血细胞分析仪计数血小板假性减少的原因分析
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在输液的同一臂侧抽血。
这样不仅使血容量发生改变,而且输液中的成分直接影响检测的结果,如血糖、肾功异常增高、二氧化碳结合力降低等,这种情况在实际工作中并不少见。
⑤抽错标本,主要发生在住院病人,是由于医务人员的责任心不强所致。
这种情况在实际工作中也会发生,这是一个很危险的因数,而又不容易被实验室人员所发现。
3 血液的孵育①孵育的方式,常推荐的是恒温水浴法,该法不仅可以加快血液的凝固,还可以保持一定的湿度,使血液中的成分含量不会发生较大的变化;而恒温孵箱孵育法,可以加快血液的凝固,但它同时使血液中的一部分水份蒸发导致结果偏高,尤其是临界值的指标。
建议各实验室统一使用恒温水浴法。
②孵育的时间,未加抗凝剂的血液需要孵育30~60m in 才能析出血清,而在实际工作中往往未达到所要求的时间。
致使血清分离不完全,部分凝血因子散落其中,形成血清凝块,堵塞仪器的管道,影响测定结果。
4 血清的离心分离血清的离心条件是1500~2000rp m 10~15m in,血浆的离心条件是2000~2500rp m 10~15m in 。
而有的实验室往往未达到离心时间的要求,致使血清(浆)分离不完全,在其中存在一些微粒成分,除了影响检测结果外,还有可能堵塞仪器的管道,致使仪器无法正常工作。
5 标本的移取在大多基层实验室,由于仪器的原因,往往无法将离心的标本直接测定,需要人工移取血清(浆)标本。
在移取的过程中,有些实验室人员一个吸头多用,造成交叉污染影响测定结果;有的甚至加错标本,造成结果完全错误。
这些都是要引起大家所重视的。
此外有的实验室同时使用血清与血浆来作生化项目的测定,虽然对一些指标没有显著的差异,但两者的介质却存在差异,血浆中的一些微粒对测定项目的比色有干扰。
因此在选择标本前要先做对照实验,结果没有差异后再慎重选用。
综上所述,影响血标本准备的因数很多,需要医务人员尤其是基层的同志要全面了解影响的各个环节,规范自己的操作,保证血液标本的质量,才能得到一个准确的结果。
EDTA依赖性假性血小板减少症实验室分析【关键词】EDTA-K2 假性血小板减少;血小板计数;血小板聚集EDTA盐(EDTA-K2)作为血细胞分析的抗凝剂是国际血液标准化委员会认定并得到广泛使用,目前血小板计数实验室普遍采用的是全自动血细胞分析仪[1],操作方便,重复性好,准确度高等优点已被普及应用,通常情况下使用EDTA二钾作为抗凝剂,对血细胞和血小板计数的影响较小,但临床发现EDTA盐有时会引起少数患者的血小板聚集导致血细胞分析仪在血小板计数出现假性偏低的现象,检测时需要实验室结合临床、排除干扰因素、选择科学可行的检测方法,才能正确报告血小板计数结果。
以防差错事故的发生,以免给临床医生带来困扰,防止医疗纠纷。
1.资料和方法1.1临床资料:患者,女18岁主诉发热、头痛、鼻塞、咳嗽、咽干咽痛等上呼吸道症状。
查体:体温38.2度、咽部充血、扁桃体无肿大,乡镇卫生院拟定为上感进行系列检查,实验室检查:白细胞10.8x109/L,红细胞3.47x1012、血红蛋白115 g/L、血小板计数为27x109/L(EDTA抗凝全血)既往健康、医生建议来上级医院院复查。
我院再次实验室检查:白细胞10.5x109/L、红细胞 3.54x1012、血红蛋白117 g/L、血小板21x109、凝血酶原时间:12.8s、活化部分凝血活酶时间:25.4s、凝血酶时间:12.5s、纤维蛋白原:2.48s、患者平日经期血量正常,无皮肤黏膜出血倾向,四肢未见出血点瘀斑。
