实验方案_低温乙醇法从人血清中提取免疫球蛋白

免疫球蛋白的合成和提取涉及到多个步骤。

首先，免疫球蛋白是由免疫系统产生的一种蛋白质，具有特异性，可以与抗原结合，发挥抗体、凝集和促进细胞毒性等功能。

免疫球蛋白的合成和提取通常从血液或血浆中提取。

血浆中包含了免疫球蛋白，而健康人的血浆可以用于提取免疫球蛋白。

在提取过程中，通常使用低温乙醇蛋白分离法分段沉淀提取免疫球蛋白组分，经超滤或冷冻干燥脱醇、浓缩和灭活病毒处理等工序制得。

其纯度应不低于90%。

此外，基因工程技术也是合成免疫球蛋白的一种方法。

这种方法通过基因重组技术，将编码免疫球蛋白的基因导入到细胞中，让细胞表达并产生免疫球蛋白。

在临床应用上，免疫球蛋白主要用于预防麻疹和传染性肝炎等疾病。

此外，免疫球蛋白还用于治疗某些自身免疫性疾病和感染性疾病。

在某些情况下，人体内的免疫球蛋白数量不足，需要从外部补充。

除了直接从血浆中提取外，还可以通过基因工程技术人工合成免疫球蛋白。

总的来说，免疫球蛋白的合成和提取是一个复杂的过程，需要考虑到多个因素，包括蛋白质的结构、生物活性、安全性以及生产成本等。

浅谈免疫球蛋白在儿科临床的应用研究中图分类号：r72 文献标识码:a 文章编号：1007-0745（2011）10-0142-01摘要：igg是免疫球蛋白的主要成分，约占机体免疫球蛋白总量的75％。

1970年，静脉用免疫球蛋白(intravenousimmunoglobulin，ivig)伴随血浆分离技术的发展出现。

ivig可作为一种免疫调节治疗方法来治疗许多炎性疾病、感染和自身免疫性疾病。

ivig被广泛用于儿科自身免疫性疾病及多种继发性、原发性免疫缺陷病的治疗。

在免疫调节和防止感染方面发挥了极其重要的作用，现综述ivig对自身免疫性疾病及全身炎性疾病等的作用机制及其在儿科临床的应用研究。

关键词：静脉注射免疫球蛋白免疫调节儿科1.静脉注射免疫球强白疗法的产生具有抗体活性的球蛋白的是免疫球蛋白，由浆细胞所产生。

按照给药途径可分为静脉注射和肌肉注射。

cohn等于1945年首次从人血浆中提纯免疫球蛋白采用低温乙醇提取法提出，用于治疗免疫缺陷病、麻疹、甲型肝炎等。

1952年首先采用丙种球蛋白肌肉注射替代治疗先天性无丙种球蛋白血症。

肌肉注射存在局部注射疼痛、次数不宜过多、用量不能过大、达有效浓度的时间长等局限性。

2o 世纪7o年代，人们研制出来剂量可加大、副作用小的静脉注射用免疫球蛋白。

其被广泛应用于各种自身免疫病、感染性疾病和免疫缺陷病。

mg来自于正常人血浆。

人血浆内免疫球蛋白分为五类，即免疫球蛋白g(igg)、免疫球蛋白a(iga)、免疫球蛋白m(igm )、免疫球蛋白d (igd)和免疫球蛋白e(ige)。

其中igg是最主要的免疫球蛋白，约占人血浆丙种球蛋白的75％一80％，是抗感染的主要抗体，大多数抗菌、抗病毒抗体和抗毒素都为igg类。

近年来随着对免疫球蛋白作用机制的深入研究，ivig在儿科临床的应用亦越来越广，且静脉注射免疫球蛋白疗法也在逐渐规范化，下面就其作用机制和临床应用进行综述。

2.ivig的作用机制研究认为细胞凋亡可由于ivig可结合补体而受到影响，t淋巴细胞亚群受到调节、巨噬细胞、树枝状细胞、b淋巴细胞补体和其他效应细胞的作用，而在免疫介导异常的疾病这些细胞之间相互作用中起关键作用。

