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实验1 培养基的配制和灭菌一、目的要求1.了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。
2.了解几种灭菌方法，掌握高压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。
3.熟悉菌种分离筛选的前期准备工作及操作方法。
4.每2人一组，每人一份实验报告。
二、实验材料1.药品：酵母粉、蛋白胨、氯化钠、琼脂、葡萄糖、KNO3、MgSO4•7H2O、FeSO4•7H2O、1N HCl、1N NaOH2.设备：高压蒸汽灭菌锅、紫外线灭菌灯、75%酒精棉。
3.材料：天平、药匙、电炉、pH 试纸、烧杯、量筒、5mL、10mL 注射器、玻璃棒、试管、培养基、吸管、移液器（1mL 0.2mL）、牛皮纸、线绳、标签等。
三、实验内容(一) 培养基的配制1．培养基的配制方法和步骤1)称量：按照配方正确称取所需药品放于烧杯中。
2)溶化：在烧杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。
3)调pH 值：用1N NaOH 或1N HCl 调pH，用pH 试纸对照。
4)加琼脂溶化：加热过程要不断搅拌，可适当补水。
5)分装：注意不要污染试管塞或纱布。
6)包扎成捆：用记号笔注明何种培养基。
7)灭菌：在高压锅中， 115 °C 高温灭菌30min。
2．培养基的配制A.富集培养基（液体）：海水2216E 液体培养基（g/L）：蛋白胨5.0，酵母粉1.0，海水1L，pH 8.0。
取50mL 分装250mL 三角瓶后，8 层纱布封口，外包1层牛皮纸，121℃，高温灭菌20min。
B. 2216E 斜面（固体）：海水2216E 液体培养基中加入2%的琼脂粉，加热溶化琼脂，每支试管内。
加入3mL，121℃高温灭菌20min，灭菌后摆斜面。
C. 无菌生理盐水和保种液：生理盐水： NaCl 0.85% 蒸馏水配制。
每支试管加入5mL，盖上试管帽、包扎、121°C 高温灭菌20min。
保种液：生理盐水，加25%甘油D. 碳源优化培养基：以海水2216E 液体培养基（蛋白胨0.5%，酵母粉0.1%，磷酸铁0.01%，人工海水，pH7.6）为基础，碳源分别是：葡萄糖、蔗糖、甘油、柠檬酸钠、乳糖，每种碳源的添加量为1%。
海洋微生物的分类及培养地球上约有80%的物种栖息在海水中，其中微生物种类超过百万种，但已经研究和鉴定过的微生物不到总量的5%。
由于海洋环境的特殊性，海洋微生物具有独特的代谢方式，产生许多特殊结构和生理功能的活性物质。
与海洋动植物相比，海洋微生物具有生长周期短、代谢易于控制、菌种可选育的优势，因此可通过大规模发酵实现工业化生产，其开发更具有自然资源的可持续利用性。
在研究早期，Macleod提出将微生物对Na+的生长需要作为海洋物种的限定，虽然这一定义仍被引用，但是部分海洋微生物在进化过程中具有适应陆地（低Na+）环境的潜力。
目前，一般认为分离自海洋环境，正常生长需要海水，并可在低营养、低温条件下生长的微生物可视为严格的海洋微生物，而有些分离自海洋的微生物，其生长不一定需要海水，但可产生不同于陆生微生物的代谢物如含溴、碘的化合物，或拥有某些特殊的生理生化性质如盐耐受性，也被视为海洋微生物[1]。
海洋微生物种类繁多，据统计有200万~2亿种。
可系统的分为病毒、古菌、细菌和真核生物[2、3]。
(1) 古菌是原核微生物的分支，与细菌在形态分化及生化特性上均有区别。
