流式细胞术检测食管癌中CD_147_分子及其高表达提示不良预后的研究

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SiRNA沉默CD147表达对胰腺癌细胞侵袭力的影响的实验研究

SiRNA沉默CD147表达对胰腺癌细胞侵袭力的影响的实验研究于春波;唐剑;李国峰;东立;齐国森;潘德超;孙鹏【期刊名称】《实用心脑肺血管病杂志》【年(卷),期】2011(19)6【摘要】目的探讨CD147胰腺癌中的表达及其与胰腺癌细胞侵袭性的相关性.方法应用免疫组化SP法对50例胰腺癌标本的CD147表达进行检测,分析其表达与胰腺癌侵袭性的关系的相关性.结果 CD147在胰腺癌中的强阳性及总阳性表达率分别为51.7%和93.1%.结论 CD147的高表达与胰腺癌的侵袭性密切相关,可作为判断胰腺癌侵袭性生长的有效指标.【总页数】1页(P949)【作者】于春波;唐剑;李国峰;东立;齐国森;潘德超;孙鹏【作者单位】068350,河北省承德市丰宁县医院;068350,河北省承德市丰宁县医院;068350,河北省承德市丰宁县医院;068350,河北省承德市丰宁县医院;068350,河北省承德市丰宁县医院;068350,河北省承德市丰宁县医院;068350,河北省承德市丰宁县医院【正文语种】中文【中图分类】R576【相关文献】1.siRNA沉默胰腺癌BXPC-3细胞中Her-2/neu基因对COX-2表达水平及细胞增殖、凋亡、侵袭力的影响 [J], 刘勇;王斌;陈思思2.siRNA沉默CD147基因对肝癌细胞的影响 [J], 赵先胜;任志群3.siRNA 靶向沉默PcG蛋白EZH2对人胃癌细胞株 MKN45增殖和侵袭力的影响[J], 蔡干慧;陈晓宇4.siRNA沉默钙囊素基因表达对人胰腺癌细胞PANC-1的影响 [J], 江枫;肖明兵;李小彦;陆翠华;倪润洲5.siRNA沉默PAR1基因表达对大肠癌细胞侵袭力的影响 [J], 陆信仰;王继见;王亚旭因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

CD147在多种肿瘤患者血清中的表达及其临床意义

２．１标准曲线如图１，以浓度为３１．２、６２．５、１２５、２５０、５００、１０００、
２０００ｐｇ／ｍｌ为纵坐标，以测出的ＯＤ值为横坐标绘制标准曲线。其曲线为：ｙ一６２４．９９ｃｒ一３３．６６６，Ｒ一０．９９５６，结果显示线＿６Ｈ性良好＿∞ｕ§ 。
基金项目：吉林省卫生计生委资助课题（２０１４Ｚ０２１）＊通讯作者
ＣＤ１４７可以上调ＶＥＧＦ，促进肺癌细胞血管生成，从而增加肺癌细胞再生和侵袭能力，也提示ＣＤ１４７
中国实验诊断学２０１８年１Ｏ月第２２卷第１Ｏ期
患者均清晨空腹采静脉血３ｍｌ于含促凝剂采血管中，４０００ｒ／ｍｉｎ，离心５分钟，取血清于一７Ｏ℃ 冰箱冻存。人ＣＤ１４７ＥＬＩＳＡ试剂盒购自武汉云克隆科技股份有限公司；安图ＰＨＯＭＯ型酶标仪，安图ｉＷＯ一９６０型洗板机。采用ＥＬＩＳＡ方法检测肿瘤患者血清中ＣＤ１４７蛋白水平含量，所有试验步骤均按说明书操作，每个样本均设复孔进行检测，测得数
ＣＤ１４７通过与基质金属蛋白酶（ＭＭＰｓ）结合，降解肿瘤细胞外基质，从而促进肿瘤的浸润及播散 “］。
ＣＤ１４７与ＭＭＰ作用的同时又可产生ＶＥＧＦ，刺激肿瘤血管内皮细胞，促进肿瘤血管重建，增强肿瘤细胞的增殖及侵袭能力］。本研究通过酶联免疫吸附实验（ＥｌＩＳＡ）方法检测六种肿瘤患者血清中ＣＤ１４７水平，比较和健康对照组的差别并分析其临床意义。１材料与方法

