肽可作为肠黏膜上皮细胞发育的能源底物,有效促进肠黏膜组织发育[33-34]㊂3.3.2㊀ESM维持仔猪肠道结构完整㊀㊀仔猪肠道组织发育及功能发挥依赖于肠道绒毛细胞结构的完整性㊂DAO有95%以上分布于肠道黏膜细胞,当肠道黏膜细胞通透性增加会进入血液,血清DAO活性反映肠上皮细胞成熟度和完整性[35-36]㊂肠道黏膜组织特异性免疫应答产物sIgA参与肠道局部免疫,在消化道黏膜防御机制中发挥重要作用[36]㊂仔猪饲粮添加1.5%和2.0%ESM降低血清DAO活性和提高sIgA含量,从而促进肠道上皮细胞完整性和肠道免疫;降低饲粮蛋白质水平使用1.5%ESM也能降低仔猪血清DAO活性㊁提高回肠黏膜sIgA含量㊂表明,ESM促进肠道消化吸收功能的正常发挥;同时,增强肠道免疫能力,减少肠道病原菌感染机会,从而保证肠道处于健康状态㊂这可能与ESM含有部分大豆活性肽有关,活性肽提高肠道黏膜免疫,促进sIgA分泌,减少病原微生物入侵,进一步降低肠上皮细胞损伤[35-36]㊂3.3.3㊀ESM优化仔猪肠道菌群结构㊀㊀仔猪肠道微生态系统由多种菌群组成,主要存在于盲肠和结肠㊂研究发现,猪正常肠道菌群包括乳酸杆菌㊁双歧杆菌属等有益菌群,以及大肠杆菌属等有害菌群[37]㊂动物肠道健康状况下菌群处于平衡状态,当有害菌大量增殖占优势时,动物则会出现腹泻等临床症状㊂ESM提高仔猪盲肠㊁结肠乳酸杆菌数量和乳酸杆菌/大肠杆菌;降低饲粮蛋白质水平同时添加1.5%ESM可提高盲肠㊁结肠乳酸杆菌数量和乳酸杆菌/大肠杆菌㊂表明,ESM能优化肠道菌群结构㊂本次研究结果与Zhou等[17]研究结果相似,这可能是由于饲粮添加ESM促进了肠道发育,提高了饲粮营养物质整体利用效率,减少了进入大肠内未消化营养物质,从而优化肠道后段的菌群结构㊂㊀㊀ESM中所含二肽㊁三肽和活性肽可通过促进肠道绒毛发育㊁增强肠道黏膜免疫㊁减少肠上皮细胞损伤来提高仔猪消化能力,使饲粮有机物㊁CP表观消化率提高;减少进入后肠未消化的营养物质,优化肠道菌群结构,进一步改善肠道内环境㊂同时,通过螯合矿物质元素,提高血清和骨骼Ca㊁P含量,从而提高饲粮Ca㊁P利用率,有利于仔猪骨骼发育㊂因此,ESM通过促进骨骼发育和肠道健康,加快仔猪生长速度㊂4㊀结㊀论㊀㊀饲粮添加1.0% 1.5%ESM可促进仔猪肠道绒毛发育㊁维持肠道结构完整㊁优化肠道菌群,从而保证消化道健康;可提高仔猪对Ca㊁P的吸收与沉积,从而促进骨骼生长发育㊂参考文献:[1]㊀杨凤.动物营养学[M].2版.北京:中国农业出版社,2000:36-44.[2]㊀CERVANTES⁃PAHMSK,STEINHH.Ilealdigesti⁃bilityofaminoacidsinconventional,fermented,andenzyme⁃treatedsoybeanmealandinsoyproteiniso⁃late,fishmeal,andcaseinfedtoweanlingpigs[J].JournalofAnimalScience,2010,88(8):2674-2683.[3]㊀YANGYX,KIMYG,LOHAKAREJD,etal.Com⁃parativeefficacyofdifferentsoyproteinsourcesongrowthperformance,nutrientdigestibilityandintesti⁃nalmorphologyinweanedpigs[J].Asian⁃AustralasianJournalofAnimalSciences,2007,20(5):775-783.[4]㊀刘海军.大豆蛋白致仔猪肠道过敏反应作用及检测技术研究[D].硕士学位论文.南京:南京农业大学,2011.[5]㊀司马博锋,陈代文,黄志清,等.固态发酵复合蛋白质对猪肠道消化生理及养分消化率的影响研究[J].