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大鼠脊髓损伤后神经营养素及受体表达的变化刘锦波;唐天驷;杨惠林;张志坚;姜平;顾卫东【期刊名称】《中国矫形外科杂志》【年(卷),期】2004(12)18【摘要】目的:观察神经营养素及受体在脊髓损伤后的表达变化。
方法:SD大鼠30只,设正常组、假伤组、脊髓损伤组。
Allen's法复制5g×10cm脊髓损伤模型。
用免疫组化和免疫电镜方法观察各组神经生长因子(NGF)、脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养素-3(NT-3)及其受体TrkA,TrkB,TrkC表达的变化。
结果:正常大鼠脊髓神经营养素及其受体表达较少,损伤后表达明显增加。
NGF和BDNF伤后1～7d持续高表达,NT-3、TrkA、TrkB和TrkC伤后1～3d表达较高,与正常组和假伤组相比,差异有显著性意义。
结论:神经营养素及受体在急性脊髓损伤中表达增加,起保护性作用。
【总页数】3页(P1404-1406)【关键词】脊髓损伤;神经营养素;酪氨酸激酶受体【作者】刘锦波;唐天驷;杨惠林;张志坚;姜平;顾卫东【作者单位】南京医科大学附属常州第二人民医院;苏州大学附属第一医院;江苏大学医学院医学研究中心【正文语种】中文【中图分类】R683【相关文献】1."三通针法"对脊髓损伤大鼠p75神经营养素受体表达的影响 [J], 闵友江;程立红;姚海华;杨柳;闵志云;裴佳2.督脉电针对不同时间段脊髓损伤大鼠运动功能及p75神经营养素受体表达的影响 [J], 吕威;时素华;莫雨平;李冰;姚海江;景泉凯;宋良玉;王鑫;毛颖秋;李志刚3.大鼠脊髓横断损伤后不同时间神经营养素表达的变化 [J], 陈熙;李素云;曾效恒;熊炜4.NMDA受体2B亚单位反义寡核苷酸对缺血性脑损伤影响的实验研究/电针对脊髓损伤后星形胶质细胞增生的影响/微囊化兔坐骨神经组织移植对大鼠脊髓损伤后神经元凋亡的影响/微囊化异种坐骨神经组织细胞移植对大鼠脊髓损伤后生长相关蛋白-43表达的影响 [J],5.海人藻酸损伤成年大鼠纹状体后Nestin表达的变化/NMDA受体亚单位NR1、NR2A、NR2B在生后大鼠海马的免疫组织化学表达/MK-801对海马脑片培养缺氧缺糖损伤中bcl-2、bax蛋白质表达的影响/局灶性脑缺血后修复蛋白表达与细胞凋亡影响的实验研究 [J],因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
血清二胺氧化酶含量与大鼠急性脊髓损伤后肠道运动功能的关系杨森;杨拯;鄢靖欣;徐洲;徐文坚;田海燕;代小琳;杨平【摘要】目的测定急性脊髓损伤大鼠血清中二胺氧化酶(DAO)的含量,同时观察肠道运动功能的变化和肠黏膜屏障损伤的程度.方法 45只Sprague-Dawley大鼠随机分为打击组(A组)、假手术组(B组)和对照组(C组),每组15只.采取改良Allen打击法(10 g×25 mm)损伤大鼠T10脊髓节段.术后1 d、3 d、7 d分别对各组大鼠进行后肢功能BBB评分,测定大鼠回肠肌电慢波及平滑肌收缩,并做回肠HE染色,ELISA试剂盒测定血清DAO含量.结果脊髓损伤后1 d、3 d和7 d,A组BBB评分显著低于C组(P<0.001),B组与C组无显著性差异(P>0.05).脊髓损伤后1 d、3 d,A组慢波频率和振幅低于C组(P<0.05),收缩频率和振幅低于C组(P<0.05),B组与C组无显著性差异(P>0.05);脊髓损伤后7 d,三组肌电慢波频率和振幅、收缩的频率和振幅均无显著性差异(P>0.05).A组回肠黏膜水肿、倒伏,炎性细胞浸润,黏膜下间隙增大.A组肠黏膜损伤Chiu评分高于B组和C组(P<0.05).脊髓损伤后1 d、3 d,A组大鼠血清DAO含量高于C组(P<0.05),B组与C组无显著性差异(P>0.05);脊髓损伤后7 d,三组间血清DAO含量均无显著性差异(P>0.05).结论血清DAO含量可以反映大鼠急性脊髓损伤后肠道的运动功能和黏膜损伤程度.