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甲型肝炎病毒IgM抗体操作步骤1．检验目的：检测人血清或血浆中的抗HA V-IgM。
2．检测原理：本品系用抗人-IgM（u链）包被的微孔板，配以纯甲型肝炎抗原（HA V-Ag）和酶标记的甲型肝炎病毒抗体（抗HA V-HRP）及其它试剂，采用捕获法原理，检测人血清或血浆中的抗-HA V-IgM。
34．操作：4.1 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有结晶析出应充分溶解）浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。
4.2 编号：将微孔条固定于支架，按序编号。
4.3 加样：待测样本用生理盐水作1：1000稀释，每个样本检测孔加入稀释样本100 uL。
设阴阳对照各1孔，每孔加入100 uL，并设空白对照1孔。
4.4 温育：置37℃温育20分钟，室温平衡2分钟。
4.5 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。
4.6 加抗原、酶：每孔加入抗原（HA V-Ag）30 uL、酶标记抗体50uL（1滴），充分混匀。
4.7 温育：置37℃温育20分钟。
4.8 洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤完后扣干（每次应保持30-60秒的浸泡时间）。
4.9 显色：每孔加底物A、B各50uL，轻拍混匀，置37℃暗置15分钟。
4.10 终止：每孔加终止液50uL，混匀。
4.11 测定：用酶标仪单波长450nm/630nm测定各孔OD值（用单波长测定需设定空白对照一孔，30分钟完成测定，并记录结果）。
5. 结果判定：5.1 临界值（C.O.）的计算：临界值=阴性对照孔OD均值N×2.1阴性对照OD值低于0.050←0.050计算，高于0.050按实际OD值计算。
5.2结果判定：样品OD值S/C.O.≥1者为HA V-IgM阳性样品OD值S/C.O.＜1者为HA V-IgM阴性5.3 失效：如果阳性对照OD均值小于0.05，则表明不正常的操作或试剂盒已变质损坏。
在此情况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂盒重新测试。
甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus, HAV)生物学性状1. (HAV电子显微镜图基因组RNA衣壳60基因结构5’—Vpg——P1（VP1—VP2—VP3—VP4）—P2—P3——3’5’VP1-4、RNA多聚酶、蛋白酶抗原性•••60℃14℃•pH3）•加热100℃5抵抗力感染动物模型黑猩猩、绒猴和红面猴对HAV易感，且能传代，经口或静脉注射可使动物发生肝炎，恢复期血清中能检出HAV的相应抗体。
细胞培养•株、人胚肺二倍体细胞株•培养10天的人胚肺二倍体细胞，呈梭型贴壁生长。
致病性与免疫性••急性甲型肝炎•所致疾病多侵犯儿童及青年。
临床表现多从发热、疲乏和食欲不振开始，继而出现肝肿大、压痛、肝功能损害，部份患者可出现黄疸。
甲型肝炎巩膜黄染传染源血液粪便急性甲肝患者隐性感染者潜伏期末至病后2周CONCENTRATION OF HEPATITIS A VIRUSIN VARIOUS BODY FLUIDSFecesSerumSalivaUrineB o d y F l u i d s 1001021041061081010Infectious Doses per mL•少数经血液、尿液和密切接触等传播。
传播途径•粪-口：污染水源、食物、海产品和食具等造成散发流行或大流行。
甲型病毒性肝炎在世界范围内发病率示意图HAV↓↓血液→↓↓机体的免疫应答致病机制免疫抗-HAV IgG甲型肝炎临床表现与血清学反应微生物学检查抗-HAV IgM防治原则•••甲肝减毒活疫苗(H2)•灭活疫苗为什么毛蚶能引起1988年上海甲型肝炎流行？（毛蚶大闹上海滩复习思考题试比较甲型肝Hepatitis A virus, HAV。