CD147、CEA 在胃癌组织中的表达及预后价值

CD147、CEA 在胃癌组织中的表达及预后价值高文华;付勇;周萍;卢宁【期刊名称】《现代肿瘤医学》【年(卷),期】2016(024)017【摘要】目的：研究胃癌组织中 CD147、CEA 的表达及其与胃癌患者临床病理参数和总体生存率之间的关系。

方法：应用免疫组织化学（SP）法检测胃癌组织标本及癌旁胃组织中CD147、CEA 的表达情况，并随访患者进行生存分析。

结果：胃癌组织中 CD147、CEA 的阳性表达率均显著高于癌旁组织（P ＜0．05）。

CD147、CEA 在胃癌中的表达均与胃癌的浸润深度、淋巴结转移和 TNM分期显著相关（P ＜0．05）。

相关性分析发现， CD147与 CEA 在胃癌组织中的表达呈正相关（r ＝0．292，P ＝0．020）。

经 Kaplan －Meier 生存分析显示，CD147、CEA 蛋白表达阳性的患者生存率均明显低于表达阴性组患者（P ＜0．05）。

单因素分析发现肿瘤浸润深度、TNM分期、淋巴结转移、CD147、CEA 均为影响胃癌患者预后的重要因素；Cox 风险模型多因素分析发现肿瘤的TNM分期、淋巴结转移、CD147、CEA 是影响胃癌预后的独立危险因素。

结论：CD147和 CEA 的表达与胃癌的浸润和转移密切相关，两者在胃癌中的表达具有协同作用，它们可协同促进胃癌的侵袭和转移。

CD147和 CEA 是胃癌预后的独立危险因素，可成为胃癌预后的新型标志物和治疗的新靶点。

%Objective:To study the expressions of CD147 and CEA in gastric cancer and their correlations with clinicopathologic parameters and overall survivalrate.Methods:Immunohistochemistry was used to examine the ex-pression of CD147 and CEA in gastric carcinoma and the adjacent normal tissues.Allthe cases were followed up for survival analysis.Results:The expression rates of CD147,CEA in gastric carcinoma tissues were significantly higher than those in paracancerous normal tissues(P <0.05).The positive expressions of CD147,CEA in gastric cancer tis-sue were significantly correlated to the infiltrative depth,lymphatic metastasis and TNMstage(P <0.05).The survival rates in patients of gastric cancer with positive expression of CD147 and CEA were significantly lower than those in patients with negative expression(P <0.05).CD147 expression was positively correlated with CEA expression in gas-tric cancer tissue (r=0.292,P =0.020).Univariate analysis showed that infiltrativedepth,lymphatic metastasis, TNMstage,CD147 and CEA were the most important indicators in prognosis of gastric cancer.Cox regression analysis revealed that lymphatic metastasis,TNMstage,CD147 and CEA were independent prognostic factors for gastric cancer. Conclusion:Expressions of CD147 and CEA are associated with infiltration and metastasis of gastric cancer,and they may cooperate with each other in the invasion and metastasis of gastric carcinoma.CD147 and CEA are the risk factors of affecting prognosis,which may become new markers in prognosis and new targets in treatment of gastric cancer.【总页数】5页(P2750-2754)【作者】高文华;付勇;周萍;卢宁【作者单位】中国人民解放军兰州军区乌鲁木齐总医院肿瘤科，新疆乌鲁木齐830000;中国人民解放军兰州军区乌鲁木齐总医院肿瘤科，新疆乌鲁木齐 830000;中国人民解放军兰州军区乌鲁木齐总医院肿瘤科，新疆乌鲁木齐 830000;中国人民解放军兰州军区乌鲁木齐总医院肿瘤科，新疆乌鲁木齐 830000【正文语种】中文【中图分类】R735.2【相关文献】1.CD147和 MMP －9在胃癌组织中的表达及其与预后的关系 [J], 周萍;付勇;高文华;卢宁2.CD147和S100P在胃癌组织中的表达及临床意义 [J], 刘京运;金世禄;刘宝珍;张建3.不同 TNM 分期胃癌组织中 S100P、CD147及OCT4的表达及意义研究 [J], 李兵;罗利玲;赖大年4.胃癌组织中CD147和VEGF的表达及其临床意义 [J], 陈秀娇;徐丽;陈智伟;郑伟男5.胃癌组织中CD147和VEGF的表达及其临床意义 [J], 陈秀娇; 徐丽; 陈智伟; 郑伟男因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