动物营养学报,2011,23(1):86-93.[6]㊀LINDEMANNMD,CROMWELLGL,MONEGUEHJ,etal.Feedingvalueofanenzymaticallydigestedproteinforearly⁃weanedpigs[J].JournalofAnimalScience,2000,78(2):318-327.8452期张爱民等:大豆酶解蛋白对仔猪生长性能㊁矿物质利用及消化道健康的影响[7]㊀陈创前,蔡会武,邵纪生,等.大豆蛋白复合酶解法研究[J].安徽农业科学,2011,39(10):6070-6074.[8]㊀唐玲,尹佳,肖伟伟.发酵豆粕的营养特性以及在动物中应用效果[J].饲料与畜牧,2014(8):22-24.[9]㊀BOZAJJ,MARTÍNEZ⁃AUGUSTINO,BARÔL,etal.Proteinv.enzymicproteinhydrolysates.nitrogenuti⁃lizationinstarvedrats[J].BritishJournalofNutrition,1995,73(1):65-71.[10]㊀STEVENSONCL.Characterizationofproteinandpeptidestabilityandsolubilityinnon⁃aqueoussolvents[J].CurrentPharmaceuticalBiotechnology,2000,1(2):165-182.[11]㊀高素蕴,潘思轶,郭康权.大豆分离蛋白水解物螯合锌(Ⅱ)的合成与制备[J].食品科学,2003,24(10):117-120.[12]㊀张全才,熊华,曹银娣,等.米蛋白肽锌的制备工艺研究[J].食品科技,2008(2):110-113.[13]㊀张墨楠.酶促水解大豆分离蛋白制备铁螯合肽的研究[D].硕士学位论文.杭州:中国计量学院,2013.[14]㊀ROJAS⁃GARCÍAC,RØNNESTADI.Assimilationofdietaryfreeaminoacids,peptidesandproteininpost⁃larvalAtlantichalibut(Hippoglossushippoglossus)[J].MarineBiology,2003,142(4):801-808.[15]㊀王恬,傅永明,吕俊龙,等.小肽营养素对断奶仔猪生产性能及小肠发育的影响[J].畜牧与兽医,2003,35(6):4-8.[16]㊀ZHOUSF,SUNZW,MALZ,etal.Effectoffeedingenzymolyticsoybeanmealonperformance,digestionandimmunityofweanedpigs[J].Asian⁃AustralasianJournalofAnimalSciences,2011,24(1):103-109.[17]㊀ZHOUS,WANGGB,YANGZB.Effectofplantsmallpeptidesonbloodbiochemicalindexesandgutfloraofsucklingpiglets[J].ChineseJournalofAni⁃malNutrition,2008,20(1):40-45.[18]㊀SUNZT,MAQG,LIZR,etal.Effectofpartialsub⁃stitutionofdietaryspray⁃driedporcineplasmaorfish⁃mealwithsoybeanandshrimpproteinhydrolysateongrowthperformance,nutrientdigestibilityandserumbiochemicalparametersofweanlingpiglets[J].Asian⁃AustralasianJournalofAnimalSciences,2009,22(7):1032-1037.