微核诱导

诱变物质的微核检测【摘要】微核（micronucleus，MCN）是真核生物细胞染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。

通过微核测试可直接推测诱变物质对人类或其他高等生物的遗传危害。

本实验以叠氮化钠为对照，检验咖啡的微核诱导率。

【引言】微核（micronucleus, 简称MCN），也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。

微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的。

在细胞间期，微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3以下。

微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样，也具合DNA的能力。

一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断片产生的。

有实验证明，整条染色体或几条染色体也能形成微核。

这些断片或染色体在分裂过程中行动滞后，在分裂末期不能进入主核，便形成了主核之外的核块。

当子细胞进入下一次分裂间期时，它们便浓缩成主核之外的小核，即形成了微核。

微核测试可以直接推测诱变物质对人类或其他高等生物的遗传危害。

经典的诱变剂有：X射线、环磷酰胺、氧化铬CrO3、叠氮化钠NaN3、甲基磺酸乙酯EMS和硫酸二乙酯。

已经证实，微核率的大小和作用因子的计量或辐射累积效应呈正相关。

目前微核测试已经广泛应用于辐射损伤辐射防护、化学诱变剂、新药试验的安全评价以及染色体遗传疾病和癌症前期诊断等方面。

其中，最常用的方法为小鼠骨髓红细胞微核检测方法。

本实验采用的是以大蒜为材料，用成浓度梯度实验组培育检测微核发生率的实验方法。

实验材料应具有染色体条数少、个体大，便于统计的特点。

并且需要对污染物反应比较敏感，适宜在当地生长。

本实验选择以大蒜为材料，符合以上要求。

咖啡从1500年前辈发现以来，现在已经成为世界三大饮料之首。

，是许多人每天必备的饮品，特别受学生和上班族的青睐。

饮用咖啡的优缺点各有说道，因此，我们选用咖啡为实验材料，希望可以分析出咖啡的微核诱变率。

诱变物质的微核检测技摘要：本实验以大蒜为实验材料，研究咖啡和咖啡伴侣能否诱发细胞产生微核，以及咖啡和咖啡伴侣的毒性是否有叠加效应。

实验中将咖啡和咖啡伴侣配置为不同浓度梯度的溶液，对大蒜进行诱发培养24小时，并观察检测微核的诱发率。

前言：由于大量新的化合物的合成，原子能应用，各种各样工业废物的排出，使人们很需要有一套高度灵敏，技术简单的测试系统来监视环境的变化。

只有真核的测试系统更能直接推测诱变物质对人类或其它高等生物的遗传危害，在这方面，微核测试是一种比较理想的方法。

微核是真核生物细胞中的一种异常结构，往往是细胞经辐射或化学药物的作用而产生。

在细胞间期微核呈圆形或椭圆形，游离于主核之外、大小应在主核1／3以下。

微核的折光率及细胞化学反应性质和主核一样。

一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的断片产生的，但有些实验也证明整条的染色体或多条染色体也能形成微核。

这些断片或染色体在细胞分裂末期被两个子细胞核所排斥便形成了第三个核块。

已经证实微核率的大小是和用药的剂量或辐射累积效应呈正相关，这一点和染色体畸变的情况一样。

所以可用简易的间期微核计数来代替繁杂的中期畸变染色体计数。

咖啡和咖啡伴侣为现代人们经常选用的饮用品。

而咖啡中的咖啡因之类的物质和咖啡伴侣中植物末（奶精）对人体的健康有没有危害呢？为此我们用大蒜作为材料研究咖啡和咖啡伴侣对细胞染色体畸变的影响，实验主要通过检测细胞微核诱发率，得到咖啡或咖啡因对细胞的影响程度。

