红汁乳菇液体发酵试验初报

香菇液体菌种发酵条件的优化
张贺迎;耿立朵;武金霞
【期刊名称】《食用菌》
【年(卷),期】2017(0)6
【摘要】对香菇ZHX-1液体培养得到的菌丝球和胞外多糖含量的影响因素进行了试验.在单因素试验的基础上,采用正交试验设计,结果表明,最佳液体发酵条件为玉米粉21 g/L,酵母膏5 g/L,KH2PO41 g/L,MgSO40.5 g/L,pH4.5,培养温度25℃,摇床转速150 r/min,接种量8.5%,装液量100 mL/250 mL,培养7 d,增菇激活酶的添加量0.2%.在此优化条件下,香菇菌丝球的生物量为2.54 g/L,胞外多糖的含量为2.34 g/L.
【总页数】5页(P16-19,24)
【作者】张贺迎;耿立朵;武金霞
【作者单位】河北大学生物技术研究中心,河北保定071002;河北大学生命科学学院,河北保定071002;河北大学生命科学学院,河北保定071002
【正文语种】中文
【相关文献】
1.香菇液体菌种培养条件优化 [J], 徐思炜;张君胜;周雯
2.香菇液体菌种发酵条件的研究 [J], 郭树凡;张慧丽
3.香菇0912液体菌种培养基及摇瓶发酵条件的筛选 [J], 李春霞;吴建金;黄亮;孙宁;王玉;班立桐
4.香菇液体菌种培养基及摇瓶培养条件优化 [J], 谢婷;何娟;张顺凯;焦海涛;边银丙;
肖扬
5.香菇液体菌种培养基及摇瓶培养条件优化 [J], 谢婷;何娟;张顺凯;焦海涛;边银丙;肖扬
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红汁乳菇(Lactarius hatsutake)的成功栽培—分子方法评估摘要：自1998年始，我们已在湖南、江苏等地建立了65 ha以上红汁乳菇—马尾松种植园。

这些林分一般三年后开始产菇，年产量可达675 kg/ha。

为了确认所产红汁乳菇子实体来源于接种的菌根苗而非自然侵入的孢子，我们进行了子实体、菌根苗菌根的分子研究。

首次比较了试验地所产子实体与红汁乳菇—马尾松菌根苗培养钵内的菌根的ITS序列。

同时，用RAPD法分析了取自于试验地内的10个红汁乳菇子实体。

结果表明，10个子实体中的9个与起始菌种CX1相比具有75%～96%的相似性。

其余一个及作为外群取自于340 km外的广西融水的子实体与起始菌种分别具有61%和37%的相似性。

我们认为，上述9个子实体与起始菌种的相关性比外群和第10个子实体更为紧密。

推测认为起始菌株及其子代菌丝形成了上述9个子实体，而其余一个子实体可能来源于周边森林侵入的孢子。

关键词：红汁乳菇；外生菌根；栽培；ITS序列；RAPD红汁乳菇(Lactarius hatsutake Tanaka)是中国和日本等地十分珍贵的食用菌，其市场在过去20年里稳步发展。

它具有暗红色的乳汁，与欧洲所产的松乳菇（Lactarius deliciosus）及血红乳菇（Lactarius sanguifluus）相似［1］。

许多研究者试图付诸栽培，但遗憾的是，除了在菌种分离和菌丝培养上取得成功之外，栽培出菇方面没有取得实质性的结果［2~7］。

自1994年开始，我们通过组织分离获得菌种，并接种于马尾松幼苗根系得到菌根苗，并于1998年和1999年，利用这些菌根苗在湖南辰溪县建立了两个种植园，一个位于宗碧垄，面积为2000m 2; 一个位于龙泉岩，面积达13000 m 2，子实体分别于3 年后首次发生。

2004年，龙泉岩种植园收获了约900 kg，相当于675 kg/ha。

2003年和2004年，在国家科技部农业成果转化基金项目支持下，在龙泉岩原试验地附近建立了一个面积达36.7 ha的新种植园。

某某公司红汁乳菇色素稳定性的研究(一)某某公司红汁乳菇色素稳定性的研究随着人们对食品安全的日益关注，食品添加剂也逐渐受到了更多关注。

作为食品添加剂的色素，往往被用于改善食品的颜色，提高其美观性和吸引力。

其中，红汁乳菇色素作为一种常用的天然颜料，在食品中得到了广泛的应用。

但它的稳定性一直是制约其应用的一个问题，某某公司专门进行了红汁乳菇色素的稳定性研究。

一、红汁乳菇色素的来源与应用红汁乳菇是蘑菇的一种，其产生的红色液体含有红汁乳菇色素。

这种色素富含多种活性成分和抗氧化剂，对人体健康有很好的保健作用。

在食品生产中，红汁乳菇作为天然颜料被广泛应用于发泡甜品、饼干、面包、果酱等食品中。

但其天然属性也造就了其稳定性欠佳的特点，对于储存保存和加工加热都存在很大的挑战。

二、红汁乳菇色素的稳定性研究某某公司从色素稳定性的角度出发，系统研究了红汁乳菇色素的影响因素和稳定性特性。

主要针对光照、温度、PH值、加工加热等因素进行了研究，分别运用了嫩菇干燥和粉碎提取、高压均质和Sterivex过滤等技术加工红汁乳菇，获得了高纯度的红汁乳菇色素，以此进行实验观察。

结果表明，红汁乳菇色素在光照下会发生分解、褪色等现象；温度越高对于色素的降解也越快；PH值在5~6之间时能够保证色素的稳定性；高压均质的过程会对色素的稳定性造成不利影响，但Sterivex过滤技术则能够减小这种影响；加工加热会使色素变质，因此应该尽量减少加工加热的时间和强度。

三、红汁乳菇色素的应用针对红汁乳菇色素的稳定性问题，某某公司开发了一款能够更好应对长时间保存的红汁乳菇色素产品。

采用了先将目标物与载体分离，然后通过微孔荧光材料进行载体修饰，使得目标物易于固定于载体表面，以此成功地解决了红汁乳菇色素在保存过程中的稳定性问题。

四、结论本文针对红汁乳菇色素在食品加工中的应用进行了稳定性研究。

研究结果表明，该色素在光照、高温、低PH值、高压均质和加工加热中均存在一定的不稳定性。

实习报告院系：生物科学与工程学院专业：生物技术1101 姓名：杨慧芳学号：20113714 指导老师：张庆华郭晓燕张宝实习时间：2014.06.05日 . 2014.06.13日一、实习目的实习是大学生活的第二课堂,是知识常新和发展的源泉,是检验真理的试金石,也是大学生锻炼成长的有效途径。

一个人的知识和能力只有在实践中才能发挥作用,才能得到丰富、完善和发展。

大学生成长,就要勤于实践,将所学的理论知识与实践相结合一起,在实践中继续学习,不断总结,逐步完善,有所创新,并在实践中提高自己由知识、能力、智慧等因素融合成的综合素质和能力,为自己事业的成功打下良好的基础生产实习是整个本科教学计划中的一个有机组成部分，是生物技术专业的一个重要的实践性环节。

通过组织参观和听取一些专题技术报告，收集一些与毕业设计课题有关的资料和素材，为顺利完成毕业设计打下坚实基础。

通过实习，应达到以下目的：（1）了解污水处理厂污水处理的流程与工艺；了解污水处理的标准。

（2）了解制药厂水针剂、粉剂、中药提取制剂、粉针剂等生产流程；同时了解制药用水的生产过程。

(3) 了解润田矿泉水生产的工艺。

（4）了解雪津啤酒的生产工艺以及污水处理工艺。

二、实习方式、地点及内容2014.06.05日上午9:30左右：在老师及解说员的带领下，我们参观了小蓝经济技术开发区污水处理厂：所参观的污水处理厂位于南昌市小蓝工业园内。

