当前位置：文档之家 › 抗可提取性核抗原(ENA)抗体(6种)定性 化学发光蛋白 …

抗可提取性核抗原(ENA)抗体(6种)定性 化学发光蛋白 …

  • 格式：pdf
  • 大小：196.28 KB
  • 文档页数：9

下载文档原格式

  / 9

合集下载

自身免疫性疾病概述

自身免疫性疾病概述

SLE好发于生育年龄女性，多见于15~45岁年龄段， 好发于生育年龄女性，多见于 岁年龄段， 好发于生育年龄女性 岁年龄段 女∶男比例为 7 ~ 9∶1。 ∶ 。 SLE的流行病学在美国多地区的调查报告，其患病率 的流行病学在美国多地区的调查报告， 的流行病学在美国多地区的调查报告 为14.6~122/10万人，我国大系列的一次性调查在上海 万人， 万人 纺织女工中进行，其患病率为70/10万人，妇女中则高 万人， 纺织女工中进行，其患病率为 万人 万人。 达115/10万人。 万人 SLE临床表现复杂多样。多数呈隐匿起病，开始仅累 临床表现复杂多样。 临床表现复杂多样 多数呈隐匿起病， 个系统， 及1~2个系统，表现轻度的关节炎、皮疹、隐匿性肾 个系统 表现轻度的关节炎、皮疹、 血小板减少性紫癜等， 炎、血小板减少性紫癜等，部分患者长期稳定在亚临 床状态或轻型狼疮， 床状态或轻型狼疮，部分患者可由轻型突然变为重症 狼疮，更多的则由轻型逐渐出现多系统损害；也有一 狼疮，更多的则由轻型逐渐出现多系统损害； 些患者发病时就累及多个系统，甚至表现为狼疮危象。 些患者发病时就累及多个系统，甚至表现为狼疮危象。 SLE的自然病程多表现为病情的加重与缓解交替。 的自然病程多表现为病情的加重与缓解交替。 的自然病程多表现为病情的加重与缓解交替
免疫抑制剂（肾上腺皮质激素、 免疫抑制剂（肾上腺皮质激素、环 磷酰胺）治疗有一定疗效， 磷酰胺）治疗有一定疗效，但副作 用与不良反应严重， 用与不良反应严重，停药后常易复 发。
自身免疫病患者中， 自身免疫病患者中 ， 有相当一部分病人 的血液或其它体液中可检测到一种或多 种高效价的自身抗体， 种高效价的自身抗体 ， 能为自身免疫病 的诊断提供非常有价值的依据。 的诊断提供非常有价值的依据。

风湿病自身抗体

风湿病自身抗体
AnuA对SLE诊断的敏感性和特异性分别为56.0%-64.2% 和97.0%-98.8%，敏感性优于抗dsDNA，是SLE的标记 抗体之一。
AnuA可出现于SLE疾病进程的各个时期，并且是狼疮肾 炎的标记性抗体，与SLE病情活动的生物标志物。
AnuA与抗dsDNA抗体可不同时出现，AnuA出现早于抗 dsDNA抗体，这对SLE的早期诊断更为有利, 目前我科 已展开了第二代AnuA的检测。
精选课件
28
“肌炎特异性自身抗体” （Myositis-Specific Antibody ,MSA）
抗合成酶抗体（20％）：Jo-1抗体占所有抗合成酶抗体 的80%，其它还有：抗PL-7抗体、抗PL-12抗体、抗OJ 抗体等。
抗SRP抗体（抗信号识别颗粒抗体）（5％）与肌炎、心 脏扩大、对治疗的抵抗相关,5年生存率为20％
抗u1RNP抗体在混合性结缔组织病（MCTD）中 几乎均为阳性，且其滴度很高；
是区分结缔组织病和非结缔组织病的有力指标。 抗u1RNP抗体阳性的病人，常有双手肿胀、雷诺
现象、肌炎和指（趾）端硬化。 25－30％的SLE患者存在该抗体，一般与抗Sm
抗体一同出现。
精选课件
24
抗Sm/nRNP抗体
30％左右SLE存在该抗体。
SLE患者中，常与抗U1RNP抗体一同出现
与临床的相关性并不强，但有证据显示其与中枢 神经系统受累、肾脏病变、肺纤维化、心包炎有 关。有人认为可以作为疾病活动度的指标。
精选课件
23
抗U1RNP抗体
抗nRNP(nuclear RNP)：以抗核内的核糖核蛋白 而得名。临床上应用较多的是u1RNP抗体。通常 又把nRNP称之为u1RNP。
抗中性粒细胞胞质抗体

生化急诊项目收费标准

生化急诊项目收费标准

生化急诊项目收费标准（一）
生化急诊项目收费标准(二）
急诊其它项目收费标准（一)
生化平诊项目收费标准（一)
（二)
生化平诊项目收费标准（三）
罗氏全自动化学发光仪
化学发光项目收费标准（二)罗氏cobas600全自动化学发光仪
化学发光项目收费标准(三）罗氏cobas600全自动化学发光仪
免疫Ⅰ项目收费标准（一）
免疫Ⅰ项目收费标准（二）
巴彦淖尔市医院
免疫Ⅱ项目收费标准HAMILTN全自动酶免仪
形态项目收费标准（一）
形态项目收费标准（二)
血流变项目收费标准
细菌项目收费标准
PCR核酸扩增收费标准
罗氏PCR扩增仪
HIV项目收费标准Thermo MK3酶联免疫测定仪
委托外送项目
委托外送项目。