1、材料与方法1.1材料1.1.1 材料：大蒜雀巢速溶咖啡雀巢速溶咖啡伴侣1.1.2 试剂： NaN3 HCL 卡诺固定液 70%乙醇改良苯酚品红1.1.3 仪器：培养皿量筒烧杯玻璃棒电子天平手套离心管单面刀片盖玻片载玻片显微镜1.2方法1.2.1 取材：将大蒜置于24 ℃水中浸泡24 h,选择根长整齐一致，不定根长约0.5－1cm左右的大蒜随机分组。

1.2.2 处理各实验组：配置50mmol/L的NaN3溶液作为阳性对照组的培养液，用自来水作为阴性对照组的培养液，将咖啡和咖啡因配置成不同浓度梯度的溶液作为样品组的培养液，将大蒜置于各组培养液中培养24小时。

蚕豆根尖微核诱导一．微核微核(micronucleus，MN)是一种类似细胞核的结构，它位于间期细胞的细胞质中，其形状近似椭圆形、卵圆形或圆形，而且边缘光滑整齐。

虽然它在染色性质，结构特征和折光性等方面与细胞核(主核)相似，但它独立存在，不与主核连在一起。

微核大小不一，有的较大，有的较小，不仅在不同植物和同种植物的不同细胞中是这样，即使在同一细胞中也常常是如此。

无论它存在于何处，是何因子诱导而成，其体积总比所在细胞的主核小，其直径一般只有主核的1／20～l／3，所以称它为微核。

在通常情况下，绝大多数细胞没有微核，微核只存在于少数细胞中。

微核的产生与细胞的内外环境有关，主要是由于各种具有损伤性的理化因子影响了染色体的结构与功能，使胞内DNA的复制和细胞分裂受到干扰以及纺垂体的形成出现了障碍。

有人认为，细胞微核的形成有两条途径，一条是细胞G，期产生的染色体断片因没有着丝粒，在细胞有丝分裂后期不能被纺锤体牵引到细胞两极，故在细胞进入间期时，它们被排斥在细胞的主核之外，形成微核。

另一条是一些染色体因种种原因，使它们不能按时达到细胞的中央赤道板；或到达了细胞中央赤道板，但不能很好分离；或纺锤体的功能受到损伤，致使染色体不能被纺锤体牵引到细胞两极。

由于上述原因，使一些染色体滞留在赤道板附近或细胞质中，在细胞进行分裂时不能参与细胞主核的形成，成为游离于细胞中的微核。

此外，细胞受放射线严重照射时，一些DNA双链发生断裂，产生错误修复和间期细胞核严重膨胀，在某一部分向外隆起形成瘤状突起(核芽)，然后瘤状突起尾部收缩，脱离细胞核，游离在细胞质中也可形成微核。

也有人认为，细胞凋亡能引起细胞内ca2+浓度升高，进而激活DNA内切酶，使其活性增加，产生较多的DNA断片【1】或细胞组分不正常(如缺乏叶酸)也在细胞中形成微核。

由此可见，微核的形成有多种途经和多种方式，而且它们中的染色体也不完全一样，既可以是有着丝粒的染色体，也可是没有着丝粒的染色体断片，或者二者都有。

花露水对大蒜根尖细胞微核的诱导摘要：夏天，更多的人们选择方便、安全的花露水来驱赶蚊虫。

所以我们小组选择常见市售花露水对大蒜根尖细胞进行诱导。

选取不同浓度的花露水（0%，5%，25%，50%，75% ) 为诱变剂 , 分别处理大蒜的根尖细胞, 用微核检测法确定大蒜根尖细胞的微核率。

大蒜根尖经过不同浓度的花露水处理液处理后, 根尖颜色明显发黄。

微核诱变试验显示, 不同浓度的花露水处理大蒜根尖细胞可诱发不同频率的微核率, 浓度在0-50%范围内，微核率随着花露水浓度的升高呈增加趋势，浓度大于50%，微核率随着花露水浓度的升高呈降低趋势。

