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酶促反应激活与抑制机理

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酶促反应动力学

酶促反应动力学

S+E
ES
P+E
二、酶促反应的动力学方程式
一．米氏方程式的推导 （假设K四为0]
k1
k三
S+E
ES
k二
对于ES的形成速度：
P+E k4
d[ES] / dt =k1[[E] — [ES]) * [S] 对于ES的分解速度：
- d[ES] / dt = k2[ES] + k3[ES]
二、酶促反应的动力学方程式
三．反竞争性抑制的曲线
总结
四、一些重要的抑制剂
抑制剂: 使酶活性降低的物质, 抑制剂作用分可逆抑制剂与不可逆抑制剂
可逆的依据：能否用透析、超滤等物理方法除 去抑制剂,使酶复活 机理：实际上是底物的类似物，专一地作用于 某一种酶活性部位的必需基团而导致酶的失活，
第三节 温度对酶反应的影响
温 度
第五节
激活剂对酶反应的 影响
一. 激活剂[activator)
激活剂：凡是能提高酶活性的物质,其中 大部分是无机离子或简单有机化合物。 金属离子有K+、Na+、Ca二+、Mg2+等 离子,ห้องสมุดไป่ตู้Mg2+是多数激酶及合成酶的激 活剂， 无机阴离子如：Cl—、Br—、I—等都可作 为激活剂。如Cl—是唾液淀粉酶的激活剂 简单的有机化合物：Cys对某些含巯基的 酶有激活作用
小） （三] Km增大,亲和力
下降
一．竞争性抑制曲线图
二．非竞争性抑制
二．非竞争性抑制曲线
（一]V下降,发生抑制 （二） Vmax减小（一部
分酶始终失活） （三） Km不变，酶与底
物亲和力不受影响
二．非竞争性抑制曲线

酶促反应的机制

酶促反应的机制

酶-底复合物形成时，酶分子构象发生变化，底物分子 也常常受到酶的作用而发生变化，甚至使底物分子发生扭 曲变形，从而使底物分子某些键的键能减弱，产生键扭曲， 有助于过度态的中间产物形成,从而降低了反应的活化能。

诱导底物变形，扭曲，促进了化学键的断裂。
酶中某些基团可使底物分子的敏感键中某些基团的电子 云密度变化，产生电子张力，降低了底物的活化能。 底物与酶结合诱导酶的分子构象变化，变化的酶分子又 使底物分子的敏感键产生“张力”甚至“形变” ，从而促 使酶－底物中间产物进入过渡态。
－OH的亲核催化(胰蛋白酶)
某些通过共价催化机制进行的酶反应
酶
3-磷酸甘油醛脱氢酶
共价中间络合物
酰基-酶
参与共价中间络合物 形成的氨基酸残基
Cys
D-氨基酸氧化酶 乙酰CoA酰基转移酶 Gly咪基转移酶
蔗糖磷酸化酶 转醛醇酶 胰蛋白酶 木瓜蛋白酶 碱性磷酸酯 ATP-柠檬酸解酶 果糖二磷酸醛缩酶 磷酸葡萄糖变位酶 琥珀酰CoA合成酶
氏双曲线。

在底物足够过量而其它条件固定的情况下，并且 反应系统中不含有抑制酶活性的物质及其他不利 于酶发挥作用的因素时，酶促反应的速度和酶浓 度成正比。
（一）、底物对酶促反应的饱和现象：
反应级数
（二）、曲线的基本含义 研究前提
I. II.
单底物、单产物反应； 酶促反应速度一般在规定的反应条件下，用单位时间内 底物的消耗量和产物的生成量来表示； 以内）时的反应速度；
子的排除、排斥，在非极性环境中可显著增高两个带电基团 之间的静电作用，有利于同底物的结合；同时，酶的催化基 团被低介电环境所包围，底物分子的敏感键和酶的催化基团 之间就会有很大的反应力，有利于酶加速反应的。

