微生物与生化药学_问答题
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微生物制药考试题及答案一、单项选择题(每题2分,共20分)1. 微生物制药中,以下哪种微生物不是用于生产抗生素的主要微生物?A. 链霉菌B. 酵母菌C. 放线菌D. 假单胞菌答案:B2. 微生物制药中,以下哪种物质不是微生物代谢产物?A. 抗生素B. 维生素C. 激素D. 蛋白质答案:C3. 以下哪种培养基不是微生物培养常用的固体培养基?A. 牛肉膏蛋白胨培养基B. 马铃薯培养基C. 液体培养基D. 琼脂培养基答案:C4. 微生物制药中,以下哪种方法不是用于分离纯化微生物的方法?A. 稀释涂布法B. 梯度稀释法C. 离心分离法D. 抗生素筛选法答案:C5. 以下哪种微生物不是用于生产疫苗的微生物?A. 细菌B. 病毒C. 真菌D. 原生动物答案:D6. 以下哪种微生物不是用于生产酶制剂的微生物?A. 细菌B. 酵母菌C. 放线菌D. 藻类答案:D7. 以下哪种微生物不是用于生产生物农药的微生物?A. 细菌B. 病毒C. 真菌D. 原生动物答案:D8. 微生物制药中,以下哪种方法不是用于微生物发酵的方法?A. 固态发酵B. 液态发酵C. 气态发酵D. 好氧发酵答案:C9. 以下哪种微生物不是用于生产生物肥料的微生物?A. 固氮菌B. 磷细菌C. 钾细菌D. 蓝藻答案:D10. 以下哪种微生物不是用于生产生物活性物质的微生物?A. 细菌B. 酵母菌C. 放线菌D. 植物答案:D二、多项选择题(每题3分,共15分)11. 微生物制药中,以下哪些微生物是用于生产抗生素的主要微生物?A. 链霉菌B. 酵母菌C. 放线菌D. 假单胞菌答案:A, C12. 微生物制药中,以下哪些物质是微生物代谢产物?A. 抗生素B. 维生素C. 激素D. 蛋白质答案:A, B, D13. 微生物制药中,以下哪些方法用于分离纯化微生物?A. 稀释涂布法B. 梯度稀释法C. 离心分离法D. 抗生素筛选法答案:A, B, D14. 微生物制药中,以下哪些微生物用于生产疫苗?A. 细菌B. 病毒C. 真菌D. 原生动物答案:A, B15. 微生物制药中,以下哪些微生物用于生产酶制剂?A. 细菌B. 酵母菌C. 放线菌D. 藻类答案:A, B, C三、填空题(每空1分,共20分)16. 微生物制药是指利用微生物的代谢活动,生产______、______、______等生物活性物质的过程。
第1章细菌的形态与结构1..细菌有哪3种形态?2.细菌的基本结构和特殊结构有哪些?特殊结构各有何作用?3.G+菌和G-菌细胞壁的结构由哪几部分组成?4.青霉素和溶菌酶为什么不能杀灭革兰阴性菌?5.简述革兰染色法操作步骤第2章细菌的生理1.细菌的生长繁殖条件是什么?2.细菌生长曲线分哪4个阶段?3.细菌根据对氧的需要程度分为哪几种类型?4.细菌合成代谢产物有哪几种?第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全1.常用的消毒剂有哪些种类?2.简述化学消毒剂的杀菌机制。
3.湿热灭菌有哪些方法? 各有何用途?4.筒述紫外线杀菌的作用机制和注意事项。
5.在温度和时间相同的情况下,为什么湿热灭菌法的效果比干热法好?6.当从事病原生物学安全实验室工作时,应考虑哪些与生物安全相关的问题?第4章噬菌体1.噬菌体的概念及其特征。
2.毒性噬菌体和温和噬菌体、前噬菌体、溶原性细菌、溶原性转换的概念及特征。
3.溶菌性周期与溶原性周期的区别。
第5章细菌的遗传变异1.细菌基因转移和重组的类型及其主要差异?2.何谓BCG、transposon、R质粒、Hfr、lysogenic conversion和Ames试验?3.影印试验验证何种理论?突变型细菌有哪些?第6章细菌耐药性1.简述抗菌药物类型2.抗菌药物作用机制又几种?3.简述细菌耐药性产生机制。
4.控制细菌耐药性策略?第7章细菌的感染与免疫1.病原菌对宿主的致病性,是由哪些因素决定的?2.试比较内毒素与外毒素的基本生物学特性?3.细菌的侵袭力,由哪些因素组成?4.请陈述机体抗细菌感染的特点?5.当机体感染病原菌后,感染的发展及其结果可能在机体有哪些方面的表现?6.试述医院感染的基本特点?从医学微生物学角度,怎样预防和控制医院感染?第8章细菌感染的检查方法与防治原则1. 试述检测病原菌的基本程序和原则?2. 对已经分离出的细菌菌落,怎样从微生物学角度去进一步鉴定?3. 试述疫苗研制及其发展的主要阶段?第9章球菌1.简述葡萄球菌的分类及意义。
微生物药物学试题及答案一、单项选择题(每题2分,共40分)1. 微生物药物学是研究()的科学。
A. 微生物的分类和鉴定B. 微生物的生理和生态C. 微生物的致病性和防治D. 微生物来源的药物答案:D2. 下列哪项不是微生物药物的特点()。
A. 生物活性强B. 来源广泛C. 化学结构简单D. 作用机制多样答案:C3. 微生物药物学的主要研究内容包括()。
A. 微生物药物的筛选B. 微生物药物的制备C. 微生物药物的药理作用D. 以上都是答案:D4. 微生物药物的筛选不包括()。
A. 菌种的分离和鉴定B. 菌种的培养和发酵C. 菌种的基因工程改造D. 药物的临床试验答案:D5. 下列哪项不是微生物药物的制备过程()。
A. 菌种的筛选B. 发酵过程的控制C. 药物的提取和纯化D. 药物的临床试验答案:D6. 微生物药物的药理作用研究不包括()。
A. 药物的体内外活性评价B. 药物的作用机制研究C. 药物的毒理学研究D. 药物的生产工艺研究答案:D7. 下列哪项不是微生物药物的分类()。
A. 抗生素B. 免疫调节剂C. 激素类药物D. 抗肿瘤药物答案:C8. 抗生素是一类具有()的微生物次级代谢产物。
A. 抗菌活性B. 抗病毒活性C. 抗肿瘤活性D. 免疫调节活性答案:A9. 下列哪项不是抗生素的特点()。
A. 低毒B. 高效C. 广谱D. 耐药性答案:D10. 下列哪项不是抗生素的作用机制()。
A. 抑制细菌细胞壁合成B. 干扰细菌蛋白质合成C. 破坏细菌核酸结构D. 促进细菌生长答案:D11. 免疫调节剂是一类具有()的药物。
A. 抗菌活性B. 抗病毒活性C. 调节免疫反应活性D. 抗肿瘤活性答案:C12. 下列哪项不是免疫调节剂的作用机制()。
A. 增强机体免疫功能B. 抑制机体免疫功能C. 调节细胞因子的产生D. 促进细胞分裂答案:D13. 抗肿瘤药物是一类具有()的药物。