流式细胞术对食管癌、贲门癌患者T细胞亚群的分析

流式细胞术对食管癌、贲门癌患者T细胞亚群的分析【摘要】目的采用流式细胞术方法检测食管癌、贲门癌患者细胞免疫功能。

方法应用三色免疫荧光流式细胞仪测定145名食管癌和贲门癌患者及18例正常对照者外周血T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞、CD4+/CD8+比值。

结合临床病理结果探讨二者之间的关系。

结果(1)食管癌、贲门癌患者外周血中CD8+T淋巴细胞比例较正常对照组明显升高（P＝）；CD3+、CD4+亚群较正常值降低，但是没有统计学差异。

NK细胞两组比较也没有显著性差异；(2)早期（0、Ⅰ期）食管癌、贲门癌病人和健康对照组之间T细胞各亚群相比没有统计学差异；中、晚期（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期）食管癌、贲门癌病人和健康对照组相比：CD4+明显降低（P ＝）；CD8+则明显升高（P＝）；CD4+/CD8+较正常有所下降，但是没有显著性差异；淋巴结阴性患者和淋巴结阳性患者比较T细胞各亚群没有明显差异。

结论外周血T细胞亚群的检测有助于提高对食管癌患者的病情，临床分期以及机体免疫状态的判断，晚期食管癌患者机体免疫状态成紊乱型改变。

【关键词】食管癌贲门癌T细胞亚群流式细胞术临床分期0引言恶性肿瘤患者往往伴有机体免疫机能低下和紊乱，免疫机能低下和紊乱对肿瘤发生发展起到一定的作用。

流式细胞术分析T细胞亚群具有快速、多参数、可定量、操作简便等优点，国外已有较多报道。

食管癌、贲门癌患者的机体免疫状态尤其是细胞免疫状态国内已有报道，但所用研究方法多为传统的免疫细胞学方法。

本研究通过三色免疫荧光流式细胞术分析145名食管癌、贲门癌患者外周血T细胞亚群，并结合临床病理分期，分析食管癌、贲门癌患者细胞免疫状态的改变及其临床意义。

1资料和方法资料和方法收集20XX年6月～20XX年8月在我科住院治疗的145名食管癌及贲门癌患者，所有病例抽血化验前均未行放、化治疗，并均经胃镜活检证实诊断。

年龄29～85岁，男性105名，女性40名，平均年龄岁。

化疗对晚期食管癌患者细胞免疫及调节T细胞的影响

化疗对晚期食管癌患者细胞免疫及调节T细胞的影响廖娟;周云峰【摘要】目的:探讨晚期食管癌患者化疗前后细胞免疫及调节T细胞(tregs)的变化及其临床价值.方法:采用流式细胞术检测健康志愿者及食管癌患者化疗前后外周血CD4+T、CD8+T细胞及调节T细胞的比例变化.结果:晚期食管癌患者化疗前外周血CD4+T细胞所占比例和CD4+T/CD8+T均较化疗后低,且二者均低于健康对照组(P＜0.05).晚期食管癌患者CD4+CD25+T细胞和Tregs细胞所占比例化疗后较化疗前有所降低,二者均明显高于健康对照组.结论:化疗能明显减轻晚期食管癌患者的肿瘤免疫耐受,改善免疫状况.【期刊名称】《现代临床医学》【年(卷),期】2014(040)001【总页数】3页(P32-34)【关键词】免疫调节T细胞;食管癌;化疗;细胞免疫【作者】廖娟;周云峰【作者单位】川北医学院附属医院,四川,南充,637000;川北医学院附属医院,四川,南充,637000【正文语种】中文【中图分类】R735.1食管癌是我国发病率较高的恶性肿瘤之一，总体5年生存率较低。