酶的作用机制和酶的调节

酶的作用机制和酶的调节

别构激活剂 别构抑制剂
（2）别构酶的动力学
S形曲线（正协同） 表观双曲线（负协同效应）
（二）酶原的激活
酶原(zymogen)：酶的无活性的前体
酶原的激活：由无活性的酶原转变为有活性 的酶的过程。酶原激活的实质是酶活性部位 的形成或暴露至分子的表面。
酶原激活的意义：在特定的环境和条件下发 挥作用；避免细胞自身消化；也可保证某些 特殊生理过程的正常进行，如凝血作用；有 的酶原可以视为酶的储存形式。
溶菌酶催化底物C1-O键裂解
五、酶活性的调节控制
（一）别构调控（allosteric regulation）
定义 别构调节：酶分子的非催化部位与某些
化合物可逆地非共价结合后发生构象的 改变，进而改变酶活性状态。 别构酶：具有别构现象的酶。 别构剂：能使酶分子发生别构作用的物
质。通常为小分子代谢物或辅因子
白
S
酶
SS
胰蛋白酶原
肠激酶
胰凝乳蛋白酶原
α-胰凝乳蛋白酶 +两个二肽
自
六肽
身 催
+
化
胰蛋白酶
弹性蛋白酶原 弹性蛋白酶 + 碎片
羧基肽酶原A
羧基肽酶A + 碎片
肠激酶启动的酶原激活
出血性胰腺炎发病机制？
凝血机制：1、受伤血管收缩减少血流；2、血小板粘聚成
栓堵住伤口；3、凝血相关因子的级联激活作用
蛋白激酶，磷酸化
酶
磷酸酶，脱磷酸化
酶-P
由核苷三磷酸（ATP）提供磷酸基，都需Mg2+。
酶的活性形式： 可能是磷酸化也可能是脱磷酸化
底物蛋白质被磷酸化的氨基酸残基有两类： （1）“P-O”键连接，如Thr, Ser, Tyr, Asp, Glu…… （2）“P-N”键连接，如Lys, Arg, His……

影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇)

影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇)

影响酶促反应的因素——温度,ph,激活剂及抑制剂,生化实验报告(共8篇) 影响酶促反应速度的因素生化实验实验二影响酶促反应速度的因素【目的】观察温度、PH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。

【原理】唾液淀粉酶催化淀粉水解，生成一系列水解产物，即糊精、麦芽糖和葡萄糖等。

淀粉及其水解产物遇碘会呈现不同的颜色。

在不同温度，不同PH值下，唾液淀粉酶活性不同，催化淀粉水解程度不一，生成的产物也就不同。

此外，激活剂、抑制剂也能影响淀粉酶活性，影响淀粉的水解。

因此可根据在不同反应条件下，溶液加碘呈现的不同颜色来判断淀粉的水解程度，从而验证了温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。

淀粉I2 【操作】1. 温度对酶促反应速度的影响取3支试管，编号，按下表操作：2. PH对酶促反应速度的影响取3支试管，编号，按下表操作：3．激活剂与抑制剂对酶促反应速度的影响取4支试管，编号，按下表操作：【结果及分析】观察各管颜色变化，说明温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。

【实验注意事项】篇二：生化实验思考题参考答案生化实验讲义思考题参考答案实验一淀粉的提取和水解1、实验材料的选择依据是什么？答：生化实验的材料选择原则是含量高、来源丰富、制备工艺简单、成本低。

从科研工作的角度选材，还应当注意具体的情况，如植物的季节性、地理位置和生长环境等，动物材料要注意其年龄、性别、营养状况、遗传素质和生理状态等，微生物材料要注意菌种的代数和培养基成分的差异等。

2、材料的破碎方法有哪些？答：(1) 机械的方法：包括研磨法、组织捣碎法；(2) 物理法：包括冻融法、超声波处理法、压榨法、冷然交替法等；(3) 化学与生物化学方法：包括溶胀法、酶解法、有机溶剂处理法等。

实验二总糖与还原糖的测定1、碱性铜试剂法测定还原糖是直接滴定还是间接滴定？两种滴定方法各有何优缺点？答: 我们采用的是碱性铜试剂法中的间接法测定还原糖的含量。

间接法的优点是操作简便、反应条件温和，缺点是在生成单质碘和转移反应产物的过程中容易引入误差；直接法的优点是反应原理直观易懂，缺点是操作较复杂，条件剧烈，不易控制。