A. 抗菌活性B. 抗病毒活性C. 抗肿瘤活性D. 免疫调节活性答案:C14. 下列哪项不是抗肿瘤药物的作用机制()。
试卷一一.选择题(每个2分,共20分)1、组成病毒粒子衣壳的化学物质是()A、糖类B、蛋白质C、核酸D、脂肪2、属于细菌细胞特殊结构的为()A、荚膜B、细胞壁C、细胞膜D、核质体3、噬菌体属于病毒类别中的()A、微生物病毒B、昆虫病毒C、植物病毒D、动物病毒4、半固体培养基中,琼脂使用浓度为()。
A、0B、0.3—0.5%C、1.5—2.0%D、5%6.下述那个时期细菌群体倍增时间最快 ( )A 稳定期B 衰亡期C 对数期D 延滞期7.下面关于连续培养的说法中,叙述不正确的是()A.恒化连续培养的控制对象是菌体密度B.恒浊连续培养中微生物菌体以最高生长速率生长C.恒化连续培养的产物是不同生长速率的菌体D.恒浊连续培养无生长限制因子8. 下列叙述中正确的说法是()A.产生抗逆性强的芽孢是产芽孢细菌在不良环境条件下的一种生殖方式。
B.厌氧的微生物需要较低的氧化还原电位。
C.一种细菌的学名是Staphylococcus aureus,其中aureus属名,Staphyloccus是种名D.类病毒是有侵染性的蛋白颗粒。
9.下述诱变剂中常引起移码突变的是:()A 亚硝酸B 烷化剂C 碱基类似物D 丫啶类染料10.下述那个最可能产生一个重组细胞:()A F+ x F-B Hfr x F+C Hfr x F-D F+ xF-二、写出下列名词解释的中文翻译及作出解释(每个2分,共12分)1.Gram positive bacteria2.parasporal crystal3 ,colony4, life cycle5,capsule6,endospore三、判断改错题(每个2分,共10分)1.大肠杆菌和枯草芽孢杆菌属于单细胞生物,唾液链球菌和金黄色葡萄球菌属于多细胞生物()2.遗传型相同的个体在不同环境条件下会有不同的表现型。
()3.低剂量照射紫外线,对微生物几乎没有影响,但以超过某一阈值剂量的紫外线照射,则会导致微生物的基因突变。
微生物制药试题+参考答案一、单选题(共40题,每题1分,共40分)1、常用的生理碱性物质()不仅可以调节发酵液pH值,还可以补充氮源。
A、葡萄糖B、硫酸铵C、硝酸钠D、NaOH正确答案:C2、铁离子对青霉素合成有毒,在生产过程中,浓度要控制在()以下。
A、10-20μg/mlB、0-10μg/mlC、20-30μg/mlD、30-40μg/ml正确答案:A3、培养基灭菌方式主要可分间歇、连续灭菌,实际操作时哪种灭菌温度更高()A、没有规律B、两者无差别C、间歇灭菌D、连续灭菌正确答案:D4、属于生物次级代谢产物的药物是()。
A、维生素B、核苷酸C、抗生素D、氨基酸正确答案:C5、在发酵过程中,不断进行通气和为调节发酵液的pH而加入酸碱溶液外,与外界没有其它物料交换。
这种培养方式操作简单,是一种最为广泛使用的方式,称之为()。
A、分批发酵B、连续发酵C、半连续发酵D、补料分批发酵正确答案:A6、用于谷氨酸发酵的培养基中需添加的生长因子是()A、氨基酸B、生物素C、碱基D、核苷酸正确答案:B7、链霉素的提取采用()A、离子交换法B、沉淀法C、萃取法D、膜过滤正确答案:A8、()是在每批培养基全部流入发酵罐后,就在罐内通入蒸汽加热至灭菌温度,维持一定时间,再冷却到接种温度。
A、空消B、实消C、连消D、连续灭菌正确答案:B9、生产谷氨酸的培养基中,其中()要保持在适量状态,若缺乏,则菌体生长十分缓慢,若过量,则为乳酸发酵。
A、生长因子B、水和无机盐C、碳源D、氮源正确答案:A10、生产链霉素的菌种是()A、绿色链霉菌B、白色链霉菌C、金色链霉菌D、灰色链霉素正确答案:D11、青霉素发酵时,适宜pH是()A、4.4-4.6B、7.4-7.6C、5.4-5.6D、6.5-6.9正确答案:D12、谷氨酸发酵培养基的碳氮比一般为()A、100:15~30B、100:4~5C、100:0.2~0.3D、100:21~42正确答案:A13、管碟法测抗生素效价时,量-反应直线斜率越小,直线越平缓,生物反应的灵敏度( )A、不变B、越低C、越高正确答案:C14、单位体积培养液在单位时间内消耗氧的量称为( )A、呼吸强度B、摄氧率C、最大比耗氧速率D、比好氧速率正确答案:B15、()的特点是微生物所处的环境是不断变化的,可进行少量多品种的发酵生产。
1.微生物的分类(按大小、结构来分)非细胞型微生物、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物2、革兰阳性菌与阴性菌的细胞壁有何差异2.青霉素++ +溶菌酶++ +3、何为细菌L型,它的成因和特点是怎样的细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制,这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型。
特点:高度多形性,大小不一;大多为革兰阴性菌;有一定的致病力。
4、细菌特殊结构有哪些,它们各自的意义如何荚膜:抗吞噬作用,是病原菌的重要毒力因子;抗杀菌物质损伤,如溶酶体、补体;粘附作用,与致病性有关;形成生物膜鞭毛:细菌的运动器官;某些细菌鞭毛与致病有关;鞭毛蛋白有抗原性:H抗原菌毛:普通菌毛粘附结构,性菌毛传递质粒芽胞:有强大的抵抗力;致病性;芽胞的大小、形状、位置等随菌种而异,有重要的鉴别价值5、根据细菌对氧气的需求与否可把细菌分为哪几类;专性厌氧菌厌氧的原因(1)专性需氧菌(2)专性厌氧菌(3)兼性厌氧菌(4)微需氧菌专性厌氧菌厌氧的原因:缺乏完善的呼吸酶系统,利用氧以外的其他物质作为受氢体6、细菌个体及群体的繁殖规律细菌个体的生长繁殖:二分裂繁殖;繁殖速度一般20~30分钟一代细菌群体的生长繁殖:以培养时间为横坐标,培养物中活菌数的对数为纵坐标,可绘制一条生长曲线。
分为四期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期7、生长曲线的分期及各期的应用生长曲线分为四期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期研究细菌的生物学性状(形态染色、生化反应、药物敏感试验等)选对数期的细菌;细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生8、IMViC试验是哪几个试验,典型的大肠埃希菌的试验结果是怎样的I:吲哚试验M:甲基红试验Vi:VP试验C:枸橼酸盐于鉴定肠道杆菌,大肠埃希菌+ + - -9、热原质的定义及特点热原质:细菌合成的一种注入人体内引起发热反应的物质。
