核酸适体技术
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SELEX技术及核酸适体的介绍SELEX技术即指数富集的配基系统进化技术(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment,SELEX)。
利用该技术可以从随机单链核酸序列库中筛选出特异性与靶物质高度亲和的核酸适体 (Aptamer)。
SELEX技术的基本思想是体外化学合成一个单链寡核苷酸库,用它与靶物质混合,通过重复的筛选与扩增,洗去与靶物质不结合或与靶物质有高亲和力外的核酸分子,分离纯化与靶物质高度亲和的核酸适体。
SELEX技术及核酸适体具有库容量大,适应范围广泛;分辨率高,实用性强;亲和力高;筛选过程相对简便、快速、经济;适配子体积小等优势。
该技术体外诊断和体内治疗及药物的开发等方面都具有应用。
服务内容:1. 核酸适体的SELEX筛选(基于毛细管电泳技术)。
2. 适体与靶标结合及亲和力的验证。
3. 提供适体单克隆。
客户提供1. 蛋白质类靶标——可为蛋白质溶液/冻干粉/表达在细胞表面的蛋白质分子: (1) 如为蛋白质溶液提供50μg纯度>99%的蛋白质; (2) 告之蛋白质的确切名称,并附上生物或环境安全的相关信息; (3) 如为表达在细胞表面的蛋白质分子,请提表达该蛋白的细胞和空宿主细胞;由于筛选过程中需要活细胞,我们将为此种样品提供短时的细胞培养服务(收费),客户可提供可配制500ml培养基所需的材料。
2. 小分子物质靶标: (1) 提供50μg小分子与载体的偶联物(附偶联率检测报告); (2) 告之小分子的确切名称,并附上生物或环境安全的相关信息; (3) 提供游离的小分子物质(溶液或固体,视具体物质而定)。
我们提供 1. 能够与靶标结合,序列各异且亲和力(Kd)在10-8~10-10nmol/L的核酸适体单克隆若干(视最终测序结果); 2. 核酸适体亲和力检测(毛细管电泳法)结果; 3. 对应核酸适体单克隆测序的峰图; 4. 带有核酸适体(载体)单克隆的大肠杆菌菌液; 5. 完整的实验报告(实验步骤、筛选过程中的富集率数据及相关的照片等)。
核酸适体技术在食品安全分析中的应用徐敦明;吴敏;邹远;张强;吴崔晨;周昱;刘贤进【摘要】Aptamers are all new ligands with a high affinity for considerably differing molecules ranging from largetargets as proteins over peptides, complex molecules to drugs and organic small molecules or even metal ions. These molecules are identified and selected through an in vitro process called systematic evolution of ligands by exponential enrichment (SELEX). Aptamers are widely used, including medical and pharmaceutical basic research, drug development, diagnosis, and therapy. Analytical and separation tools bearing aptamers as molecular recognition and binding elements are another big field of application. The SELEX method was modified over the years in different ways to become more efficient and less time consuming, to reach higher affinities of aptamers selected and higher automation of process. In reviewing this technology, the article covers the topic, following a general introduction, under the headings: the SELEX protocol, the development of aptamers by use of SELEX, and the application of aptamers in food safety.%核酸适体(Aptamer)是经体外筛选技术(SELEX)筛选出的能特异结合蛋白质或其它小分子物质的寡聚核苷酸片段,对可结合的配体有严格的识别能力和高度的亲和力.经过十几年的发展,SELEX技术已经成为一种重要的研究手段和工具,被广泛应用到分子生物学、基因组学、临床医学等领域.高通量筛选的技术特点与Aptamer精确识别、易体外合成与修饰等特性,使得Aptamer在分析化学与生物医药研究方面具有广阔的应用前景.本文对提高筛选效率和效果为目标的核酸适体筛选技术新进展、核酸适体技术在食品安全分析中的应用进行了回顾,展望了核酸适体在食品安全分析上的应用前景.【期刊名称】《分析化学》【年(卷),期】2011(039)006【总页数】9页(P925-933)【关键词】核酸适体;指数富集配体系统进化;食品安全;残留分析;有机小分子;评述【作者】徐敦明;吴敏;邹远;张强;吴崔晨;周昱;刘贤进【作者单位】厦门出入境检验检疫局,厦门,361026;厦门出入境检验检疫局,厦门,361026;厦门大学化学化工学院,厦门,361005;江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所,南京,210014;厦门大学化学化工学院,厦门,361005;厦门出入境检验检疫局,厦门,361026;江苏省农业科学院食品质量安全与检测研究所,南京,210014【正文语种】中文1953年,DNA双螺旋结构的提出,是现代分子生物学诞生的里程碑[1,2]。