与其他肿瘤一样，食管癌的发生发展与肿瘤免疫耐受明显相关，调节T细胞作为主要的免疫负向调节细胞促进肿瘤的免疫耐受，从而促进肿瘤的发生发展。

化疗作为临床治疗食管癌的重要方法之一，尽管已广泛应用于临床，但能否影响食管癌患者调节T细胞，目前尚不清。

本研究从肿瘤免疫角度，初步探讨化疗对晚期食管癌患者调节T 细胞及细胞免疫功能的影响，为食管癌治疗的疗效观察提供一定的免疫学依据。

1 资料与方法1.1 一般资料将川北医学院附属医院2010年6月至2012年6月就诊的经病理学或细胞学证实确诊的晚期食管癌患者56例设为观察组，其中:男43例，女13例;年龄44～80岁，中位年龄59岁;病理组织学类型中鳞癌48例，腺癌8例;组织分级为高分化者18例，中分化者21例，低分化者17例。

所有患者均无免疫相关性疾病和其他肿瘤病史，未使用抗肿瘤及免疫增强或免疫抑制剂治疗。

肝癌细胞株SMMC-7721中CD147和MMP-9的表达及意义

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文章编号：３７４８（０８０ —０３ —０１０ — ２７２０）３３０２１
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CD147与肿瘤侵袭转移关系的研究进展

CD147与肿瘤侵袭转移关系的研究进展琚玲丽;刘惠宁【摘要】@@ 肿瘤的发生、转移包括原发性肿瘤浸润、肿瘤细胞脱落、转送和继发性生长等环节,是一个多因素参与、多步骤的复杂过程,也是临床治疗恶性肿瘤的主要障碍和造成肿瘤患者死亡的主要原因.人们正在从不同水平、不同途径对肿瘤转移的发生机制进行研究.CD147是目前的一个研究热点.【期刊名称】《西南国防医药》【年(卷),期】2011(021)004【总页数】4页(P450-453)【关键词】细胞外基质金属蛋白酶诱导因子;侵袭;转移【作者】琚玲丽;刘惠宁【作者单位】410008,长沙,中南大学湘雅医院妇产科;410008,长沙,中南大学湘雅医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R733肿瘤的发生、转移包括原发性肿瘤浸润、肿瘤细胞脱落、转送和继发性生长等环节,是一个多因素参与、多步骤的复杂过程,也是临床治疗恶性肿瘤的主要障碍和造成肿瘤患者死亡的主要原因。

人们正在从不同水平、不同途径对肿瘤转移的发生机制进行研究。

CD147是目前的一个研究热点。

CD147又称细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinases inducer,EMMPRIN),曾有多种不同的命名，最初被命名为TCSF/EMMPRIN,即肿瘤细胞来源的胶原酶刺激因子/细胞外基质金属蛋白酶诱导因子,来源于人肺癌细胞系LX-1〔1〕。

CD147在体内分布广泛,参与精子发生、胚胎发育、器官形态发生、伤口愈合、骨重建等〔2〕生理过程,同时还参与炎症反应、病毒感染、肿瘤的侵袭和转移等病理过程,是具有多功能的分子。

笔者就CD147 的结构、调控及其与肿瘤的关系作一综述。

1 CD147的结构CD147〔3〕属于免疫球蛋白超家族(immunoglobulin superfamily,IgSF),分子量约58 KD，其编码基因定位于19p13.3,mRNA 序列1.7 kb长,编码区编码269个氨基酸包括21个氨基酸残基组成的信号肽、185个氨基酸残基组成的膜外结构域、24个氨基酸残基组成的跨膜结构域和39个氨基酸残基组成的胞浆内结构域。