大多数是G-菌的脂多糖。
热原质耐高温,高压蒸汽灭菌不能破坏(121℃,20 min),250℃高温干烤才能破坏。
微生物与生化药学问答题第二章基因工程制药1、利用基因工程技术生产药物得优点?答:1、大量生产过去难以获得得生理活性蛋白与多肽,为临床使用提供有效得保障;2、可以提供足够数量得生理活性物质,以便对其生理、生化与结构进行深入得研究,从而扩大这些物质得应用范围;3、可以发现、挖掘更多得内源性生理活性物质;4、内源生理活性物质在作为药物使用时存在得不足之处,可通过基因工程与蛋白质工程进行改造与去除;5、可获得新型化合物,扩大药物筛选来源。
2、基因工程药物制造得主要步骤?答:目得基因得克隆;构建DNA 重组体;将DNA 重组体转移入宿主菌构建工程菌;工程菌得发酵;外源基因表达产物得分离纯化;产品得检验等。
3、化学合成目得基因得先决条件?答:较小得蛋白质或多肽得编码基因可以采用人工化学合成,其先决条件:已知目得基因得核苷酸序列或蛋白质得氨基酸序列,按相应得密码子推导出DNA 得碱基序列。
4、人工合成基因得限制有哪些?答:1、不能合成太长得基因,50~60 个碱基对;2、人工合成碱基对时,遗传密码得简并会为选择密码带来很大得困难:3、费用高。
5、基因工程宿主菌应满足那些要求?目前应用最广泛得宿主菌有哪些?答:1、容易获得较高浓度得细胞;2、能利用廉价易得得原料;3、不致病、不产生内毒素;4、发热量低,需氧低,适当得发酵温度与细胞形态;5、容易进行代谢调控;6、容易进行DNA 重组技术操作;7、产物得产量、产率高,产物容易提取。
宿主菌可分两大类:1、原核细胞:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌;2、真核细胞:酵母菌、丝状真菌、哺乳动物细胞。
6、表达载体须具备哪些条件?常用载体有哪些?答:1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。
2、具多个限制酶切点,但每种切口最好只有1 个,以便与外源基因连接。
3、具有某些标记基因,便于进行筛选。
4、所产生得mRNA 必须有翻译得起始信号。
5、具有很强得启动子。
6、有很强得终止子。
常用载体有:1、细菌细胞得质粒。
微生物与生化药学问答题第二章基因工程制药1. 利用基因工程技术生产药物的优点?答:1、大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽,为临床使用提供有效的保障;2、可以提供足够数量的生理活性物质,以便对其生理、生化和结构进行深入的研究,从而扩大这些物质的应用范围;3、可以发现、挖掘更多的内源性生理活性物质;4、内源生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处,可通过基因工程和蛋白质工程进行改造和去除;5、可获得新型化合物,扩大药物筛选来源。
2. 基因工程药物制造的主要步骤?答:目的基因的克隆;构建 DNA 重组体;将 DNA 重组体转移入宿主菌构建工程菌;工程菌的发酵;外源基因表达产物的分离纯化;产品的检验等。
3. 化学合成目的基因的先决条件?答:较小的蛋白质或多肽的编码基因可以采用人工化学合成,其先决条件:已知目的基因的核苷酸序列或蛋白质的氨基酸序列,按相应的密码子推导出 DNA 的碱基序列。
4. 人工合成基因的限制有哪些?答:1、不能合成太长的基因,50~60 个碱基对;2、人工合成碱基对时,遗传密码的简并会为选择密码带来很大的困难:3、费用高。
5. 基因工程宿主菌应满足那些要求?目前应用最广泛的宿主菌有哪些?答:1、容易获得较高浓度的细胞;2、能利用廉价易得的原料;3、不致病、不产生内毒素;4、发热量低,需氧低,适当的发酵温度和细胞形态;5、容易进行代谢调控;6、容易进行 DNA 重组技术操作;7、产物的产量、产率高,产物容易提取。
宿主菌可分两大类:1、原核细胞:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌;2、真核细胞:酵母菌、丝状真菌、哺乳动物细胞。
6. 表达载体须具备哪些条件?常用载体有哪些?答:1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。
2、具多个限制酶切点,但每种切口最好只有 1 个,以便与外源基因连接。
3、具有某些标记基因,便于进行筛选。
4、所产生的 mRNA 必须有翻译的起始信号。
5、具有很强的启动子。
药学微生物学习题及答案绪论一、填空题1、微生物学作为一门学科,是从显微镜开始的,其发展经历的三个时期是经验时期________、____实验时期____、现代时期和__________。
2、微生物学的奠基人是_______。
二、判断是非1、巴斯德是一位著名的微生物学家,他第一个在显微镜下看到微生物的个体形态。
2、因为显微镜稀少,列文虎克逝世后微生物学未能迅速发展。
()3、病原菌学说最初是由科学家柯赫提出来的。
()三、名词解释1、微生物:指大量的、极其多样的、不借助显微镜看不见的微小生物类群的总称。
2、微生物学:是研究微生物在一定条件下的形态结构、生理生化、遗传变异以及微生物的进化、分类、生态等生命活动规律及其应用的一门学科。
四、选择题1、微生物的研究从形态描述推进到生理学研究阶段,以哪两位为代表的科学家揭露了微生物是造成腐败发酵和人畜疾病的原因。
CA、巴斯德、列文虎克B、柯赫、列文虎克C、巴斯德、柯赫D、巴斯德、弗莱明2、第一个发现微生物的人是AA、列文虎克B、柯赫C、巴斯德D、斯坦利3、菌种的分离、培养、接种、染色等研究微生物的技术的发明者是CA、巴斯德B、柯赫C、吕文虎克D、别依林克4、自然发生说的理论认为A、微生物来自无生命的物质B、大动物中发现有系统发育C、人类是从类人猿进化的D、病毒是从细菌退化的。
5、巴斯德采用曲颈瓶试验来AA、驳斥自然发生说B、证明微生物致病C、认识到微生物的化学结构D、提出细菌和原生动物分类系统。
五、问答题1、什么是微生物?它包括那些种类?非细胞型微生物、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物2、微生物的一般特性是什么?1.微生物多以独立生活的单细胞或细胞群体形式存在3、微生物学发展的各个时期有哪些主要成就?第一章细菌第一节细菌的形态与结构一、名词解释l、细菌2、中介体3、质粒4、异染颗粒5、荚膜6、鞭毛7、芽胞8、L型细菌二、填空题1.细菌个体微小,通常以——作为测量单位。