人血丙种球蛋白制造及检定规程本品系由乙型肝炎疫苗免疫健康人的血浆或血清经低温乙醇法提取的免疫球蛋白制剂。

含两种球蛋白90%以上。

用于常见病毒性感染的被动免疫，主要用于预防麻疹和传染性肝炎。

1 制造1.1制造要求与《人血白蛋白（低温乙醇法）制造及检定规程》中1.1项规定相同。

1.2制造工艺1.2.1采用低温乙醇法。

可含适宜稳定剂（如含甘氨酸，应为0.3或0.4mol/L）。

1.2.2分批每批制品最少应由1000名以上健康献血员的血浆（清）混合制成。

同一制造工艺同一空中溶解稀释的制品作为一批，不同滤器除菌过滤或不同机柜冻干的制品应分为亚批。

1.2.3半成品检定液体制剂于除菌过滤后应做理化检查（残余乙醇含量≤0.03%）及热原质试验，并按亚批抽样做无菌试验。

直接分装时应留样做上述实验。

1.2.4 冻干半成品经检定合格后及时分装，并按《人血白蛋白（低温乙醇法）制造及检定规程》1。

2。

5项规定进行冻干，但制品温度不得超过35℃。

1.3剂型与规格1.3.1剂型分为液体及冻干两种。

1.3.2规格液体制剂蛋白质浓度为10%。

液体和冻干制剂每瓶（支）蛋白质装量均为150mg、300mg。

1.4制品重滤和再制与《人血白蛋白（低温乙醇法）制造及检定规程》中1.4项相同。

2 成品检定2.1抽样每批成品应抽样做全面检定，不同机柜冻干的制品应分别抽样做无菌试验及水分测定。

2.2物理检查2.2.1外观冻干制剂应为白色或灰白色的疏松体，无融化迹象。

液体制剂和冻干制剂溶解后溶液应为接近无色，可带乳光，或淡黄色澄明液体，不应含有异物、混浊或摇不散的沉淀。

2.2.2冻干制剂溶解时间冻干制剂加入20～25℃标示量的灭菌注射用水后，应在15分钟内完全溶解。

2.2.3热稳定性试验液体制剂置57±0.5℃水浴保温4小时后，应无凝胶化或絮状物。

2.3化学检定按《生物制品化学检定规程》进行。

2.3.1水分冻干制剂的水分含量应≤3%（g/g）。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202011408376.8(22)申请日 2020.12.05(71)申请人 贵州泰邦生物制品有限公司地址 550025 贵州省贵阳市花溪区竹林村(72)发明人 刘勇　邓靖　张尧　李丹　肖春桥　杨龙　陈云华　赵学梅　(74)专利代理机构 贵州派腾知识产权代理有限公司 52114代理人 周黎亚(51)Int.Cl.C07K 16/06(2006.01)C07K 1/36(2006.01)C07K 1/30(2006.01)C07K 1/34(2006.01)C07K 1/18(2006.01)C07K 1/14(2006.01)(54)发明名称一种快速从血浆提取人免疫球蛋白的方法(57)摘要本发明涉及生物制品技术领域，具体是一种快速从血浆提取人免疫球蛋白的方法。

本发明以血浆为原料，采用特定浓度的辛酸直接进行沉淀，减少组分反应步骤，最终产品质量好、收率高，基本不含活化凝血因子Ⅺ等杂质，能有效避免产品使用过程中产生致栓性风险，降低产品发生血栓不良反应。

本发明的生产方法简单，工艺周期短，不需要进行血浆低温乙醇工艺中组分反应步骤，能够快速制备免疫球蛋白，尤其适用突发性大规模疫情感染特异性免疫球蛋白的制备，为患者快速提供高效价、高安全性的特异性免疫抗体制剂。

