菠萝蛋白酶的制备原理

从菠萝中提取菠萝蛋白酶
菠萝蛋白酶是一种有机物，也称为溶菌酶或蛋白水解酶。

它的特点是可以分解蛋白质，具有较强的酸性和碱性环境适应能力，因此，广泛应用于医疗、食品、化妆品等领域中。

从菠萝中提取菠萝蛋白酶是一项艰巨的任务。

以下是一些步骤：第一步是采集新鲜的菠萝果肉。

必须选用成熟度好的金丝菠萝果肉。

应选择外皮金黄色、果肉红黄相间的菠萝果肉。

第二步是制备浸出液。

将新鲜的菠萝果肉去皮、去核，切成小块，加入适量的水，搅拌并煮沸，经过静置、过滤，即可得到浸出液。

第三步是提取菠萝蛋白酶。

将制备好的浸出液冷藏，待其沉淀，将上层的冰冷水慢慢倒出，留下沉淀。

然后，在沉淀中加入适量的酸性酶解剂，轻轻摇晃，放置几小时。

第四步是酶活测定。

将提取的菠萝蛋白酶放在适宜的酶活测定条件下，如适宜的温度和酸碱度等，测定其活性或浓度。

以上是从菠萝中提取菠萝蛋白酶的一些步骤。

菠萝蛋白酶的应用范围广泛，可用于肉制品、啤酒、乳制品、水产品等食品中。

同时，它还能被用于医疗和化妆品领域，例如用于抗肿瘤、消炎、增加皮肤弹性等。

因此，菠萝蛋白酶的提取十分重要，细节决定了酶的纯度和活性，也影响到菠萝蛋白酶在不同领域中的应用。

菠萝蛋白酶提取一、实验目的：1、了解菠萝蛋白酶的提取和纯化工艺2、优化和加深熟悉菠萝蛋白酶提取技术二、实验原理：菠萝蛋白酶(Bromelain，简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤梨酵素)是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。

其外观为浅灰色粉末状，分子量为33000 ，等电点为9.55 。

品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工,采用超滤方法进行过滤浓缩,低温冷冻干燥而得的。

产品已被广泛应用于食品、医药等行业。

结果表明。

提取菠萝中菠萝蛋白酶最佳提取工艺条件是添加单宁溶液的浓度为0．2％，提取时最适pH值为6．5～8．5左右，而最适提取温度为60℃。

菠萝蛋白酶作为一种食品添加剂可用于肉质嫩化，啤酒澄清，还用于干酪、明胶及水解蛋白的生产。

在医药上它可以治疗水肿及多种炎症；它能迅速溶痂，对正常组织无害，不影响植皮，适用于中小面积深度烧伤的治疗。

三、实验步骤操作要点：菠萝蛋白酶的提取称取1 kg制备好的鲜果皮汁，加5％苯甲酸钠溶液10 ml搅匀，以4 000 r／min离心7 min，取上清液倒人干净烧杯中。

上清液分装在6个小烧杯中，每个装100 ml菠萝汁，分别缓缓加入空白、0．1％、0．2％、0．3％、0．4％、0．6％单宁溶液10 ml，边加边拌约1 5min，沉淀物析出，静止40 min。

虹吸除去上清废液，把酶复合沉淀物倒入离心杯中，以4 000 r／min。

离心5 min，倒掉上清废液，得到酶糊复合物。

分离、洗涤和保护把提取的蛋白酶糊倒人烧杯中，加0．1％EDTA溶液100 ml搅匀，再将1．5％氯化钠溶液200 ml倒人烧杯中搅匀，以4 000 r／min离心7 min，倒掉上清废液，得到洗涤剂I酶复合沉淀物。

把洗涤剂I酶复合沉淀物倒入烧杯中，加0．5％乙酸锌溶液20 min，搅拌均匀，静止5 min，加0．06％抗坏血酸溶液30 ml，搅匀，静止5 rain，加1．5％氯化钠溶液20 ml，搅匀，静止5 min，最后再加0．5％EDTA溶液20 ml，搅匀，静止5min，以4 000 r／min离心7 min，把上清废液倒掉，得到洗涤剂Ⅱ酶复合沉淀物。