核酸适体技术研究发展现状
核酸适体技术是一种基于核酸分子的高度特异性识别和结合其他分子的技术。
它的研究发展现状可以从多个方面来进行分析。
首先,我们可以从技术原理和方法的角度来看。
核酸适体技术主要包括SELEX技术(Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment)和方法的改进。
SELEX技术是通过不断筛选和进化,使得核酸适体与特定的靶分子结合,从而获得高度特异性的适体。
近年来,科研人员对SELEX技术进行了许多改进,如分子进化技术的应用、高通量筛选技术的发展等,使得核酸适体的筛选效率和特异性得到了显著提高。
其次,从应用领域来看,核酸适体技术在生物医药领域具有广泛的应用前景。
例如,核酸适体可以作为药物靶向输送系统的一部分,用于治疗癌症、病毒感染等疾病。
此外,核酸适体还可以用于生物传感器、分子识别和分子成像等领域,为生命科学研究提供了重要的工具和方法。
另外,从研究热点和趋势来看,近年来,随着生物技术和纳米技术的发展,人们对核酸适体技术的研究越来越深入。
例如,一些
学者致力于开发新型的核酸适体筛选平台,以提高筛选效率和特异性;还有一些研究者将核酸适体技术与纳米材料相结合,开发出具
有生物传感和药物释放功能的纳米材料复合物,为生物医药领域带
来新的突破。
总的来说,核酸适体技术在研究发展现状方面取得了许多进展,从技术原理和方法、应用领域以及研究热点和趋势等多个角度来看,都表明了这一技术的巨大潜力和广阔前景。
希望未来能有更多的科
研成果和应用突破,推动核酸适体技术的进一步发展和应用。
核酸适配体识别原理核酸适配体识别原理是基于生物化学原理,通过适配体的选择性亲和性识别目标核酸序列的一种技术。
本文将从以下几个方面介绍核酸适配体的原理和相关知识。
一、核酸适配体的基本定义和作用核酸适配体是一种单链的DNA或RNA分子,它们具有特定的空间结构和亲和性,可以与目标核酸的特定位点结合,实现对目标核酸的无标记检测、定量和成像等。
二、核酸适配体的选择方法核酸适配体的选择可以通过体外进化技术,如选体法、SELEX法等。
选体法是利用化学标记的核酸诱导选择反应,筛选出具有亲和性的核酸适配体。
SELEX法则是通过多轮体外进化演化产生高亲和力的核酸适配体。
这两种方法的主要区别在于,选体法通过将两个核酸结合起来,筛选出与目标核酸结合最紧密的分子,而SELEX法要求在体外化学和物理环境下不断利用多轮筛选获得高亲和力的分子。
三、核酸适配体的结构和特点核酸适配体的结构通常是单链的DNA或RNA分子,具有平面或马鞍形。
它们能够通过空间结构方法识别目标核酸的特定序列,同时还具有高亲和力和选择性。
此外,核酸适配体的合成成本低,易于制备,因此被广泛应用于生物医学、生物技术等领域。
四、核酸适配体的应用核酸适配体的应用非常广泛,主要包括生物分析、诊断、药物传递和治疗等领域。
常见的应用,如荧光标记技术,可以通过搭配不同颜色的标记使实验结果更加直观。
此外,核酸适配体还可用于分析单个分子,对单个分子进行检测,避免了外部信息对分子系统的影响。
五、核酸适配体的发展前景核酸适配体作为一种新兴的生物技术,拥有广阔的应用前景。
目前在生物医学和生物技术领域的应用中,核酸适配体技术已经成为了切实可行的分析方式之一。
未来,随着逐渐成熟的技术和更加精细的研究,核酸适配体技术无疑会为更多领域的发展带来新的可能和机遇。
综上所述,核酸适配体技术的发展让人们看到了一个全新的生物接口,它将以自身独特的方式推动生物学和医学的研究。
未来,我们有理由相信,核酸适配体技术将在更广泛的领域得到应用。
核酸适体aptamer:一种具有潜力的肿瘤药物“靶向配基”核酸适体(aptamer)可描述为化学抗体,是用配体指数富集法系统进化(SELEX)技术筛选获得的单链DNA或RNA,借其自身形成的空间结构与靶标分子特异性识别,具有靶分子广、亲和力高、特异性强、易改造修饰等特点。
本文简述核酸适体作为肿瘤药物“靶向配基”的应用研究。
标签:核酸适体;靶向配基;肿瘤药物肿瘤的靶向疗法是利用特异性“靶向配基”的介导,将药物或其他杀伤肿瘤的物质选择性地运送到肿瘤部位、选择性地杀伤肿瘤细胞以提高治疗效果的一种治疗方法。
近年来国内外核酸适体(aptamer)介导的主动靶向给药研究成为热点。
核酸适体(aptamer)是经过一种新的体外筛选技术(systematic evolution of ligands by exponential enrichment,SELEX),从随机单链寡聚核苷酸文库中得到的能特异结合蛋白或其他小分子物质的单链寡聚核苷酸,可以是RNA,也可以是DNA,长度一般为25~60个核苷酸[1]。
SELEX技术自Tuerk等[2]1990年发明以来,在临床诊断、靶向药物研制方面得以广泛应用。
首个核酸适配体药物”Macugen”[3]由美国FDA在2005年批准上市,成为核酸适配体领域的一个里程碑。
美国Achemix、SomaLogic,德国Noxxon AG等多个公司正在开发核酸适配体药物和诊断试剂。
肿瘤细胞靶向给药是提高肿瘤治疗效果减少毒副作用的有效途径。
将药物偶联于肿瘤细胞特异性配体上是靶向给药的主要方法。
核酸能特异性结合细胞并且随之内化,是理想的靶向细胞输送剂。
核酸适体“靶向配基”介导或修饰的药物及药物纳米制剂,为主动靶向肿瘤细胞给药系统构建开拓了新方向。
本文简要综述适体作为肿瘤药物“靶向配基”的应用研究。
1 核酸适体作为肿瘤药物“靶向配基”的优势具有高特异性与亲和性“靶向配基”的筛选,是制约主动靶向给药系统研究的瓶颈[4-5]。