[19]㊀付晓,马力周,于俊瑶,等.不同微生物酶解和发酵豆粕对断奶仔猪生产性能和养分消化率的影响[J].中国饲料,2009(14):24-26.[20]㊀张晶,单安山,李牧,等.蛋白酶解物对早期断奶仔猪肠黏膜形态和生长性能的影响[J].动物营养学报,2006,18(2):122-125.[21]㊀汪官保.植物活性肽对哺乳仔猪生产性能的影响及其促生长机理的研究[D].硕士学位论文.西宁:青海大学,2007.[22]㊀潘翠玲,陈伟华,邹思湘,等.大豆蛋白酶解物对21日龄早期断乳仔猪消化道发育的影响[J].西北农林科技大学学报:自然科学版,2006,34(7):27-31,36.[23]㊀王石,王卫国.谷朊粉酶解物对断奶仔猪生产性能㊁腹泻及消化率的影响[J].粮食与饲料工业,2011(2):55-57,60.[24]㊀刘卫东,王章存,程璞,等.大米蛋白肽对育成猪生产性能㊁养分代谢和血液生化指标的影响[J].中国粮油学报,2012,26(7):72-75.[25]㊀魏金涛,李绍章,杨雪海,等.液态酶解发酵豆粕对生长育肥猪生产性能及部分营养物质粪排泄量的影响[J].中国兽医学报,2012,32(3):478-482.[26]㊀SONGYS,PÉREZVG,PETTIGREWJE,etal.Fer⁃mentationofsoybeanmealanditsinclusionindietsfornewlyweanedpigsreduceddiarrheaandmeasuresofimmunoreactivityintheplasma[J].AnimalFeedScienceandTechnology,2010,159(1/2):41-49.[27]㊀FENGJ,LIUX,XUZR,etal.TheeffectofAspergil⁃lusoryzaefermentedsoybeanmealongrowthper⁃formance,digestibilityofdietarycomponentsandac⁃tivitiesofintestinalenzymesinweanedpiglets[J].AnimalFeedScienceandTechnology,2007,134(3/4):295-303.[28]㊀GILBERTER,WONGEA,WEBBKE,Jr.Board⁃invitedreview:peptideabsorptionandutilization:im⁃plicationsforanimalnutritionandhealth[J].JournalofAnimalScience,2008,86(9):2135-2155.[29]㊀GAOJJ,CHESR.Effectofdietaryphytasesupple⁃mentationonavailabilityofCa,Pandbonedevelop⁃mentinpigs[J].ChineseJournalofAnimalNutrition,2007,19(4):357-365.[30]㊀李硕.大豆小分子肽对机体保健功能作用的研究[D].硕士学位论文.昆明:昆明理工大学,2013.[31]㊀HAMPSONDJ.Alterationsinpigletsmallintestinalstructureatweaning[J].ResearchinVeterinarySci⁃ence,1986,40(1):32-40.[32]㊀PLUSKEJR,WILLIAMSIH,AHEMEFX.Villousheightandcryptdepthinpigletsinresponsetoincrea⁃sesintheintakeofcows 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西安大学生物工程学院2020级《生物化学》课程试卷(含答案)__________学年第___学期考试类型:(闭卷)考试考试时间:90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题(50分,每题5分)1. 蛋白质在人体内消化的主要器官是胃和小肠。