[菠萝蛋白酶提取]果菠萝蛋白酶的提取失败原因菠萝蛋白酶提取一、实验目的：1、了解菠萝蛋白酶的提取和纯化工艺2、优化和加深熟悉菠萝蛋白酶提取二、实验原理：菠萝蛋白酶(Bromelain，简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤梨酵素)是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。

其外观为浅灰色粉末状，分子量为 33000 ，等电点为 9.55 。

品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工,采用超滤方法进行过滤浓缩,低温冷冻干燥而得的。

产品已被广泛应用于食品、医药等行业。

结果表明。

提取菠萝中菠萝蛋白酶最佳提取工艺条件是添加单宁溶液的浓度为0．2％，提取时最适pH值为6．5～8．5左右，而最适提取温度为60℃。

菠萝蛋白酶作为一种食品添加剂可用于肉质嫩化，啤酒澄清，还用于干酪、明胶及水解蛋白的生产。

在医药上它可以治疗水肿及多种炎症；它能迅速溶痂，对正常组织无害，不影响植皮，适用于中小面积深度烧伤的治疗。

三、实验步骤操作要点：菠萝蛋白酶的提取称取1 kg制备好的鲜果皮汁，加5％苯甲酸钠溶液10 ml搅匀，以4 000 r／min离心7 min，取上清液倒人干净烧杯中。

上清液分装在6个小烧杯中，每个装100 ml菠萝汁，分别缓缓加入空白、0．1％、0．2％、0．3％、0．4％、0．6％单宁溶液10 ml，边加边拌约1 5min，沉淀物析出，静止40 min。

虹吸除去上清废液，把酶复合沉淀物倒入离心杯中，以4 000 r／min。

离心5 min，倒掉上清废液，得到酶糊复合物。

分离、洗涤和保护把提取的蛋白酶糊倒人烧杯中，加0．1％EDTA溶液100 ml搅匀，再将1．5％氯化钠溶液200 ml倒人烧杯中搅匀，以4 000 r／min离心7 min，倒掉上清废液，得到洗涤剂I酶复合沉淀物。

把洗涤剂I酶复合沉淀物倒入烧杯中，加0．5％乙酸锌溶液20 min，搅拌均匀，静止5 min，加0．06％抗坏血酸溶液30 ml，搅匀，静止5 rain，加1．5％氯化钠溶液20 ml，搅匀，静止5 min，最后再加0．5％EDTA溶液20 ml，搅匀，静止5min，以4 000 r／min离心7 min，把上清废液倒掉，得到洗涤剂Ⅱ酶复合沉淀物。

菠萝蛋白酶‎的制备及活‎性测定背景菠萝蛋白酶‎(Brome‎l ain)，别名菠萝酶‎，是存在于菠‎萝(Anana‎COmOS‎l2S)植株中的蛋‎白质水解酶‎，为浅黄色无‎定形粉末，微有异臭。

菠萝的果、茎、柄和叶片中‎都含有菠萝‎蛋白酶。

一般从菠萝‎果中提取的‎称为果菠萝‎蛋白酶，从菠萝皮、茎中提取的‎为茎菠萝蛋‎白酶。

八成熟的菠‎萝果汁含有‎约0．4％的菠萝蛋白‎酶，成熟的菠萝‎果汁含有O‎．3％左右的菠萝‎蛋白酶，茎汁含8．7％的菠萝蛋白‎酶(Murac‎h i，et a1．，1964)。

1981年‎，Marca‎n o首先发‎现菠萝汁中含‎有蛋白水解‎酶，随后Wil‎l stat‎t er，Bergm‎a nn和M‎a rtin‎相继指出，菠萝蛋白酶‎存在于果、皮和茎部中‎，存在于茎部‎的称为茎酶‎(Stemb‎r omel‎a in E．C．3．4．22．4)，存在于果汁‎中的酶称为‎果酶(Fruit‎brome‎l ainE‎．C．3．4．22．5)。