食管鳞状细胞癌中MMP-9、CD-147的表达及意义

食管鳞状细胞癌中MMP-9、CD-147的表达及意义熊松柏;徐义;蒋彬;朱小星;杨康【期刊名称】《现代生物医学进展》【年(卷),期】2007(007)001【摘要】目的:探讨基质金属蛋白酶9(MMP-9)和CD-147在食管鳞状细胞癌的表达及其与肿瘤浸润转移的关系.方法:应用免疫组化S-P法观察57例食管鳞癌组织中MMP-9、CD-147的表达,并探讨其与食管鳞癌临床病理资料的关系.结果:MMP-9、CD-147在癌组织中的阳性表达率分别为82.46%,64.91%;在癌旁组织中的阳性表达率分别是29.82%,8.77%.在食管鳞癌中,MMP-9及CD-147的表达均与食管鳞癌的浸润深度有关,与分化程度无明显关联;有淋巴结转移的病例阳性表达率明显高于无淋巴结转移组.结论:MMP-9及CD-147的表达均与食管鳞癌的浸润深度及淋巴结转移有关.【总页数】3页(P42-43,46)【作者】熊松柏;徐义;蒋彬;朱小星;杨康【作者单位】第三军医大学第一附属医院胸心外科,重庆,400038;第三军医大学第一附属医院胸心外科,重庆,400038;第三军医大学第一附属医院胸心外科,重庆,400038;第三军医大学第一附属医院胸心外科,重庆,400038;第三军医大学第一附属医院胸心外科,重庆,400038【正文语种】中文【中图分类】R655.4【相关文献】1.食管鳞状细胞癌组织中FAK、Paxillin和MMP-9蛋白的表达及临床意义 [J], 庞霞;李晟磊;赵志华;赵阿红;张红新;高冬玲2.脑梗死并发食管鳞状细胞癌人群中nm23-H1和MMP-9表达及生物学意义 [J], 龚哲;尚闯;刘兴安;单国用3.MMP-2和MMP-9在食管鳞状细胞癌患者癌组织中的表达及其意义 [J], 孙晓宏;房福元;李卉;尹娜;庞作良;李惠武4.MMP-9和TIMP-1 mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达及其意义 [J], 孙晓宏;吕红博;李卉;尹娜;李慧武;庞作良5.食管鳞状细胞癌组织中VEGF、MMP-9的表达及意义 [J], 关耀武因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

CD147和VEGF蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

CD147和VEGF蛋白在食管鳞状细胞癌中的表达及意义马光;高志安;李春宏;孔庆儒;甄伟【期刊名称】《辽宁医学院学报》【年(卷),期】2006(027)003【摘要】目的探讨食管鳞状细胞癌中CD147和VEGF蛋白的表达及意义.方法应用免疫组化s-P法观察70例食管鳞癌组织中CD147和VEGF蛋白的表达.结果在低分化、中分化和高分化食管鳞癌组织中CD147蛋白的阳性率分别为87.50%、96.43%和96.15%,VEGF蛋白的阳性率分别为87.50%、92.86%和88.46%.CD147和VEGF蛋白的表达均与食管鳞癌浸润深度有关,与分化程度及临床分期无明显关联;有淋巴结转移的病例阳性率明显高于无淋巴结转移组.结论CD147和VEGF蛋白的表达均与食管鳞癌的浸润深度、淋巴结转移有关.【总页数】4页(P21-23,36)【作者】马光;高志安;李春宏;孔庆儒;甄伟【作者单位】锦州医学院病理学教研室,辽宁,锦州,121001;锦州医学院病理学教研室,辽宁,锦州,121001;锦州医学院病理学教研室,辽宁,锦州,121001;锦州医学院病理学教研室,辽宁,锦州,121001;辽东学院,辽宁,丹东,118001【正文语种】中文【中图分类】R735.1【相关文献】1.VEGF-C、VEGFR-3、CD105及CD68蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义 [J], 陈明勇;庞霞;郑湘予;李晟磊;赵志华;张红新;陈奎生2.CD147、核转录因子κB、表皮生长因子受体在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义 [J], 熊莉娜;熊枝繁3.基质金属蛋白酶2及CD147在食管鳞状细胞癌中的表达及意义 [J], 赵建华;樊克武4.CD147、EGFR在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义 [J], 熊莉娜;熊枝繁;涂艳5.胃癌组织中CD147和VEGF的表达及其临床意义 [J], 陈秀娇;徐丽;陈智伟;郑伟男因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