门诊特殊疾病的种类及申报所需诊断资料

门诊特殊疾病的种类及申报所需诊断资料
疾病种类
申报所需诊断资料
15.慢性胃功能衰竭（衰竭期）药物治疗
间隔3个月以上至少2次血肌酊报告转口进行治疗的病历（记载病情和治疗方案）.
16,骨髓增生异常综合征
（I）血常规；（2）骨髓检查报告单；（3）进行治疗的病历
（记出情和治疗方案）和病情证明书.
17.地中海贫血（珠蛋白生成障碍性贫血）
（1）血常规检查报告单；（2）血红蛋白电泳、脆性或地中海贫血基因测序检查报告；（3）血液专科出院证（记载病情和治疗计划）螃病诊断证明书.
9∙肝豆状核变性
(1)血/青铜蓝蛋白检蛉报告；(2)眼科裂隙灯检看报告；(3)尿铜检验报告；(4)肝铜检验报告；(5)门诊或住院病历.
10∙普拉德-财诲合征
(1)分子遗传学检查报告；(2)门诊病历或出院证明书.
疾病种类
申报所需诊断资料
11.原发性生长激素缺乏症
(1)骨龄检直报告；(2)血清胰岛素样生长因子I(IGF1.)检直报告；(3)生长激索(GH)激发试验报告；(4)垂体账像学检直报告；(5)门诊病历或出院证明.
18.风/附
心脏彩超报告单以及出院证（记躺情和治疗计划）或疾病诊断证明书.
19.干燥综合征
（I）免疫球蛋白；（2）抗核抗体；（3）抗可提取性核抗原（ENA）抗体谱;（4）类风湿因子检查报告；（5）角膜染色；（6）唇腺活检检查报告；（7）出院证（记载病情和治疗计划）螃病诊断证明书。
20.高血压性心脏病
门诊特殊疾病的种类及申报所需诊断资料（表
疾病种类
申报所需诊断资料
第一类特殊疾病
1.糖尿病
（1）不同时间两次以上的好脉血糖或糖化血红蛋白化验报告单（空腹及餐后2小时）；（2）门诊病历或出院证。
2.高血压

自身免疫性疾病的实验室检测

自身免疫性疾病的实验室检测

• 最多18种抗原 • 自动化操作 • 全自动化结果判读
抗ENA抗体的临床意义
1、抗Sm抗体 SLE的标志性抗体，30%--40%SLE患者抗
Sm抗体 阳性，不与SLE的活动性有关。抗Sm 抗体 对早期、不典型的SLE诊断意义较大。
2.抗核RNP(nRNP)抗体 MCTD的重要血清学依据，检出率大
自身抗体的特性
自身免疫性疾病都伴有特征性的自身抗体（谱） 是自身免疫性疾病的重要标志 与疾病的活动性相关 参与免疫病理性损伤。
自身抗体的临床意义
AID诊断与鉴别诊断 AID 病情评估与治疗监测 AID病程转归与预后判断 AID致病机制的研究
常检测的自身抗体
• 抗核抗体（ANA） • 抗可提取性核抗原抗体（ENA） • 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA） • 类风湿因子（RF） • 抗角蛋白抗体（AKA） • 抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体） • 抗心磷脂抗体（ACLA）
检检测测方方法法及及应应用用
• 间接免疫荧光检测：检测抗dsDNA抗体最特
异和最敏感的方法是用马疫锥虫或绿蝇短膜虫作 为抗原基质进行间接免疫荧光检测，是目前国内 外临床常规检测抗dsDNA抗体最常用的方法。 • 抗dsDNA抗体诊断SLE的特异性可达95%～100%， 但其敏感性仅为30%～50%，因此抗dsDNA抗体阴 性不能排除SLE的诊断。
内分泌性疾病 血液系统疾病 循环系统疾病
按器官特异性分为两类
系统性自身免疫病 (systemic autoimmune disease)或器官非特异性或全身性自身免疫病
器官特异性自身免疫病 (organ-specific
autoimmune disease)或局限性自身免疫病
自身免疫性疾病的共同特征

抗核抗体谱检测的临床意义

抗核抗体谱检测的临床意义

抗核抗体谱检测的临床意义（1）自身抗体：是指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原的免疫球蛋白。

抗细胞内抗原的抗体包括：1、抗细胞核成分的抗体（抗核抗体）。

2、抗细胞浆内成分的抗体（抗中性粒细胞及其他细胞胞浆抗体、抗线粒体抗体、抗核糖体抗体等）。

3、抗细胞表面抗原的抗体。

抗细胞外抗原的抗体包括：类风湿因子、抗甲状腺球蛋白抗体等。

抗核抗体（antinuclear antibody，ANA）:又称抗核酸抗原抗体，是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白（DNP）、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等作为靶抗原的自身抗体的总称，能与所有动物的细胞核发生反应，主要存在于血清中，也可存在于胸水、关节滑膜液和尿液中。