药学微生物学试题及答案一、单项选择题(每题1分,共20分)1. 微生物学是研究()的科学。
A. 微生物的形态B. 微生物的分类C. 微生物的生理D. 微生物的生命活动规律及其与人类的关系答案:D2. 细菌的基本结构不包括()。
A. 细胞壁B. 细胞膜C. 细胞质D. 叶绿体答案:D3. 真菌的细胞结构中不含有()。
A. 细胞壁B. 细胞膜C. 细胞核D. 核糖体答案:D4. 下列哪种微生物是原核生物()。
A. 酵母菌B. 放线菌C. 霉菌D. 细菌答案:D5. 病毒的遗传物质是()。
A. DNAB. RNAC. DNA或RNAD. 蛋白质答案:C6. 微生物的培养基中,提供碳源的物质是()。
A. 牛肉膏B. 蛋白胨C. 葡萄糖D. 氯化钠答案:C7. 微生物的培养基中,提供氮源的物质是()。
A. 牛肉膏B. 蛋白胨C. 葡萄糖D. 氯化钠答案:B8. 下列哪种微生物是厌氧菌()。
A. 大肠杆菌B. 乳酸菌C. 酵母菌D. 金黄色葡萄球菌答案:B9. 微生物的菌落特征不包括()。
A. 形状B. 颜色C. 质地答案:D10. 微生物的分类依据不包括()。
A. 形态特征B. 生理特征C. 生化特征D. 地理分布答案:D11. 微生物的灭菌方法不包括()。
A. 干热灭菌B. 湿热灭菌C. 辐射灭菌D. 过滤除菌12. 微生物的保存方法不包括()。
A. 冷冻保存B. 干燥保存C. 真空保存D. 化学保存答案:C13. 微生物的计数方法不包括()。
A. 直接计数法B. 稀释涂布法C. 比浊法D. 显微镜计数法答案:D14. 微生物的鉴定方法不包括()。
A. 形态鉴定B. 生理鉴定C. 生化鉴定D. 地理鉴定答案:D15. 微生物的污染控制不包括()。
A. 无菌操作B. 消毒C. 灭菌D. 污染监测答案:D16. 微生物的抗生素敏感性测试不包括()。
A. 纸片法B. 琼脂稀释法C. 肉汤稀释法D. 显微镜法答案:D17. 微生物的质粒是()。
1.微生物的分类(按大小、结构来分)非细胞型微生物、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物2、革兰阳性菌与阴性菌的细胞壁有何差异2.青霉素++ +溶菌酶++ +3、何为细菌L型,它的成因和特点是怎样的细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制,这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型。
特点:高度多形性,大小不一;大多为革兰阴性菌;有一定的致病力。
4、细菌特殊结构有哪些,它们各自的意义如何荚膜:抗吞噬作用,是病原菌的重要毒力因子;抗杀菌物质损伤,如溶酶体、补体;粘附作用,与致病性有关;形成生物膜鞭毛:细菌的运动器官;某些细菌鞭毛与致病有关;鞭毛蛋白有抗原性:H抗原菌毛:普通菌毛粘附结构,性菌毛传递质粒芽胞:有强大的抵抗力;致病性;芽胞的大小、形状、位置等随菌种而异,有重要的鉴别价值5、根据细菌对氧气的需求与否可把细菌分为哪几类;专性厌氧菌厌氧的原因(1)专性需氧菌(2)专性厌氧菌(3)兼性厌氧菌(4)微需氧菌专性厌氧菌厌氧的原因:缺乏完善的呼吸酶系统,利用氧以外的其他物质作为受氢体6、细菌个体及群体的繁殖规律细菌个体的生长繁殖:二分裂繁殖;繁殖速度一般20~30分钟一代细菌群体的生长繁殖:以培养时间为横坐标,培养物中活菌数的对数为纵坐标,可绘制一条生长曲线。
分为四期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期7、生长曲线的分期及各期的应用生长曲线分为四期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期研究细菌的生物学性状(形态染色、生化反应、药物敏感试验等)选对数期的细菌;细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生8、IMViC试验是哪几个试验,典型的大肠埃希菌的试验结果是怎样的I:吲哚试验M:甲基红试验Vi:VP试验C:枸橼酸盐于鉴定肠道杆菌,大肠埃希菌+ + - -9、热原质的定义及特点热原质:细菌合成的一种注入人体内引起发热反应的物质。
大多数是G-菌的脂多糖。
热原质耐高温,高压蒸汽灭菌不能破坏(121℃,20 min),250℃高温干烤才能破坏。
微生物学问答题第一章细菌的形态与结构1.试比较G+和G—菌细胞壁结构的特征和区别?答:2.细菌特殊结构的生理学意义?答:(1)荚膜:a,抗吞噬作用,荚膜具有保护细菌抵抗宿主吞噬细胞的吞噬和消化的作用,增强细菌的侵袭力,因而荚膜是病原菌的重要毒力因子。
b.黏附作用c.抗有害物质的损伤作用。
(2)鞭毛:有些细菌的鞭毛与致病性有关,如霍乱弧菌鞭毛是其主要致病因素,根据细菌能否运动(有无动力),鞭毛的数量。
部位和特异的抗原性,可用于鉴定细菌和进行细菌分类。
(3)菌毛:普通菌毛与细菌的致病性有密切关系,主要是细菌的黏附结构,能与宿主细胞表面的特异性受体结合,如淋球菌。
性菌毛在细菌间传递遗传物质,如R质粒。
(4)芽胞:细菌的芽胞对热力干燥,辐射,化学消毒剂等理化因素均有强大的抵抗力。
当进行消毒灭菌时,应以芽胞是否将杀死作为判断灭菌效果的指标。
根据芽胞大小,位置和数目鉴别细菌。
3.革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌细胞壁结构差异的生物学意义?答:(1)与染色有关:G+菌的细胞壁致密、肽聚糖含量高,脂含量低,酒精不容易透入;G-菌的细胞壁疏松、肽聚糖薄,外膜、脂蛋白、脂多糖脂含量极高,酒精容易透入。
细胞内结合染液中的结晶紫-碘的复合物容易被酒精溶解而脱色。
(2)与细菌对药物的敏感性有关:主要结构基础是肽聚糖。
G+菌的细胞壁对青霉素、溶菌酶敏感,青霉素可抑制肽聚糖四肽侧链与甘氨酸5联桥之间的联结,而干扰肽聚糖的合成;溶菌酶杀菌机理是水解肽聚糖N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1,4糖苷键。
G-菌的细胞壁肽聚糖少,有外膜保护,对化学药物有抵抗力,对多种抗生素敏感性低,青霉素作用效果差。