%Objective To measure the level of diamine oxidase (DAO), and observe the intestinal motor and mucosal barrier injury after acute spinal cord injury (SCI) in rats. Methods A total of 45 Sprague-Dawley rats were randomly divided into SCI group (group A, n=15), sham group (group B,n=15) and control group (group C, n=15). SCI model was established with Allen's strike mode (10 g × 25 mm) by striking T10 spinal segment in rats.One day, three days and seven days after SCI, hind limb motor function was assessed with Basso-Beat-tie-Bresnahan (BBB) Scale in each group, the myoelectric slow wave and ileum smooth muscle contractility were measured in rats, ileum tis-sues were tested with HE staining, and the DAO content of serum was tested with ELISA kit. Results One day, three days and seven days af-ter SCI, the BBB score was significantly lower in group A than in groups B and C (P<0.001). One day, three days after SCI, the frequency and amplitude of both slow wave and contractility were lower in group A than in groups B and C (P<0.05);seven days after SCI, there was no significant difference among three groups (P>0.05). Group A showed ileal mucosal edema, lodging, inflammatory cell infiltration, and submucosal gap increase. The Chiu's score of intestinal mucosal injury was higher in group A than in groups B and C (P<0.05), as well as the serum DAO content one day and three days after SCI (P<0.05), and no significant difference was found in the serum DAO content among three groups seven days after SCI (P>0.05). Conclusion Serum DAO content may respond to the intestinal motor function and mu-cosal injury after acute SCI in rats.【期刊名称】《中国康复理论与实践》【年(卷),期】2017(023)006【总页数】7页(P634-640)【关键词】脊髓损伤;二胺氧化酶;肠道运动功能;黏膜损伤;大鼠【作者】杨森;杨拯;鄢靖欣;徐洲;徐文坚;田海燕;代小琳;杨平【作者单位】成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500;成都医学院,四川成都市610500【正文语种】中文【中图分类】R651.2[本文著录格式]杨森，杨拯，鄢靖欣，等.血清二胺氧化酶含量与大鼠急性脊髓损伤后肠道运动功能的关系[J].中国康复理论与实践,2017,23(6):634-640.CITED AS:Yang S,Yang Z,Yan JX,et al.Relationship between serum diamine oxidase content and intestinal motility after acute spinal cordinjury[J].Zhongguo Kangfu Lilun Yu Shijian,2017,23(6):634-640.临床上，脊髓损伤(spinal cord injury)后患者常出现胃肠功能障碍、大小便失禁、运动和感觉功能障碍、性功能障碍[1-3]。