Murac‎h i和Ne‎u rath‎、E1．G harba‎w i和Wh‎i take‎r采取层析‎法分离提取‎了菠萝蛋白‎酶并研究了‎它的活性成‎分。

结构特性研‎究表明，果菠萝蛋白‎酶是酸性酶‎，等电点为p‎H4．6，茎菠，约为33，000，等电点为p‎H9．5，其活性中心‎的氨基酸顺‎序和催化机‎理与木瓜蛋‎白酶相似，并确定茎菠‎萝蛋白酶为‎糖蛋白。

Ota S et aL研究指‎出，茎菠萝酶分‎子量为36‎000，末端氨基酸‎残基是丙氨‎酸，果酶分子量‎为3000‎0，末端氨基酸‎残基也为丙‎氨酸，碳水化合物‎分析与Mu‎r acll‎i 的分析结‎果相似。

1988年‎，T．L．迈诺特等由‎十二烷基硫‎酸钠．聚丙烯胺凝‎胶电泳(SDS．PAGE)测定果菠萝‎蛋白酶分子‎量2220‎0．25080‎，等电点3．8~4．8。

菠萝蛋白酶‎是各种酶的‎混合物，已知菠萝蛋‎白酶粗品中‎包含至少五‎种蛋白水解‎酶，也包含非蛋‎白水解酶，包括酸性磷‎酸酶和过氧‎化物酶，并含有淀粉‎酶和纤维素‎酶活性，还存在其他‎成分。