酶促反应的机制

酶促反应的机制

可逆性抑制 不可逆性抑制
（一）不可逆性抑制
不可逆性抑制：抑制剂通常与酶 的活性中心上的必需基团以共价 键结合，使酶失活。 不能用透析，超滤等方法除去。
农药可使酶失活解磷定可以解毒
（二）可逆性抑制
可逆性抑制：抑制剂通常与酶 通过非共价键结合，使酶失活。 能用透析，超滤等方法除去。
竞争性抑制作用 非竞争性抑制作用 反竞争性抑制作用
酶的活性中心是酶分子中具有三 级结构的区域，如裂缝或凹陷， 可由疏水性氨基酸的基团组成疏 水口袋。
Essential groups of enzyme out of active site
peptide substrate
active site
Catalytic Essential group groups of Binding enzyme in group active site
酶促反应的机制
第一节 酶的分子结构与功能
酶是蛋白质，同样具有一、二、三 甚至四级结构。 单体酶：仅具有三级结构 寡聚酶：多个相同或者不同的亚基 多酶体系：有几种不同的酶聚合 多功能酶：多种不同催化功能在一 条多肽链上。
酶蛋白与辅助因子结合形成的复 合物成为全酶。
金属酶：结合紧密 金属激活酶：不甚紧密 辅酶：结合松散，可透析超滤去出 接受基团或质子后离开酶蛋白。 辅基：结合紧密，不可透析超滤去 出，不离开酶蛋白。
所有酶均与底物结合时的速度）
Vmax = kcat [E]total .
(3)
正反应速度为：
Vf = k1 [E] ·[S] 逆反应速度为：
Vr= k-1 [ES] 在反应达到平衡时，正反应速度等 与逆反应速度：
k1 [E] ·[S] = k-1 [ES]

生物化学酶促反应动力学酶的作用机制和酶的调节讲课文档

生物化学酶促反应动力学酶的作用机制和酶的调节讲课文档

初速度
产 酶促反应速度逐渐降低
物
0
时间
酶促反应的时间进展曲线
第十二页，共165页。
v 在其他因素不变的情况下，底物浓度对反应速度的 影响呈矩形双曲线关系。
V
反 应 初 速 度
0
底 物 浓 度 [S]
反应初速度随底物浓度变化曲线
第十三页，共165页。
V Vmax
[S] 当底物浓度较低时
反应速度与底物浓度成正比；反 应为一级反应。
活性部位基团）
第五十六页，共165页。
（1） 非专一性不可逆抑制剂
①重金属离子 Ag+ 、 Cu2+ 、 Hg2+ 、 Pb2+ 、 Fe3+
高浓度时可使酶蛋白变性失活； 低浓度时对酶活性产生抑制。
——通过加入EDTA解除
第五十七页，共165页。
②烷化剂（多为卤素化合物）
H2N-CH-COOH CH2 SH
单分子反应：A P
双分子反应：A+B P+Q
第四页，共165页。
• 单分子反应
v = kc
• 双分子反应
v = kc1c2 c 、c1、c2 ：反应物浓度（mol/l） k：比例常数/反应速率常数
第五页，共165页。
2.反应级数
能以v = kc表示，为一级反应； 能以v = kc1c2表示，则为二级反应； v 与反应物浓度无关，则为零级反应。
数。
[S]很大时， Vmax＝ k3[E] 。
k3表示当酶被底物饱和时，每秒钟每个酶分子转 换底物的分子数，
——又称为转换数、催化常数kcat kcat越大，酶的催化效率越高
第三十一页，共165页。

温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响

温度、pH、激活剂和抑制剂 对酶活性的影响
[目的] 1.掌握温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性影响 的基本原理； 2.熟悉唾液淀粉酶所催化的酶促反应过程；
[原理] 1. 温度：对酶的活性的影响为双效性，当酶促反应 的温度为最适温度时，最有利于酶促反应的进行。 温度过低，酶的活性减弱，温度太高，会使酶变性、 失活； 2.pH ：酶活性最大时的环境 pH 为最适 pH 。 pH 不仅 会影响酶的活性，还会影响底物的解离状态，从而 影响酶与底物的结合。过酸或过碱性的环境可使酶 变性、失活。