怀疑为EDTA依赖性假性血小板减少症。
1.2方法1.2.1仪器与材料:采用希森美康XS500i全自动血液分析仪进行分析,试剂(溶血剂、稀释液、清洗液)为仪器配套试剂。
EDTA-K2抗凝剂和枸橼酸钠抗凝剂。
仪器采用专用校准品进行校准,每日室内质控均在控,参加卫生部室间质评亦在控。
1.8 mg/ml的EDTA-K2真空采血管、109 mmol/L的枸橼酸钠真空采血管均有河北超然医疗器械有限公司提供。
XN-9000血液分析仪检测血小板假性降低的一例分析【摘要】目的探讨一例假性血小板减少的影响因素及解决办法。
方法抽取静脉血分别采用EDTA-K2、柠檬酸钠、肝素三种抗凝剂抗凝,采血后10分钟内及于4℃-8℃冰箱放置2天后分别在XN-9000血液分析仪上进行PLT—I、PLT—O、PLT—F三种方法的检测,同时分别进行血涂片的复检及人工显微镜下计数血小板。
结果三种抗凝血立即于XN-9000血液分析仪的PLT—I法计数的血小板结果分别为19×109/L,11×109/L,13×109/L,PLT—O法计数结果分别为40×109/L,35×109/L,35×109/L,PLT—F法计数结果分别为44×109/L,39×109/L,41×109/L,显微镜下复检可见大血小板及血小板聚集。
于4℃-8℃冰箱放置2天后在XN-9000血液分析仪的PLT—I法计数的血小板结果分别为43×109/L,29×109/L,36×109/L,PLT—O法计数结果分别为144×109/L,116×109/L,163×109/L,PLT—F法计数结果分别为52×109/L,51×109/L,45×109/L,显微镜下复检可见大血小板、血小板聚集、皱缩小红细胞及红细胞碎片,人工显微镜血小板计数结果为50×109/L。
结论为此进行血细胞分析,最好采血后尽快进行测试,当血小板直方图异常时可增加PLT—O及PLT—F通道进行复检,而PLT—F法测定的血小板结果对于大血小板及红细胞碎片等因素的影响程度相较小,结果更可信。
【关键词】血小板; XN-9000血液分析仪; PLT—I; PLT—O; PLT—F传统的全自动血液分析仪检测血小板的原理主要是采用电阻抗的方法(PLT—I),其不能很好地识别大血小板、红白细胞碎片、血小板卫星现象、血小板聚集、假性血小板减少等现象,而Sysmex XN-9000全自动血液分析仪检测血小板除采用电阻抗的方法(PLT—I)外尚可采用光学法(PLT—O)和荧光色素染色法(PLT—F)检测血小板,大大地弥补了电阻抗方法检测血小板的不足,极大地提高了血小板检测的准确性,避免了大量样本的镜检复查。
当代医学 2008年9月总第149期 C ont em pora ry M edi c i ne,Sept e m ber 2008,I ss ue N o.149临床医学C l i n i c a l M e d i c i n e 血细胞分析仪具有快速、方便、重复性好、工作效率高等优点。
在检验工作中广泛应用,但是我们每天的血细胞分析中都会遇到白细胞、红细胞直方图正常,但是血小板直方图异常且血小板数目减少的标本。
根据血小板直方图的提示,再次用分析仪进行复查并进行显微镜下计数。
我们发现有很多的标本是假性的血小板减少。
假性血小板减少如不及时纠正会给临床医生误导,有时会引起医疗纠纷。
因此,必须重视和纠正这样的情况。
现就血细胞分析仪计数血小板假性减少原因分析如下。
1采血是否顺利采血是否顺利是造成血小板偏低的一个重要因素。
静脉经多次穿刺而引起的水肿及皮下出血时,因组织损伤后,组织凝血因子易于混入血液标本产生肉眼看不见的小凝块,也就是造成测定结果偏低的常见因素。