(3)与细菌致病性有关:G-菌的细胞壁含有磷酸脂多糖(LPS),其中的脂类A是其主要毒性成分。
(4)与抗原性有关:G-菌细胞壁磷酸脂多糖(LPS)中的特异性多糖具有抗原性,属于O 抗原,依其可对细菌进行分群、分型。
第二章细菌的生理1. 简述细菌生长繁殖的条件?答:(1)充足的营养物质—水、碳源、氮源、无机盐和生长因子。
.问答题:1.简述微生物的种类。
①原核细胞型微生物仅有原始核质,细胞器只有核糖体②真核细胞型微生物细胞质内细胞器完整③非细胞型微生物没有典型的细胞结构,只能在活细胞内生长繁殖。
2.简述细菌的大小与形态。
①球菌:圆球形或近似球形 1微米左右②杆菌:圆柱形大〔3-10微米〕中〔2-3微米〕小〔0.6-1.5微米〕③螺形菌:弯曲状弧菌〔2-3微米〕螺菌〔3-6微米〕螺杆菌3.分析G+菌、G-菌细胞壁结构与组成特点及其医学意义。
G+菌:肽聚糖(厚,层数多)——聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥磷壁酸G-菌:肽聚糖(薄,层数少)——聚糖骨架、四肽侧链外膜——脂蛋白、脂质双层、脂多糖〔LPS,即内毒素,包含脂质A、核心多糖、特异多糖〕医学意义:两类细菌在染色性、抗原性、致病性及对药物的敏感性差异很大。
4.分析溶菌酶、青霉素、链霉素、红霉素的杀菌机制。
溶菌酶:能切断N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间的连接,破坏聚糖骨架,引起细菌裂解。
青霉素:干扰四肽侧链和五肽交联桥之间的连接,使革兰阳性菌不能合成完整的细胞壁,导致细菌裂解死亡。
链霉素:抑制细菌蛋白质的合成。
红霉素:不可逆的结合到细菌核糖体50S亚基的靶位上,选择性抑制细菌蛋白质的合成5.表达细菌的特别结构及其医学意义。
①荚膜:抗吞噬作用;粘附作用;抗有害物质的损伤作用②鞭毛:是细胞的运动器官;有些细菌的鞭毛与致病性有关;抗原性,可以用来鉴定细菌③菌毛:一般菌毛有粘附的能力,与致病性相关;性菌毛传递遗传物质④芽胞:以杀死芽胞作为消毒灭菌是否彻底的指标;芽胞侵入可致感染;依据芽胞的特征有助于鉴别细菌。
6.分析细菌芽胞抵抗力强的原因。
①芽胞含水少,减弱了热对蛋白的变性损伤作用②芽胞被膜厚而致密,无通透性,能对抗有害物质及紫外线进入,并预防进一步脱水。
③芽胞特有成分吡啶二羧酸〔DPA〕,具有爱护和稳定蛋白质等生命物质的作用。
7.简述细菌的生长繁殖条件。
①充分的营养物质②③适宜的温度:37度④适宜的气体环境:专性需氧菌〔结核分枝杆菌〕;微需氧菌〔幽门螺杆菌〕;兼性厌氧菌〔大多数〕;专性厌氧菌〔破伤风梭菌〕8.分析细菌的代谢产物及其医学意义。
重庆理工大学2013 年攻读硕士学位研究生入学考试试题学院名称:药学与生物工程学院学科、专业名称:药学、微生物与生化药学第一部分微生物学一、名词解释(每个5分,共40分)营养缺陷型接合富营养化孔蛋白选择毒力正变株PHB 呼吸链二、选择题(每题2分,共40分)1、霉菌的基本形态是( )。
A、球状B、杆状C、螺旋状D、分枝丝状体2、发酵是以 ( )作为最终电子受体的生物氧化过程。
A、O2B、CO2C、无机物D、有机物3、细菌的芽孢是( )。
A、繁殖体B、营养体C、休眠体D、运动器官4、链霉素是从何种微生物中提取出来的( )。
A、细菌B、放线菌C、真菌D、衣原体5、接种环常用的灭菌方法是( )。
A、火焰灭菌B、干热灭菌C、高压蒸汽灭菌D、间歇灭菌6、酵母菌在( )条件下进行酒精发酵。
A、有氧B、无氧C、有二氧化碳D、有水7、下列微生物能通过细菌滤器的是( )。
A、细菌B、酵母菌C、病毒D、霉菌8、在固体平板上,青霉菌菌落周围葡萄球菌不能生长,此种关系为()。
A、竞争关系B、猎食关系C、拮抗关系D、寄生关系9、除()外都是噬菌体的最重要的特征参数。
A、潜伏期B、裂解期C、平稳期D、裂解量10、大部分微生物( )。
A、是原生动物B、帮助改善生活质量C、生活在海洋的底层D、发现于外层空间11、属于细菌细胞特殊结构部分的是( )。
A、细胞壁B、细胞膜C、芽孢D、原生质12、接合时F因子进入受体细胞,受体细胞()A、经历裂解B、快速繁殖C、变成供体细胞D、发育出线粒体13、微生物双名法两个组成部分是()。
A、目名和科名B、科名和属名C、属名和种的形容词D、属名和多样化的词14、古细菌概念的提出依据是1977年Woese对()核酸序列同源性的测定分析。
A、23S rRNAB、16S rRNAC、tRNAD、mRNA15、抗体分泌在机体的腔中如消化道的是()。
A、IgDB、IgAC、IgED、IgM16、G+细菌细胞壁的主要成分为( )。
(1)细菌生长可分为四个时期:迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期。
各期特点:a.迟缓期:细菌进入新环境后的适应阶段,为大量繁殖作准备;对数期:生长迅速;形态、染色性、生理活性典型,因此, 采用此期观察细菌的性状(形态染色、生化反应、药物敏感试验等);稳定期:由于营养物质消耗,有害代谢产物积聚,pH下降以及需氧菌菌数过密通气不良所致。
细菌的芽胞和外毒素、抗生素等代谢产物在此期产生;衰亡期:形态多样不典型(2)根据DNA片段的来源及交换方式不同,将转移与重组的方式分为:转化、接合、转导、溶原性转换和原生质体融合等。
转化(transformation):是供体菌裂解游离的DNA片段被受体菌直接摄取,供受体菌获得新的性状。
接合(conjugation):是细菌通过性菌毛相互连接沟通,将遗传物质(主要是质粒DNA)从供菌转移给受菌。
转导(transduction):是以噬菌体为载体,将供菌的遗传物质转移到受菌中去,使受菌获得新的性状。
溶原性转换(lysogenic conversion):是侵入细菌的噬菌体在溶原期可以前噬菌体形式在细菌内与细菌的染色体发生重组,导致细菌的基因型发生改变。
溶原性细菌可因此而获得新的性状(如白喉毒素、致热外毒素、肉毒毒素和α毒素)。
(3)一、细菌耐药性的概念细菌耐药性(drug resistance)亦称抗药性,是指细菌对某抗菌药物(抗生素或消毒剂)的相对抵抗性。
指病原体或肿瘤细胞对反复应用的化学治疗药物敏感性降低或消失的现象。
耐药性的程度用某药物对细菌的最小抑菌浓度(MIC)表示。
临床上有效药物治疗剂量在血清中浓度大于最小抑菌浓度称为敏感,反之称为耐药。
二、细菌耐药性的遗传机制遗传学上把细菌耐药性分为固有耐药性和获得耐药性。