该园为省级民营科技园，离南昌市仅20公里，15分钟路程，交通便捷。

规划面积40平方公里，现已建成18平方公里，入驻企业200余家。

园区拟建日处理15万m3/d污水处理厂，项目实行总体规划，分期实施，一期建设日处理5万m3/d污水处理厂，项目主要包括征地、土建、设备、安装污水收集、处理系统；二期扩建至日处理能力15万m3/d的污水处理厂。

（据估计：2005年污水排放量5.56万m3/d，工业污水2.5万m3/d，生活污水2.13万m3/d，公建污水0.93万m3/d；2020年污水排放量16.13万m3/d，工业污水6.0万m3/d，生活污水7.44万m3/d，公建污水2.69万m3/d。

第52卷 第1期2024年1月西北农林科技大学学报(自然科学版)J o u r n a l o f N o r t h w e s t A&F U n i v e r s i t y(N a t .S c i .E d .)V o l .52N o .1J a n .2024网络出版时间:2023-06-30 15:29 D O I :10.13207/j .c n k i .jn w a f u .2024.01.015网络出版地址:h t t ps ://k n s .c n k i .n e t /k c m s 2/d e t a i l /61.1390.S .20230629.1645.009.h t m l 基于菌株生长和菌根苗品质的红汁乳菇菌株筛选[收稿日期] 2022-09-29[基金项目] 湖南省创新平台与人才计划项目(2021N K 4186);湖南省重点研发计划项目(2016N K 2161):湖南省林业科技计划项目(X L K 201969,X L K 201904) [作者简介] 谭 云(1989-),男,湖南长沙人,助理研究员,硕士,主要从事微生物资源学研究㊂E -m a i l :t a n y_h n c u @163.c o m [通信作者] 申爱荣(1980-),女,湖南邵阳人,副研究员,博士,主要从事菌物学研究㊂E -m a i l :s h e n a r @h n l k y.c n 谭 云1,2,3,谭著明1,2,3,沈宝明1,2,3,申爱荣1,2,3,刘丽娜1,2,3(1湖南省林业科学院,湖南长沙410004;2湖南省菌根性食用菌种质资源保护与利用中心,湖南长沙410004;3湖南省林下特色生物资源培育与利用工程技术研究中心,湖南长沙410004)[摘 要] ʌ目的ɔ筛选用于菌根苗接种的高质量红汁乳菇菌株,为提高红汁乳菇产量提供支持㊂ʌ方法ɔ以10个红汁乳菇菌株(J H 1㊁J H 2㊁J H 4㊁J H 5㊁J H 7㊁J H 8㊁J H 10㊁J H 11㊁J H 12㊁J H 13)为研究对象,将菌株分别在P D A 和B A F 培养基上培养后,测定菌株生长势指标(菌丝生长速度㊁菌丝生物量);将红汁乳菇液体菌种接种于马尾松幼苗根部合成菌根苗,以不接种为对照(C K ),培养210d 后对菌根合成能力(菌根数量㊁菌根侵染率㊁菌根化率)和宿主植物生长量(苗高㊁主根长㊁地径㊁干质量)进行测定㊂对上述9个参数进行相关性分析,并用隶属函数法对菌株性状进行综合评价㊂ʌ结果ɔ①在P D A 固体培养基上,以菌株J H 1菌丝生长速度最快,达到3.17mm /d ;在B A F 液体培养基上,以菌株J H 5的菌丝生物量最大,为3.28g /L ㊂②所有菌株均能与马尾松根系形成外生菌根,但菌根形态并不相同㊂接种红汁乳菇菌株J H 5的马尾松苗的菌根数量为45.65个/株,菌根化率为90.67%,菌根侵染率为79.60%,显著高于其他9个菌株,表现出较强的合成菌根苗能力㊂③接种不同红汁乳菇菌株的马尾松苗,在苗高㊁主根长㊁地径和干质量等指标上表现各异㊂接种菌株J H 4的马尾松苗高㊁主根长和干质量表现最优,较对照分别提高24.45%,16.72%和53.33%;接种菌株J H 5的马尾松苗地径生长量表现最优,较对照提高5.19%㊂④相关性分析表明,菌丝生物量与菌根化率和菌根苗干质量呈极显著正相关(P <0.01),菌根数量与菌根化率和菌根苗地径呈极显著正相关(P <0.01)㊂⑤基于隶属函数法的综合评价结果表明,红汁乳菇J H 5为适合培育菌根苗的最佳菌株,J H 4和J H 7为次优菌株㊂ʌ结论ɔ筛选出1个优良红汁乳菇菌株J H 5,该菌株的生长势和菌根苗品质整体表现较好㊂[关键词] 红汁乳菇;菌根苗;菌根合成;隶属函数法[中图分类号] S 646.1+9[文献标志码] A[文章编号] 1671-9387(2024)01-0136-09S e l e c t i o n o f L a c t a r i u s h a t s u d a k e s t r a i n b a s e d o n s t r a i n a c t i v i t i e s a n dm y c o r r h i z a l s e e d l i n g q u a l i t yT A N Y u n1,2,3,T A N Z h u m i n g 1,2,3,S H E N B a o m i n g 1,2,3,S H E N A i r o n g 1,2,3,L I U L i n a 1,2,3(1H u n a n A c a d e m y o f F o r e s t r y ,C h a n g s h a ,H u n a n 410004,C h i n a ;2H u n a n G e r m p l a s m R e s o u r c e s P r o t e c t i o n a n d U t i l i z a t i o n g Ce n t e rf o r M y c o r r h i z a l E d i b l e F u ng i ,Ch a n g s h a ,H u n a n 410004,C hi n a ;3H u n a n E n g i n e e r i n g R e s e a r c h C e n t e r f o r C u l t i v a t i o n a n d U t i l i z a t i o n o fD i s t i n c t i v e B i o -r e s o u r c e s U n d e r F o r e s t ,C h a n gs h a ,H u n a n 410004,C h i n a )A b s t r a c t :ʌO b j e c t i v e ɔT h e p r o p e r t i e s o f L a c t a r i u s h a t s u d a k e s t r a i n s w e r e e v a l u a t e d t o s c r e e n h i gh -q u a l i t y s t r a i n s o f L .h a t s u d a k e f o r m y c o r r h i z a l s e e d l i n g i n o c u l a t i o n a n d t o i m pr o v e t h e y i e l d o f L .h a t -s u d a k e p l a n t a t i o n s .ʌM e t h o d ɔT e n L .h a t s u d a k e s t r a i n s (J H 1,J H 2,J H 4,J H 5,J H 7,J H 8,J H 10,J H 11,J H 12a n d J H 13)w e r e i n o c u l a t e d i n t o P D A a n d B A F m e d i a t o d e t e r m i n e s t r a i n g r o w t h v i g o r (m yc e l i a l g r o w t h r a t e a nd m y ce l i a l b i o m a s s ).T h e m y c o r r h i z a l s y n t h e s i s a b i l i t y (m y c o r r h i z a l n u m b e r ,m yc o r r h i z a l i n -f e s t a t i o n r a t e a n d m y c o r r h i z a l i s a t i o n r a t e)a n d h o s t p l a n tg r o w t h(s e e d l i n gh ei g h t,m a i n r o o t l e n g t h,g r o u n d d i a m e t e r a n d d r y w e i g h t)w e r e m e a s u r e d b y i n o c u l a t i n g L.h a t s u d a k e s t r a i n s o n s e e d l i n g s o f P i n u s m a s s o n i a n a a f t e r210d.C o r r e l a t i o n a n a l y s i s a n d s u b o r d i n a t e f u n c t i o n m e t h o d w e r e u s e d f o r e v a l u a t e s t r a i n s c o m p r e h e n s i v e l y.