下调 microRNA-181b 在小鼠缺血性脑损伤中的神经保护作用彭志锋【摘要】AIM:To explore the role of microRNA-181b (miR-181b) in ischemic injury and autophagy pro-tein 5 (Atg5) levels ofmice .METHODS:Oxygen-glucose depletion (OGD) model in N2A cells to mimic ischemic in-jury in vitro was established .A middle cerebral artery occlusion ( MCAO) model to mimic ischemic injury in vivo was also induced in mice.The N2A cell apoptosis after OGD was assessed by in situ cell death detection kit.The Atg5 and caspase-9 expressions were determined by Western blotting .Luciferase reporter assay was performed to identify the direct binding of miR-181b with 3’-UTR of Atg5 mRNA.RESULTS:The alteration of miR-181b expression level by transfection with pre-miR-181b or anti-miR-181b significantly affectedN2A cell apoptosis (P<0.05).Accordingly, the changes of miR-181b levels significantly altered the protein level of Atg 5 ( P<0.05 ) .Co-transfection of the luciferase reporters with pre-miR-181b or anti-miR-181b resulted in the inhibition or enhancement of the luciferase activities of luciferase expressing plasmid containing 3’-UTR of Atg5 mRNA (P<0.05).In addition, the miR-181b antagonist significantly reduced the cleaved caspase-9 levels in cerebral ischemic cortex of the mice after MCAO( P<0.05 ) .CONCLUSION: Down-regulation of miR-181b plays an important role in ischemic injury of mice through regulating Atg 5 proteinlevel.%目的：探讨microRNA－181b（miR－181b）在缺血性小鼠脑损伤病理过程中的神经保护作用。
微小RNA 在脊髓损伤中的作用研究进展晏梓钧，罗怡平，何潇敏，庞庆阳，陈锴，蔡梦溪，何晨，翟骁*（上海长海医院 脊柱外科，上海 200433）关键词：脊髓损伤；微小RNA ；神经再生中图分类号：R681.5 文献标识码：A 文章编号：2095-8552（2020）04-0404-04doi:10.3969/j.issn.2095-8552.2020.04.009损伤后许多miRNA 的表达是异常且复杂的，可能与脊髓损伤的许多阶段有关，如神经元死亡与再生、胶质增生、细胞应激反应和炎症[4]。