()答案:正确解析:胃是食物早先蛋白最初消化部位,但主要包括在小肠中进行。
2. 对于反应:ATP+H2O→ADP+Pi和ATP+H2O→AMP+PPi,其ΔGϴ′是相同的,均为-30.5kJmol。
()答案:错误解析:反应ATP+H2O→AMP+PPi的标准自由能波动∆Gϴ′=7.7kcalmol=-32.19kJmol,大于反应ATP+H2O→ADP+Pi的ΔGϴ′(即-7.3kcalmol、-30.5kJmol)。
3. 嘧啶核苷酸的补救合成途径需要1磷酸核糖5焦磷酸。
()答案:错误解析:4. 3磷酸甘油的其中一个去路是首先转变为磷酸二羟丙酮,再进入糖酵解代谢。
()答案:正确解析:5. 原核生物基因转录时,第一个磷酸二酯键形成以后,α因子与全酶解离,转录从起始状态转入延伸状态。
()答案:错误解析:实际上在无机实际上大约十聚核苷酸以后,σ因子才与RNApol全酶解离,RNA pol开始移位,转录进入延伸阶段。
6. 丙酮酸激酶反应几乎不可逆地朝向ATP合成方向进行是磷酸烯醇式丙酮酸转化为丙酮酸高度放能的结果。
()答案:正确解析:7. 5氟尿嘧啶核苷酸是尿嘧啶核苷酸的类似物,在体内作为胸腺嘧啶核苷酸合酶的竞争性抑制剂而抑制胸腺嘧啶核苷酸的合成。
()答案:错误解析:8. 生物体的DNA复制都是双向对称的,没有例外。
()答案:错误解析:9. 黄嘌呤氧化酶的底物是次黄嘌呤和黄嘌呤。
()答案:正确解析:10. 暗反应只能在没有光照的条件下进行。
()答案:错误解析:暗反应不需要光,因此可以在不是光照的条件下进行,但也可以在光照条件市场条件下需要进行。
1、引言近年来,随着震撼整个世界畜牧产业的牛海绵状脑病(Bovine spongiform encephalopathy, BSE)、口蹄疫(Exterminate)、二恶英(Dioxin)污染以及我国出现的猪无名高热病等事件,人们对使用动物性饲料原料日益恐惧,全世界饲料行业中动物性蛋白质原料的供应量也随着这类事件而下降,相反其替代产品——植物性蛋白质原料的需求则呈现上升趋势。
另一方面,含有大量优质蛋白质的动物性蛋白原料——鱼粉,因为其价格昂贵供应不稳定等问题,配方师会调低鱼粉的用量,选用价格更低的植物性蛋白原料。
目前,使用植物蛋白原料替代鱼粉的研究已经有很多了,比如在美国红鱼(Sciaenops ocellatus)饲料中用豆粕替代26%鱼粉(Reigh & Ellis,1992),在黄尾鱼日粮中替代20%鱼粉(Shimeno etc., 1993b),在肉鸡日粮中不使用鱼粉而全部用豆粕代替也不会降低其经济性能(Lee,1971)等研究说明豆粕可以作为经济的优质饲料使用。
还有Kim等人(1995)也指出在提高肉鸡的生长能力及赖氨酸利用率方面,豆粕也是优质蛋白质源。
但即使是优质的豆粕,实际上在动物体内也无法被有效的分解和吸收,营养成分中相当一部分不能被动物体所利用而被排出,这种营养成分的损失不仅是经济上的损失,从环保角度考虑也不理想。
为了提高饲料中营养成分的利用率,可以在饲料里添加酶制剂。
比如,在饲料中添加半乳糖苷酶、半乳甘露聚糖酶、淀粉酶,可以增加豆粕中低聚糖和碳水化合物的利用率(Kang等,2001);在以豆粕为主要原料的日粮中添加植酸酶可以提高存在于植物性饲料中的植酸磷的利用率(Eeckhout 和De paepe,1994)。