流式细胞术定量检测食管癌组织中P53、cyclin D1和 Rb蛋白表达的意义

流式细胞术定量检测食管癌组织中P53、cyclin D1和 Rb蛋白表达的意义丁卫军;刘志辉;常建华;黄朝晖;李莉华【期刊名称】《中国临床医学》【年(卷),期】2005(012)006【摘要】目的:研究P53、cyclin D1和Rb蛋白在食管癌形成与发展中的作用.方法:应用流式细胞术对59例食管癌组织的cyclin D1、P53和Rb蛋白进行定量检测.结果:cyclin D1、P53在低分化组的表达显著高于分化组(P＜0.05);Rb在低分化组的表达低于分化组,但无显著差异(P＞0.05);3种蛋白的表达与淋巴结转移均无相关性(P＞0.05).结论:P53和cyclin D1的表达与食管癌的分化密切相关;cyclin D1上调,P53失活可能是食管癌形成与发展的重要分子生物学机制.【总页数】2页(P1023-1024)【作者】丁卫军;刘志辉;常建华;黄朝晖;李莉华【作者单位】苏州大学附属第四医院心胸外科,无锡,214062;苏州大学附属第四医院肿瘤研究所,无锡,214062;苏州大学附属第四医院心胸外科,无锡,214062;苏州大学附属第四医院肿瘤研究所,无锡,214062;苏州大学附属第四医院肿瘤研究所,无锡,214062【正文语种】中文【中图分类】R735.1【相关文献】1.食管癌组织中p16、p21、p53 cyclin D1表达及其意义 [J], 战雪梅;王国新;孙崇伟;王家银;李玲2.非小细胞肺癌组织中cyclin D1、p16和Rb蛋白表达的意义 [J], 张朝晖;徐正顺;吉巧红3.人结肠癌组织中 NIBP、CyclinE 和 CyclinD1蛋白表达变化及意义 [J], 陈楚杰;黄杰安;徐春燕4.宫颈癌组织P53和CyclinD1蛋白表达及意义 [J], 侯玉朱;王蓁;袁芳5.胃癌组织中cyclin D1 P16和Rb蛋白表达的意义 [J], 魏铜有;魏明霞;杨苏敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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Hospital，Xuancheng 242000，China 【Abstract】 Objective To study the expressions and significance of CD147 proteins in esophageal carcinoma （ EC） and
their relationship with the patient prognosis． Methods The expressions of CD147 protein in 45 cases were detected by Immunohistochemitical staining， Flow Cytometry was used to quantitative analysis of CD147 protein． Results All of ECs （ 37 /37， 100. 0% ），and most of esophageal mucosa （ EM）（ 7 /8，87. 5% ），it mainly was located in cancer cell membrane in ECs and basal cells membrane in NCs； The expressions of CD147 wasn't significative difference between normal cervix and CCs，but with tumor progression． Conclusion CD147 expression was evaluated a reliable indicator of poor prognosis for cervical cancer，it was a target for CC therapy．