菠萝蛋白酶的提取原理菠萝蛋白酶是一种天然的蛋白酶，广泛存在于菠萝的果汁和果肉中。

提取菠萝蛋白酶的原理主要涉及菠萝蛋白酶的特性、细胞破碎、酶的活化与稳定化等过程。

下面将详细介绍菠萝蛋白酶的提取原理。

菠萝蛋白酶是一种催化蛋白质水解的酶，属于半胱氨酸蛋白酶家族。

菠萝蛋白酶具有较强的蛋白质降解活性，可以在酸性条件下或中性条件下发挥作用。

在酸性条件下，菠萝蛋白酶通常具有最佳催化活性。

提取菠萝蛋白酶的第一步是破碎菠萝，以释放细胞内的菠萝蛋白酶。

菠萝果实的表面有一层防护性的角质层，需要先去除这层角质层，使其暴露出果肉。

然后，将果肉切成小块，用果汁机或搅拌器进行细胞破碎，以破坏细胞壁释放细胞内的菠萝蛋白酶。

提取菠萝蛋白酶的第二步是酶的活化。

菠萝蛋白酶是一种活性酶，在一定条件下可以被活化。

常用的活化剂有酒精、盐酸、醋酸等，其中以酒精最常见。

将细胞破碎液与酒精混合，放置一段时间，使菠萝蛋白酶被活化。

提取菠萝蛋白酶的第三步是稳定酶的活性。

由于菠萝蛋白酶容易被环境因素（如温度、pH等）影响而失去活性，因此需要采用一些方法来稳定酶的活性。

常用的方法包括温度控制、pH调节、添加保护剂等。

例如，可以将活化后的菠萝蛋白酶溶液进行冷冻保存或加入抗氧化剂来延缓酶的衰老过程。

提取菠萝蛋白酶的最后一步是纯化酶。

菠萝蛋白酶的提取通常是作为一种复杂液体提取物，其中除了目标酶外还含有其他杂质。

为了获得高纯度的菠萝蛋白酶，需要进行纯化步骤，如离心、过滤、层析等。

这些步骤可根据酶的特性和特定实验要求来选择。

总的来说，菠萝蛋白酶的提取原理主要涉及菠萝蛋白酶的特性、细胞破碎、酶的活化与稳定化以及纯化。

通过这些步骤，可以获得菠萝蛋白酶的高纯度提取物，为进一步研究和应用菠萝蛋白酶提供了基础。

在实际操作过程中，还需根据具体需求和条件进行改进和优化，以提高菠萝蛋白酶的提取效果。

菠萝蛋白酶生产工艺
菠萝蛋白酶是一种能够降解蛋白质的酶，广泛应用于食品、酒类、制酶等行业中。

下面我将介绍菠萝蛋白酶的生产工艺。

菠萝蛋白酶的生产工艺主要包括以下几个步骤：原料准备、发酵、分离提纯和产品包装。

首先是原料准备。

菠萝蛋白酶的原料主要是新鲜菠萝。

首先将新鲜菠萝去皮、去核，然后用搅拌机将其搅碎成糊状物。

得到的菠萝糊经浸泡蛋白酶活性稳定剂，以提高蛋白酶的活性和稳定性。

接下来是发酵。

将经过处理的菠萝糊加入到发酵罐中，并加入适量的发酵基质，如糖、氨基酸等。

在适当的温度和pH条件下，接种适量的菌种，进行发酵培养。

发酵过程中需要控制好温度、pH值和搅拌速度等参数，以促进菌种生长和蛋白酶的产生。

发酵完成后，进行分离提纯。

首先对发酵液进行离心，分离出菠萝蛋白酶。

然后采用酒精沉淀、超滤、析出等一系列分离纯化工艺，去除杂质并提高蛋白酶的纯度。

最后是产品包装。

将提纯后的菠萝蛋白酶经过过滤、浓缩等处理，最终得到浓缩度适宜的酶液。

将酶液灌装到容器中，然后进行杀菌、封装等工序，最终得到成品。

总的来说，菠萝蛋白酶的生产工艺是一个较为复杂的过程，需
要进行原料处理、发酵、分离提纯和产品包装等多个步骤。

不同的厂家和工艺流程可能有所不同，但一般都遵循以上的基本流程。

通过科学合理的工艺控制，可以获得高活性和纯度的菠萝蛋白酶产品。

从菠萝中提取菠萝蛋白酶
菠萝蛋白酶是一种酶类蛋白质，可分解蛋白质成分。

菠萝是其主要来源之一，因此，从菠萝中提取菠萝蛋白酶成为一种常见的方法。

提取菠萝蛋白酶的方法可以通过多种方式实现，其中包括机械压榨、超声波处理、低温浸泡、固相萃取和酵素技术等。

不同的方法会对提取效果产生不同的影响。

机械压榨是最简单的提取方法之一，通过将菠萝果肉或茎汁挤压后，分离出含有菠萝蛋白酶的液体。

超声波处理则是一种快速、高效的提取方法，它利用超声波能量刺激菠萝细胞释放菠萝蛋白酶。

低温浸泡是一种保留菠萝蛋白酶活性的提取方法，通过在低温下将菠萝浸泡一段时间，可提高菠萝蛋白酶的纯度和活性。

固相萃取是一种常用的精细化提取方法，它将菠萝蛋白酶从其他成分中分离出来，通过针对菠萝蛋白酶特异性的化学反应，可将菠萝蛋白酶浓缩，从而得到纯度高的菠萝蛋白酶。

酵素技术则是利用大肠杆菌等细菌表达人造菠萝蛋白酶，通过纯化酶产物得到菠萝蛋白酶。

总之，从菠萝中提取菠萝蛋白酶是一种常见的方法，通过不同的提取技术可以得到不同品质的菠萝蛋白酶。

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菠萝蛋白酶（菠萝酶）菠萝蛋白酶编辑词条B 添加义项 ?菠萝蛋白酶是从菠萝水果皮、茎、芯等部分经生物技术制得的一种纯天然植物蛋白酶，其分子量为33000，等电点为9.55，属于疏基蛋白酶，其活动中心为疏基（-SH），能进行蛋白质水解等各种生化反应，菠萝蛋白酶是一种天然的、无毒无害，卫生安全的蛋白酶，它可广泛应用食品、医药及生物等行业。