抗核抗体是一组对细胞核内的DNA，RNA，蛋白或这些物质的分子复合物的自身抗体。

按其核内各个分子的性能不同可将各ANA区分开来，如(一)抗DNA抗体，（二）抗组蛋白抗体，（三）抗非组蛋白抗体，（四）抗核仁抗体等。

每一大类又因不同抗原特性而再分为许多种类。

因此ANA在广义上是一组各有不同临床意义的自身抗体，更确切的名称应为抗核抗体谱。

ANA 主要存在于IgG，也见于IgM、IgA，甚至LgD及LgE中。

常见的核免疫荧光杭核抗体试验有以下几种图形：（1）均质型：核质染色均匀一致，这种染色型常与抗组蛋白和抗DNA抗体有关；（2）斑点型：核质染色呈斑点状，抗可提取性核抗原（ENA）抗体常呈这种染色型；（3）周边型：荧光染色围绕在核膜周围，它与抗DNA抗体有关；（4）核仁型：仅有核仁染色，具有抗4-6sRNA抗体呈现这种染色型；（5）着丝点型：在体外培养的细胞株（喉癌细胞）在核分裂相期时，可见到荧光染色的着丝点排列成特殊图型，而在鼠肝做底物中看不到此类图型，而被遗漏。

抗核抗体在多种自身免疫病中均呈不同程度的阳性率，如系统性红斑狼疮（SLE，95%~100%）、类风湿性关节炎（RA，10%~20%）、混合性结缔组织病（MCTD，80%~100%）、干燥综合症（SjS,10%~40%）、全身性硬皮病（85%~90%）、狼疮性肝炎（95%~100%）、原发性胆汁性肝硬化（95%~100%）等，但经皮质激素治疗后，阳性率可降低。

自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家建议

自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家建议

自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家建议自身抗体检测是自身免疫性疾病诊治中的重要工具，随着早期诊断、规化治疗的开展，自身抗体检测在疾病诊断、监测及预后评估中发挥的作用也日益受到重视。

但是，由于目前自身抗体检测缺乏统一的标准化检验方法，加上工作条件、传统诊疗习惯、结果判读以及医疗保险限制等方面的因素影响，导致自身抗体检测在临床应用上存在着不统一、不规现象。

因此，制定适合我国国情的自身抗体临床应用建议十分必要，可为广大临床医生和检验医师提供参考。

《自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家建议》（以下简称为《建议》）形成分3步进行。

首先由来自全国大型教学医院风湿免疫科医师通过检索国外文献并结合中国实际情况起草《建议》草案，然后将该草案提交由风湿免疫科、检验科、消化科、血液科、神经科等组成的专家组讨论，补充和提出修改意见，修改后的草案再次由起草成员讨论，形成初步建议，并对每项建议条目进行解读。

最后提交由中国免疫学会临床免疫分会专家进行投票评分（Delphi评分，分值从0分到10分，0分表示完全不赞同，10分表示完全赞同），计算所有专家打分的（平均值±标准差）作为每条建议的专家认可度。

《建议》包括13条，每一条都附有基于GRADE 法[1]的证据分级、证据质量和专家认可度及其95%的可信区间。

一、自身免疫性疾病概述自身免疫性疾病是由于免疫功能紊乱，机体产生针对自身抗原的病理性免疫应答反应而引起器官或系统损伤的一类疾病。

根据临床表现和病变累及的围，自身免疫性疾病可以分为系统性和器官特异性，前者以系统性红斑狼疮（SLE）、系统性硬化症（SSc）、类风湿关节炎（RA）、抗磷脂综合征（APS）等为代表；后者包括自身免疫性肝炎（AIH）、原发性胆汁性肝硬化（PBC）、自身免疫性甲状腺炎（AIT）、胰岛素依赖性糖尿病（IDDM）等。

自身免疫性疾病的发病机制尚不完全清楚，目前认为是遗传易感个体在环境因素如感染、紫外线及肿瘤、药物等多种因素共同作用下发生。

体外诊断试剂的分类

体外诊断试剂的分类

体外诊断试剂（I V D）分类1按注册法规分类根据产品风险程度的高低，体外诊断试剂依次分为三类、二类、一类产品。

（一）第三类产品：1．与致病性病原体抗原、抗体以及核酸等检测相关的试剂；2．与血型、组织配型相关的试剂；3．与人类基因检测相关的试剂；4．与遗传性疾病相关的试剂；5．与麻醉药品、精神药品、医疗用毒性药品检测相关的试剂；6．与治疗药物作用靶点检测相关的试剂;7．与肿瘤标志物检测相关的试剂;8．与变态反应（过敏原）相关的试剂。

（二）第二类产品：除已明确为第三类、第一类的产品，其他为第二类产品，主要包括：1．用于蛋白质检测的试剂；2．用于糖类检测的试剂；3．用于激素检测的试剂；4．用于酶类检测的试剂；5．用于酯类检测的试剂；6．用于维生素检测的试剂；7．用于无机离子检测的试剂；8．用于药物及药物代谢物检测的试剂；9．用于自身抗体检测的试剂；10．用于微生物鉴别或药敏试验的试剂；11．用于其他生理、生化或免疫功能指标检测的试剂。