由于植酸与蛋白质结合形成植酸-蛋白质复合体,降低了蛋白质的溶解度,抑制蛋白质分解酶的作用,降低了蛋白质在动物体内的吸收(Richardson, et al., 1985; Kornegay, 1996)。
果胶酶在饲料中的应用1.引言1.1 概述果胶酶是一类在植物细胞壁中起重要作用的酶,具有分解果胶的能力。
果胶是一种在植物细胞壁中广泛存在的多糖物质,它对食物的口感和质地起着至关重要的作用。
果胶酶可以将果胶分解为较小的果糖和果胶酸分子,从而改善食物的可口性和消化性。
随着畜牧业的发展和人们对动物饲料品质的要求不断提高,果胶酶在饲料中的应用逐渐受到关注和重视。
通过在饲料中添加适量的果胶酶,不仅可以提高饲料的营养价值和消化利用率,还可以改善动物的生长性能和免疫功能。
果胶酶在饲料中的应用主要体现在以下几个方面:首先,果胶酶可以分解饲料中的果胶,降低饲料的粘度,提高饲料的可流动性,从而促进动物的摄食和消化吸收。
其次,果胶酶可以改善饲料中纤维素的降解和利用,提高动物对纤维素的消化率。
此外,果胶酶还可以增加饲料中的溶解性膳食纤维含量,促进有益菌群的繁殖,改善动物的肠道微生态环境。
尽管果胶酶在饲料中的应用具有诸多优势,但目前相关研究还相对较少,仍存在一些挑战和待解决的问题。
例如,如何确定最佳的果胶酶添加剂用量、选择合适的饲料配方和优化应用技术等方面都需要进一步研究和探索。
总之,果胶酶在饲料中的应用具有巨大的潜力和广阔的发展前景。
进一步深入研究果胶酶的功能和应用机制,推动果胶酶在饲料领域的应用与发展,将有助于提高饲料的质量和动物的生产性能,促进畜牧业的可持续发展。
1.2文章结构文章结构部分的内容可以写成如下所示:1.2 文章结构本文将分为三个部分来探讨果胶酶在饲料中的应用。
首先,引言部分将概述本文的背景和目的,为读者提供整体的研究框架。
其次,在正文部分,将详细介绍果胶酶的定义和作用,以及果胶酶在饲料中的应用现状。
为了更好地了解果胶酶在饲料中的应用优势,我们将分析其对饲料的影响和效果,并探讨果胶酶如何提高动物的消化吸收能力和生长发育。
最后,在结论部分,本文将总结果胶酶在饲料中的应用优势,并展望果胶酶在饲料领域的未来发展。
张泽虎:蛋白酶对猪氨基酸消化率的影响建明工业全方位营养张泽虎,建明中国高级产品经理作为动物本身可以分泌的内源酶的一种——蛋白酶,由于其特殊性、复杂性,一直以来都是作为复合酶的一个组分被使用。
近年来由于养殖者对动物生产最大潜能的开发、蛋白原料价格的上涨以及由简单日粮向复杂日粮的转变,科研工作者对于单一蛋白酶和复合蛋白酶的研究也日渐增多。
蛋白酶针对蛋白质中的肽键进行水解,最终的产物是氨基酸,因此外加蛋白酶改善动物生长性能的前提主要是其能否对动物氨基酸消化利用率产生有利影响。
蛋白酶在家禽上的研究开始较早,近年来在猪上的研究也显示添加蛋白酶可以降低豆粕中的大豆球蛋白和β伴大豆球蛋白抗营养因子进而减少仔猪腹泻、促进仔猪生长性能、改善仔猪和生长猪的氨基酸消化率。
1 对猪必需氨基酸(EAA)和非必需氨基酸(NEAA)消化率的影响必需氨基酸的营养对养殖动物至关重要,而非必需氨基酸尤其是其中一些功能性的NEAA不足也会影响猪的免疫和生产性能。
通过添加有效的蛋白酶不仅可以提高EAA的消化率,同时蛋白酶也可以提高NEAA的消化率(图1)。
Wang et al.(2011)研究了两个不同剂量(0.05%Vs0.10%)蛋白酶处理组对32.3kg生长猪的氨基酸消化率的影响,发现EAA的平均AID由对照组的80.83%分别提高至83.56%和84.26%,改善了3.38%和4.24%;NEAA的平均AID由对照组的77.60%分别提高至80.00%和80.75%,改善了3.09%和4.06%。