（2）革兰氏阳性菌包括常见的放线菌。
此外，还可分为极端细菌（嗜冷、嗜热、嗜碱、嗜压等）、非极端细菌、放线菌、真菌等。
海洋微生物生存在海水和海泥中，在培养之前需要将其从生存环境中分离。
所有用于分离陆生微生物的方法几乎都可用于海洋微生物的分离。
但是有些海洋微生物的分离需要特殊条件，如需含有海水的培养基和调节水压；深海微生物需在高的静水压下从深海中分离等[4]。
由于海洋极其复杂的营养背景和物理条件在目前的技术条件下大多数海洋微生物都无法在实验室培养，目前只有不足5%的海洋微生物可以培养鉴定，从中发现的活性物质只占总数的1%[5]。
一般是将冷冻保存的菌种接种在斜面培养基上，恒温培养，在培养过程中可以选择静置或使用摇床。
发酵培养基一般包括：葡萄糖、蛋白胨、酵母粉、人工海水及营养成分（如马铃薯浸汁、牛肉浸膏等）。
大连海域海洋功能细菌的筛选王倩倩;刘玮;刘春莹;迟乃玉;张庆芳;于爽【摘要】从大连海域采集30余种海洋样品,用海水2216E固体培养基、含亚甲基蓝的固体培养基、含碳酸钙的固体培养基等进行培养,初筛出100多株具有产酸、产酶、产抗氧化性物质的菌株;20℃培养48 h,复筛出12株繁殖力强的低温菌,对其进行生长量检测、革兰氏染色、产酸、产葡萄糖氧化酶、亚硝酸盐降解、硝酸盐分解及10℃低温培养.其中菌株M2,5,6,4-1,7-1耐低温、生长快、产酸高、降解亚硝酸能力强、不分解硝酸盐、革兰氏阳性,兼性厌氧,初步确定为低温乳酸菌.同时还筛选出40余株具有葡萄糖氧化酶特性的菌株以及其他特性菌株,并对筛选的近200株海洋菌株进行保藏.该研究进一步证明了海洋微生物种类的多样性,使人们对未知的海洋微生物世界的研究更加着迷.【期刊名称】《科技创新与生产力》【年(卷),期】2019(000)006【总页数】4页(P42-45)【关键词】海洋微生物;细菌;细菌筛选;细菌保藏【作者】王倩倩;刘玮;刘春莹;迟乃玉;张庆芳;于爽【作者单位】大连大学生命科学与技术学院,辽宁大连 116622;辽宁省海洋微生物工程技术研究中心,辽宁大连 116622;大连大学生命科学与技术学院,辽宁大连116622;辽宁省海洋微生物工程技术研究中心,辽宁大连 116622;大连大学生命科学与技术学院,辽宁大连 116622;辽宁省海洋微生物工程技术研究中心,辽宁大连116622;大连大学生命科学与技术学院,辽宁大连 116622;辽宁省海洋微生物工程技术研究中心,辽宁大连 116622;大连大学生命科学与技术学院,辽宁大连 116622;辽宁省海洋微生物工程技术研究中心,辽宁大连 116622;大连大学生命科学与技术学院,辽宁大连 116622;辽宁省海洋微生物工程技术研究中心,辽宁大连 116622【正文语种】中文【中图分类】Q93-33浩瀚的海洋是地球上生命的摇篮，海洋特有的环境造就了海洋微生物的多样性与独特性，据估计，海洋微生物可达2 亿种。
海洋细菌代谢产物的分离纯化与鉴定海洋是一个生物多样性极高的生态系统，其中微生物数量巨大，而海洋微生物的代谢产物则是各种生物活性物质和化学品的重要来源。
其中，海洋细菌是抗生素和化合物的主要生产者。
因此，分离纯化和鉴定海洋细菌代谢产物是研究海洋微生物学和发现新药物的重要途径。
分离纯化海洋细菌分离纯化海洋细菌是鉴定其代谢产物的重要步骤。
为了确定海洋细菌的生态基础，首先需要进行采样。
海洋样品可以从许多地方采集，例如海洋底部、沿海潮汐区、沿海海洋、开阔的海洋水域等。
分离出的微生物可以通过灭菌肉汤养殖以增强生长条件，其排泄代谢产物会被累积和释放。
分离纯化海洋细菌的方法有多种，例如通过筛选、稀释、差异培养和质量分析等方法。
所有这些方法的目的是将海洋微生物从混合群体中分离出来，进一步纯化其代谢产物。