外诱导成纤维细胞合成 MMP － 1、2、3。随后对 CD147 研究发现，在骨巨细胞瘤、泌尿系肿瘤、肺癌、乳腺癌、结直肠癌、口腔鳞状细胞癌、神经胶质瘤、成釉细胞癌、子宫内膜癌、骨髓癌、皮肤基底细胞癌、黑色素瘤、皮肤鳞状细胞癌等肿瘤细胞中均发现 CD147 表达升高［3］，同时 MMP 活性增加，且与肿瘤的浸润和转移相关［4］。免疫组织化学显示，相对于正常组织和癌旁组织，癌组织中 CD147 mRNA 的表达升高［3］。在部分肿瘤中还发现随着肿瘤恶性程度的增高，CD147 的水平也随之升高，且和肿瘤的浸润和转移相关［5］。将 CD147 的 cDNA 转染至 MDA － MB436 乳腺癌细胞，能够加速裸鼠肿瘤生长、浸润和转移，同时肿瘤细胞中 MMP － 2 和 MMP － 9 表达增加；对黑色素瘤细胞系和口腔鳞癌细胞系的体外研究证实，使用 CD147 抗体能够显著抑制肿瘤侵袭和转移［3］。这充分证明了 CD147 在肿瘤细胞侵袭和转移中的作用。CD147 不仅能够刺激成纤维细胞表达 MMP，同时它也可以通过一种旁分泌的方式作用于血管内皮细胞，调节内皮细胞的 MMP 表达，提示肿瘤源性的 CD147 可能通过调节内皮细胞 MMP 的产生而促进肿瘤新生血管生成［3 － 4］。在后续的一些研究中，人们发现 CD147 分子可作为甲状腺癌、肾癌、肝癌、前列腺癌、膀胱癌及小儿胶质瘤评价不良预后的一个指标。
作者单位： 242000 安徽省宣城市中心医院内三科（汤北岭，赵云，刘有礼，李启松）；武汉大学医学院肿瘤研究中心（王进）
1. 2 实验方法 1. 2. 1 主要试剂一抗：（ 1）鼠抗人 CD147 单克隆抗体，美国 R＆D 公司产品，使用浓度 1∶ 100。（ 2）标记碱性磷酸酶的羊抗鼠多克隆抗体，美国 pierce 公司产品，使用浓度 1∶ 100。（ 3） FITC － CD147 ，同型对照均为美国 BD 公司产品。 1. 2. 1 组织化学染色组织用 10% 福尔马林，常规石蜡包埋，二甲苯脱蜡，梯度酒精再水化后，3% 过氧化氢抑制内源性过化酶活性，100℃ 0. 01mol / L 枸橼酸钠（ PH 6. 0）行抗原修复 10min， PBS 冲洗 3 遍，10% BSA 封闭非特异性位点 10min，一抗（ Anti － EMMPRIN，识别 CD147 膜外抗原表位） 4℃ 育过夜，PBS 冲洗 3 遍，加入标记为辣根过氧化物酶二抗（ Pierce，USA，1： 1000 ）室温下孵育 1h， PBS 冲洗 3 遍， DAB 镜下观察显色。 1. 2. 2 流式细胞样品的制备及检测方法人食管癌组织手术切除离体半小时内，含 1000U / mL 的青霉素（ Gibco，USA）和 1000μg / ml 链霉素（ Gibco，USA） PBS 冲洗以去除污染的红细胞；将其剪成小碎片，0. 5mg / ml 胶原酶 IV + DMEM / F12 （ Gibco）、37℃ 消化过夜，1500g 离心，弃上清，0. 025mmol / L EDTA －胰酶（ Gibco，USA） 37℃ 化半小时，FACS buffer （ 1 ×
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PJCCPVD August 2011，Vol，19 No. 8
PBS，5% FBS，and 0. 1% sodium azide）重悬细胞，每个样本分 3 组，以 2. 5 × 105 / 孔将细胞移至 96 孔板，500g 离心，弃上清，分别加入 10ml 的 CD147 － FITC （ BD，USA）、mouse IgG 1κ （ isotype control，BD，USA）、10ml 的 buffer，在暗室中孵育 30min，各孔加入 200μl 的 buffer，500g 离心，弃上清，每孔再加入 200ml 的 buffer 重悬细胞，上机分析，定量分析 CD147 表达量〔参照 Morkve 等和 Kelsten 等提出的荧光指数（ fluorescence index，FI）表示 CD147 基因蛋白的相对含量〕，FI = 实验样品的平均荧光强度－对照样品的平均荧光强度，因为每次上样细胞数目一致，均不同时除于细胞数目。 