3、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
C．激活剂、 抑制剂组 1%淀粉 试剂 （2滴） 唾液
C1管
1ml 1%NaCl 10d
C2管
1ml 1%CuSO4 10d
C3管
1ml
C4管
1ml
1%Na2SO4 蒸馏水 10d 10d
摇匀， 37℃保温,每隔30秒从1号管中吸取溶液1d加到白瓷 盘小池中（小池预先加好0.1%碘液） 。当碘液不变色时， 分别向4管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。
收集唾液 ( 自来水漱口、收集唾液约 2-3ml 于小烧杯 中，蒸馏水稀释10倍,备用) 1、温度对酶活性的影响 A．温度组 唾液 （2ml） 1%淀粉 （1ml） 1%碘液 A1管 冰水浴 5分钟 冰水浴 15分钟 2d A2管 37 ℃水 浴5分钟 37℃水浴 15分钟 2d A3管 沸水浴 5分钟 沸水浴 15分钟 2d
2、pH对酶活性的影响 B．PH值组 B1管 PH5.0 2ml 10d B2管 PH6.8 2ml 10d B3管 PH8.6 2ml 10d
磷酸盐缓冲液 （2ml） 1%淀粉 唾液
摇匀，立即置37℃保温，每隔30秒从2号管中吸取溶液1滴 加到白瓷盘小池中（小池预先加好0.1%碘液）。当碘液不 变色时，分别向3管中加入1%碘液2滴，观察颜色变化。

酶的反应动力学


竞争性抑制剂双倒数曲线，如下图所示：
1 ＝Km 1 〔 I 〕 1 （1+ ） + Ki 〔S〕 Vmax v Vmax
Vmax指该酶促反应的最大速度，[S]为底 物浓度，Km是米氏常数，VO是在某一底物浓 度时相应的反应速度。从米氏方程可知： 当底物浓度很低时 [S] << Km,则 V≌Vmax[S]/Km ，反应速度 与底物浓度呈正比; 当底物浓度很高时， [S]>> Km ，此时V≌Vmax ，反应速度达最大 速度，底物浓度再增高也不影响反应速度。
Vmax A B A B K A AB K s KB m
B m
A Ks KB A m Km B
v
K
A m
1 1 v Vmax
1 KB m A 1 B
1 V max
二. 酶浓度的影响
化学动力学基础
底物浓度对酶反应速率的影响 温度、pH及激活剂 对酶反应的影响
酶的抑制作用
目的与要求
重点掌握酶促反应动力学：米氏方程、 温度、pH、激活剂、抑制剂对酶促反应速 度的影响；掌握三种可逆抑制作用的动力 学特点。
化学动力学基础
各级反应的特征
1 一级反应
t1/2≈0.693/k 2 二级反应 t1/2=1/ka 3 零级反应
ES的形成速度： d„ES‟/ dt＝k1„E‟„S‟ ES的分解速度： －d„ES‟/ dt＝（k2＋k3）„ES‟ 稳态平衡下， k1„E‟„S‟ ＝（k2＋k3）„ES‟ 即：„E‟„S‟/„ES‟= （k2＋k3）/ k1=Km
而„E‟=[E]t－„ES‟代入
得：
Et ES S Km ES

酶促反应动力学


k1 k 1
ES
ES
k2 P E
[ES]生成速度： v1
k1 Et ESS ，[ES]分解速度： v2 k1ES k2 ES
当酶反应体系处于恒态时： 即： 令：
k1 Et ESS k1ES k2 ES
恒态法推导：
1925年Briggs和Haldame对米氏方程作了一次重要 的修正，提出了恒态的概念。
k1 k3
E+S
k2
ES
E+P
所谓恒态是指反应进行一定
时间后，ES的生成速度和ES的分 解速度相等，亦即ES的净生成速
度为零，此时ES的浓度不再改变，
达到恒态，也称稳态。
SE
S
Et ES
2.米氏常数的意义 （1）. 物理意义： Km值等于酶反应速度为最大速度一半时的底物浓度。 （2）. Km 值愈大，酶与底物的亲和力愈小；Km值愈小， 酶与底物亲和力愈大。酶与底物亲和力大，表示不需要很 高的底物浓度，便可容易地达到最大反应速度。 （3）. Km 值是酶的特征性常数，只与酶的性质，酶所催 化的底物和酶促反应条件(如温度、pH、有无抑制剂等)有 关，与酶的浓度无关。酶的种类不同，Km值不同，同一种 酶与不同底物作用时，Km值也不同。各种酶的Km值范围很 广，大致在 10-1～10-6 M 之间。
为解释酶被底物饱和现象，Michaelis和Menten 做了大量的定量研究，积累了足够的实验数据， 提出了酶促反应的动力学方程：
中间复合物学说：
第一步: E+S
第二步: ES→E+P
ES
V∝[ES]
1913年Michaelis和 Menten推导了米氏方程