(一)固有耐药(intrinsic resistance)固有耐药性指细菌对某些抗菌药物的天然不敏感。
固有耐药性细菌称为天然耐药性细菌,其耐药基因来自亲代,由细菌染色体基因决定而代代相传的耐药性,存在于其染色体上,具有种属特异性。
1什么是用革兰氏染色法,并说明其染色机制。
:革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师、细菌学家 Christain Gram创立。
细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌此色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G—)。
革兰氏染色是原生质染色,染色后细胞内形成了深紫色的结晶紫碘的复合物,而脱色与否则决定于细菌细胞壁的结构和组成。
革兰氏阴性细菌的细胞壁肽聚糖层较薄,含量较少,而脂类含量高,当酒精脱色时,脂类物质溶解,细胞壁透性增大,结晶紫碘复合物被洗脱出来,当用红色染料复染时,而被染上红色。
由于G+细菌细胞壁较厚,尤其是肽聚糖含量较高,网格结构紧密,含脂量又低,当他被酒精脱色时,引起细胞壁肽聚糖层网状结构的孔径缩小以致关闭,从而阻止了不溶性结晶紫碘复体物的逸出,当用红色染料复染时,而不易被染上红色,故菌体呈紫色。
2以金黄色葡萄球菌为例,说明革兰氏阳性细菌的肽聚糖特点。
:聚糖骨架是由两种氨基糖即N-乙酰葡糖胺和N-乙酰胞壁酸交替间隔排列,经B-1,4糖苷键连接而成的,四肽侧链连接在胞壁酸上,其氨基酸依次为L-丙氨酸、D-谷氨酸、L-赖氨酸、D-丙氨酸,第三位的L-赖氨酸通过五个甘氨酸组成的交联桥连结到相邻聚糖骨架四肽侧链第四位的D-丙氨酸上,构成坚韧的三维立体网状结构。
3芽孢为什么具有较强的抗逆性?细菌的芽孢有何实践重要性?:细菌芽孢抗逆性强的原因:a芽孢的含水量低,特别是自由水远低于营养细胞,使核酸和蛋白质不易变质。
b芽孢的酶组成型与细胞的酶组成型有差别,芽孢只含又少量酶,并处于不活跃状态。
C含有2,6-吡啶二羧酸,与Ca+结合成大分子物质d芽孢壁厚e芽孢中含硫氨基酸高。
细菌芽孢的实践意义:a芽孢的有无在细菌鉴定中是一项重要的形态指标。
B芽孢的有无利于这类菌种的筛选和保藏。
C由于芽孢有很强的耐热性和其他抗性,因此是否能杀灭一些代表菌的芽孢就成了衡量各种消毒灭菌措施的主要指标。
注 W开头的为问答题1.简述微生物的共性2.简述微生物的发现和微生物学的发展分那几个时期3.简述球菌的基本形态及其分裂方式。
4.简述原核生物与真核微生物的主要区别:5.简述细菌细胞壁的主要功能6.简述革兰氏阳性菌的细胞壁肽聚糖的结构特点7.简述G+菌细胞壁磷壁酸(teichoic acid)的生理功能8.简述G-菌细胞壁与G+菌细胞壁肽聚糖的主要区别9.简述G-菌外膜(outer membrane)的基本结构10.简述G-菌外膜的主要功能11.W试比较G+菌和G-菌细胞壁的生物学特性12.W试述缺壁细胞的种类及其生物学特点、意义13.W试述革兰氏染色的方法及机制14.简述细菌细胞膜的生理功能:15.W试述细胞内含物(inclusion body)及其主要功能。
16.W细菌的特殊结构有哪些?各有何功能?17.简述芽孢的特点:18.芽孢的抗逆性主要表现在哪些方面?19.简述芽孢的形成过程20.W何谓芽孢的萌发,试述芽孢萌发的过程21.试述芽孢的耐热性机制22.简述研究芽孢的意义23.何谓孢囊?孢囊和芽孢的异同点?24.W何谓糖被?试述糖被的分类、化学性质和功能?25.何谓糖被?可分为哪几种?26.简述糖被的化学性质?27.简述糖被的功能28.W试述鞭毛的结构及其功能29.W何谓菌毛?其有何特点和功能?30.W何谓性毛?有何特点和功能?31.简述酵母菌细胞壁的结构特点32.简述丝状真菌细胞壁的结构特点(以粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)为例):33.简述真核微生物鞭毛与纤毛的构造34.何谓几丁质酶体(chitosome)?有何功能?35.何谓氢化酶体(hydrogenosome)?有何功能?36.W举例说明微生物的繁殖方式37.微生物生态学的研究意义?38.简述微生物在生态系统中的作用?39.简述微生物参与的C\N\S\P的循环?40.简述微生物种群之间的相互关系?41.比较陆生、水生、大气生境中的微生物在生态分布、存在状态、生理活性等方面的异同点?42.嗜极微生物在极端环境下生存的基础是什么?嗜极微生物研究的意义?43.发光细菌和海洋鱼类的共生作用有哪些?44.生物体中正常菌群的功能有哪些?45.固体废弃物处理与资源化技术通常有哪些?46.哪些方面说明微生物具有降解环境污染物的巨大潜力?47.微生物修复环境污染的强化措施有哪些?(为什么说生物强化可以在生物修复中发挥重要的作用?)48.环境微生物污染监测包括哪几方面?49.蛋白质和核酸分子作为微生物进化谱系分析所依据的原理是什么?(必须具备的条件?)50.为什么16SrRNA或18SrRNA作为研究微生物进化的主要对象?51.微生物的分类鉴定要用到那些特征和技术?52.若让你分离和鉴定一种环境有机污染物的高效降解细菌,你如何设计研究方法?(结合了微生物生态学和微生物的分类鉴定两章内容)53.现代分子生物学和免疫学技术的采用在微生物鉴定中的应用?54.古生菌的多样性表现在哪些方面?55.微生物在生物进化中的作用?56.微生物资源的特点和有待开发的方面?57.微生物生长繁殖与控制、生态与系统发育部分58.如果从环境中分离得到你所需要的细菌,你该如何设计实验?59.论述细菌群体生长规律、特点及在发酵工业生产实践上的指导意义?(大题.简述细菌群体生长规律及特点?或者什么是无分枝单细胞微生物的生长曲线?它包括几个时期,各时期的特点及在实际生产的应用?)60.若让你分离和鉴定一种环境有机污染物的高效降解细菌,你如何设计研究方法?(结合了微生物生态学和微生物的分类鉴定两章内容)61.影响延迟期长短的因素有哪些?及对实践的指导意义?62.掌握对数生长期特点的意义是什么?63.描述丝状微生物生长的特点?64.恒化培养与恒浊培养的概念、原理、特点及应用?65.获得同步培养的方法有哪些?66.无性孢子和有性孢子各有哪些?67.真菌的有性繁殖包括三过程?68.酵母菌的繁殖方式如何?69.温度对微生物的生长影响主要体现在哪几个方面?70.嗜冷微生物在低温下生长的机理推测原因是什么?71.高温型微生物在高温下生长的机理原因是什么?72.微生物对热的耐受力与哪些因素有关?73.温度过低造成微生物死亡的原因是什么?74.专性厌氧菌氧毒害的原理是什么?75.培养好氧微生物时采取的措施?培养厌氧微生物时采取的措施?76.环境pH值对微生物生长的影响表现在哪些方面?77.微生物生长量测定的方法有那些?并简述?78.防腐的措施有哪些?防腐的机理是什么?79.灭菌与除菌常用的方法有哪些?80.紫外线杀菌或诱变原理是什么?81.耐药菌的耐药机理有哪些?使用抗生素应注意什么?82.分别以大肠杆菌和啤酒酵母为例阐明原核和真核微生物基因组结构的特点?83.以詹氏甲烷球菌为例简述古生菌的基因组结构特征?84.染色体外遗传物质的结构和特性?85.简述分解代谢与合成代谢的关系。