因此，花露水对大蒜根尖细胞有一定的诱导作用。

关键词：花露水大蒜根尖细胞微核前言：驱蚊花露水是居民夏季防蚊最常用的卫生用品之一,是在普通花露水的基础上配以适量驱避剂而成。

目前,避蚊胺、驱蚊酯、羟哌酯和植物精油是常见的蚊虫驱避剂。

驱蚊酯又称丁基乙酰氨基丙酸乙酯、BAAPE，IR3535，伊默宁，是一种塑化剂，也是广谱、高效的低毒昆虫驱避剂，它对苍蝇、虱子、蚂蚁、蚊子、蟑螂、蠓虫、牛虻、扁蚤、沙蚤、沙蠓、白蛉、蝉等都有良好的驱避效果；它的驱避作用时间长，能在不同气候条件下使用。

据文献报道，其小鼠急性经口LD50为10 000 mg /kg。

市场上现在以驱蚊酯为有效成分的驱蚊产品主要有4% 宝宝金水舒爽驱蚊花露水、4%柏纷婴儿护肤防蚊液、4.5%六神驱蚊花露水、11.5% 强生婴儿驱蚊液等。

采用大蒜为实验材料，具有许多优点：①用鳞茎进行无性繁殖，避免了有性繁殖过程中的遗传性变异，具有遗传背景稳定的优势，目前已有利用大蒜根尖细胞检测水质、大气污染研究的报道；②分布广、材料易得，不受地区和季节的限制；③培养方便，操作简单，蒜瓣去皮后将基部浸入净水中即可萌生新根，无需其他条件，且蒜瓣体积较小，萌生新根的数目较多；④价格低廉，对诱变剂敏感，是一种理想的试验材料。

1 材料与方法1.1 材料1.1.1 供试材料大蒜根尖、六神花露水。

洗手液对大蒜根尖的微核诱导摘要本实验选用大蒜根尖为实验材料，某品牌洗手液为待测样品，依据化学诱变剂可以改变细胞染色体复制、分离中的完整性及数目，从而产生有染色体或其片段形成微核结构的原理，展开实验。

其中用蒸馏水设置一组阴性对照。

关键词洗手液、大蒜、微核诱导前言微核（micronucleus, 简称MCN）也叫卫星核，是真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式，呈圆形或椭圆形，游离于主核之外，大小应在主核1/3以下，折光率及细胞化学反应性质和主核一样，也具合成DNA的能力。

微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的。

一般认为微核是由有丝分裂后期丧失着丝粒的染色体断片形成的。

一、诱导对象及方法：1.实验材料的培养本实验选取大蒜根尖为实验材料。

将筛选好的大蒜（2头）放盛有蒸馏水的小烧杯中，液面刚好淹没大蒜底部以保证根尖垂直、同步生长。

室温培养约2-4天，待根尖长出2-3 cm即可备用。

2.待测液处理将某品牌洗手液分别稀释5倍、10倍、50倍、100倍、200倍，配置成20 ml的溶液。

将备用的大蒜根尖浸于相应浓度的待测液中（2颗/浓度）。

另外取2颗备用大蒜根尖浸于蒸馏水中，作为阴性对照。

室温处理时间为48 h。

3.恢复培养取出待测液中的大蒜根尖用蒸馏水反复冲洗3-5次，1-2 min/次，再置于盛有蒸馏水的小烧杯中继续室温培养24 h。

4.解离与染色恢复培养后将根尖剪下约2 cm，分别置于1M的盐酸溶液中、60°C水浴中经10 min解离取出。

取一个根尖用蒸馏水冲洗后放在干净的载玻片，用吸水纸吸取根尖周围的水分，取根部尖端约0.5-1 cm进行染色。

将一滴吉姆萨染液滴于待染的根尖，染色约10-15 min。

5.制片与镜检吸取根尖周围的染液，滴一滴45%的醋酸溶液，盖上盖玻片，轻压。

用吸水纸包住玻片，用铅笔的橡皮头敲打盖玻片至标本呈散开的云雾状。