激活剂与抑制剂对酶的影响实验目的


KI-I2溶液（mL） 记录观察结果
2滴
2滴
2滴
从1号试管中用玻棒取出1滴溶液，置于白磁板上用碘液检查淀粉的水解程度。待 1号试管内的溶液遇碘不再变色后，立即取出所有的试管，各加碘液2滴，观察溶 液颜色的变化。
操作步骤
1. 取3支试管，各加2mL 含0.3％氯化钠的0.5％ 淀粉溶液。 2. 另取3支试管，各加1mL淀粉酶液。 3. 将此 6 支试管分为 3 组，每组中盛淀粉溶液与 淀粉酶液的试管各1支。 4. 三组试管分别置入 0℃ 、 37℃ 与 100℃ 的水浴 中。 5. 等 5min 后，将各组中的淀粉溶液倒入淀粉酶 液中，继续维持原温度条件5min后，立即滴加2 滴碘液，观察溶液颜色的变化。
操作步骤
1、唾液淀粉酶液的准备
实验者用蒸馏水嗽口，除去食物残渣。然后含一口蒸馏 水于口中，轻嗽一分钟，吐入小烧杯中。将其稀释一倍。
2、检查试剂
试剂处理
（取2只试管，按下表操作）
试管编号 #1 3 — 2 #2 － 3 2
含0.3％NaCl的淀粉溶液（mL） 2% 蔗糖溶液（mL） Benedict试剂（mL） 摇匀，沸水浴煮沸3min 记录观察结果
3. 淀粉酶的专一性实验
试管编号
（取2只试管，按下表操作）
#1 1 3
#2 1 －
试剂处理
已稀释的唾液溶液（mL） 含0.3％NaCl的0.5%淀粉溶液 （mL） 2%蔗糖溶液（mL） Benedict试剂（mL） 记录观察结果
—
2
3
2
摇匀，置37℃水浴保温15min 摇匀，沸水浴煮沸2min
二、pH对淀粉酶活性的影响
三、温度对淀粉酶活性的影响
实验目的 了解温度对酶活性的影响及最适温度的定义。 实验原理
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竞争性抑制
• 竞争抑制的原理是抑制剂与底物结构相似， 与底物竞争，阻碍酶-底物复合体的形成。
E+S + I
ES
E+P
EI
竞争性抑制
非竞争性抑制作用
• 抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合,底 物与抑制剂之间无竞争关系,但酶-底物-抑制 剂复合物（ESI）不能进一步释放出产物。
E+S + I
ES + I
酶促反应速率方程
k1 E S ES E P k1 k2
条件： 1[S] [S0 ] 2酶总量守恒 [E] [ES] [E t ] Cons. 3忽略第二步的逆反应
v0 k2 [ES] k1 [ES] Ks = k-1 [E][S] k1 [ES] [E][S] k1
Thank You
酶（原）激活的例子
一 定 条 件
酶原
某些肽键断裂
结构改变
形成或暴露 出活性中心
肠激酶
胰蛋白酶
组
46
缬天天天天赖异缬甘
丝
18 3
S S S 活性中心
S
缬天天天天赖
缬 异甘组 丝 S S S S
胰蛋白酶原的激活过程
来点儿公式
• 酶促反应速率公式是使用与反应初期的速 率计算公式。其双倒数形式在验证抑制机 理时十分有用。
• 酶与底物靠近形成酶-底物复、表面效应的影响，从而大大降低 反应活化能。
酶促反应的抑制
不可逆抑制
抑制
竞争性抑制
可逆抑制
非竞争性抑制
反竞争性抑制
不可逆抑制
• 抑制剂与酶的活性中心的必须基团紧密结 合（共价键），使酶失活。
不可逆抑制
例1 羟基酶的失活
vm [S]
有抑制作用存在时的速率方程
• 以非竞争性抑制作用为例：
E+S + I
ES + I
EI +S
ESI
基本的套路是不变的。。。
• 需要修改一下酶守恒的表达式。
[ ES ] [ E ] [ EI ] [ EIS ] [ Et ] [ ES ]= k1 k [ E ][ S ] 1 [ S ]([ Et ] [ ES ] [ EI ] [ EIS ]) k1 k1
ki [ ES ] k i [ I ] K i [ I ] k [ EI ] K1 [ S ] 1 [S ] k1 [ EIS ] K s [ ES ][ I ] [ ES ]= K [I ] k1 [ S ]{[ Et ] [ ES ](1 K s [ I ]+ i )} k1 K1 [ S ]