重庆理工大学硕士研究生试题专用纸重庆理工大学2015年攻读硕士学位研究生入学考试
试题
学院名称:药学与生物工程学院
学科、专业名称:微生物与生化药学
第一部分微生物学(150分)
一、名词解释(每小题5分,共40分)
1. 三域学说
2. 分生孢子
3.噬菌斑
4.生长因子自养型微生物
5. 异型乳酸发酵
6.分批培养
7.孢囊
8.贫营养细菌
二、单选题(每小题3分,共30分)
1.细菌菌毛的主要功能是()。
A.附着 B. 运动 C.传递遗传物质 D.致病性
2.酵母菌除了细胞核内含有DNA外,其他含有DNA的部分还有()。
A.色素体和内质网
B.线粒体和2μm质粒
C. 内质网和2μm质粒
D. 内质网和线粒体
3.酵母菌细胞壁是由特殊成分组成的,其外层中层内层分别是()。
A.甘露聚糖蛋白质葡聚糖
B. 葡聚糖蛋白质甘露聚糖
C.几丁质蛋白质葡聚糖
D.纤维素甘露聚糖葡聚糖
4.病毒的核酸是()。
A.DNA
B.RNA
C.DNA和RNA
D. DNA或RNA
5.细菌中营养物质进入细胞的一种主要方式是()。
A.单纯扩散
B.促进扩散
C.主动运输
D.基团移位
6.在下列微生物中()能进行产氧光合作用。
A.大肠杆菌
B.放线菌
C.蓝细菌
D.紫硫细菌
1。
微生物与生化药学问答题第二章基因工程制药1. 利用基因工程技术生产药物的优点?答:1、大量生产过去难以获得的生理活性蛋白和多肽,为临床使用提供有效的保障;2、可以提供足够数量的生理活性物质,以便对其生理、生化和结构进行深入的研究,从而扩大这些物质的应用围;3、可以发现、挖掘更多的源性生理活性物质;4、源生理活性物质在作为药物使用时存在的不足之处,可通过基因工程和蛋白质工程进行改造和去除;5、可获得新型化合物,扩大药物筛选来源。
2. 基因工程药物制造的主要步骤?答:目的基因的克隆;构建DNA 重组体;将DNA 重组体转移入宿主菌构建工程菌;工程菌的发酵;外源基因表达产物的分离纯化;产品的检验等。
3. 化学合成目的基因的先决条件?答:较小的蛋白质或多肽的编码基因可以采用人工化学合成,其先决条件:已知目的基因的核苷酸序列或蛋白质的氨基酸序列,按相应的密码子推导出DNA 的碱基序列。
4. 人工合成基因的限制有哪些?答:1、不能合成太长的基因,50~60 个碱基对;2、人工合成碱基对时,遗传密码的简并会为选择密码带来很大的困难:3、费用高。
5. 基因工程宿主菌应满足那些要求?目前应用最广泛的宿主菌有哪些?答:1、容易获得较高浓度的细胞;2、能利用廉价易得的原料;3、不致病、不产生毒素;4、发热量低,需氧低,适当的发酵温度和细胞形态;5、容易进行代调控;6、容易进行DNA 重组技术操作;7、产物的产量、产率高,产物容易提取。
宿主菌可分两大类:1、原核细胞:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌;2、真核细胞:酵母菌、丝状真菌、哺乳动物细胞。
6. 表达载体须具备哪些条件?常用载体有哪些?答:1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存。
2、具多个限制酶切点,但每种切口最好只有1 个,以便与外源基因连接。
3、具有某些标记基因,便于进行筛选。
4、所产生的mRNA 必须有翻译的起始信号。
5、具有很强的启动子。
6、有很强的终止子。
常用载体有:1、细菌细胞的质粒。
2、λ噬菌体载体。
7. 真核基因在大肠杆菌中的表达形式?答:有三种形式:(1)融合蛋白的表达形式。
(由一段短的原核多肽和真核蛋白结合在一起的蛋白质,称为融合蛋白.。
)(2)非融合蛋白的表达形式。
(3)分泌型表达形式。
8. 表达用的酵母菌应满足哪些条件?答:表达用的酵母宿主菌应具备:①体生长力强.②菌体蛋白酶要较弱.③菌株性能稳定.④分泌能力强。
9.基因工程菌在发酵过程中对发酵罐有哪些要求?答:①要提供菌体生长的最适宜条件;②培养过程不得污染,保证纯菌培养;③培养及消毒过程中不得游离出异物;④不能干扰细菌代活动。
10.离子交换层析的原理?答:当离子交换剂处于水溶液中时,活性离子可以从活性基因上解离下来,在基质骨架与溶液间自由迁移,并可与溶液间的同性离子,因与活性基因的化学亲和力不同而发生交换,即发生离子交换作用。
11.疏水层析的基本原理?答:蛋白质表面多由亲水基团组成,也有一些疏水性较强的疏水区。
在高盐浓度时,蛋白质表面疏水部位的水化层被破坏,暴露出疏水部位,疏水作用增强,与固定相上的疏水基团产生疏水性作用而被吸附;盐浓度降低时蛋白质疏水作用减弱,目的蛋白质被逐步洗脱下来。
12.亲和层析的基本原理?答:通过将具有亲和力的两个分子中一个固定在不溶性基质(也称载体)上,利用分子间亲和力的特异性和可逆性,对另一个分子进行分离纯化。
(被固定在基质上的分子称为配体,配体与基质共价结合,构成亲和层析的固定相,称为亲和吸附剂。
)13.凝胶过滤层析的优缺点?答:优点:设备简单、操作方便、样品回收率高、实验重复性好、不改变样品生物学活性。
缺点:分辨率较低,尤其是相对分子质量相近的分子之间。
第三章细胞工程制药1.动物细胞的生理特点?答:1 细胞分裂周期长(动物细胞分裂所需时间一般为12~48h。
)。
2 细胞生长需贴附于基质,有接触抑制现象。
3 二倍体细胞寿命有限(异倍体细胞系寿命长)。
4 对生长环境要求敏感。
5 培养基要求高。
6 合成的蛋白质有修饰。
2.动物细胞培养时加入血清的作用机制?答:提供基本营养物质;提供激素和各种生长因子;提供贴附因子和伸展因子;对培养中的细胞起到某些保护作用;提供PH\缓冲物质,调节培养基PH;影响培养系统中的某些物理特性如:剪切力、黏度、渗透压和气体传递速度等。
3.无血清培养基的优点?答:优点:①可避免血清批次间的质量变动,提高细胞培养和实验结果的重复性。