ʌR e s u l tɔ①A m o n g t h e10s t r a i n s,J H1h a d t h e f a s t e s t m y c e l i a l g r o w t h r a t e o f 3.17mm/d o n P D A s o l i d c u l t u r e,a n d J H5h a d t h e l a r g e s t m y c e l i a l b i o m a s s o f3.28g/L o n B A F l i q u i d c u l-t u r e.②A l l s t r a i n s w e r e a b l e t o s y n t h e s i z e e c t o m y c o r r h i z a w i t h P.m a s s o n i a n a a n d m y c o r r h i z a l f o r m s w e r e v a r i a b l e.W h e n t h e s e e d l i n g s o f P.m a s s o n i a n a w e r e i n o c u l a t e d w i t h J H5s t r a i n,a v e r a g e n u m b e r o f m y c o r-r h i z a e,m y c o r r h i z a l i z a t i o n r a t e a n d m y c o r r h i z a l i n f e s t a t i o n r a t e w e r e45.65,90.67%a n d79.60%,s h o w i n g s i g n i f i c a n t l y h i g h e r a b i l i t y t o s y n t h e s i z e m y c o r r h i z a t h a n o t h e r s t r a i n s.③S e e d l i n g s o f P.m a s s o n i a n a i n o c-u l a t e d w i t h d i f f e r e n t L.h a t s u d a k e s t r a i n s p e r f o r m e d d i f f e r e n t l y i n t e r m s o f s e e d l i n g h e i g h t,m a i n r o o t l e n g t h,g r o u n d d i a m e t e r a n d d r y w e i g h t.S e e d l i n g s w i t h J H4p e r f o r m e d b e s t i n t e r m s o f s e e d l i n g h e i g h t, m a i n r o o t l e n g t h a n d d r y w e i g h t,w h i c h w e r e24.45%,16.72%a n d53.33%h i g h e r t h a n t h e c o n t r o l,r e-s p e c t i v e l y.S e e d l i n g s i n o c u l a t e d w i t h J H5p e r f o r m e d b e s t i n t e r m s o f g r o u n d d i a m e t e r,w h i c h w a s5.19% h i g h e r t h a n t o t h e c o n t r o l.④C o r r e l a t i o n a n a l y s i s s h o w e d t h a t m y c e l i a l b i o m a s s w a s s i g n i f i c a n t l y a n d p o s i-t i v e l y c o r r e l a t e d w i t h m y c o r r h i z a l r a t e a n d d r y w e i g h t o f m y c o r r h i z a l s e e d l i n g s(P<0.01).M y c o r r h i z a l n u m b e r w a s s i g n i f i c a n t l y a n d p o s i t i v e l y c o r r e l a t e d w i t h m y c o r r h i z a l r a t e a n d g r o u n d d i a m e t e r o f m y c o r r h i-z a l s e e d l i n g s(P<0.01).⑤T h e c o m p r e h e n s i v e e v a l u a t i o n s h o w e d t h a t J H5w a s t h e b e s t s t r a i n f o r c u l t i v a-t i n g m y c o r r h i z a l s e e d l i n g s,w h i l e J H4a n d J H7w e r e s u p e r i o r s t r a i n s.ʌC o n c l u s i o nɔW i t h b e t t e r m y c e l i a l g r o w t h v i g o r a n d m y c o r r h i z a l s e e d l i n g q u a l i t y,J H5w a s s c r e e n e d a s e x c e l l e n t L.h a t s u d a k e s t r a i n.K e y w o r d s:L a c t a r i u s h a t s u d a k e;m y c o r r h i z a l s e e d l i n g s;m y c o r r h i z a l s y n t h e s i s;s u b o r d i n a t e f u n c t i o n m e t h o d红汁乳菇(L a c t a r i u s h a t s u d a k e)为红菇科乳菇属真菌,俗称寒菌㊁雁鹅菌㊁枞菌㊁铜锣菌㊁紫花菌等,可与松科和壳斗科等经济树种形成外生菌根,是一类珍稀外生菌根性食用菌[1]㊂红汁乳菇资源在我国分布广泛,从东北温带到西南㊁华中㊁华东等亚热带地区均有分布,其中湖南㊁贵州和云南等地产量较大,资源丰富,食用历史悠久㊂红汁乳菇子实体营养丰富㊁味道鲜美㊁食药用价值高,富含粗蛋白㊁粗脂肪㊁粗纤维㊁多糖㊁多种氨基酸及维生素等生物活性成分[2-3],具有益肠胃㊁提高免疫力㊁抗肿瘤㊁抗炎症等药用功效[4-6],是一种天然优质多功能菌物食品㊂红汁乳菇可鲜食㊁速冻,亦可加工成罐头或者菌油[7],产业链完整,开发前景广阔㊂目前,有关红汁乳菇的研究涵盖菌种鉴定㊁菌丝发酵㊁活性成分[8]㊁菌根合成[9]㊁人工栽培[10]㊁功能基因挖掘[11]㊁内生细菌生物互作[12]等多个领域,其中人工栽培与种植园管理是红汁乳菇产业链的核心环节㊂随着菌根性食用菌种植园建设的逐步兴起,市场对菌根苗质量的要求越来越高,也是种质质量提升的重要方向㊂红汁乳菇离体菌丝生长速度慢,并伴随有自溶现象,对菌种质量稳定性构成了较大挑战㊂因此,提高菌种活力,提升生长速度,缩短培养周期,是改善红汁乳菇菌种品质的主要切入点,也是提高菌根苗品质和子实体产量的关键㊂本研究从提高菌种活力入手,将提升菌根苗质量作为目标,比较10个红汁乳菇菌株菌丝在相同培养基中的生长速度和生物量等性状,用对应的液体菌种接种宿主植物马尾松,在控制条件下合成菌根,继而评估菌根合成能力和促进马尾松苗生长的能力,遴选出综合表现优异的菌株,以期为优良红汁乳菇菌株的筛选提供参考㊂1材料与方法1.1菌株试验菌株于2017-2019年由湖南嘉禾县试验基地野生红汁乳菇子实体分离得到,菌株纯度经I T S测序确认㊂供试10个红汁乳菇菌株编号分别为J H1㊁J H2㊁J H4㊁J H5㊁J H7㊁J H8㊁J H10㊁J H11㊁J H12㊁J H13㊂1.2培养基红汁乳菇固体培养采用P D A培养基,液体培养采用B A F培养基[13-14]㊂所有培养基p H值均为6.0㊂1.3菌株生长活力测定将10株红汁乳菇菌株分别接到P D A固体培养731第1期谭云,等:基于菌株生长和菌根苗品质的红汁乳菇菌株筛选基上,观察菌丝密度㊁颜色变化,在接种后7和14d ,采用 十字交叉法 测量菌丝直径,计算菌丝生长速度;将10株菌株分别接入到B A F 液体培养基中培养21d ,培养结束后,将菌丝抽滤后于80ħ烘干至恒质量,测定菌丝发酵生物量[13]㊂每个试验均重复3次,结果用 平均值ʃ标准差 表示㊂1.4 红汁乳菇马尾松菌根苗培育1.4.1 红汁乳菇液体菌种培养 将上述10个红汁乳菇菌株分别接种到121ħ灭菌20m i n 的B A F 液体培养基中,于23ħ㊁150r /m i n [15]培养21d,形成菌丝球后结束培养㊂将中止发酵培养的10个菌株的液体菌种分别保存,用于接种马尾松苗㊂1.4.2 马尾松育苗 马尾松苗培养基质用泥炭土和蛭石以体积比2ʒ1混合,121ħ灭菌2h ,冷却后平铺于32穴育苗穴盘中,备用㊂选取饱满㊁无虫害的马尾松种子,用无菌水浸泡24h 后,用体积分数30%过氧化氢振荡浸泡15m i n,再用无菌水冲洗5次,放在垫有灭菌湿润纱布的培养皿中,25ħ培养箱中催芽,待种子萌发率达80%以上时,将萌发的种子点播至育苗穴盘中㊂1.4.3 菌根合成 将播种的育苗穴盘置于人工气候室内培养,适时喷水,待马尾松苗高至3~5c m时,接入1.4.1节红汁乳菇液体菌种,接种量为3m L /株㊂以不接种的马尾松苗作为空白对照(C K ),每个菌株接种160株苗㊂用于盆栽试验的马尾松苗全部置于光照1500l x ㊁气温(25ʃ2)ħ㊁相对湿度70%~80%环境下培养,每隔7d 用超纯水浇透1次㊂1.4.4 菌根形态特征和数量观测 接种210d 后,每个处理随机抽取30株成苗,调查菌根苗的苗高㊁主根长㊁地径㊁干质量等生长量指标,同时在体视显微镜下观测马尾松苗的菌根形态特征和数量,用A ge r e r [16]的方法对菌根形态特征进行描述[17-18],并计算菌根化率[19]:P 1=N 1/N ˑ100%㊂(1)式中:P 1为菌根化率;N 1为有菌根的株数;N 为取样总株数㊂将马尾松苗的根系剪成1c m 等长的根段,随机选取100个根段,在体视显微镜下检测并统计外生菌根数量,计算菌根侵染率[19]:P 2=n 1nˑ100%㊂(2)式中:P 2为菌根侵染率;n 1为侵染菌根根段数;n 为总根段数㊂1.5 数据分析采用S P S S 17.0软件进行数据处理,采用D u n -c a n s 法进行单因素和多重比较方差分析,显著性水平设置为0.05,并对数据进行正态分布检测和P e a r s o n 相关性分析㊂应用模糊数学中的隶属函数法,计算红汁乳菇菌株各参数的隶属函数值:U (X )=X -X m i nX m a x -X m i n㊂(3)式中:U (X )为隶属函数值,X 为红汁乳菇某参数因子,X m a x 和X m i n 分别为该因子的最大值和最小值㊂2 结果与分析2.1 10个红汁乳菇菌株生长情况比较不同红汁乳菇菌株生长活力的比较见表1㊂表1 不同红汁乳菇菌株生长活力的比较T a b l e 1 C o m pa r i s o n o f s t r a i n g r o w t h a c t i v i t i e s o f d i f f e r e n t L a c t a r i u s h a t s u d a k e s t r a i n s 菌株S t r a i n 菌丝生长速度/(mm ㊃d -1)M y c e l i a l gr o w t h r a t e 菌丝颜色M yc e l i a l c o l o r 菌丝生物量/(g㊃L -1)M yc e l i a l b i o m a s s J H 13.17ʃ0.02a浅绿色L i g h t g r e e n 2.98ʃ0.05bJ H 22.36ʃ0.01c d 白色W h i t e 2.21ʃ0.03eJ H 42.44ʃ0.02c白色W h i t e 2.58ʃ0.05cJ H 52.81ʃ0.01b 纯白W h i t e 3.28ʃ0.02aJ H 73.12ʃ0.03a白色W h i t e 2.96ʃ0.05b J H 82.22ʃ0.02d 白色W h i t e2.38ʃ0.03d J H 101.02ʃ0.03e黄褐色Y e l l o w i s h b r o w n1.56ʃ0.05gJ H 112.15ʃ0.02d 肉红色F l e s h r e d1.88ʃ0.03fJ H 122.19ʃ0.01d 白色W h i t e 1.89ʃ0.04fJ H 132.20ʃ0.03d白色W h i t e2.36ʃ0.04d注:同列数据后标不同小写字母表示差异显著(P <0.05)㊂下表同㊂N o t e :D i f f e r e n t l o w e r c a s e l e t t e r s r e p r e s e n t s i gn i f i c a n t d i f f e r e n c e s (P <0.05).T h e s a m e b e l o w.831西北农林科技大学学报(自然科学版)第52卷由表1可知,10个红汁乳菇在P D A固体培养基上培养时,各菌株的菌丝生长速度和形态差异均较大㊂其中菌株J H1和J H7菌丝生长速度最快,分别为3.17和3.12mm/d,两者之间无显著差异,但均显著高于其他8个菌株;菌株J H1菌丝浅绿色,稀疏,气生菌丝多,菌丝纤细,基内菌丝少;菌株J H7菌丝白色,稀疏,气生菌丝多,菌丝纤细㊂菌株J H5的生长速度为2.81mm/d,菌丝纯白色,致密,基外菌丝茂盛,不易老化,呈旺盛态,基内菌丝和基外菌丝生长同步㊂菌株J H2㊁J H4之间及菌株J H8㊁J H11㊁J H12和J H13之间菌丝生长速度无显著差异;菌株J H10菌丝生长速度最慢,仅为1.02 mm/d,菌丝黄褐色,稀疏,气生菌丝多,易老化,呈羸弱态㊂由表1还可知,在B A F液体培养基中培养21d 后,红汁乳菇菌株J H5的菌丝生物量最大,为3.28 g/L,显著高于其他9个菌株㊂观察发现,其菌丝颜色呈金黄色,形状为短棒状或短杆状,菌丝球较小;这种短小的菌丝体,利于菌剂制作,可以直接接种马尾松幼苗㊂菌株J H1与J H7㊁菌株J H8与J H13㊁菌株J H11与J H12相互间菌丝生物量无显著差异;菌株J H4的菌丝生物量为2.58g/L,菌丝球颗粒直径较大;菌株J H10液体培养时菌丝生长最慢,生物量最低,仅为1.56g/L㊂综合菌株的生长情况来看,红汁乳菇菌株J H1㊁J H5和J H7在菌丝生长速度和生物量上表现良好,整体优于其他7个菌株㊂2.2马尾松苗接种红汁乳菇菌株后的菌根形态特征和菌根合成能力马尾松苗接种不同红汁乳菇菌株210d后,菌根形态观测结果(表2和图1)显示,不同红汁乳菇菌株的菌根形态表现各异,其形态包括二叉分枝状㊁不规则羽状㊁珊瑚状和单轴羽状4大类;菌根探索类型可以分为接触探索型㊁短距离探索型和长距离探索型3种㊂从菌根形态看,接种J H5菌株的马尾松苗的菌根形态为珊瑚状,接种J H1㊁J H8和J H10菌株的马尾松苗的菌根形态为二叉分枝状,接种J H2㊁J H4㊁J H7和J H11菌株的马尾松苗的菌根形态为不规则羽状,接种J H12和J H13菌株的马尾松苗的菌根形态为单轴羽状㊂从菌根探索类型看,接种J H1和J H8菌株的马尾松苗的菌根探索类型为短距离探索型,接种J H2㊁J H4㊁J H7和J H13菌株的马尾松苗的菌根探索类型为长距离探索型,接种J H5㊁J H10㊁J H11和J H12菌株的马尾松苗的菌根探索类型为接触探索型㊂表2马尾松苗接种红汁乳菇菌株后的菌根形态和探索类型T a b l e2 M o r p h o l o g i c a l a n d e x p l o r a t i o n t y p e o f m y c o r r h i z a a f t e r i n o c u l a t i n g d i f f e r e n t L a c t a r i u s h a t s u d a k es t r a i n s o n s e e d l i n g s o f P i n u s m a s s o n i a n a接种菌株I n o c u l a t e d s t r a i n菌根形态M o r p h o l o g i c a l t y p eo f m y c o r r h i z a菌根探索类型E x p l o r a t i o n t y p e o fm y c o r r h i z aJ H1二叉分枝状D i c h o t o m o u s短距离探索型S h o r t-d i s t a n c e e x p l o r a t i o n J H2不规则羽状I r r e g u l a r l y p i n n a t e,d i c h o t o m o u s-l i k e长距离探索型L o n g-d i s t a n c e e x p l o r a t i o n J H4不规则羽状I r r e g u l a r l y p i n n a t e,d i c h o t o m o u s-l i k e长距离探索型L o n g-d i s t a n c e e x p l o r a t i o n J H5珊瑚状C o r a l l o i d接触探索型C o n t a c t e x p l o r a t i o nJ H7不规则羽状I r r e g u l a r l y p i n n a t e,d i c h o t o m o u s-l i k e长距离探索型L o n g-d i s t a n c e e x p l o r a t i o n J H8二叉分枝状D i c h o t o m o u s短距离探索型S h o r t-d i s t a n c e e x p l o r a t i o n J H10二叉分枝状D i c h o t o m o u s接触探索型C o n t a c t e x p l o r a t i o nJ H11不规则羽状I r r e g u l a r l y p i n n a t e,d i c h o t o m o u s-l i k e接触探索型C o n t a c t e x p l o r a t i o nJ H12单轴羽状U n i a x i a l p i n n a t e接触探索型C o n t a c t e x p l o r a t i o nJ H13单轴羽状U n i a x i a l p i n n a t e长距离探索型L o n g-d i s t a n c e e x p l o r a t i o n表3显示,接种不同红汁乳菇菌株的马尾松苗均形成了形态正常的外生菌根,试验组马尾松苗平均菌根数量为21.91个/株,而对照组未形成菌根㊂其中,接种红汁乳菇J H5菌株的马尾松苗的菌根数量为45.65个/株,菌根化率为90.67%,菌根侵染率高达79.60%,均显著高于其他9个菌株,在10个菌株中表现最优㊂接种J