2 微小RNA调控脊髓损伤后炎症反应脊髓损伤后与炎性相关的miRNA 会发生改变。
一项研究中，检测损伤大鼠脊髓中表达的269种miRNAs ，其中97种发生了明显的改变[5]。
脊髓损伤会促发炎性反应过程，首先改变血脑屏障，然后多种免疫细胞渗入、小胶质细胞活化并诱导随后的炎性通路，同时也受多种免疫介质的调控[6]。
miRNA 调控免疫细胞介导的炎症反应。
在调节中性粒细胞和炎性应答中，miR-223有着重要作用[7]。
miR-223在损伤后6h 、12h 、3d 表达明显升高，其表达的时间与炎性反应出现的时间重叠，且miR-223阳性细胞位于损伤边缘，与中性粒细胞出现位置相同。
说明miR-223的上调与中性粒细胞在脊髓损伤后渗入相关[8]。
miR-142在T 细胞内特异高表达，所以T 细胞渗入也能解释观察到表达上调。
miR-411、miR-99a 、miR-125b 表达下调促使炎症因子肿瘤坏死因子- α表达升高[5, 9-10]。
miR-181a 、miR-125、let-7a 表达下调，调控细胞因子白介素-6 表达升高[11]。
脊髓损伤后，miR-9、amiR-19、miR-199、miR-124、miR-181b 表达下调 ，从而引起NF-κB 表达升高[12-16]；相反，miR-15、miR-223、miR-146a 表达上调，引起核因子-κB 表达下调。
MicroRNA 调控骨髓间充质干细胞成骨分化研究进展马林，滕兆伟，陆声*基金项目：国家自然科学基金(81660156);云南省应用基础研究项目［2018FE00K-174)］；云南省重大科技专项计划(2017ZF025);*本文通讯作者：陆声马林，滕兆伟，陆声.MicroRNA 调控骨髓间充质干细胞成骨分化研究进展［J ］.实用骨科杂志,2020,26(3):2-14-2-17.(昆明医科大学解放军联勤保障部队第九二O 医院临床学院，云南昆明文章编号:1008-5572(2020)03-0244-04中图分类号：R329. 2骨质疏松症(osteoporosis, OP)是最常见的骨骼疾病，是 一种以骨量低、骨组织微结构损坏，导致骨脆性增加，易发生骨折的全身性骨病［1］.随着人口老龄化,OP 已经成为全世界关注的健康问题.有报道称在2006-2007年间全世界有2亿妇女受骨质疏松症影响，每年造成890多万例骨折，每3s 即发生1次骨质疏松性骨折［2］.然而目前对OP 的发病机 制认识仍然有限.骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stemcels , BMSCs)是一类具有自我更新能力的多能干细胞，该细胞可以在体外培养并可以通过不同诱导液诱导为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞等多种细胞类型旳.有研究表明与年龄有关的骨质疏松症与成骨细胞减少和骨髓中脂肪组织累积增加有关⑷，因此，深人了解BMSCs 成骨分化与成脂肪分化 的分子机制对于了解OP 的发病机制具有重要意义.微小核糖核酸(micro ribonucleic acid, miRNA)是一类内生的、长度为20 ~29 nt 的非编码小RNA ［5］,自从Lee等讯首次发现miRNA 以来，越来越多的miRNA 被人们所 熟知.目前研究发现人类编码miRNA 的基因约占总基因的3%,然而这些少量的miRNA 所调控的人类编码基因却占了总数的40%~90%,广泛影响着细胞增殖、分化、凋亡等疾病 的发生发展［7］.研究表明多种miRNA 参与BMSCs 的分化［8］,由于miRNA 体积小，易于进人细胞，因此被认为是未 来治疗OP 的潜在方法.本文将对BMSCs 成骨分化过程中涉及的主要四个信号通路Wnt 、转化生长因子(transforminggrowth factor,TGF)(、骨形态发生蛋白(bone morphogenet ic protein, BMP)及Notch 信号通路作一概述.1 MiRNA 调控BMSCs 成骨分化信号通路机制信号通路是指能将细胞外的分子信号经细胞膜传人细胞内发挥效应的一系列酶促反应通路,在最近几十年的深人 研究中，已经证实了多种miRNA 参与BMSCs 的成骨分化 过程,越来越多的研究表明miRNA 通过调控关键转录因子及信号通路,影响着BMSCs 的成骨分化过程,各个信号通路 650032)开放科学(资源服务)标识码(OS ID):文献标识码：A存在着联系,但目前关于这方面的报道相对较少.13 Wnt 信号通路Wnt 家族是由19种具有分泌功能的糖蛋白组成，参与各种生命活动过程，如细胞增殖、凋亡、间 充质干细胞的分化，包括依赖于(catenin 的经典Wnt/(catenin 信号通路和非经典的Wnt 信号通路［9］ . Wnt 蛋白通过与Frizzled 受体及LPR5/6受体集合抑制(catenin 磷酸化，非磷酸化的(cat e nin 进人细胞核内调节靶基因的表达［0］.