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一、实验目的1. 掌握培养基的基本成分和配制方法。
2. 熟悉培养基的灭菌操作流程。
3. 了解培养基在微生物培养中的应用。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基质，通常由碳源、氮源、无机盐、生长因子和水等组成。
根据微生物的营养需求和实验目的，可以配制不同类型的培养基。
灭菌是保证培养基无菌的关键步骤，常用的灭菌方法包括高压蒸汽灭菌、干热灭菌和过滤灭菌等。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 酵母提取物- 胰蛋白胨- 琼脂- NaCl- K2HPO4- MgSO4·7H2O- 水- 水平式电热灭菌锅- 高压蒸汽灭菌锅- 烧杯- 玻璃棒- 试管- 移液器- 灭菌指示剂- 灭菌棉塞2. 仪器：- 电子天平- 灭菌器- 玻璃器皿四、实验步骤1. 培养基的配制：- 称取酵母提取物10g、胰蛋白胨20g、琼脂15g、NaCl 5g、K2HPO4 1g、MgSO4·7H2O 0.5g，加入适量水溶解。
- 将溶液转移至烧杯中，用玻璃棒搅拌至完全溶解。
- 将溶液转移至锥形瓶中，用移液器定容至1000mL。
- 将锥形瓶置于电热灭菌锅中，进行121℃、20min的高压蒸汽灭菌。
2. 灭菌指示剂的加入：- 在灭菌后的培养基中，加入灭菌指示剂，观察指示剂的变化，确认培养基是否灭菌彻底。
3. 培养基的倒平板：- 将灭菌后的培养基冷却至50℃左右，倒入平板中，待凝固后，用无菌镊子取出平板，标记并放置于培养箱中。
五、实验结果与分析1. 培养基灭菌效果：- 通过观察灭菌指示剂的变化，确认培养基灭菌彻底。
2. 培养基平板制备：- 倒平板过程中，注意无菌操作，防止污染。
六、实验讨论1. 培养基的配制过程中，应注意称量准确，避免误差。
2. 灭菌过程中，应控制好温度和时间，确保培养基灭菌彻底。
3. 倒平板过程中，应注意无菌操作，防止污染。
七、实验总结通过本次实验，我们掌握了培养基的基本成分和配制方法，熟悉了培养基的灭菌操作流程，了解了培养基在微生物培养中的应用。
实验五培养基的制备、包扎一、实验教学目的与要求目的：1、明确培养基的配制原理。
2、掌握配制培养基的一般方法和步骤。
内容：1、牛肉膏蛋白胨培养基的配制。
2、SDAY培养基的配制。
二、实验原理培养基是供微生物生长、繁殖和代谢的营养基质。
培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子及水分等。
培养还应具有适宜的pH、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。
在液体培养基中加入0.5%-1.0%的琼脂配置为半固体培养基，加入1%-2%的琼脂配置为固体培养基。
琼脂是从石花菜等海藻中提取的多糖，是应用最广的凝固剂。
琼脂在96-100℃融化，46℃以下凝固。
培养基经灭菌后方可使用。
三、实验材料及用具1.试剂牛肉膏、蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、琼脂、链霉素、1M NaOH、1M HCl、NaCl、蒸馏水。
2.仪器及用具试管、三角瓶、培养皿、烧杯、量筒、玻璃棒、分液漏斗、天平、药匙、pH试纸、称量纸、棉花、纱布、线绳、橡胶管、报纸、铁架台、标签纸。
四、操作步骤（一）培养基配方：牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠5g、琼脂20g、蒸馏水1L、pH 7.0～7.2。
SDAY培养基：葡萄糖40g、蛋白胨10g、酵母浸出粉10g、琼脂20g、蒸馏水1L。
（二）步骤：操作图示（1）称量按照培养基配方，准确称量各成份放于烧杯中。
对于不是粉状（如肉膏），应用烧杯称量。
（2）配调向烧杯中加入适量的水，搅拌，使其溶解（可加热助溶）。
如是配制固体培养基，在琼脂的熔化时，需不断搅拌，并控制火力不要使培养基溢出或烧焦。
待完全熔化后，补足所失水分。
如果配方中含有淀粉，先将淀粉用少量冷水调成糊状并在火上加热搅拌，然后加足水分及其他药品，待完全熔化后补足所失水分。
（3）调节pH值培养基溶解均匀并冷却至室温时用pH试纸测pH，然后根据要求加酸或碱（一般用1molHcl和1molNaOH），要缓慢少量且多加搅拌。
一、实验目的1. 掌握培养基的基本制备原理和方法。
2. 学会牛肉膏蛋白胨培养基的配制过程。
3. 了解培养基灭菌的重要性及常用灭菌方法。
4. 熟悉实验室无菌操作的基本规范。
二、实验原理培养基是微生物生长繁殖的营养基质，主要由碳源、氮源、无机盐、生长因素和水等成分组成。
根据微生物的种类和实验目的，培养基可以有不同的配方和种类。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种常用的细菌基础培养基，适用于培养大多数细菌。
三、实验材料与仪器实验材料：- 牛肉膏- 蛋白胨- 氯化钠- 琼脂- 蒸馏水- pH试纸- 灭菌棉塞- 高压蒸汽灭菌锅- 三角瓶- 烧杯- 量筒- 移液管- 玻璃棒- 培养皿- 等等。