H10菌株的马尾松苗的菌根化率最低,仅为45.00%;接种J H11菌株的马尾松苗的菌根侵染率最低,仅为31.75%;接种J H12菌株的马尾松苗的菌根数量最少,仅为10.16个/株㊂由此可见,接种红汁乳菇J H5菌株的菌根苗在菌根数量㊁菌根化率和菌根侵染率上整体显著优于其他9个菌株,合成菌根能力最强㊂931第1期谭云,等:基于菌株生长和菌根苗品质的红汁乳菇菌株筛选图1 马尾松苗接种红汁乳茹菌株后的菌根形态F i g .1 M y c o r r h i z a l m o r p h o l o g y a f t e r i n o c u l a t i n g di f f e r e n t L a c t a r i u s h a t s u d a k e s t r a i n s o n s e e d l i n gs o f P i n u s m a s s o n i a n a 表3 不同红汁乳菇菌株合成菌根能力的比较T a b l e 3 C o m p a r i s o n o f m y c o r r h i z a l s y n t h e s i s a b i l i t y of d i f f e r e n t L a c t a r i u s h a t s u d a k e s t r a i n s 菌株S t r a i n 菌根数量/(个㊃株-1)M yc o r r h i z a a m o u n t菌根化率/%M y c o r r h i z a r a t e 菌根侵染率/%M y c o r r h i z a i n f e c t i o n r a t e 菌株S t r a i n 菌根数量/(个㊃株-1)M y c o r r h i z a a m o u n t菌根化率/%M y c o r r h i z a r a t e 菌根侵染率/%M y c o r r h i z a i n f e c t i o n r a t eJ H 114.17ʃ0.18e 62.00ʃ1.46b c 52.33ʃ9.56b cJ H 1012.52ʃ0.91e f 45.00ʃ2.89c56.67ʃ1.2b cJ H 222.13ʃ0.24c64.25ʃ2.64b c 50.34ʃ8.47c dJ H 1119.41ʃ0.69d49.00ʃ2.57c31.75ʃ0.85eJ H 428.47ʃ0.65b 65.67ʃ1.44b c 48.80ʃ6.88dJ H 1210.16ʃ0.34f63.00ʃ2.55b c 35.00ʃ0.58eJ H 545.65ʃ0.88a90.67ʃ9.33a79.60ʃ0.75aJ H 1315.64ʃ0.29e 58.96ʃ5.48b c 47.33ʃ2.14d J H 728.15ʃ0.68b 70.87ʃ6.22b 68.62ʃ2.68b C KJ H 822.83ʃ1.38c69.67ʃ7.13b50.83ʃ0.6c d2.3 不同红汁乳菇菌株对马尾松苗生长的影响2.3.1 苗 高 由表4可见,不同红汁乳菇菌株接种马尾松后,其对苗高的影响不尽相同㊂其中接种J H 4和J H 5菌株的马尾松苗较高,分别达到25.25和24.61c m ,二者之间无显著差异,但显著高于其他8个菌株和对照㊂接种菌株J H 1㊁J H 2㊁J H 11和J H 12的马尾松苗的苗高与对照相比无显著差异㊂接种红汁乳菇J H 13菌株的马尾松苗的苗高显著低于对照,说明J H 13对马尾松苗高的生长具有抑制作用㊂2.3.2 主根长 由表4可见,接种不同红汁乳菇菌株对马尾松苗主根的促生作用不尽相同㊂接菌组马尾松苗的平均主根长为12.49c m ,略高于对照组(12.20c m ),总体上看差异不大,其中接种J H 4和J H 5菌株的马尾松苗的主根较长,分别达到14.24和13.72c m ,均显著高于对照,说明这2个菌株可以促进马尾松苗主根的生长㊂接种J H 10菌株的马尾松苗主根长显著低于对照,仅为10.35c m ,说明菌株J H 10具有抑制马尾松主根生长的效果㊂接种其余7个菌株的马尾松苗的主根长度与对照均无显著差异,说明其对马尾松苗主根生长影响不大㊂2.3.3 地 径 由表4可见,试验组马尾松苗的平均地径为2.13mm ,略高于对照组(2.12mm ),总体而言接种外生菌根真菌对马尾松苗地径影响不大㊂10个接菌处理中,接种菌株J H 4㊁J H 5和J H 841西北农林科技大学学报(自然科学版)第52卷的马尾松苗的地径较大,分别达到2.20,2.23和2.16mm ,显著高于对照,说明接种J H 5㊁J H 4㊁J H 8能显著促进马尾松苗地径的生长㊂接种菌株J H 1㊁J H 2㊁J H 7㊁J H 11㊁J H 12和J H 13的马尾松苗的地径与对照无显著差异,而接种J H 10菌株的马尾松苗的地径显著低于对照㊂说明J H 10菌株对马尾松苗的地径生长具有抑制效应㊂2.3.4 干质量 由表4可见,10个红汁乳菇菌株接种马尾松苗的平均干质量为1.03g,显著高于对照,说明接种红汁乳菇可以大幅促进宿主植物马尾松营养物质的积累㊂接种菌株J H 4的菌根苗干质量最大,达到1.15g,显著高于其他9个菌株㊂接种菌株J H 1㊁J H 2㊁J H 5㊁J H 7㊁J H 8的马尾松苗的干质量均大于1.00g,但相互间均无显著差异;接种菌株J H 11的马尾松苗的干质量最低,仅为0.91g,但也显著高于对照(0.75g)㊂说明各红汁乳菇菌根均能够促进马尾松根系从土壤中吸收养分供自身生长㊂上述结果证明,以马尾松苗高㊁主根长㊁地径和干质量为评估指标,J H 4㊁J H 5㊁J H 7和J H 8为优选接种马尾松苗的红汁乳菇菌株㊂表4 不同红汁乳菇菌株接种马尾松苗后植株生长参数的比较T a b l e 4 C o m p a r s i o n o f g r o w t h p a r a m e t e r s a f t e r i n o c u l a t i n g di f f e r e n t L a c t a r i u s h a t s u d a k e s t r a i n s o n s e e d l i n gs o f P i n u s m a s s o n i a n a 菌株S t r a i n 苗高/c mS e e d l i n g h e i gh t 主根长/c mM a i n r o o t l e n gt h 地径/mmG r o u n d d i a m e t e干质量/gD r y w e i g h tt J H 121.51ʃ0.16d e f11.67ʃ0.22d2.04ʃ0.06d e1.07ʃ0.04b cJ H 221.81ʃ0.31d e f 11.96ʃ0.22d2.14ʃ0.02b c 1.05ʃ0.04b c J H 425.25ʃ0.28a 14.24ʃ0.38a2.20ʃ0.01a b1.15ʃ0.01aJ H 524.61ʃ0.34a13.72ʃ0.28a b 2.23ʃ0.01a1.10ʃ0.01bJ H 722.56ʃ0.24d12.33ʃ0.16c d 2.15ʃ0.01b c 1.06ʃ0.02b c J H 823.14ʃ0.55b c 12.25ʃ0.36c d2.16ʃ0.01a b 1.08ʃ0.01b c J H 1022.31ʃ0.78c d 10.35ʃ0.22e2.03ʃ0.02e0.93ʃ0.01d cJ H 1120.75ʃ0.13f12.83ʃ0.31b c 2.13ʃ0.01b c 0.91ʃ0.01eJ H 1220.62ʃ0.18f12.98ʃ0.09b c 2.11ʃ0.01c d0.97ʃ0.01d J H 1318.15ʃ0.12g12.58ʃ0.14c2.15ʃ0.02b c 0.99ʃ0.03d C K 20.89ʃ0.31e f 12.20ʃ0.14c d2.12ʃ0.02c d0.75ʃ0.01f2.4 红汁乳菇菌株及菌根苗各参数因子的相关性分析采用S P S S 17.0软件,对红汁乳菇菌株的菌丝生长速度㊁菌丝生物量㊁菌根数量㊁菌根化率㊁菌根侵染率,以及马尾松菌根苗的苗高㊁主根长㊁地径㊁干质量等参数因子,进行柯尔莫可洛夫-斯米洛夫检验(K o l m o go r o v -S m i r n o v t e s t ),结果显示,红汁乳菇菌株及菌根苗各参数数据均服从正态分布,适于进行P e a r s o n 相关性分析㊂红汁乳菇菌株及菌根苗各参数因子的相关性分析结果如表5所示㊂表5 红汁乳菇菌株及菌根苗各参数因子的P e a r s o n 相关性分析T a b l e 5 P e a r s o n c o r r e l a t i o n a n a l y s i s o f p a r a m e t e r f a c t o r s i n L a c t a r i u s h a t s u d a k e s t r a i n s a n d m y c o r r h i z a l s e e d l i n gs 因子F a c t o r s 菌株生长参数S t r a i n a c t i v i t i e s p a r a m e t e r sL 1L 2菌根参数M y c o r r h i z a l p a r a m e t e r s P 1P 2P 3生长量参数G r o w t h p a r a m e t e r s Z 1Z 2Z 3Z 4L 11.0000.871**0.4480.647*0.3460.1780.4440.3570.621L 21.0000.705*0.818**0.700*0.4110.4290.4860.771**P 11.0000.823**0.732*0.689*0.5770.808**0.627P 21.0000.687*0.5210.5690.725*0.737*P 31.0000.5310.0070.3230.520Z 11.0000.3480.4290.685*Z 21.0000.838**0.497Z 31.0000.561Z 41.000注:L 1.