对这样的标本应该涂片复检后建议重采血测定。
2标本的放置时间用乙二胺四乙酸(ED TA )盐作为抗凝剂已被国际血液学标本化委员会(I CSH )认定,并广泛应用。
ED TA K 2作抗凝剂时会使血小板形态发生变化,其外膜形成的微小管游离端向外伸展,从而在血小板周围形成丝状伪足,数个这样的伪足相互缠绕,形成血小板可逆聚集体。
此时测定血小板,结果偏低,直方图尾部抬高或成锯齿状。
但是随着时间的延长ED TA 使血小板变形,可逆聚集体破散,此时测定血小板,就可以避免血小板假性减少。
3大血小板的影响正常情况下血小板多分布在2~15fl 区域内。
仪器通常设定血小板阈值,且仪器只识别颗粒大小而不区别颗粒的性质血小板与红细胞在同一通道内计数。
当血小板体积大于24fl 时,血小板会被误认为是小红细胞而不纳入血小板的计数范围。
因此而使血小板计数降低的这种情况多见于肿瘤、白血病、肝病患者等。
浅谈血细胞分析仪计数血小板的影响因素及其质量控制血细胞分析仪的广泛使用使临床检验工作提高到了一个新的水平,不仅能检测更多的实验参数而且大大提高了检测结果的准确性。
但在计数过程中的影响因素也不容忽视,尤其是计数血小板时影响因素比较多,现将使用血细胞分析仪出现血小板假性减少和假性升高的原因及质量控制总结如下:1 血小板计数假性升高因素1.1 地线和电源:血细胞分析仪要求良好的接地效果,如果地线未接或接地不良,均可形成静电脉冲信号而影响血小板计数,其主要表现在血小板直方图的起点偏左,并形成小峰,这种情况一定要排除地线和电源的因素,再寻找其他原因。
1.2 试剂质量原因:血细胞分析仪在做血常规分析时,由于稀释液或溶血素过滤不严或被污染导致本底偏高时会引起血小板计数假性增多,故在每天开机做本底检测时发现本底偏高,应进行清洗使本底降至规定范围。
1.3 标本溶血:溶血对红细胞和血小板影响最大,因为红细胞破坏,其计数值减少,而破坏的红细胞形成大小不等的碎片,分析仪将其识别为血小板,使血小板升高,故血细胞分析前应避免溶血。
1.4 小细胞对血小板计数影响:赵勇等[1]报道用血细胞分析仪进行血小板计数时,其结果易受红细胞体积的影响,小细胞数量越多,红细胞体积越大,影响越大,即血小板直方图降波向右延伸范围越大,这与血小板间接计数中红细胞和血小板的形态学及其量的改变一致。
避免方法是注意观察红细胞直方图的起点及血小板降波是否达到基底,否则,应及时做血涂片观察或用显微镜进行直接计数。
1.5 药物影响:有些药物可以影响血小板的计数。
钱敏等[2]报道患者输用脂肪乳后影响血小板计数,认为脂肪乳剂中的脂肪乳颗粒直径和患者血小板相近,导致输入脂肪乳的患者血小板会假性增高,并建议患者输用脂肪乳后如需检测血小板最好在5~6h以后,如出现血小板过高时应随时和临床联系,最后经血片观察方可报出结果。
1.6 弥散性血管内凝血(DIC):DIC患者的血小板计数仪器法与手工法结果有很大差异,仪器法计数明显高于手工法,这是由于病人血管内溶血产生的红细胞碎片对仪器法计数血小板所造成的正向干扰引起的。
血小板计数假性减少原因分析及其对策赵卫华发表时间:2018-12-03T10:51:17.083Z 来源:《中国误诊学杂志》2018年第28期作者:赵卫华[导读] 血细胞分析仪使用中会因为较多因素引起血小板计数假性减少,实际检测中需要重视上述相关因素的影响。
中医药大学第二附属医院检验科天津市 300150摘要:目的:总结血小板计数假性减少原因,从而采取管理对策。
方法:本研究时间在2016.4-2018.4,研究对象为80例血小板计数假性减少患者,回顾分析血小板计数假性减少原因,根据分析的原因采取管理对策。