四、实验步骤1. 称量：根据牛肉膏蛋白胨培养基的配方，准确称取牛肉膏、蛋白胨、氯化钠等成分。
2. 溶解：将称量好的牛肉膏、蛋白胨等成分放入烧杯中，加入适量的蒸馏水，用玻璃棒搅拌使其充分溶解。
3. 调整pH值：用pH试纸测定溶液的pH值，根据需要加入适量的1M盐酸或氢氧化钠溶液调整pH值至7.2-7.6。
4. 灭菌：将溶解好的培养基转移至三角瓶中，加入灭菌棉塞，用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，灭菌时间为15-20分钟。
5. 冷却：灭菌后，待培养基冷却至50-60℃，加入适量的琼脂，充分搅拌使其溶解。
6. 分装：将冷却后的培养基分装至培养皿中，待凝固后备用。
7. 无菌操作：在无菌操作条件下，用移液管吸取适量的菌液，接种至培养基中。
五、实验结果与分析1. 培养基制备：成功制备了牛肉膏蛋白胨培养基，颜色呈淡黄色，透明度高。
2. 灭菌效果：通过高压蒸汽灭菌，确保了培养基的无菌状态，避免了微生物污染。
3. 接种结果：接种后，培养基上出现了菌落生长，表明培养基对细菌具有良好的培养效果。
六、实验讨论1. 在培养基的制备过程中，称量、溶解、调整pH值等步骤对培养基的质量至关重要，应严格按照实验步骤进行操作。
2. 灭菌是防止培养基污染的关键环节，应选择合适的灭菌方法，确保灭菌效果。
培养基的配制及倒平板
教学目标：
了解培养基的配方；学会配制培养基；学会倒平板。
教学重难点：
根据不同需求配制不同培养基；学会倒平板的操作。
教学内容：
一.制备培养基
1.配制培养基
称取去皮的马铃薯200g,切成小块，加水1000mL,加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。
向滤液中加入20g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15-20g琼脂用蒸馏水定容至1000mL。
加琼脂的目的是什么?作为凝固剂
2、灭菌
将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，并用皮筋勒紧，再放入高压蒸汽灭菌锅中，在压力为100 kPa、温度为1219C的条件下，灭菌15-30 min。
将5-8套培养皿包成一包用几层牛皮纸包紧，放入干热灭菌箱内，在160-170°C灭菌2h。
注意：（1）调pH：pH7.6（用0.1%的氢氧化钠或盐酸溶液把培养基调节到所要求的值）
（2）分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。
分装三角瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
（3）在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞，在取出培养基锥形瓶时也起到隔绝空气中杂菌污染的作用。
3.倒平板待培养基冷却到50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
二、无菌检查
将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24—48小时，以检查灭菌是否彻底。
如果有菌落生长，说明培养基已被污染。
一、教学目标1. 知识目标：- 了解培养基的基本组成及其在微生物培养中的作用。
- 掌握培养基配制的步骤和方法。
- 熟悉不同类型培养基的特点和应用。
2. 能力目标：- 能够独立完成培养基的配制过程。
- 能够根据实验需求选择合适的培养基配方。
- 培养实验操作技能和实验室安全意识。
3. 情感目标：- 培养学生对微生物学的兴趣和好奇心。
- 增强学生的团队协作能力和责任感。
- 增强学生的科学素养和严谨的科研态度。
二、教学对象本教学设计方案适用于生物学、微生物学等相关专业的本科生。
三、教学内容1. 培养基的基本组成：- 营养成分：碳源、氮源、水、无机盐、生长因子。
- 添加剂：指示剂、抗生素、抑制剂等。
2. 培养基的配制步骤：- 原料准备：称量、溶解、灭菌。
- 配制方法：液体培养基的配制、固体培养基的制备。
- 分装与灭菌：分装、封口、高压灭菌。
3. 常见培养基的类型及其应用：- 选择培养基：用于分离和纯化特定微生物。
- 培养基：用于培养和保存微生物。
- 差异培养基：用于观察微生物的特定特征。
四、教学过程1. 理论教学：- 讲解培养基的基本组成、配制步骤和常见类型。
- 通过PPT、视频等多媒体手段展示培养基配制的实际操作。
2. 实验教学：- 学生分组进行培养基配制实验。
- 教师现场指导，解答学生疑问。
- 学生独立完成培养基配制，包括原料准备、溶解、灭菌、分装与封口等步骤。
3. 课后作业：- 完成实验报告，包括实验目的、原理、步骤、结果和分析。
- 撰写实验总结，反思实验过程中的问题及改进措施。
五、教学评价1. 课堂表现：学生的出勤率、参与度、提问积极性等。
2. 实验操作：学生的实验技能、操作规范性、实验结果等。
3. 作业完成情况：实验报告的质量、实验总结的深度等。
六、教学资源1. 教材和参考书籍：《微生物学》、《微生物实验技术》等。
2. 实验室设备：天平、高压灭菌器、移液器、培养皿、试管等。
3. 多媒体资源：PPT、视频、实验操作指南等。