②避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染;③避免血清组分对实验研究的影响;④有利于体外培养细胞的分化;⑤可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化。
(缺点:主要表现为细胞的适用围窄,细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响,培养的保存和应用不如传统的合成培养基方便。
)4.动物细胞大规模培养的方法有哪些?答:①根据培养细胞的种类:原代细胞培养和传代细胞培养。
②根据培养基的不同:液体培养和固体培养。
③根据生产实际:贴壁培养、悬浮培养和贴壁-悬浮培养(假悬浮培养)。
5.动物细胞悬浮培养的优缺点?答:优点:适用的细胞较广;容易更换培养液;容易采用灌流培养的方式使细胞达到高密度。
缺点:操作比较麻烦;培养条件不易均一;传质、传氧较差;不能有效监测细胞的生长;需要合适的贴附材料和足够的面积;扩大培养比较困难,投资大。
6.动物细胞贴壁培养的优缺点?答:优点:操作简单,培养的体积大、成本低;培养条件比较均一;传质、传氧较好;传代时无需消化分散;容易扩大培养规模。
缺点:由于细胞体积较小,难采用灌流培养,细胞密度较低7.动物细胞包埋或微囊培养的优点?答:包埋在在体的细胞可以获得保护,避免了剪切力的损害。
可以获得较高的细胞密度,一般都在10^7~10^8 个/ml 以上。
可以使产品浓缩在微囊,利于下游产物的纯化。
可以采用多种生物反应器进行大规模培养。
8.动物生物反应器的作用、类型及应满足哪些条件?答:应满足的条件:材质无毒;结构的传质、传热和混合性能;密封性好;参数能自动检测和调控;长期连续运转;面光滑、无死角;拆装、清洁、维修和消毒;设备成本。
动物生物反应器的作用:是给动物细胞的生长代提供一个最优化的环境,从而使其在生长代过程中产生出最大量、最优质的所需产物。
反应器类型:搅拌罐式反应器、气升式生物反应器、中空纤维式生物反应器、透析袋或膜式生物反应器和固定床或流化床式生物反应器。
第四章抗体工程制药1.免疫导向疗法为什么没有成功?从哪些方面可以对单克隆抗体进行改造?答:阻碍:A.单克隆抗体的均是鼠源性抗体,应用于人体可可产生人鼠源抗体,加速了排斥反应,在人体的半衰期只有5-6h,难以维持有效药物的作用靶组织时间。
B.完整的抗体份子Ig 分子质量过大,难以穿透实体肿瘤组织,达不到有效的治疗浓度。
改造:A.降低单克隆抗体的免疫原性。
B.降低单克隆抗体的相对分子质量(1)人-鼠嵌合抗体:由人抗体的恒定区与鼠源单抗的可变区融合得到。
(2).改型抗体:把鼠抗体的CDR 序列移植到人抗体的可变区,所得到的抗体(3)小分子抗体小分子抗体包括:Fab、Fv 或ScFv 、单域抗体、最小识别单位。
这些部位都可以改造。
2.单克隆抗体的制备流程及方法。
流程:将有用抗原免疫过的淋巴细胞与骨髓瘤用PEG 进行杂交融合。
把融合的细胞在HAT 培养基上选择出来。
将选择后的整合细胞分散,培养成杂交瘤细胞。
使能产生单克隆抗体的杂交瘤细胞克隆化。
杂交瘤细胞抗体的性状的鉴定。
单克隆抗体的大量制备,一是在培养液更是繁殖,二是注入纯系小鼠腹腔量繁殖。
单克隆抗体的纯化。
制备方法:体诱生法和体外法。
3.动物体诱生法制备单克隆抗体的优缺点答:优点:简单,比较经济,所得单克隆抗体量较多且效价较高,可有效地保存杂交瘤细胞株和分分离已污染的杂菌的杂交瘤细胞株。
缺点:小鼠腹水中混有来自小鼠的多种杂蛋白,给纯化带来难度。
4.鼠源性单克隆抗体改造后的抗体类型及各自的特点?答:①人-鼠嵌合抗体:保持鼠源性单克隆抗体的抗原结合特异性,但对人免疫原性大幅下降了。
②改型抗体:鼠源性单克隆抗体的互补决定区(CDR 区)序列替换人的Ig 分子中的CDR 序列。
基本消除免疫原性。
③小分子抗体:Fa b 将Ig的重链在铰链区的C 端裂解,获得两个完全相同的抗原结合片段。
才铰链区和二硫键相连。
有完整的生双价抗体活性,相对分子质量减少为三分之一,排斥反应也降低,人体很稳定。
Fv 含有L 链和Fd链一半的N 端可变区。
有完整的抗体相似的结能力,相对分子质量减少为六分之一。
④单链抗体scFv:单链易改造;体半衰期短,免疫原性低;稳定性低,重轻链之间的分子间作用力弱;功能单一,只能与一种抗原特异性结合;亲和力低,稳定性差,体清除过快。
域抗体:只由一个CDR 构成。
5.多功能抗体的优点。
答:具有高亲和力性能,由于具有多个结合价,可同时与细胞膜上相邻的两个或多个靶抗原结合,与肿瘤细胞表面抗原的多价结合有利于肿瘤的影像分析及治疗。
6.有应用价值的多功能抗体应具备有哪些特征。
能高选择性,高亲和性地同靶抗原或肿瘤相关抗原结合。
在血循环中,与效应细胞或细胞毒触发分子有较低亲和力。
应为人源化抗体,最大限度地减少人抗鼠蛋白的排斥反应,使得复给药不受限制。
分子应大小适中,既能渗透到肿瘤组织部,又能保证适当的滞留时间。
7.抗体导向酶-前药疗法中酶和前药有哪些要求?答:(1)对酶的要求:活化酶最好来自非哺乳动物,而人体不存在相应的类似物,以保证高度的特异性。
酶还能通过化学交联与单抗结合,在较长的一段时间保持稳定性和活性。
(2)对前药的要求:前药本身应无活性或活性很低,只能被相应的酶活化为高度扩散性的小分子,以实现在肿瘤组织的广泛分布和杀伤肿瘤细胞。
而且前药还应具有极短的生物半衰期,避免重新进入循环产生非特异性毒性。
第六章酶制药工程1.用微生物生产酶制剂的优点:答:(1)微生物种类多,品种齐全(2)微生物生长繁殖快,生长周期短,产量高(3)培养方法简单,原料来源丰富,价格低廉,经济效益高,并可以通过控制培养条件来提高酶的产量(4)微生物具有较强的适应性和应变能力2.优良的产酶菌株应满足哪些要求:答:1 繁殖快,产酶量高,酶的性质应符合使用要求,最好是产生胞外酶的菌,2 不是致病菌,在系统发育上与病原体无关,也不产生有毒物质,3 产酶性能稳定,不易变异退化,不易感染噬菌体,4 能利用廉价的原料,发酵周期短,易于培养3.固定化酶的优点:答:1 可以较长时间多次使用,酶的稳定性高。
2 反应后,酶与底物和产物易于分开,易于纯化,产品质量高。
3 反应条件易于控制。
4 酶的利用率高。
5 比水溶性酶更适合于多酶反应。
4.物理吸附法制备固定化酶的优缺点:答:优点:操作简单,可选用不同电荷和不同形状的载体,固定化过程和纯化过程同时实现,酶失活后载体仍可以再生。