（三）第一类产品：1．微生物培养基（不用于微生物鉴别和药敏试验）；2．样本处理用产品，如溶血剂、稀释液、染色液等。

2按管理分类按药品进行管理的体外生物诊断试剂一、按药品进行管理的体外生物诊断试剂包括：1．血型、组织配型类试剂；2．微生物抗原、抗体及核酸检测类试剂；3．肿瘤标志物类试剂；4．免疫组化与人体组织细胞类试剂；5．人类基因检测类试剂；6．生物芯片类；7．变态反应诊断类试剂。

按医疗器械管理的体外试剂1．临床基础检验类试剂；2．临床化学类试剂；3．血气、电解质测定类试剂；4．维生素测定类试剂；5．细胞组织化学染色剂类；6．自身免疫诊断类试剂；7．微生物学检验类试剂。

3.命名体外诊断试剂，包括可单独使用或与仪器、器具、设备或系统组合使用，在疾病的预防、诊断、治疗监测、预后观察、健康状态评价以及遗传性疾病的预测过程中，用于对人体样本（各种体液、细胞、组织样本等）进行体外检测的试剂、试剂盒、校准品（物）、质控品（物）等。

抗ENA抗体及临床意义

抗ENA抗体及临床意义

什么是抗ENA抗体，有何临床意义ENA（extractable nuclear antigen）的中文名称是可提取的核抗原，它不含组蛋白，可以溶于盐水而被提取，针对ENA的抗体即称抗ENA抗体，它与疾病的严重程度或活动性无明显相关。

（1）抗nRNP (nuclear RNP) 抗体以抗核内的核糖核蛋白而得名，由于其富含尿嘧啶（U），通常又把nRNP称之为U1RNP。

具有抗原性的U1RNP其分子量有70kD、30kD 和22kD。

U1RNP抗体在混合性结缔组织病中几乎均为阳性，且其滴度很高；在其他结缔组织病中阳性率低且滴度低；它是区分结缔组织病和非结缔组织病的有力指标。

抗U1RNP抗体阳性的病人，常有双手肿胀、雷诺氏现象、肌炎和指（趾）端硬化。

有人认为抗U1RNP 抗体阳性，则肾病发生率较低；如果抗dsDNA、抗Sm抗体同时存在，则发生狼疮性肾炎的可能性较大。

（2）抗Sm抗体以病人名字（Smith）命名。

已知Sm是核内小核糖体蛋白（snRNP）。

其抗原决定簇主要在于U1、U2、U4~U6 RNA连接的B和D蛋白多肽上，已知蛋白多肽的分子量B（29kD）、B’（28kD）、D（16kD）。

抗Sm抗体的蛋白多肽有较高特异性的为B和D带。

国际上通常用对流电泳和免疫双扩散法检测抗Sm抗体，其阳性率在SLE中为30％左右，抗Sm抗体对早期、不典型的SLE或经治疗缓解后的SLE回顾性诊断有很大帮助。

从理论上讲，测得抗Sm抗体的同时，多可测得U1RNP，但抗U1RNP抗体阳性，则抗Sm 抗体可为阴性。

抗U1RNP抗体在系统性硬化症伴多发性肌炎的重叠综合征中频率较高。

银屑病及雷诺现象的病人也可呈阳性。

（3）抗SSA／Ro抗体由于该抗体与干燥综合征相关，故取名SSA，也有人取名于最早检测到的病人名字Ro。

SSA与Ro的抗原性、生化特点一致。

SSA／Ro是含有Y－YRNA 的蛋白质，更多存在于胞浆内。

在以鼠肝为底物的ANA检测中，抗SSA抗体常阴性，而以Hep-2细胞为底物，则ANA为阳性。

自身抗体检测的临床应用与质量控制_万本愿

自身抗体检测的临床应用与质量控制_万本愿

自身抗体检测的临床应用与质量控制_万本愿自身免疫性疾病(autoimmune diseases，AID)是指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病。

自身抗体的存在与自身免疫性疾病并非两个等同的概念，自身抗体可存在于无自身免疫性疾病的正常人，特别是老年人，如抗甲状腺球蛋白、甲状腺上皮细胞、胃壁细胞、单链-DNA抗体等。

