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非肥胖性糖尿病小鼠干眼模型的初步建立崔红;李春华;李正日;李承霖;金海燕;任宁;汝新宇;李英俊【摘要】目的:初步建立非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠蒸发过强型干眼模型,通过研究小鼠眼表组织病理变化,初步探讨其作为糖尿病性干眼模型的可行性.方法:选取40只雌性NOD小鼠,NOD小鼠自发糖尿病为实验组,同时选取未自发糖尿病的NOD 小鼠作为正常对照组.实验组NOD小鼠置于40％以下湿度环境,每天皮下注射0.5mg/0.2mL氢溴酸菪胺,并置于可控干燥箱中,每天通风12h,制作蒸发过强型干眼模型.在造模后的第1、7、10、14d采用酚红棉线实验测量泪液分泌量,PAS染色检查结膜杯状细胞形态和数目;在造模后的第10d,进行角膜组织苏木精染色检测角膜上皮变化情况.结果:实验组NOD小鼠泪液分泌量随造模时间而逐渐降低,正常对照组未有明显变化.实验组的结膜杯状细胞体积变大,在造模后的第1d,杯状细胞密度较正常对照组减少(P=0.008),从造模后第7d开始,随时间延长,实验组杯状细胞数量逐渐减少,且较同一时间点正常对照组显著减少(均P<0.001).此外,观察两组第10d的角膜上皮情况,实验组NOD小鼠角膜上皮层变薄,部分角膜上皮细胞变性、基底细胞水肿.结论:初步建立了NOD小鼠干眼模型,其眼表变化与临床上干眼症表现类似.【期刊名称】《国际眼科杂志》【年(卷),期】2019(019)008【总页数】4页(P1293-1296)【关键词】NOD小鼠;糖尿病;干眼症;蒸发过强型干眼模型;结膜杯状细胞【作者】崔红;李春华;李正日;李承霖;金海燕;任宁;汝新宇;李英俊【作者单位】133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科;133000 中国吉林省延吉市,延边大学附属医院眼科【正文语种】中文0引言糖尿病是一种复杂的慢性全身性疾病，是20～74岁人群中最常见的主要致盲原因之一，已成为发展中国家和发达国家日益严重的公共社会问题[1-2]。
单纯环境因素诱导的小鼠干眼模型的开题报告
1.研究背景
干眼症是指眼部表面及/或泪膜因润滑不足等原因，导致眼睛疼痛、疲劳、视力
模糊等症状的疾病。
目前研究表明，环境因素，如空气污染、电脑辐射和空调使用等，是干眼症的主要诱因之一。
因此，建立单纯环境因素诱导的小鼠干眼模型，对探究干
眼症的病理机制和寻找治疗干眼症的方法具有重要意义。
2.研究目的
本研究旨在通过简单的环境因素干预，建立小鼠干眼模型，进一步研究环境因素对干眼症的作用机制。
3.研究方法
3.1 小鼠实验
通过将小鼠暴露于环境污染、电脑辐射和空调干燥等环境因素中，建立小鼠干眼模型。
采用Schirmer实验和荧光素染色检测方法，评估小鼠干眼的程度。
3.2 组织学分析
采用光镜和电镜等方法，对小鼠眼球组织进行形态学和病理学分析。
通过观察角膜上皮细胞、泪腺、结膜等组织的损伤程度，判断小鼠干眼模型的成功建立。
4.研究预期结果
通过本研究建立的小鼠干眼模型，可以深入研究环境因素对干眼症的影响和作用机制，为干眼症的治疗提供新思路和新方法。
同时，为研究干眼症的发病机制和预防
措施，提供重要的研究基础和实验模型。
5.研究意义
本研究对于揭示干眼症的病理机制和筛选治疗手段有着重要的理论和临床意义。
同时，对于环境因素对人体健康的影响以及人们的健康生活方式有着一定的科普作用。
·３６２·史旦塞旦！垦型鲞查！Ｑ！！堡堡旦箜塑鲞箜！塑堡！垫！旦！！堕ＱＰ竺！！！垒卫堂！！！！，ｙ！！塑，堕！．璺时合并睑缘炎、角结膜炎症的干眼㈨·。
２．维生素Ａ缺乏：维生素Ａ参与合成角膜糖蛋白，影响角膜的能量代谢，正常含量的维生素Ａ对维持角膜上皮的正常生长与分化，抑制角化细胞生成有着重要意义。