k [ EIS ] s [ ES ][ I ] k s ki [ EI ] [ E ][ I ]=K i [ E ][ I ] ki ki [ ES ] k i [ I ] K i [ I ] k [ EI ] K1 [ S ] 1 [S ] k1 [ EIS ] K s [ ES ][ I ]
K1[ Et ][ S ] [ ES ]= 1+K1[ S ](1 K s [ I ]) K i [ I ] v0 k2 [ ES ] vm [ S ] 1 (1 K i [ I ]) [ S ](1 K s [ I ]) K1
令K s K m 1 K 1 1 = (1+K s [ I ])+ m (1 K s [ I ]) v0 vm vm [S]
用酶总量守恒式对[ES]进行替换。 平衡近似
[E] [ES] [Et ]
k1[ES] k1[S]([Et ] [ES])
k1[ES] k1[S][E t ] k1[S][ES] [ES] k1[S][E t ] k1 k1[S]
合并同类项
[S][E t ] [ES] k1 [S] k1 v0 k2 [ES] k2 [S][E t ] k1 [S] k1
我们认为酶促反应速率最大的时刻是酶被 饱和的时刻。达到最大速率时[ES]=[Et]
vm lim v0 k2 [Et ]
[S]
vm [S] v0 = k1 1 [S] [S] Ks k1
vm [S]
vm [S] v0 = k1 1 [S] [S] Ks k1 令K s K m 1 1 1 Km 1 = + v0 vm vm [S]
酶促反应激活与抑制机理
C:王鑫瑞 Support:DDB,XX，刘治愈
• 酶促反应的特点？
• 高效 • 特异性 • 可调节性
• 高效 • 特异性（绝对，相对，立体） • 可调节性（抑制，激活，变构）
酶简介
决定反应的特异性
酶蛋白 +
无催化活性 决定反应的性 质和反应类型
辅助因子
无催化活性
全酶
有催化活性 holoenzyme
[ ES ]=
k1 k [ E ][ S ] 1 [ S ]([ Et ] [ ES ] [ EI ] [ EIS ]) k1 k1
k [ EIS ] s [ ES ][ I ] k s [ EI ] ki [ E ][ I ] K i [ E ][ I ] k i
E+P
EI +S
ESI
非竞争性抑制
反竞争性抑制
• 抑制剂仅与酶和底物形成的ES结合，使ES 的量下降。既减少从ES转化为产物的量， 也同时减少从ES解离出E和S的量。
E+S
ES + I
E+P
ESI
反竞争性抑制
酶的激活
• 激活剂：使酶从无活性转变为有活性或活 性增加的物质。 • 一般认为激活的机理是激活剂通过配位， 切割，成键等作用改变酶的结构，使酶具 有催化反应所需的结构。
金属离子 组成 辅助因子 辅基 (prosthetic group) 分类 辅酶 或
小分子有机化合物
(coenzyme)
活性中心
• 酶分子中直接与底物结合，并和酶催化作 用直接有关的区域叫酶的活性中心（active center）或活性部位（active site)
活性中心内的必需基团
结合基团 与底物相结合 催化基团 催化底物转变成产物
活性中心外的必需基团
位于活性中心以外，维持酶活性中心应有 的空间构象所必需。
酶促反应
• 是如何进行的呢？
酶促反应
• 中间产物假说：
E S ES E P
• 诱导契合假说：底物首先与酶弱结合，然 后酶改变其构象，增加了与过渡态的亲和 力并稳定这个过渡态，因此减少了达到过 渡态所需的活化能。（酶与底物互变）
不可逆抑制
例2 巯基酶的失活
• 发生不可逆抑制时抑制剂与酶的活性中心 紧密结合，不能用透析、超滤等方法予以 除去。解除抑制的方法主要是使用与抑制 剂结合更为紧密的物质将酶置换。
可逆抑制
• 抑制剂通常以非共价键与酶或酶-底物复合 物可逆性结合，使酶的活性降低或丧失； 抑制剂可用透析、超滤等方法除去。