近年来，自身抗体检测在诊断自身免疫性疾病、判断疾病的活动程度、观察治疗效果、指导临床用药等具有重要的作用。

由于不同实验室可能采用不同的抗原基质，即使同样的抗原基质，其抗原固定方法也有差异或不同。

另外，由于不同的血清稀释方法以及操作者对不同荧光模式的识别能力的不同，均可影响到自身抗体的检测质量。

１常见自身抗体检测的临床应用大多数自身免疫性疾病患者的血清中可检测到高效价的自身抗体，虽然有些自身抗体在疾病中的作用尚未被证实，但其与疾病的相关性已获得认可。

特别是有些自身抗体的检测已纳入到某些自身免疫性疾病的诊断标准中，这些自身抗体的检测对自身免疫性疾病的诊断和鉴别诊断及愈后评估具有重要的临床意义。

随着对自身抗体的了解越来越深入，临床应用越来越广泛，免疫学技术进一步的提高，自身抗体检测已是临床免疫检测的一项重要的实验室指标。

在诊断自身免疫性疾病、判断疾病的活动程度、观察治疗效果、指导临床用药等具有重要的临床意义。

笔者简单介绍一下自身抗体的临床应用。

1.1抗核抗体(antinuclearantibody，ANA)是一组针对自身真核细胞的各种细胞核成分为靶抗原的自身抗体的总称。

ANA的性质主要是IgG、也有IgM、IgA和IgD。

其无器官和种属的特异性，故该类抗体可与所有动物的细胞核发生反应[1,2]。

现已证实ANA对很多自身免疫性疾病有诊断价值，在不同疾病中，特别是在风湿性疾病中，其抗体谱有一定的特征性。

此外，在桥本甲状腺炎、重症肌无力、多发性动脉炎等患者中也可能检测出ANA。

各种自身免疫性抗体的临床意义

各种自身免疫性抗体的临床意义

多数自身免疫病患者血清中都会出现自身抗体。

虽然有些自身抗体在疾病中的确切意义尚未得到严格的证实，但其与疾病的相关性已得到认可，所以这些自身抗体在自身免疫病的诊断和疗效评价方面都具有重要的意义。

一、类风湿因子类风湿因子（RF）是抗变性IgG的自身抗体，主要为19S的IgM，也可见7S的IgG及IgA。

它能与人或动物的变性IgG结合，而不与正常IgG发生凝集反应。

RF主要出现在类风湿性关节炎患者，约70％～90％的血清中和约60％的滑漠液中可检出IgG类RF，这很可能是自身IgG变性所引起的一种自身免疫应答的表现。

IgG是感染等原因诱导的免疫应答中的主干抗体，这些抗体与相应抗原结合时会发生变性；此外，在炎症等病理条件下滑漠或其他部位可能产生不正常的IgG；这些变性IgG就构成自身抗原，刺激免疫系统产生各种抗IgG抗体。

滑膜液中的IgG类RF与变性IgG结合而形成中等大小的免疫复合物，比血清中的IgM类RF更具有致病意义，因为这一类免疫复合物易于沉积在关节滑膜等部位，可激活补体，形成慢性渐进性免疫炎症性损伤。

RF的检测最初是用致敏绵羊红细胞凝集试验（Rose-Waaler 法）进行检测，目前最常采用IgG吸附的胶乳颗粒凝集试验；但此法的灵敏度和特异性均不高，而且只能检出血清中的IgM类RF。

IgG类和IgA类RF则需要用RIA或ELISA等方法检测。

RF在类风湿性关节炎患者中的检出率很高，RF阳性支持早期RA的倾向性诊断，如对年轻女性应进行RA和风湿热间的鉴别；而对非活动期RA的诊断，需参考病史。

但RF也象ANA一样，并不是RA 独有的特异性抗体。

在SLE病人均有50％RF阳性，在其他结缔组织病如SS、硬皮病、慢性活动性肝炎及老年人中均可有不同程度的阳性率。

二、抗核抗体抗核抗体（antinuclearantibodies，ANA）泛指抗各种核成分的抗体，是一种广泛存在的自身抗体。

ANA的性质主要是IgG，也有IgM和IgA，甚至IgD和IgE。

第三篇：检验科免疫室检验申请单(病房)

第三篇：检验科免疫室检验申请单(病房)

注:红字部分为新开展的项目
注：红字部分为新开展的项目
检验科生化室检验申请单
注：红字部分为新开展的项目*为将开展的新项目
检验科微生物室检验申请单
注：红字部分为新开展的项目
检验科血液和体液室检验申请单
注：红字部分为新开展的项目
注：红字部分为新开展的项目
说明：
1）因每天早晨标本多，受仪器速度的限制，不能保证按时出报告。

为此，建议非急查的只需在上午得到结果的标本送到北楼B 坐3层中心化验室，8：00以前的标本12:00可看到结果。

2）斜体下划线部分为待开展的项目
3）红字部分为新开展的项目。

免疫检验考试辅导：SLE的实验诊断

免疫检验考试辅导：SLE的实验诊断

1）免疫荧光法检测抗核抗体：该法以小鼠肝细胞、Hep-2细胞（人喉癌上皮细胞株）、Hela 细胞（宫颈癌细胞株）或小鼠腹水癌细胞等作为抗原片，以Hep-2细胞抗原片敏感性较高。

2）抗DNA抗体：分为天然（双链）DNA（ds-DNA）和变性（单链）DNA（ss-DNA）抗体。

ds-DNA抗体的测定方法有间接免疫荧光法（以短膜虫或马疫锥虫为抗原）、间接酶标抗体法（以短膜虫为抗原）、补体结合抗体法（以短膜虫为抗原，以抗人C3荧光抗体为第二抗体）、酶联免疫吸附试验（ELISA，以DNA为抗原）和放射免疫分析法（即Farr法）等多种方法。

前四种方法检测到的都是低亲和力的抗dsDNA抗体，或敏感性低，或检测结果不稳定、重复性差。

Farr法检测dsDNA抗体的特异性最高，结果可靠，重复性好，因此是目前国际上公认的检测抗ds-DNA抗体的标准方法。

当抗ds-DNA抗体结合率>20%时对诊断SLE有意义。

3）抗可提取性核抗原（ENA）抗体：目前抗ENA抗体的检测方法有双向免疫扩散或对流免疫电泳和免疫印迹法。

近年来随着分子生物学技术的发展，可以以重组抗原为底物，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测特异性抗体。