权利要求书1页 说明书7页CN 112500477 A 2021.03.16C N 112500477A1.一种快速从血浆提取人免疫球蛋白的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)使用单采血浆技术，采集健康献浆员血浆、经疫苗免疫的献浆员血浆或者突发性疫情感染的康复者的血浆；(2)将步骤(1)中的血浆于20‑25℃条件下融化，用醋酸缓冲液稀释血浆，加入辛酸进行辛酸沉淀反应，沉淀杂蛋白，过滤去除沉淀，收集上清液；(3)将步骤(2)的上清液，补加辛酸进行辛酸病毒灭活，灭活后进行深层过滤，收集上清液；(4)将步骤(3)得到的经过深层过滤后的溶液，经过离子交换层析，收集流穿液；(5)将步骤(4)的流穿液进行超滤透析，得到透析后料液；(6)将步骤(5)中透析后料液进行纳米膜过滤，纳米膜孔径为20nm，得到过滤液；(7)将步骤(6)的过滤液加入山梨醇，进行巴氏病毒灭活，得到巴氏灭活后料液；(8)将步骤(7)的巴氏灭活后料液进行超滤透析，得到原液；(9)将步骤(8)的原液进行半成品配制，进行除菌过滤、分装，得到成品。

专利名称：低温乙醇提取静注人免疫球蛋白的方法专利类型：发明专利
发明人：安康,张宝献,张其昌,王猛,滕世超,郭心怡申请号：CN201410003241.1
申请日：20140103
公开号：CN103665100A
公开日：
20140326
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种低温乙醇提取静注人免疫球蛋白的方法，依次分离FⅠ、FⅡ+Ⅲ、FⅢ、FⅡ，在对FⅡ沉淀超滤、纯化时，依次采用超滤脱醇、巴氏灭活、一次沉淀分离、二次沉淀分离、二次沉淀超滤脱醇的工艺。

本发明在过滤时将压滤机的温度控制在较低范围内，在沉淀分离工艺采用了适当的电导率，提高了免疫球蛋白的收率，在对免疫球蛋白纯化精制时，进行了两次沉淀分离，两次沉淀分离均采用了二级澄清除菌过滤，通过四级过滤技术，去除了制品中的不溶性颗粒，提高了制品的澄清度和收率。

申请人：华兰生物工程重庆有限公司
地址：408102 重庆市涪陵区鹤凤大道66号(李渡工业园区内)
国籍：CN
代理机构：重庆华科专利事务所
代理人：夏洪
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I 血液及组织样品的制备分析组织中某种物质的含量、探索物质代谢的过程和规律，经常使用动物的肝、肾、脑、粘膜和肌肉等组织，也选用全血、血浆、血清或者无蛋白血滤液等血液样品，有时也采用尿液、胃液等完成各种生化实验。

掌握以上各种实验样品的正确处理和制备方法是保证生化实验顺利进行的关键。

一、血液样品(一）采血测定用的血液，多由静脉采集。

一般在饲喂前空腹采取，因此时血液中化学成分含量比较稳定，采血时所用的针头、注射器，盛血容器要清洁干净；接血时应让血液沿着容器壁慢慢注入，以防溶血和产生泡沫。

(二）血清、全血及血浆的制备1.血清的制备血清是全血不加抗凝剂自然凝固后析出的淡黄清亮液体。

制备方法是：将刚采集的血液直接注入试管或离心管中。

将试管放成斜面，让其自然凝固，一般经3h 血块自然收缩而析出血清；也可将血样放入37 ℃恒温箱内，促使血块收缩，能较快约析出血清。

为了缩短时间，也可用离心机分离（未凝或凝固的均可离心），分离出的血青，用吸管吸出置于另一试管中，若不清亮或带有血细胞，应重离心，加盖冷藏备用。

2.全血及血浆的制备取清洁干燥的试管或其它容器，收集动物的新鲜血液，立即与适量的抗凝剂充分混合，所得到的抗凝血为全血。

每毫升血液中加入抗凝剂的种类可以根据实验的需要进行选择，但是用量不宜过大，否则将影响实验的结果。

将已抗凝的全二于2，000r / min 离心10min ，沉降血细胞，取上层清液即为血浆。

血浆比血清分离得快而且量多：两者的差别，主要是血浆比血清多含一种纤维蛋白原，其它成分基本相同。

3.抗凝剂凡能够抑制血液凝固反应进行的化合物称为抗凝剂。

抗凝剂种类甚多，实验室常用的有如下几种，可根据情况选择使用。

（1）草酸钾（钠）优点是溶解度大，可迅速与血中钙离子结合，形成不溶性草酸钙，使血液不凝固。

每毫升血液用1-2mg 即可。

配制方法：配制10％草酸钾水溶液二吸取此液0.1ml 放入一试管中，慢慢转动试管，泛草酸钾尽量铺散在试管壁上，置80 ℃烘箱烤干（若超过150 ℃则分解），管壁即呈一薄层三色粉末，加塞备用。