1. 3 统计学方法采用 SPSS 进行统计分析，计量资料以（ x ± s）表示，采用 t 检验，以 P ＜ 0. 05 为差异有统计学意义。 2 结果 2. 1 CD147 基因蛋白的定位分析结果所有的癌组织（ 37 /37， 100. 0% ）和绝大多数正常食管组织（ 7 /8，87. 5% ）都表达 CD147 蛋白，不同的是在食管癌中其主要表达在癌细胞膜表面（见图 1 B、C），而在正常食管组织中，CD147 蛋白主要位于基底层细胞，表达强度由下向上逐渐递减，表皮层细胞不表达 CD147 蛋白（见图 1 A）。 2. 2 FACS 分析食管癌中 CD147 的蛋白表达量在食管癌及正常食管中，都可以检测到 CD147 蛋白表达（正常食管： 7 /8；癌组织： 21 /21），正常食管中 CD147 蛋白表达量与食管癌组织相比无显著性区别（图 2 B），但在恶性组织中，肿瘤的进展与 CD147 的表达成正相关，随着肿瘤进展，CD147 表达量越高（ P ＜ 0. 05，见图 2 C）。
adenocarcinoma （ C， × 1000）
图 2 FACS 分析食管癌中 CD147 表达 Figure 2 CD147 was detected by FACS in esophageal carcinoma
3 讨论 Biswas 将其命名为 TCSF 的 CD147 分子纯化，发现 CD147 体
流式细胞术近年来逐渐应用于蛋白定量，尤其在膜蛋白中的定量备受推崇，而且已经有了成功的报道［5］；我们通过对新鲜食管癌组织中的 CD147 表达量进行了准确定量，发现 CD147 表达量直接与肿瘤的进展密切相关，是肿瘤进展的一个指标；最近人们有发现，放疗后的宫颈癌病人中，CD147 高表达提示该患者生存时间缩短［7］；综上所述，CD147 是食管癌评价预后的一个可靠指标，这个结论在卵巢浆液性囊腺癌中也同样得到了印证。
【Key words】 Esophageal carcinoma； CD147 ； Flow cytometry
CD147 又被称为促细胞外基质金属蛋白酶因子（ extracellular matrix metalloproteinase inducer， EMMPRIN ）或者 basigin，其高度表达在肿瘤细胞的表面，刺激肿瘤细胞周围的成纤维细胞分泌基质金属蛋白酶［1］。在多种肿瘤中发现 CD147 高表达，与肿瘤的浸润和转移密切相关，而且，其表达与癌症患者预后密切相关［1］。为了进一步说明问题，本研究应用流式细胞术检测手术切除的食管癌组织中 CD147 蛋白的表达，了解 CD147 高表达对评价食管癌预后的意义。 1 材料与方法 1. 1 标本来源取自安徽宣城中心医院及武汉大学肿瘤医院 07 － 09 年 21 例食管癌病人手术切除标本，术前均按照食管癌临床病理分级，食管鳞癌（ Ⅰ 期： 9 例，Ⅱ A 期： 10 例，Ⅱ b： 10 例，Ⅲ： 4 例），食管腺癌（ Ⅰ： 2 例，ⅡA： 2 例，），正常食管 8 例〔样本平均年龄为（ 41 ± 12）岁，年龄范围为 21 ～ 76 岁〕，术前未行治疗；每例癌组织各取两块，分别用组织化学染色及流式细胞术分析。
实用心脑肺血管病杂志 2011 年 8 月第 19 卷第 8 期
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·论著·
流式细胞术检测食管癌中 CD147 分子及其高表达提示不良预后的研究
汤北岭，赵云，刘有礼，李启松，王进
【摘要】目的探讨 CD147 在食管癌中的表达及其与食管癌预后的关系。方法应用免疫组化方法检测 CD147 蛋白在食管癌中表达，采用流式细胞术定量检测新鲜食管癌组织中 CD147 的表达量。结果所有的食管癌（ 37 /37， 100. 0% ）和绝大多数正常食管组织（ 7 /8，87. 5% ）都表达 CD147 蛋白，均主要表达在细胞表面； CD147 在食管癌中的表达量与正常食管表达量无明显异常，但其在癌组织中的随着肿瘤进展，其表达量也随之增高。结论 CD147 表达为评价食管癌不良预后一个可靠指标，亦提示其为食管癌治疗的一个靶点。