菌丝生长速度;L 2.菌丝生物量;P 1.菌根数量;P 2.菌根化率;P 3.菌根侵染率;Z 1.苗高;Z 2.主根长;Z 3.地径;Z 4.干质量㊂表6同㊂**表示在0.01水平(双侧)显著相关;*表示在0.05水平(双侧)显著相关㊂N o t e :L 1.M y c e l i u m g r o w t h r a t e ;L 2.M y c e l i a l b i o m a s s ;P 1.M y c o r r h i z a a m o u n t ;P 2.M y c o r r h i z a r a t e ;P 3.M y c o r r h i z a i n f e c t i o n r a t e ;Z 1.S e e d -l i n g h e i g h t ;Z 2.M a i n r o o t l e n g t h ;Z 3.G r o u n d d i a m e t e r ;Z 4.D r y w e i g h t .T h e s a m e f o r T a b l e 6.**i n d i c a t e s s i g n i f i c a n t c o r r e l a t i o n a t 0.01l e v e l (b i l a t e r a l ).*i n d i c a t e s s i gn i f i c a n t c o r r e l a t i o n a t t h e l e v e l o f 0.05(b i l a t e r a l ).141第1期谭 云,等:基于菌株生长和菌根苗品质的红汁乳菇菌株筛选由表5可见,菌丝生长速度与菌丝生物量呈极显著正相关(P <0.01),与菌根化率呈显著正相关(P <0.05);菌丝生物量与菌根数量㊁菌根侵染率呈显著正相关(P <0.05),与菌根化率和菌根苗干质量呈极显著正相关(P <0.01)㊂说明红汁乳菇菌丝的生长速度越快,菌丝生物量越大,液体菌种中红汁乳菇浓度越高,接种到育苗基质中更容易形成优势菌群,有利于加快侵染马尾松根系,促进菌根合成,提高菌根化率和菌根侵染率㊂由表5还可见,菌根参数各内部因子(P 1㊁P 2㊁P 3)间相关性显著,如菌根数量与菌根化率和菌根侵染率呈极显著或显著正相关,菌根化率与菌根侵染率呈显著正相关(P <0.05),说明3个因子的变化趋势具有相似性,后续可以根据相关系数对菌根参数进行降维处理㊂菌根数量与地径㊁苗高呈极显著或显著正相关,菌根化率与地径和干质量呈显著正相关(P <0.05)㊂表明红汁乳菇菌根的形成能够有效促进马尾松生长和有效物质的积累㊂生长量参数中,苗高与干质量呈显著正相关(P <0.05),表明除干质量是植株营养积累的直接指标外,苗高也可间接表征植株营养的有效积累程度;主根长与地径呈极显著正相关(P <0.01),表明主根越长,根系越发达,营养吸收能力越强,地径越粗㊂2.5 红汁乳菇菌株的综合评价上述研究结果表明,不同红汁乳菇菌株在菌种培养㊁菌根合成和菌根苗生长等方面表现各异,用单一指标来评价菌株优劣不够科学㊂由于各指标之间存在较大相关性,可以剔除红汁乳菇的菌丝生物量㊁菌根数量和菌根化率3个显著相关的变量,避免权重的不合理迭加,确保各因子数据的独立性㊂采用隶属函数法,计算其余6个因子的隶属函数值,对10个红汁乳菇菌株进行综合评价,结果如表6所示㊂由表6可知,红汁乳菇菌株J H 5㊁J H 4和J H 7的隶属函数值较高,排名靠前,是培养菌根苗的较优菌株;菌株J H 10㊁J H 11和J H 12的隶属函数值较低,菌根合成能力较差,不宜用于菌根苗的规模化生产㊂表6 基于隶属函数值的10株红汁乳菇菌株的综合评价T a b l e 6 C o m p r e h e n s i v e e v a l u a t i o n o f 10L a c t a r i u s h a t s u d a k e s t r a i n s b a s e d o n m e m b e r s h i p fu n c t i o n v a l u e s 菌株S t r a i n 隶属函数值M e m b e r s h i p fu n c t i o n v a l u e L 1P 3Z 1Z 2Z 3Z 4累计T o t a l排名R a n k i n g J H 11.0000.4300.4730.3390.0500.6672.9596J H 20.6230.3890.5150.4140.5500.5833.0745J H 40.6600.3561.0001.0000.8501.0004.8662J H 50.8331.0000.9100.8661.0000.7925.4011J H 70.9770.7710.6210.5090.6000.6254.1033J H 80.5580.3990.7030.4880.6500.7083.5064J H 100.0000.5210.5860.0000.0000.0831.19010J H 110.5260.0000.3660.6380.5000.0002.0309J H 120.5440.0680.3480.6760.4000.2502.2868J H 130.5490.3260.0000.5730.6000.3332.38173 讨论与结论高质量的红汁乳菇菌种在合适的固体培养基上,应该具有基外菌丝粗壮㊁菌丝层厚㊁菌落边缘整齐㊁浓密,基内菌丝和基外菌丝同步生长㊁不易老化㊁不自溶㊁白色或肉红色等复合特征㊂本研究结果表明,10个红汁乳菇菌株中,J H 5菌株的菌丝形态最符合上述特征,生长势最佳;J H 1㊁J H 2㊁J H 4和J H 7次之,且较为接近㊂本研究通过测定10个红汁乳菇菌株的2个菌种生长势参数(菌丝生长速度和菌丝生物量)㊁3个菌根参数(菌根数量㊁菌根化率和菌根侵染率)和4个宿主植物生长量参数(苗高㊁主根长㊁地径和干质量),利用隶属函数法进行综合评价,筛选出适合接种菌根苗的红汁乳菇最佳菌株J H 5,较优菌株J H 4和J H 7㊂J H 5菌株在P D A 固体培养基上的生长速度达到2.81mm /d ,在B A F 液体培养基中的菌丝生物量达到3.28g /L ㊂接种红汁乳菇J H 5菌株的菌根数量㊁菌根化率和菌根侵染率均显著优于其他9个菌株,合成菌根能力最强㊂接种J H 5菌株的马尾松苗的地径表现最优,接种J H 4菌株的马尾松苗苗高㊁主根长和干质量表现最优㊂从马尾松苗生长量参数来看,接种菌株J H 4㊁J H 5㊁J H 7和J H 8的菌根苗在苗高㊁主根长㊁地径和干质量上均显著高于对照,这与祁金玉等[20]用红汁乳菇接种油松合成外生菌根后,油松苗苗高㊁地径㊁干质量显著提高的结论相似㊂前人关于同一菌根真菌的不同菌株对相同宿主241西北农林科技大学学报(自然科学版)第52卷植物促生作用的研究,主要集中在牛肝菌[21]㊁双色蜡蘑[21]㊁松茸[22]等外生菌根真菌上,尚未见红汁乳菇的相关报道㊂本研究通过对10个红汁乳菇菌株的分析发现,红汁乳菇对马尾松各生长量参数的促生作用并不一致,有的甚至显示出抑制作用;其中, J H5菌株接种的马尾松菌根苗的菌根化率达到90.67%,菌根侵染率为79.60%,苗高㊁地径和干质量分别较对照提高17.81%,5.19%,46.67%,这与前人用红汁乳菇接种马尾松[23]和油松[20]幼苗后可使之菌根化,且能明显促进苗木生长的结论吻合,但这些研究均未对不同红汁乳菇菌株的菌根化能力进行进一步探讨㊂本研究表明,接种不同外生菌根真菌菌株后宿主植物的生长表现各异,具体而言,部分菌株能够显著促进宿主植物地上部分的发育,有的菌株则主要作用于根部,刺激幼苗形成次生根,还有的菌株则无明显促生作用[24],说明各菌株对宿主植物的刺激效应存在一定差异,与宿主植物的亲和力也不尽相同㊂相关性分析表明,菌根侵染率和主根长的相关系数仅为0.007,说明二者之间基本无明显相关性,这与调查过程中未在马尾松菌根菌的主根上直接发现菌根的现象相符,说明红汁乳菇更偏爱于侵染一级㊁二级侧根等次生根系㊂已有研究表明,在菌根合成过程中,外生菌根真菌能合成并分泌生长素来实现信号传递,生长素能够抑制宿主植物主根生长而诱导侧根的形成,从而增加菌丝的侵染位点,同时能抑制根毛发生,有效提高菌根侵染效率[25-26]㊂有研究表明,生长素在块菌[27-28]㊁松茸[29]等外生菌根合成过程中发挥着重要作用,但外源生长素能否提高红汁乳菇的菌根侵染率,还需进一步验证㊂本研究证实,菌种的质量可直接影响菌根合成的水平和能力㊂此外,宿主植物的种类㊁育苗基质配方㊁菌剂类型㊁接种量㊁接种方式㊁接种时间等因素也会影响菌根的发育[30-31]㊂因此,后期需对上述因子进行优化,以获取红汁乳菇菌根合成的关键参数的优化组合,实现红汁乳菇高质量菌根苗的高效化生产㊂[参考文献][1]魏杰,高巍,黄晨阳.中国菌根食用菌名录[J].菌物学报,2021,40(8):1938-1957.W e i J,G a o W,H u a n g C Y.A c h e c k l i s t o f e d i b l e e c t o m y c o r r h i-z a l m u s h r o o m s i n C h i n a[J].M y c o s y s t e m 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红汁乳菇菌丝对环境条件的适应性研究初报X王志勇李晓宏(湖北咸宁教育学院咸宁437100)摘要:从红汁乳菇菌盖上分离得到的菌丝易于培养。