Guggenbuhlet al.(2012)对28日龄断奶仔猪进行了分阶段消化率的测定:第一阶段是从断奶开始并在第14天进行屠宰取回肠末端食糜测定,结果显示这一期蛋白酶对粗蛋白、总氨基酸、EAA、NEAA的AID影响都不显著;第二阶段是断奶后第15-29天,于第29天测定,结果显示蛋白酶显著改善了粗蛋白、EAA、NEAA及支链氨基酸的AID,改善率分别为6.68%、5.24%、7.22%和5.81%。
利用酶制剂降低家禽饲料成本酶制剂在家禽饲料中的应用已经成为一种常见的降低饲料成本的手段。
酶制剂可以提高饲料中的营养价值,减少浪费,同时也减轻了动物的消化负担,提高了生产性能。
下面,将介绍三种常见的酶制剂以及它们在家禽饲料中的应用。
1. 淀粉酶淀粉是家禽饲料中最主要的能量来源。
然而,禽类只能利用部分淀粉,而不能完全消化。
淀粉酶的作用就是分解淀粉,使淀粉更易于禽类消化吸收,从而提高饲料利用率,降低饲料成本。
目前市场上的淀粉酶主要分为α淀粉酶和β淀粉酶两种。
这两种淀粉酶都可以提高淀粉的降解率,但是它们各自的适应性不同。
2. 蛋白酶蛋白质是家禽生长必需的营养素之一。
然而,蛋白质的消化吸收并不完全。
在家禽肠道中,未消化的蛋白质会发酵产生氨和气味,造成环境污染。
蛋白酶的作用就是分解蛋白质,使得蛋白质更容易被禽类消化吸收。
这样不仅可以提高蛋白质的利用率,还可以降低饲料中氨和气味的产生,改善环境。
3. 纤维素酶纤维素是家禽饲料中的主要纤维素成分。
然而,禽类消化道缺乏产生纤维素酶的能力,因此无法消化和吸收纤维素。
未被消化的纤维素会加重禽类的消化负担,降低饲料利用率,甚至会引起消化道疾病。
纤维素酶的作用就是分解纤维素,使纤维素更易于消化和吸收。
这样不仅可以提高饲料利用率,还可以减轻禽类的消化负担,降低消化道疾病的风险。
总的来说,酶制剂在家禽饲料中的应用可以提高饲料利用率,降低饲料成本,改善环境和禽类健康。
但是,在使用酶制剂时需要注意以下几点:1. 酶制剂的剂量要准确。
过高的剂量会导致禽类的消化负担增加,还会使得饲料的结构破坏,影响禽类的食欲和生长发育。
2. 酶制剂的pH和温度条件要适当。
酶制剂的活性受温度和pH值的影响,选择适当的温度和pH条件可以最大限度地提高酶制剂的降解效率。
3. 酶制剂的选择要根据不同饲料的特点和禽种的需求。
不同的酶制剂适用于不同的饲料,而不同的禽种对酶的消化吸收能力也有所差异,因此合理选择酶制剂有助于提高饲料利用率和禽类生产性能。
背景:饲料用酶是一类用量十分巨大的工业用酶,在消化道中存在各种蛋白酶会对饲料用酶进行消化分解,从而影响饲用酶的使用效率,因此提高饲用酶的蛋白酶抗性是非常必要的。
β-甘露聚糖酶(β-1,4-D-Mannanase,EC 3.2.1.78)是一类能够水解含β-1,4-D-甘露糖苷键的内切水解酶,属于半纤维素酶类,可水解广泛存在于自然界的甘露聚糖等,被广泛应用于食品和饲养工业。
思路:本文即针对假密环菌Armillariellatabescens中的β-甘露聚糖酶MAN47,基于同源建模DS MODELER和分子动力学模拟DS CHARMm对MAN47的胰蛋白酶抗性进行了理性设计,以获得胰蛋白酶抗性提高并保持催化活性的改良酶。
文章首先预测得到MAN47分子结构,其次分析结构中所有胰蛋白酶水解位点K((Lys,赖氨酸)和R(Arg,精氨酸)及其与周围溶剂的暴露程度,然后基于暴露程度选定突变位点,进行模拟突变,最后通过分析突变前后的氢键键长和整体结构稳定性的变化来确证突变氨基酸的组合类型。
文章计算结果与实验结果一致,证实了可以通过该理性设计策略来进行蛋白分子的胰蛋白酶抗性改造。
图1. MAN47胰蛋白酶结构示意图(左),原始胰蛋白酶及各个突变体的RMSD值(右)。
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