专利名称：一种低温乙醇法去除人免疫球蛋白热原质的方法专利类型：发明专利
发明人：雷文成,吕勇,时凯,叶刚,周爱辉,庞利民
申请号：CN201510969585.2
申请日：20151222
公开号：CN105367651A
公开日：
20160302
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及低温乙醇法去除人免疫球蛋白热原质的方法，可有效解决去除人免疫球蛋白热原质，以满足对人免疫球蛋白的需要问题。

方法是，将热原不合格的人免疫球蛋白制品用生理盐水稀释，加入组分Ⅰ+Ⅲ或组分Ⅲ沉淀，用醋酸盐缓冲液调整溶液pH值，降温至0℃±0.05℃，再加入乙醇，调整pH值；加入硅藻土，压滤，得组分III压滤液，加入氯化钠，调整pH值，加入乙醇反应，压滤，收集沉淀，沉淀用注射用水溶解，调节pH值，静置过滤，超滤，透析，加入麦芽糖，调节pH 值，即成，本发明方法科学先进，易操作，效果好，可有效的去除人免疫球蛋白制品中热原质，变废为宝，减少环境污染。

申请人：郑州莱士血液制品有限公司
地址：450001 河南省郑州市高新区玉兰街22号
国籍：CN
代理机构：郑州天阳专利事务所(普通合伙)
代理人：聂孟民
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人血白蛋白（低温乙醇法）制造及检定规程本品系由乙型肝炎疫苗免疫健康人的血浆或血清经低温乙醇法分离提取，经60℃10小时加温灭活病毒后制成。

白蛋白含量96%以上，含适宜稳定剂，不含防腐剂和抗生素，专供静脉输注。

主要用于治疗创伤性、出血性休克、严重烧伤以及低蛋白血症等。

1 制造1.1 制造要求1.1.1 新鲜分离的液体血浆、过期血分离的血浆、半成品、成品检定剩余血浆、轻度溶血或脂肪血浆、去除其他血浆蛋白的组分，均可用于制备。

所用之血浆或血清的来源应符合《原料血浆采集（单采血浆术）规程》。

1.1.2 血浆或血清应尽可能保持无菌，否则应及时投料制造或低温冰冻保存。

低温冰冻保存血浆量长保存期不应超过2年。

1.1.3制造工作室应符合工艺流程。

冷库及各种生产用具必须专用，严禁与其他异种蛋白质混用。

制造工作室的建筑应便于清洁、消毒、防霉。

在制造过程中为防止制品污染热原质，应采取各种有效措施，如降低操作室温度，注意无菌操作等。

各种直接接触制品的用具，用后应立即洗净，用前须经除热原质或灭菌处理。

1.1.4 生产用水应符合饮用水标准，直接用于制品的水应符合注射用水标准。

所用各种化学药品应符合《中国生物制品主要原材料试行标准》规定，未纳入试行标准者应不低于化学纯。

1.2 制造工艺1.2.1 采用低温乙醇法。

应含适量的稳定剂（每g蛋白质用0.16mmol辛酸钠或0.08mmol辛酸钠和0.08mmol乙酰色氨酸钠）。

1.2.2 热处理每批制品必须经60±0.5℃加温10小时处理。

热处理可在除菌过滤前或分装后24小时内进行。

1.2.3 分批同一制造工艺、同一容器混合的制品作为一批。

不同滤器除菌过滤或不同机柜冻干的制品应分为亚批。

1.2.4 半成品检定液体制剂于除菌过滤后应做理化检查（残余乙醇含量≤0.03%）及热原质试验，并应按亚批抽样做无菌试验。

直接分装时应留样做上述试验。

1.2.5 冻干除菌过滤后制品应及时分装、旋冻、冻干。

实验方案_低温乙醇法从人血清中提取免疫球蛋白低温乙醇法从人血清中提取免疫球蛋白的实验方案：实验目的：通过低温乙醇法从人血清中提取免疫球蛋白，获取纯度较高的免疫球蛋白样品。