条件适宜时,菌丝浓密洁白,且在基质上产生桔红色色素。

菌丝对单糖、双糖、多糖均可利用,对氨态氮、硝态氮、尿素、氨基酸也均可利用。

菌丝可在510~3010e下生长,最适温度为2010~2510e,pH值3~11时均可生长,最适pH值为5~8,光照对菌丝生长的影响不大。

关键词:红汁乳菇;菌丝;生物学特性Prim ary Studying Re port on Adaptatio n of Lactarius HatsidakeT anaka to E nvironme ntal Co nditionW ang Z hiyo ng L i X iao ho ng(X ianning Educa tio n Co llege o f H ubei X ianning437100)A bstr act:Fungus separ ated fr o m L actaru ius ha tsuda ke T anaka is ea sy to be cultur ed.T hey a re dense,snow -w hite and pr oduce pig ment of o r ange-r ed co lo r o n the r aw mater ials under suitable conditio n.The f ungus may utilize mo nosacchar ide,disa ccharide a nd polysa ccharide a s w ell as to the utiliza tio n o f N O3--N,NH4 +-N,amm onium-N and ur ea.T he fungus can gr ow under temper ature510~3010e,but the mo st suit-able temper atur e is2010~2510e under w hich it ca n g ro w av er agely w hen pH v alue is3~11,the mo st adaptable pH is5~8,and t he fung us are influe nce d litt le by the sun ligh ts.Ke y word s:L acta rius hatsudake Ta na ka;fungus;bio log y fe atur e红汁乳菇(L actarius hatsudake Tanaka)是1种外生菌根菌[2]。