结果:80例血小板计数假性减少原因为:乙二胺四乙酸引起的45例,冷凝集引起6例,大血小板引起24例,白细胞周围卫星现象2例,原因不明3例。
枸缘酸钠抗凝剂仪器法与手工计数方法在检测结果方面无统计学意义,而采用乙二胺四乙酸二钾抗凝剂则存在血小板计数假性减少,与上述检测结果相比存在统计学意义(P<0.05)。
结论:血细胞分析仪使用中会因为较多因素引起血小板计数假性减少,实际检测中需要重视上述相关因素的影响。
关键词:血小板计数;假性减少;原因分析;应用对策血液分析仪在实际应用中因具有操作简单、重复性好、工作效率高以及检测简单等优势,在临床生化分析检验中得到广泛应用。
随着血液分析仪的使用,临床文献报道指出血液分析仪在使用中存在血小板计数假性减少问题,影响到实际检测结果的可靠性[1]。
为明确血小板计数假性减少原因,进而为血液分析仪应用中血小板计数假性减少预防提供依据。
本文结合笔者整理的2016.4-2018.4期间收治的80例血小板计数假性减少患者,对其原因以及应用情况进行分析。
1、资料与方法1.1一般资料本研究时间在2016.4-2018.4,研究对象为80例血小板计数假性减少患者,所有患者使用血液分析仪实施检查。
其中男性44例+女性36例。
年龄:24—75岁、平均年龄(48.65±5.48)年;所有患者使用血液分析仪检查期间,血小板值明显降低,不足50×109/L。
血细胞分析仪计数血小板假性减少的原因分析血细胞分析仪具有快速、方便、重复性好、工作效率高等优点,但是由于自身检测原理
的限制以及血小板易于粘附、聚集、破坏等特点,血细胞分析仪测定血小板时常常会出现假
性减少现象,这是临床经常反映的问题。
假性血小板减少如不及时纠正会给临床医生误导,
有时会引起医疗纠纷。
因此,必须重视和纠正这样的情况。
现就血细胞分析仪计数血小板假
性减少原因分析如下:
1.采集血液标本不顺利造成:采血过程影响血小板计数的准确性,采血速度和出血是
否顺利是保证血小板数目准确的关键。
手指采血时若方法掌握不当,如采血速度慢、出血不畅、挤压采血部位等,都会造成假性血小板减少。
静脉经多次穿刺而引起的水肿及皮下出血时,因组织损伤,组织凝血因子混入血液标本中产生肉眼看不见的小凝块,是造成血细胞分
析仪计数血小板出现假性减少的常见原因之一,所以对血小板减少患者应注意阅片,必要时
重新采血。
标本采集后混匀抗凝不充分,可在试管帽或管壁上形成不易发现的血液凝块,也是
造成血小板假性减少的原因之一。
此类情况可重新留取标本进行复检[1]。
2.标本放置时间不足造成:在实际工作中,采取标本后立即进行检测,有时会出现血
小板计数假性减少现象。
这是由于血小板离体后,其形态立即发生变化,其外膜形成的微小
管游离端向外伸展,从而在血小板周围形成丝状伪足,数个这样的血小板伪足相互缠绕,形
成血小板可逆聚集体,其体积一般和淋巴细胞大小相似。
由于这种血小板不被溶血剂溶解,
故而使血小板计数暂时减少,随着时间的延长,这种假性聚集发生一定程度的解聚,所以,
为了提高准确性,建议在采血后放置15~20min再测定可得到准确结果。
3.计数血小板方法学的缺陷造成:自动化的血液分析仪,无论是阻抗法还是光散射法,对于血小板数及形态正常的标本,结果一般比较可靠,但是对于血小板明显减少和/或形态异常者,所得结果误差甚大,有时甚至难以计数。
其原因是:这些方法基本上都是依据细胞的
大小进行区分和计数的,而正常人的血小板体积相差甚大,可自2fl至20fl以上,其体积分
布直方图不是对称的,而是明显地向右延伸,即都存在一定数量的大血小板。