马轶群等心¨以维生素Ａ完全缺乏的饲料喂养兔，４个月后可诱导出干眼动物模型，兔眼泪腺出现萎缩，结膜丧失杯状细胞，角膜上皮角化。
Ｔｏｓｈｉｎｏ［２２３给大鼠喂养维生素Ａ完全缺乏的饲料，也能诱导出严重的干眼，在角膜中还检测出影响角质形成细胞的转谷胺酰胺酶显著上调，并认为它可能是角膜出现角化的信使蛋白。
３．防腐剂：通常在长期使用滴眼液的患者中容易出现泪膜不稳定的情况，引起干眼症状，一般均认为与眼液中含有防腐剂有一定关系。
为得到证实，Ｘｉｏｎｇ乜纠使用０．１％苯扎氯铵给兔连续点眼１４天，在第３天出现虎红染色积分增加，第５天出现泪液分泌下降，角膜染色积分增加，第７天可检测到杯状细胞密度下降，同时出现泪膜中ＭＵＣ５ＡＣ表达下降。
在此实验基础上，Ｌｉｎ瞳４１使用０．２％苯扎溴铵给小鼠滴眼也可建立于眼模型，连续点眼后，小鼠除了会出现泪液分泌明显减少，角膜染色积分及虎红染色积分增加以外，角膜会出现炎性细胞浸润并同时伴有炎性介质ＴＮＦ一仪的上调，角膜上皮细胞凋亡增加，电镜下可观察到角膜上皮微绒毛的大小和间隔出现变化。
４．干燥环境：在现实生活中，当人处于干燥环境及空调环境中，泪液蒸发率会相应增加，容易出现干眼症状。
研究者通过模拟人类所处干燥环境，将１２周龄小鼠置于低湿气流环境中的培养箱（湿度１８．５％±５，ｌ％，气流１５Ｌ／ｍｉｎ），３天后即可诱导出眼表病理改变，结膜上皮层变薄，杯状细胞计数下降，同时伴有泪液分泌下降及角膜荧光素着色。
这是一个能很好对干燥环境引起干眼进行研究的动物模型，同样的实验方法，Ｃｈｅｎ瞳５１发现模型小鼠眼表可出现Ｃａｓｐａｓｅ一３表达上调，这是最重要的细胞凋亡效应性蛋白裂解酶，它的表达上调推测与干眼造成眼表细胞凋亡增加有关。
MMTV-PyMT转基因小鼠模型介绍
基因敲除小鼠是什么？是否就是我们平日所说的实验室用的小白鼠?其实小鼠有很多种，小白鼠只是其中一种，通常普通的小白鼠多被药厂用作临床试验，而基因敲除的小鼠，则用于更尖端的生物医学研究。
基因敲除小鼠技术原理：是先在小鼠的胚胎干细胞上通过基因重组的办法进行基因修饰——就是将胚胎干细胞中的靶向基因改掉,然后将“修饰”后的胚胎干细胞植入小鼠的早期胚胎,生成嵌合体小鼠。
这种嵌合体小鼠长大后,体内同时存在被“修饰”过的基因和未被“修饰”的基因。
下面是，MMTV-PyMT转基因小鼠介绍
MMTV-PyMT转基因小鼠是一种人类乳腺癌动物模型。
该小鼠使用MMTV-LTR驱动多瘤病毒中间T抗原（PyMT）在小鼠乳腺组织的表达，使小鼠出现乳腺肿瘤的表型。
可用于研究乳腺肿瘤的发生、发展及转移，及乳腺肿瘤相关药物的筛选。
SOD1-G93A转基因小鼠模型介绍这些 SOD1-G93A 转基因小鼠表达携带 G93A 突变的人 SOD1，可用于研究神经肌肉疾病，如肌萎缩侧索硬化症（ALS 或 Lou Gehrig 病）。
SOD1-G93A转基因小鼠详情SOD1-G93A（也称为G93A-SOD1）转基因半合子的小鼠可存活可育，并可表达携带G93A 突变的人SOD1。
此首建鼠品系（通常称为G1H）据报道具有高转基因拷贝数。
半合子小鼠表现出类似于人类肌萎缩侧索硬化(ALS)的表型；由于脊髓运动神经元丧失，可出现一个或多个肢体瘫痪。
转基因小鼠的寿命缩短：50% 小鼠的寿命为128.9 +/- 9.3 天（与之对比，C57BL/6J遗传背景下50% 寿命为157.1 +/- 9.1 天）。
与 LPS 诱导的小胶质细胞和活化的 M1/M2 巨噬细胞不同，由疾病进展活化的脊髓小胶质细胞未上调 M1（神经毒性）表型或 M2（保护性）表型偏好的基因。
在表达SOD1G93A 的活化小胶质细胞中的基因表达模式呈现了独特的 ALS 特异性特征。
在维持活体种群时，杰克森实验室发现雄性小鼠具有攻击性。
我们建议每笼饲养不超过 4 只雄鼠。
这些SOD1-G93A（也称为G93A-SOD1）转基因小鼠可用于研究神经肌肉疾病，包括肌萎缩侧索硬化症（ALS 或 Lou Gehrig 病）。