实验原理：低温乙醇法是一种常用的蛋白质沉淀方法，其基本原理是在低温下，添加适量的乙醇，使蛋白质发生沉淀，从而实现分离纯化目的。

实验步骤：1.实验前准备：1.1.预先配制10%的乙醇溶液，使用冷藏保存。

1.2.准备人血清样品。

1.3.准备离心管和离心机。

2.实验操作：2.1.取一定体积的人血清样品，将其转移到离心管中。

2.2.在离心管中加入等体积的10%乙醇溶液。

2.3.混匀溶液，并在4℃下静置20-30分钟，使免疫球蛋白发生沉淀。

2.4.将离心管放入离心机中，以1500-2000g的速度离心15分钟，沉淀免疫球蛋白。

2.5.将上清液倒掉，并用凉蒸馏水轻轻洗涤沉淀2-3次，以去除杂质。

2.6.加入一定储存缓冲液（如磷酸盐缓冲液）重悬沉淀，得到免疫球蛋白样品。

2.7. 可进一步使用其他方法（如电泳、Western blot等）检测免疫球蛋白的纯度和活性。

3.结果分析：通过低温乙醇法提取的免疫球蛋白样品，可以通过其他实验方法来检测其纯度和活性。

同时，实验中的收率和纯度也可以根据实验结果进行分析和评估。

注意事项：1.实验操作要在低温下进行，以避免免疫球蛋白的降解和失活。

2.实验过程中离心操作要平稳，避免产生气泡和颗粒。

3.在操作过程中要小心避免受到污染，以确保提取的免疫球蛋白的纯度。

4.提取的免疫球蛋白样品可以进一步保存、分析和应用于实验研究中。

总结：低温乙醇法是一种简便、经济、有效的免疫球蛋白提取方法，适用于从人血清等样品中提取纯度较高的免疫球蛋白样品。

通过该实验方案，可以得到稳定、纯度较高的免疫球蛋白样品，为后续实验研究提供基础数据和支持。

需要注意的是，在实验过程中要严格控制实验条件，以确保实验结果的可靠性和有效性。

静注人免疫球蛋白（pH4）Jingzhu Ren Mianyiqiudanbai（pH4）Human Immunoglobulin（pH4）forIntravenous Injection本品系由健康人血浆，经低温乙醇蛋白分离法或经批准的其他分离法分离纯化，去除抗补体活性并经病毒灭活处理制成。

含适宜稳定剂，不含防腐剂和抗生素。

1基本要求生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。

2制造2.1原料血浆2.1.1血浆的采集和质量应符合“血液制品生产用人血浆”的规定。

2.1.2低温冰冻的血浆保存期应不超过3年。

2.1.2每批投产血浆应不少于1000人份。

每批应由1000名以上供血浆者的血浆混合而成。

2.1.3组分Ⅱ、组分Ⅱ+Ⅲ沉淀或组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ沉淀应冻存于-30℃以下，并规定其有效期。

2.2原液2.2.1采用低温乙醇蛋白分离法或经批准的其他分离法制备。

所采用的生产工艺应能使制品中IgG亚类齐全，其值与正常人血清IgG亚类分布相近（正常人血清IgG亚类分布参考值IgG1：60.3%～71.5%；IgG2：19.4%～31.0%；IgG3：5.0%～8.4%；IgG4：0.7%～4.2%）；应能保留IgG的Fc段生物学活性。

生产过程中不得加入防腐剂或抗生素。

2.2.2经纯化、超滤、除菌过滤后即为人免疫球蛋白原液。

2.2.3原液检定按3.1项进行。

2.3半成品2.3.1配制按成品规格配制，使成品中蛋白质含量不低于50g/L，并加入适量麦芽糖或其他经批准的适宜稳定剂。

2.3.2半成品检定按3.2项进行。

2.4成品2.4.1分批应符合“生物制品分批规程”规定。

2.4.2分装应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。

2.4.3规格每瓶含蛋白质1g（20ml）、1.25g(25ml)、2.5g(50ml)、5g(100ml)、10g.(200ml)。

蛋白质浓度为50g/L。

应为经批准的规格。

人免疫球蛋白Ren MianyiqiudanbaiHuman Immunoglobulin本品系由健康人的血浆，经低温乙醇蛋白分离法或经批准的其他分离法分离纯化，并经病毒灭活处理制成。