越来越多证据表明，Wnt/f-catenin 信号通路具有刺 激成骨分化而抑制脂肪分化的作用，在促进成骨分化和保持骨量中具有关键作用［11］.Hu 等1发现miR-142-3p 能够通过调节靶基因APC促进人成骨细胞(hFOB1.19)成骨分化，进一步通过转染miR-142-3p 模拟物使miR-142-3p 表达上调，免疫蛋白印迹分析发现(catenin 表达上调，因此miR-142-3p 通过靶向调控APC 使(catenin 表达上调促进成骨细胞分化.Miclea 等「旳研究表明APC 基因功能缺失的转基因小鼠成骨分化 和成软骨分化升高，进一步验证了上述结果.有趣的是Hu等发现miR-142-3p 在人胚肾细胞(HEK293)中通过靶向 调控CTNNB1基因抑制Wnt 信号通路,CTNNB1是一种编码(catenin 的基因.上述研究表明miR-142-3p 通过调控不 同靶基因既可以抑制Wnt 信号通路，又可以促进Wnt 信号通路而发挥不同的生物学效应.Wang 等［15］发现在人骨髓 间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stemcels,hBMSCs)中miR-346通过与靶基因GSK3(的3】非编码区(3--UTR)结合，下调GSK-3B 表达水平促进成骨分化,当敲除(catenin 后miR-346促进成骨细胞分化效应减弱。
转基因小鼠在生命科学中的研究进展毕业论文1 转基因小鼠技术概述自其诞生以来的30多年里，转基因动物技术经过世界各国生物学家们的不懈努力，已经成为一项非常成熟的技术手段，极大的促进了相关生命科学领域研究进展，至今已经取得了辉煌的成就并且在不断得到改进和发展[2]。
转基因技术运用于动物育种的研究始于70年代，经过近30多年的研究和不断发展，取得了突破性进展。
1974年Jaenish和MintzIZI[3]通过微注射法向移植前的小鼠注射SV40病毒DNA，后在实验小鼠部份细胞中检测到该病毒的DNA，首次成功获得转基因小鼠，虽然该转基因小鼠传代的几率小。
随着科学技术的不断进步，在1976年，Jaenish又通过反转录病毒感染小鼠的胚胎，将目标基因组整合到实验鼠中得到了能传代的转基因小鼠；1980年,Gordon等[1]首先用受精卵原核注射法,将疱疹病毒基因SV40DNA段和PBR32DNA段分别注射到小鼠原核期的胚胎中,获得了相应的转基因小鼠。
1982年美国科学家Palmiter将大鼠生长激素基因导人小鼠受精卵后，获得了首批被称为“硕鼠”的转基因动物[4]。
1985年，Hanahan等将SV40T抗原基因与大鼠胰岛素启动子(RIP)体外整合后导入小鼠早期胚胎细中，构建了SV40T抗原基因转基因小鼠，在小鼠体内检测到特异性T抗原，T抗原表达时间的早晚影响转基因小鼠对T抗原的免疫应答：胚胎早期表达T抗原的小鼠对SV40T抗原发生免疫耐受，胰腺组织正常；胚胎晚期表达T抗原的小鼠体内产生抗自身胰岛B细胞的抗体，出现自身免疫性糖尿病[5]。
近年来，随着现代分子生物学和转基因动物技术的日臻完善，转基因小鼠及其他转基因动物逐渐成为现代医学及其他学科研究中的一个十分重要的工具。
纵观此间发展历程，转基因动物带来的不仅仅是一种全新的药物生产模式，极大地降低生物药品的成本和投资风险，为人类社会带来了新的经济增长点，如今的动物乳腺反应器生产的药物占所有基因工程药物的95％，带来了巨大经济效益，潜藏巨大的市场价值，相信随着应用的不断革新，其必将逐渐形成具有高额利润的新兴产业。