4）抗增殖细胞核抗原抗体。

（2）抗组蛋白抗体。

（3）抗核糖体抗体。

（4）抗Ku抗体。

（5）皮肤狼疮带试验。

风湿病的免疫检验

风湿病的免疫检验

风湿病的免疫检验风湿病的免疫检验自身免疫病(AID)是指由于过度而持久的自身免疫反应导致组织器官损伤并引起相应器官病变或临床症状的一类疾病。

风湿病是一类涉及到关节、软骨、肌肉等结缔组织的慢性疾病。

下面是yjbys店铺为大家带来的风湿病的免疫检验的知识，欢迎阅读。

一、抗核抗体测定(Antinuclear antibody ,ANA) ANA是抗细胞核多种成分的自身抗体，无种属及器官特异性。

ANA可分为抗DNA抗体、抗组蛋白抗体、抗非组蛋白抗体、抗核仁抗体及其他细胞成分抗体。

这些抗体共同组成ANA谱。

抗核抗体(ANA)的检查最常用于筛查全身性风湿病和自身免疫病。

ANA的检查可观察到能与细胞核内的核酸和蛋白抗原起反应的自身抗体。

细胞内可能存在对多种抗原起反应的抗体。

只有某种抗体的效价很高时，IFA才能加以鉴别。

1、homogenous(均质型)又称弥散型，相应的抗原是双链DNA和组蛋白复合物。

常见于SLE，特别是肾脏受累病人。

也可见于其它结缔组织病，如：风湿性关节炎，MCTD，干燥综合征，硬皮病，慢性活动性肝炎及原发性胆汁性肝硬变。

2、Peripheral(周边型)相应的抗原为双链DNA，多见于活动性SLE病人。

3、Speckle(斑点型)主要是针对ENA的抗体，包括Sm，RNP，SSA，SSB，Scl-70。

一般认为低效价的斑点型ANA不是结缔组织病特有的，实际上不代表临床异常。

高效价的抗Sm抗体多与SLE有关。

高效价的抗RNP自身抗体见于MCTD，但也见于SLE。

抗SSA和抗SSB抗体，见于S.S，也可见于SLE。

当病人有抗SSA抗体时，通常以皮肤表现和光过敏为主。

，也存在于ANA阴性狼疮和新生儿狼疮。

Scl-70抗体与硬皮病有关。

4、Nucleoli(核仁型)其靶抗原是与RNA分子相关的核蛋白。

多见于硬皮病。

5、Centromere(着丝点型)抗着丝点抗体(ACA)，多见于全身性硬皮病的CREST综合征。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