含适宜稳定剂，不含防腐剂和抗生素。

1 基本要求生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。

2 制造2.1 原料血浆2.1.1 血浆的采集和质量应符合“血液制品生产用人血浆”的规定。

2.1.2 低温冰冻的血浆保存期应不超过3年。

2.1.2 每批投产血浆应不少于1000人份。

每批应由1000名以上供血浆者的血浆混合而成。

2.1.3 组分Ⅱ、组分Ⅱ+Ⅲ沉淀或组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ沉淀应冻存于-30℃以下，并规定其有效期。

2.2 原液2.2.1 采用低温乙醇蛋白分离法或经批准的其他分离法制备。

原液生产过程中不得加入抗生素或防腐剂。

2.2.2 经纯化、超滤、除菌过滤后即为免疫球蛋白原液。

2.2.3 原液检定按3.1项进行。

2.3 半成品2.3.1 配制制品中可加适宜的稳定剂。

按成品规格以注射用水稀释蛋白质浓度，并适当调整pH值及钠离子浓度。

2.3.2 半成品检定按3.2项进行。

2.4 成品2.4.1 分批应符合“生物制品分批规程”规定。

2.4.2 分装应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。

2.4.3 规格每瓶含蛋白质150mg、300mg。

蛋白质浓度为10%。

应为经批准的规格。

2.4.4 包装应符合“生物制品包装规程”规定。

2.5 病毒去除和灭活生产过程中应采用经批准的方法去除和灭活病毒。

如用灭活剂（如有机溶剂、去污剂）灭活病毒，则应规定对人安全的灭活剂残留量限值。

3 检定3.1 原液检定3.1.1 蛋白质含量可采用双缩脲法(附录Ⅵ B第三法)测定，应大于成品规格。

3.1.2 纯度应不低于蛋白质总量的90.0%（附录Ⅳ A）。

3.1.3 pH值用生理氯化钠溶液将供试品蛋白质含量稀释成10g/L，pH值应为6.4～7.4(附录Ⅴ A)。

利凡诺—低温乙醇结合法分离的人血免疫球蛋白质量研究焦丽华;余蓉;姚萍;刘文方【期刊名称】《中国输血杂志》【年(卷),期】1993(6)4【摘要】本文对分别采用利凡诺—低温乙醇结合法(R—E 法)、低温乙醇法(E 法)和利凡诺—硫酸铵结合法(R—AS 法)分离的人血免疫球蛋白质量进行了对比观察。

结果用 R—E 法分离的免疫球蛋白纯度为96.67±0.93%,其中 IgG、IgA 和 IgM 组分占89.26±0.81%、6.29±0.38%和1.16±0.28%(n=10),IgG 单体和双体为95.96±1.38%,多聚体为3.04±0.73%,裂解物为1.02±1.04(n=7)。

用 E 法和 R—AS 法分离的同类制品纯度分别为89.20±5.45%和96.22±0.67%,IgG、IgA 和IgM 组分分别占88.59±4.87%、0.34±0.21%、0.15±0.09%(n=8)和88.90±1.46%、7.08±1.28%、0.24±0.29%(n=6)。

E 法制品中 IgG 单体和双体为98.43±0.57%,多聚体为0.96±0.25%,裂解物为0.62±0.33%(n=3)。

3种方法分离的免疫球蛋白制品经57℃加热4小时外观无明显变化。

【总页数】4页(P186-189)【关键词】免疫球蛋白;利凡诺法;低温乙醇法【作者】焦丽华;余蓉;姚萍;刘文方【作者单位】中国医学科学院输血研究所【正文语种】中文【中图分类】R392－33【相关文献】1.低温无水乙醇沉淀法提取牦牛血免疫球蛋白的工艺条件研究 [J], 金晶;张珍;张丽;赵文宝;梁春娜;张佩2.用改良的低温乙醇-利凡诺法分离人血浆蛋白 [J], 王清和3.进一步降低利凡诺-低温乙醇结合法生产的白蛋白中利凡诺残留量 [J], 杨守俊;卢传兰4.低温乙醇蛋白分离法中乙醇的质量控制 [J], 周仁花5.利凡诺法与低温乙醇法分离的白蛋白性质对比研究 [J], 余蓉;焦丽华;姚萍;刘文芳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。