此品系运输时应携带 JAXTagTM 。
SOD1-G93A转基因小鼠模型开发SOD1-G93A（或G93A-SOD1）转基因携带突变型人SOD1 基因（携带 93 号密码子甘氨酸至丙氨酸的单个氨基酸替换），由其内源性人 SOD1 启动子调控。
将此转基因注射至B6SJLF1 小鼠的受精卵中，获得首建鼠。
B6SJL 混合遗传背景的转基因小鼠被送至杰克森实验室。
自身免疫相关性干眼动物模型的研究进展
魏瑞华;郝永娜;赵少贞
【期刊名称】《眼科新进展》
【年(卷),期】2012(32)7
【摘要】干眼是最常见眼病之一,损伤眼表和视力,影响生活质量,其发病机制尚未完全明了,这严重限制了对干眼的有效治疗.值得关注的是,较为严重的干眼类型多见于自身免疫相关性干眼.近年来,随着转基因小鼠和敲除基因小鼠的出现及分子遗传学和免疫学等学科的飞速发展,人们已经成功建立了许多新的干眼动物模型,对自身免疫相关性干眼的研究有重大价值.
【总页数】4页(P690-693)
【作者】魏瑞华;郝永娜;赵少贞
【作者单位】300384天津市,天医科大学眼科中心天津医科大学眼视光学
院;300384天津市,天医科大学眼科中心天津医科大学眼视光学院;300384天津市,天医科大学眼科中心天津医科大学眼视光学院
【正文语种】中文
【相关文献】
1.干眼动物模型的研究进展 [J], 张晓博;陈蔚
2.间充质干细胞对自身免疫性干眼的免疫调控作用研究进展 [J], 王希莲;路晓晓;杨丽媛;粘红;魏瑞华
3.Sj(o)gren's综合征所致干眼动物模型的研究进展 [J], 朱培庆;刘立夏;程琳;张富文;段俊国
4.干眼动物模型制作的研究进展 [J], 刘莉;何慧琴
5.自身免疫性甲状腺炎实验动物模型的研究进展 [J], 邓莉;孙文;侯毅;刘铜华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
一种干燥综合征小鼠模型的造模方法引言干燥综合征是一种以眼部干涩、口干、全身乏力及关节疼痛等表现为主的自身免疫性疾病。
为了深入研究干燥综合征的发病机制以及探索治疗方法，科研人员提出了一种干燥综合征小鼠模型的造模方法。
本文将介绍该方法的具体步骤和操作要点。
实验材料和设备1.4-8周龄的雌性C57BL/6小鼠。
2.放置冰片的无菌培养皿。
3.满足标准的实验室动物饲养设备。
4.干冰盒。
实验方法第一步：准备工作1.将小鼠放置在无菌环境下，并确保其适应环境至少一周。
2.准备好实验所需的材料和设备。
第二步：制备试剂1.准备好人工合成的干燥综合征自身抗体，浓度为1mg/m l。
2.制备盐水溶液，浓度为0.9%。
第三步：造模操作1.用放置在冰上的冰片麻醉小鼠，待小鼠完全麻醉后，移至培养皿中。
2.使用注射器，将人工合成的干燥综合征自身抗体以0.2m l/10g的剂量注射到小鼠腹腔内。
3.每隔两天，重复一次注射操作，连续注射14天。
4.在注射期间，每次注射后将小鼠恢复到温暖的环境中，并观察其行为变化。
5.在注射结束后，让小鼠自由饮用盐水溶液以保持其体液平衡。
结果分析行为观察在注射过程中，小鼠可能表现出口干、眼干、活动减少等症状，这与干燥综合征患者的临床表现相似。
病理检测可以通过检测小鼠的泪液分泌量、唾液分泌量以及相关器官组织的病理学变化，来评估小鼠是否成功建立了干燥综合征模型。
结论通过上述干燥综合征小鼠模型的造模方法，可以成功模拟干燥综合征的临床表现和病理变化。
此模型可为研究干燥综合征的发病机制和寻找治疗方法提供有力的实验性依据。
参考文献1.Sm it hK.G.,Jo nes R.B.,Bu rn sS.M.,e t al.R at mo de ls ofA N CA-a s so ci at ed va sc uli t is.A rt hr it is Res T he r,2011,13(6):207.2.小鼠实验动物模型制备方法标准操作规程，中国实验动物学杂志，2014，22(6)：590-591.。