【包装规格】 48 人份/盒
【临床意义】 抗可提取性核抗原（ENA）抗体（6 种）定性检测试剂盒(化学发光蛋白芯片法)定性检 测血清样本中的 6 种可提取抗核抗体，包括 SSA/Ro、SSB/La、Jo-1、RNP、Sm、Scl-70。 它们的临床意义如下： （1）抗 SSA／Ro 抗体：SSA／Ro 是小分子细胞浆核糖核蛋白（scRNPs） ，是蛋白 和小分子核糖核酸形成的复合物。 抗原是含有 Y1－Y5 RNA 的蛋白质， 其分子量有 52KD 及 60KD。52KD 的多肽条带与干燥综合征（SS）相关，而 60KD 的多肽条带则更多存 在于 SLE 患者中。抗 SSA 抗体主要见于原发性干燥综合征，阳性率高达 60％～75％。 此外， 抗 SSA 抗体常与亚急性皮肤性红斑狼疮、 抗核抗体阴性狼疮、 新生儿狼疮等相关。 （2）抗 SSB/La/Ha 抗体：SSB 抗原是 RNA 多聚酶转录中的小 RNA 磷酸蛋白质。 其分子量为 48KD、47KD、45KD，其中 48KD 更具特异性。抗 SSB 抗体较抗 SSA 抗体 诊断干燥综合征更特异，是干燥综合征血清特异性抗体。原发性干燥综合征阳性率达 40％左右。其他自身免疫性疾病中如有抗 SSB 抗体，常伴有继发性干燥综合征。 （3）抗 Scl-70 抗体：天然 Scl-70 抗原是分子量为 100KD 的 DNA 拓朴异构酶 I 的 降解产物，因其主要见于硬皮病，且其相应抗原分子量为 70KD，故取名为抗 Scl-70 抗 体。系统性硬化症中阳性率达 20%～59%，重症弥漫性 PSS（SSc）中抗 Scl-70 抗体阳 性率高达 75％。
湖州数康生物科技有限公司
1
（4）抗 Jo-1 抗体：Jo-1 抗原是组氨酰-tRNA 合成酶在胞浆中以小分子核糖核蛋白 （scRNPs）形式出现，分子量为 50KD。抗 Jo-1 抗体对多发性肌炎/皮肌炎（PM/DM） 的诊断具有较强的特异性，阳性率为 25％-35%。 （5）抗 RNP 抗体：临床上应用较多的是 U1RNP 抗体，U1snRNP 由 U1RNP 和 9 种不同的蛋白质组成，所作用的抗原是 U1 小分子细胞核核糖核蛋白（U1snRNP） ，所以 又称抗 U1RNP 抗体。混合性结缔组织病(MCTD)的抗 RNP 阳性率>95%。抗体滴度与疾 病活动相关。抗 RNP 抗体在 SLE 中的阳性率为 40%左右，但几乎总伴有抗 Sm 抗体。 （6）抗 Sm 抗体： Sm 抗原是 U 族小分子细胞核核糖核蛋白（UsnRNP） 。Sm 抗体 和 SnRNP 是同一分子复合物中的不同抗原位点，故抗 Sm 抗体很少单独出现，它常于 U1RNP 抗体相伴，在 SLE 中阳性率为 30.2%，为 SLE 的标记抗体。
【样本要求】 1) 样本为静脉采血后自然析出的血清。 2) 血 样 采 集 后 ， 应 不 加 抗 凝 剂 ， 并 放 置 在 干 净 、 干 燥 的 试 管 内 静 置 １ 小 时 ， 离 心 （2000rpm× 5min） ，吸出血清，待测。 3) 溶血样本和黄疸血样本不宜检测；脂血的样本应先离心（20000rpm× 3min） ，去除上层油 脂后，取下层血清检测。 4) 若样本当天不检测而在一周内检测，则应放置在 2-8℃保存；若样本当天不检测而在一个
48 人/块×1 块 6ml×1 瓶 1 瓶（冻干品） 1 瓶（冻干品） 50ml×1 瓶 50ml×1 瓶 0.6ml×1 瓶 0.6ml×1 瓶 1份
【储存条件及有效期】 试剂盒在 2℃~8℃条件下储存； 试剂盒自检定合格日起有效期为六个月； 阴、阳性对照品复溶后应在 2 小时内使用。
【适用仪器及型号】 HD-2001A 生物芯片阅读仪（湖州数康生物科技有限公司）
【预期用途】 同时并行定性检测人血清样本中的抗 SSA/Ro、SSB/La、Jo-1、RNP、Sm、Scl-70 抗体， 用于夏普综合症 （混合性结缔组织病， MCTD） 、 系统性红斑狼疮 （SLE） 、 干燥综合症 （SS） 、 进行性系统性硬化症、多肌炎/皮肌炎（PM/DM）等的临床辅助诊断。
【参考临界值】 参见说明书附录 I：本批次阳性对照品中各指标临界系数。
【检验结果的解释】 1) 输入各指标临界系数（参见附录 I） ，由生物芯片阅读仪读取对照品及各样本在芯片上对 应于各指标的信号强度值 2) 通过阳性对照品各指标的信号值与相应指标临界系数的比值获得临界信号值，样本指标 信号值大于该指标临界信号值，则样本为该指标阳性；反之，则样本为该指标阴性。
湖州数康生物科技有限公司 5
【检测方法的局限性】 1、本品只能用于血清样本的测定而不能用于其他体液样本。 2、通过其他方法得到的值与本品测定结果不具有直接的可比性。
【产品性能指标】 1.分析灵敏度 采用公司内部灵敏度参考品（六个指标各一份）进行检测，检测结果为相应指标阳性。 2.精密度 采用公司内部精密性参考品进行检测 10 孔，检测结果为六指标的 CV 值均（n=10）≤15%。 3.特异性 3.1、阴性符合率：检测 10 份经欧蒙斑点法检测试剂盒检测结果为 SSA/Ro、SSB/La、Jo-1、 RNP、Sm、Scl-70 抗体阴性的血清，检测结果为阳性的血清不大于 1 份。 3.2、阳性符合率：检测经欧蒙斑点法检测试剂盒检测结果为 SSA/Ro、SSB/La、Jo-1、RNP、 Sm、Scl-70 抗体单一或者多指标阳性的血清（每个指标阳性份数≥10 份） ，结果为各指标阴 性份数不大于 1 份。 4.干扰实验 0.23mg/ml 胆红素、7 mg/ml 血红蛋白（牛血红蛋白）和 51.36 mg/ml 脂类（甘油三油酸酯） 对检测无影响；检测结果不受溶血、脂血和黄疸的干扰； 5.交叉反应 所用抗原的高纯度保证了本品的高特异性，未发现与其他自身抗（CENP-BRib.p.protein、