目录1基本介绍2组成结构3理化性质4制备方法5价值应用6注意事项折叠编辑本段基本介绍菠萝蛋白酶(Bromelain），简称菠萝酶，亦称为凤梨酶或凤111梨酵素。

是从菠萝果茎、叶、皮提取出来，经精制、提纯、浓缩、酶固定化、冷冻干燥而得到的一种纯天然植物蛋白酶。

其外观为浅灰色粉末状，分子量为33000，等电点为9.55。

品质最佳的菠萝蛋白酶是利用菠萝的中茎加工，采用超滤方法进行过滤浓缩，低温冷冻干燥而得的。

产品已被广泛应用于食品、医药等行业。

折叠编辑本段组成结构菠萝蛋白酶是由多种不同分子量和分子结构的酶所组成的酶系，其中至少包含了5种蛋白水解酶。

除此之外，有的还含磷酸酯酶、过氧化物酶、纤维素酶、其它糖苷酶及非蛋白物质。

菠萝蛋白酶是一种糖蛋白，分子结构中含有一个寡糖分子，由木糖（xylose，xy1）、岩藻糖（fucose，Fuc）、甘露糖（mannose，Man）和N—乙酰葡糖胺（N—aceltylglu2cosamine，GlcNAc）组成，共价连接在肽链上，Ishihara和Yasuda等人分别推测出了糖分子的结构。

折叠编辑本段理化性质菠萝蛋白酶的分子量为30000－33000，等电点为9155，酶液的最大吸收波长为280nm。

因其由多种酶分子构成，故在催化底物上具有多样性。

它能分解蛋白质、肽、脂和酰胺，其水解蛋白的活性较木瓜蛋白酶高10倍以上。

菠萝蛋白酶催化的必需基团不是糖分子，而是所含肽链中的巯基；另外，菠萝蛋白酶分子结构中的羧基和羟基亦与酶活性无关。

菠萝蛋白酶的催化活性易受到pH、温度、金属离子、EDT A 及还原剂等的影响。

菠萝蛋白酶提取一．实验目的:1.了解菠萝蛋白酶的基本性质，设计提取方法并测性其蛋白总量及酶活性；2.计算从菠萝中提取菠萝蛋白酶时每步的回收率，判断提取方法的优劣。

二．实验原理：菠萝蛋白酶外观为白色至浅棕黄色无定形粉末；可溶于水，水溶液无色至淡黄色，有时有乳白光，不溶于乙醇、氯仿和乙醚；属糖蛋白。

主要作用原理是使多肽类水解为低分子量的肽类，尚有水解酰胺基键和酯类的作用。

其作为一种食品添加剂可用于肉质嫩化,啤酒澄清,还用于干酪、明胶及水解蛋白的生产。

在医药上它可以治疗水肿及多种炎症；它能迅速溶痂,对正常组织无害,不影响植皮,适用于中小面积深度烧伤的治疗。

提取菠萝蛋白酶的传统工艺是高岭土吸附法和单宁沉淀法。

高岭土吸附法生产工艺和操作都比较复杂,原材料消耗多,所需设备也多,酶活总回收率低,但产品质量较好,纯度较高,单宁沉淀法工艺和操作比高岭土法简单,原材料消耗少,所需设备少,但酶活回收率低。

有些研究用超滤法对传统工艺进行了改革,不仅使菠萝蛋白酶产品更纯,而且酶粉得率比传统工艺高,但超滤法生产工艺和和操作比上述两种方法复杂,工人素质要求高,且设备一次性投资大。

本实验采用新型吸附法提取菠萝蛋白酶,步骤简单,产率比传统方法有所提高,是一种有发展的方法。

在新型吸附沉淀法提取菠萝蛋白酶中,所使用的锌离子对酶有激活作用,乙二胺四乙酸是一种螯合物,可有效地螯合原料中某些重金属离子,以避免其与酶结合而使酶失去活性,抗坏血酸则具有还原性,分子上的活泼羟基氢可使酶活性中心保持还原状态,从而有效地保持酶活性,其中以EDTA 和L2半胱氨酸组合,效果最佳。

单宁用量多少会直接影响酶产量,一般范围0. 15 %～0. 25 %的浓度。

采用Folin-酚法测定蛋白酶含量，发生双缩脲反应的蛋白中酚基（酪氨酸），在碱性条件下将磷钼酸和磷钨酸还原成钼酸和钨酸，呈蓝色，在650nm和66onm处有最大吸收值。

Folin-酚试剂由甲试剂和乙试剂组成。