液体酵母培养实验报告引言液体酵母培养是一种常见的实验方法，旨在研究酵母菌在液体培养基中的生长状况及代谢产物的生成。

本实验通过控制培养条件，观察液体酵母培养过程中酵母菌的生长情况，并探讨培养基成分对酵母生长的影响。

实验方法1. 准备培养基：将适量的葡萄糖、酵母粉和去离子水加入500ml锥形瓶中，混合均匀得到液体培养基。

2. 前处理：将液体培养基分装到不同的试管中，并加盖。

3. 酵母接种：取出一株酵母菌的培养板，用铅笔尖取一小块菌落，将其接种到试管中的培养基中。

4. 培养过程：将试管放置在恒温摇床上，以适当的摇床速度摇动，使酵母菌充分接触氧气。

5. 生长观察：每过24小时观察一次酵母菌的生长情况，记录菌液的密度变化、颜色变化等信息。

6. 数据统计：记录实验过程中的数据，并进行统计分析。

实验结果在实验过程中，我们观察到酵母菌在液体培养基中出现了生长现象。

培养基中酵母菌逐渐增殖，菌液的密度不断增加。

在初期，酵母菌呈现出悬浮在培养基中的状态，随着培养时间的推移，酵母菌逐渐聚集在瓶底，形成沉淀，上层液体逐渐变清澈。

在培养过程中，我们还注意到菌液的颜色逐渐变浅，由混浊的黄色逐渐变为透明的浅黄色。

讨论与分析酵母菌的生长过程受到多个因素的影响，其中培养基成分对酵母菌的生长具有重要的影响。

葡萄糖作为培养基的主要碳源，可以提供能量供给给酵母菌进行代谢活动。

而酵母粉中含有丰富的氮源、维生素等营养物质，能够满足酵母菌正常生长所需。

因此，合理调控培养基中葡萄糖和酵母粉的比例，可以促进酵母菌的生长。

此外，培养条件也对酵母菌的生长产生影响。

摇床的运动使得培养基中的酵母菌能够充分接触氧气，从而促进代谢产物的生成。

此外，恒温摇床提供了一个稳定的温度环境，有利于酵母菌的正常生长。

通过本次实验，我们观察到了酵母菌的生长情况，并了解了培养基成分和培养条件对其生长的影响。

这对于后续的酵母菌研究以及相关酵母发酵产物的生产具有重要的参考价值。

液体菌种工作总结_暑假实习工作总结工作总结暑假实习期间，我在液体菌种公司进行了为期两个月的工作实习。

在这段时间里，我主要负责液体菌种的培养、发酵及相关的实验工作，并在导师的指导下取得了一定的成果。

通过这次实习，我不仅增长了专业知识，还学会了工作中的沟通协调能力和团队合作精神。

以下是我的工作总结汇报。

1、液体菌种的培养和发酵工作在实习期间，我主要负责液体菌种的培养和发酵工作。

我要制备好培养基，接种培养基，然后将菌种放入培养箱进行培养。

在培养的过程中，我需要根据菌种的生长情况及时调整培养条件，确保菌种的生长繁殖。

在发酵工作中，我需要控制好发酵的各个参数，如温度、pH值、氧气供应等，以保证最佳的发酵效果。

通过这些工作，我对液体菌种的培养和发酵过程有了更深入的了解，并且掌握了相应的操作技能。

2、实验数据的记录和分析在进行液体菌种的培养和发酵实验时，我需要及时记录实验数据，并对实验结果进行分析总结。

我学会了如何准确地记录实验过程中的各项参数和观察结果，同时也掌握了如何运用统计方法和数据分析软件对实验数据进行分析，得出科学的结论。

这些工作不仅提高了我的数据处理能力，也增强了我在实验中的分析思维和判断能力。

3、实验室安全与管理在实习期间，我还学习了实验室的安全操作规程和实验室管理制度。

我遵守实验室的各项安全规定，认真地进行实验操作，保证了实验过程的安全。

我还了解了实验室的日常管理工作，比如实验器材的清洁和消毒、实验废物的处理等，学会了如何保持实验室环境的整洁和安全。

4、团队合作和沟通能力在液体菌种公司实习的过程中，我和其他实习生、实验员及导师之间密切合作，完成了一系列的实验工作。

在这个过程中，我学会了如何与同事有效地沟通和协作，共同解决实际问题。

我还积极参与团队讨论，分享自己的想法和经验，使得团队的合作效果更加高效和完美。

通过这次实习，我不仅学到了大量的专业知识和实验技能，还养成了严谨的工作态度和团队合作的精神。

赵　洪，李　静，向　旭，等．红汁乳菇菌丝体液体发酵条件的优化研究［Ｊ］．江苏农业科学，２０２０，４８（１４）：１６７－１６９．ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０２０．１４．０３０红汁乳菇菌丝体液体发酵条件的优化研究赵　洪１，李　静１，向　旭１，高礼安２，邓功成１（１．黔南民族师范学院生物科学与农学院，贵州都匀５５８０００；２．黔南民族师范学院旅游与资源环境学院，贵州都匀５５８０００） 摘要：采用液体发酵技术和正交试验方法，研究碳源、氮源、起始ｐＨ值和发酵时间等发酵条件对红汁乳菇菌丝体干质量的影响，并对发酵条件进行优化。

结果表明，红汁乳菇菌丝体液体发酵条件的较优组合为碳源为马铃薯粉，浓度为３％；氮源为酵母膏，浓度为０．３％；起始ｐＨ值为６．０；发酵时间５ｄ。

在２７℃条件下，该组合菌丝体干质量最高，为１０．０９４ｇ／Ｌ。

关键词：红汁乳菇；菌丝体；液体发酵；工艺优化；正交试验 中图分类号：Ｓ６４６．０４ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－１３０２（２０２０）１４－０１６７－０３收稿日期：２０１９－０８－２３基金项目：贵州省科学技术基金［编号：黔科合ＬＨ字（２０１４）７４２５］。

作者简介：赵　洪（１９６８—），男，贵州瓮安人，副教授，主要从事生态学教学和环境生态及资源开发研究。

Ｅ－ｍａｉｌ：７３２１４０１２６＠ｑｑ．ｃｏｍ。

红汁乳菇（Ｌａｃｔａｒｉｕｓｈａｔｓｕｔａｋｅ），别称紫菌、松毛菌，属担子菌亚门（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔｉｎａ）层菌纲（Ｈｙｍｅｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）伞菌目（Ａｇａｒｉｃａｌｅｓ）红菇科（Ｒｕｓｓｕｌａｃｅａｅ）乳菇属（Ｌａｃｔａｒｔｕｓ）大型真菌［１］。

红汁乳菇为菌根食用菌，目前尚不能人工栽培。

红汁乳菇菌丝体可以与马尾松等植物形成菌根［２］，对松树的生长有促进作用，可提高松树抗环境胁迫能力已得到普遍认同。

有研究者对红汁乳菇子实体的生境及发生规律开展了调查和研究［３－５］，对其子实体的营养成分进行了测定［６］。