湖州数康生物科技有限公司 2
【主要组成成份】 见表 1
表 1 抗可提取性核抗原（ENA）抗体（6 种）定性检测试剂盒组分表
1.蛋白芯片集成块（各种指标的抗原微阵列 NC 膜集成模块） 2.反应液（酶标羊抗人 IgG，稳定剂稀释） 3.阳性对照品（阳性血清稀释冻干品） 4.阴性对照品（阴性血清稀释冻干品） 5. 浓缩洗液（Tris-Hcl+Tween+Nacl 缓冲液） 6. 样品稀释液（蔗糖+PB 缓冲液） 7.检测液 A（过氧化物稳定剂和过氧化氢的混合物） 8.检测液 B（鲁米诺和增强子的混合物） 9. 说明书
【试验原理】 抗可提取性核抗原（ENA）抗体（6 种）定性检测试剂盒(化学发光蛋白芯片法)基于间 接化学发光酶联免疫方法、蛋白芯片技术检测血清中的抗 ENA 抗体。检验原理如下： 1） 将 SSA/Ro、SSB/La、Jo-1、RNP、Sm、Scl-70 等 6 种 ENA 抗原以微阵列方式固定在硝 酸纤素膜上制备成蛋白芯片。 2） 加入待检样本，经第一次温育，待检样本中抗 ENA 抗体与蛋白芯片固定的抗原特异性 结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上以微阵列方式只留下各种特异性结 合的抗原抗体复合物。 3） 加入 HRP 酶标记抗体，经第二次温育，与固相载体上抗原抗体复合物特异性结合，形 成“抗原---抗体---HRP 酶标记抗体”复合物。洗涤后，固相载体上的酶量体现待检样本中 各个抗 ENA 抗体含量。 4） 加入化学发光底物，HRP 酶催化底物经化学发光产生光信号。 5） 利用生物芯片阅读仪对化学发光光信号进行捕获和数字化转化，并根据光信号的强弱， 可以检测出待检样本中每个指标抗体含量。
湖州数康生物科技有限公司
4
6） 洗涤：弃去芯片反应孔内液体，并用洗涤液进行冲洗一次，剥离蛋白芯片集成块的上部 将蛋白芯片集成块下部放入洗盒中加入洗涤液， 并将洗盒直立固定于恒温摇床内， 设定恒温 摇床运行参数为 37℃、250rpm，温育振荡 8 分钟，弃去洗盒内洗涤液。共洗涤四次。 7） 发光：将洗涤完成的蛋白芯片集成块拍干，在每个芯片的膜表面加入 20μl 已混合 15 分 钟的检测液 A 和 B 混合液，静置 1.5 分钟。 8） 阅读与数据分析：将蛋白芯片集成块放入生物芯片阅读仪，软件自动读取图象（时间 60s） ，设置阳性对照和阴性对照的位置，输入各指标临界系数，分析各被测样本的测试结果 并打印数据报表。 质量控制 1） 单个芯片反应孔有效性： 若同一芯片反应孔内阳性对照指标（IgG）检测信号值>500,且阴性对照指标（BSA）检测信 号值<150，则判定该芯片反应孔检测结果有效；反之，则该芯片反应孔无效。 2） 实验整体有效性控制： A）效。 B） 根据临界系数判定， 阳性对照品判定 6 指标均为阳性， 阴性对照品判定 6 指标均为阴性。 3） 同时符合上述两个条件则判定整体实验有效；有任一条件不符，则试验无效。
Mi-2、histone、dsDNA）之间的交叉反应。
6.稳定性 本品试剂盒 4℃放置 6 个月或置（37±1℃）4 天，检测产品性能合格。
【注意事项】
湖州数康生物科技有限公司 6
1、 阴、阳性对照品已经过 HBsAg、梅毒抗体、HCV 抗体、HIV1&2 抗体检测均为阴性。 2、 不同批号的试剂盒所含组分不可混用。 3、 避免试剂和样本的交叉污染以免造成错误结果。 4、 本品为一次性使用的产品，不可重复使用。 5、 有效日期已注明，请勿在有效日期后使用。 6、 本品的检测结果只作为医生的辅助诊断依据。
抗可提取性核抗原（ENA）抗体（6 种）定性 检测试剂盒(化学发光蛋白芯片法) 使用说明书(48 人份)
【产品名称】 通用名称：抗可提取性核抗原（ENA）抗体（6 种）定性检测试剂盒(化学发光蛋白芯片法) 英文名称：Qualitative kit for anti-ENA antibody （Protein Chip-Chemiluminescence）
湖州数康生物科技有限公司 3
月内检测，则应放置在-20℃保存。样本冻融之后，应立即检测，不宜反复冻融。 5) 样本应避免微生物污染。
【试验方法】 试验准备工作 1） 取出试剂盒，在实验室内平衡至室温（15-30C） 。注：试剂盒内各组份为一次性使用， 不可回收重复使用。整个实验过程操作人请戴乳胶手套操作。 2） 样本稀释： （1）待检测血清样本用样品稀释液按照 1：101 稀释，比如 5ul 样本加入 500ul 样品稀 释液； （2）阳性对照品、阴性对照品中分别加入 120ul 纯化水复溶。 3） 浓缩洗涤液稀释：用纯化水稀释 15 倍。温育至 25C 左右。 4） 调试恒温摇床，确认可以正常运行。 试验过程 1） 加样：用 200μl 微量移液器依次吸取阴性对照品、阳性对照品、待测样品各 100μl 加入 芯片个反应孔内，避免产生气泡，每吸取一个样本应更换一个枪头。 注：在开始温育前加完所有样本。 2） 温育第一次：将已加样完成的芯片，平放固定于恒温摇床内，设定恒温摇床运行参数为 37℃、250rpm，温育振荡 30 分钟。 3） 洗涤：弃去芯片反应孔内液体，并用洗涤液进行冲洗一次，将芯片放入洗盒中加入洗涤 液，并将洗盒直立固定于恒温摇床内，设定恒温摇床运行参数为 37℃、250rpm，温育振荡 8 分钟，弃去洗盒内洗涤液。共洗涤四次。 4） 加反应液：在芯片各反应孔内加入 100μl 反应液，避免产生气泡。 5） 温育第二次：与温育第一次操作方法相同。