MicroRNA-7基因敲减小鼠模型的鉴定朱顺飞;李永菊;陈超;胡燕;赵娟娟;郭萌萌;陶弋婧;秦娜琳;徐林【期刊名称】《遵义医学院学报》【年(卷),期】2014(37)6【摘要】目的鉴定miR-7基因敲减小鼠模型,为进一步研究miR-7的生物学功能奠定基础.方法常规剪取7只miR-7基因敲减(miR-7 knock down,miR-7KD)小鼠的脚趾和尾巴,分别用来提取基因组DNA和总RNA;剪取1只WT(wild-type,Wr)小鼠的尾巴,提取其总RNA;将提取的两组小鼠的总RNA逆转录成eDNA;分别以基因组DNA和eDNA为模板,用特异性引物PCR技术扩增目的基因增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)片段;提取WT和miR-7KD小鼠7个不同组织器官的总RNA,利用Real-time PCR探针法检测各组织器官中miR-7成熟体的表达水平;HE染色观察miR-7KD小鼠心脏、肺脏以及结肠的形态学结构改变.结果 PCR结果显示,模型小鼠的脚趾基因组DNA和尾巴cDNA中均能扩增出载体目的基因EGFP片段;Real-time PCR结果显示,miR-7KD 小鼠心脏、肝脏和脾脏等组织器官miR-7成熟体的表达水平较WT小鼠均显著下调(P ＜0.05);HE染色结果显示,miR-7 KD小鼠心脏、肺脏以及结肠形态学结构发生了明显的病理性改变.结论成功鉴定了miR-7基因敲减小鼠模型,为后续深入探讨该分子的生物学功能提供重要实验基础.【总页数】6页(P582-586,590)【作者】朱顺飞;李永菊;陈超;胡燕;赵娟娟;郭萌萌;陶弋婧;秦娜琳;徐林【作者单位】遵义医学院免疫学教研室暨贵州省免疫学研究生教育创新基地,贵州遵义563099;遵义医学院免疫学教研室暨贵州省免疫学研究生教育创新基地,贵州遵义563099;遵义医学院免疫学教研室暨贵州省免疫学研究生教育创新基地,贵州遵义563099;遵义医学院免疫学教研室暨贵州省免疫学研究生教育创新基地,贵州遵义563099;遵义医学院免疫学教研室暨贵州省免疫学研究生教育创新基地,贵州遵义563099;遵义医学院免疫学教研室暨贵州省免疫学研究生教育创新基地,贵州遵义563099;遵义医学院免疫学教研室暨贵州省免疫学研究生教育创新基地,贵州遵义563099;遵义医学院免疫学教研室暨贵州省免疫学研究生教育创新基地,贵州遵义563099;遵义医学院免疫学教研室暨贵州省免疫学研究生教育创新基地,贵州遵义563099【正文语种】中文【中图分类】R332【相关文献】1.microRNA-7基因敲减对小鼠CD4＋SP细胞胸腺发育的影响 [J], 陶弋婧;朱顺飞;陈超;赵娟娟;郭萌萌;张忆雄;秦娜林;徐林2.胶原糖基化Glcα1和2Galβ1修饰基因(GLT25D1)敲低小鼠模型的制备与基因型鉴定 [J], 叶小慧;李玉凤;张一帆;何玲玲;张曼卡;马慧敏;肖凡;黄玉波;魏红山3.敲降Gata6基因雄性小鼠模型睾丸功能维持过程中的调控机制 [J], 王顺德;李晶;王澍弘4.基因敲入小鼠模型鉴定及表型分析的研究进展 [J], 雍曾花;姚合斌5.敲降Gata6基因雄性小鼠模型睾丸功能维持过程中的调控机制 [J], 王顺德;李晶;王澍弘;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
MicroRNA-181b在缺血性脑卒中小鼠脑损伤中作用
及其分子机制的开题报告
引言：
缺血性脑卒中是一种常见的严重脑血管疾病，发病率和死亡率很高，同时也是导致残疾和生活质量下降的主要原因之一。
目前，尽管有很多
治疗方法，但是很少能够防止再灌注损伤及减轻神经细胞损伤。
因此，
研究其分子机制并探寻高效的治疗方法是至关重要的。
最近的研究表明，microRNA-181b在缺血性脑卒中中起着重要的调控作用。
研究目的：
本次研究旨在探究microRNA-181b在缺血性脑卒中中的作用及其分子机制，以期为开发缺血性脑卒中的治疗方法提供科学依据。
研究方法：
通过建立小鼠缺血性脑卒中模型，观察microRNA-181b在脑损伤中的表达水平变化，并通过临床评分，神经病理学染色和免疫组织化学等
方法评估其对神经细胞的保护作用。
同时，利用基因编辑技术改变microRNA-181b的表达，研究其对细胞凋亡和炎症反应等分子指标的影响，寻找其分子机制。
预期结果：
通过本次研究，我们预计可以发现microRNA-181b在缺血性脑卒中中的调控作用，并找到其分子机制。
同时，也希望能够提供一种针对microRNA-181b的治疗方法，为缺血性脑卒中的临床治疗提供新的思路
和方法。