在病理情况下,大血小板会更多地增加。
由于大部分血液分析仪不能将大血小板与小红细胞等分开,致使许
多大血小板被当成红细胞而未计入血小板总数中,从而使血小板计数结果偏低。
4.抗凝剂EDTA的影响造成:有极少数人的血小板在用EDTA抗凝时,反而会出现血小板聚集,这种EDTA依赖性假性血小板减少可能与血浆中存在的抗血小板抗体和/或抗心磷脂抗
体等自身抗体有关,但无任何病理、生理意义,也与特殊药物使用无关,多发生在肿瘤患者、自身免疫病、肺心病、晚期孕妇、肝病、毒血症等疾病,此现象是其他疾病发生的伴随现象。
5药物的影响:长期使用某些药物如:地高辛、双氢克尿塞、甲基多巴、青霉素等,引起
血小板减少;使用促凝药物后如:VK、VK3、止血敏等,当药物过量或某些患者对这类药物
较为敏感时,也可发生血小板聚集。
这些药源性的血小板减少常要在停药15~20天后可恢复。
6输血的影响:大量的输入血液制品时会引起血小板减少。
这种情况多在4~6天后恢复
正常;此外,某些患者在输血后一周左右,出现血小板计数明显减少,这是因为患者对外源
性血小板抗原产生同种免疫,再次输入相应的血小板后产生血小板特异性抗原—抗体复合物,使输入的血小板受到破坏,也使患者自身血小板破坏,引起血小板的明显降低。
7.治疗方法的影响:有些治疗方法对血小板的计数也会产生较大影响如血液经光量子血疗
仪照射后,血小板计数明显减少,经电镜观察发现,照射后的血小板形态不完整,形成大量
的伪足及血小板碎片;此外[2],肿瘤患者化疗前后血小板数量有显著差异,呈现先低后逐渐
增高至化疗前水平。
8.疾病的影响:高胆固醇和高甘油三酯血症时,血小板聚集性增高,部分患者可以引起假性血小板减少;老年人由于动脉粥样硬化而导致的血管壁粗糙及血液粘稠度较高,出现血小板聚集,部分患者引起假性血小板减少;部分肺部疾病及产妇或待产妇、烧伤患者等均可出现血小板聚集,尤其是慢性肺心病患者,其体内的血小板被激活,使血小板黏附、聚集、稀释等功能增强。
综上所述,血细胞分析仪计数血小板具有快速、简便、重复性好等优点,然而,血小板易于粘附、聚集、破坏等诸多因素,常常造成血小板计数假性减少,从而给临床准确诊断疾病带来困难。
针对此种情况,在实际工作中,要排除一些干扰因素,以便准确测定混有大血小板、血小板聚集等异常血液标本的血小板数,进一步保证异常血液标本中血小板检测结果的准确性,为临床提供可靠的诊疗依据。
人工计数和显微镜涂片检查是确认血小板假性减少的唯一的方法,虽然大部分血细胞分析仪具有血小板聚集的警示功能,但这种提示是非特异的、不完全准确的,最好的办法是对初诊患者,血细胞分析仪计数血小板减少的病例引起重视,通过人工计数和显微镜观察血涂片予以确认,对血小板进行复核最关键的环节是血膜的制备良好,也是保证其复核血片达到质量要求最重要的环节,通常良好的血膜需达到的要求为: 头体尾的分布均匀,并且厚薄适宜。
而以手工法复核血片关键程序则是某一张血片需进行完整的瑞氏染色,还需予以低倍镜对整张血片进行观察,其血小板数量同仪器计数是否达到大致相符,之后需观察成熟红细胞的大小,观察是否有红细胞的碎片,在最后观察血小板是否出现聚集,以及大血小板是否存在,最终才能得到可靠的检测结果[3]。
综上所述,必须加强血细胞分析仪的质量控制和日常维护,规范血液标本的采集、运送、仪器操作、结果分析等步骤,确保给临床医师提供一个正确的检验结果。
参考文献
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[3]沈培奇.血小板假性减少原因分析及对策[J].中外医疗,2010,29(4):70.。