鉴定海洋细菌代谢产物鉴定海洋细菌代谢产物是海洋微生物学的重要难题之一。
这需要大量的实验，以确定侵入生物、细胞生长、当地（限制性）生态条件和代谢物的量和结构。
海洋细菌代谢产物包括抗生素、生物硅石、环境尤为适合的化合物等。
这些化合物的特性会随着海洋环境和海洋生物的质量量和变化而发生变化。
因此，只有通过多个实验技术来鉴定海洋微生物学和代谢物学的目的。
其中，从海洋细菌过滤液、生长底物和培养物中分离代谢物是鉴定海洋细菌代谢物的重要途径之一。
利用多种技术进行筛选、分离、纯化和鉴定海洋细菌代谢物是发现新药物和化学品的主要途径之一。
海洋细菌代谢物是一些重要的生物活性物质，例如抗生素、生长因子和抗肿瘤化合物等。
随着科学技术的不断发展，人们将有更多的机会去发现这些化合物，并将它们加以应用，使其为人类健康和经济带来更多的福利。
目录1. 摘要 (1)2. 前言 (1)3. 寡营养细菌生态分布 (1)3.1 寡营养细菌在海洋中的分布 (1)3.2 寡营养细菌在淡水中的分布 (2)3.3 寡营养细菌在土壤中的分布 (2)4. 海洋中微生物的研究概况、现状及发展前景 (2)4.1海洋微生物的研究概况 (2)4.2 海洋微生物的现状 (3)4.3海洋微生物的研究发展前景 (3)5. 海洋中寡营养细菌的分离纯化 (4)5.1 传统分离纯化及培养办法........................................... 错误！未定义书签。
5.2 新型的分离培养纯化及培养办法................................. 错误！未定义书签。
6. 寡细菌的适应机制................................................................. 错误！未定义书签。
6.1形态变化.......................................................................... 错误！未定义书签。
6.2附着机制 (6)6.3能量储存.......................................................................... 错误！未定义书签。
6.4抵抗性增强 (8)7.总结和展望 (9)参考文献 (10)海洋中寡营养细菌的分离培养技术及环境适应机制的研究进展1.摘要：寡营养细菌的分离、培养及鉴定较困难，并且生长慢，研究周期长，所以在较长一段时间内其研究进展缓慢，但近几年随着生物技术的快速发展及广泛应用，寡营养细菌在生态中的分布及其生态作用引起了生态学家和环境学家的广泛关注，寡营养细菌在生态、环境、能源、公共卫生等领域中的重要性已受到人们重视[3-8]。
海洋微生物的分离与鉴定研究第一章：引言海洋微生物是海洋生态系统中最丰富多样的生命形态之一。
它们在海洋生态系统中扮演着重要的角色，例如维持海洋生态平衡和参与有机物分解循环等。
近年来，随着现代分子生物学和生物技术的发展，对海洋微生物的分离和鉴定研究也取得了显著进展。
本文将对海洋微生物的分离和鉴定研究进行介绍和讨论。
第二章：海洋微生物的分离方法海洋微生物的分离方法主要包括传统分离和现代分离两种方式。
传统分离方法是基于微生物生理学和生态学的研究原理，利用不同菌株的生长条件、生长速率和生理代谢差异等特征进行筛选和分离。
常见的传统分离方法包括表层沉淀、筛选培养基和微生物计数等。
现代分离方法则利用现代分子生物学技术和高通量筛选平台，对微生物进行高通量分离、筛选和鉴定。
常见的现代分离方法包括共培养方法、PCR扩增和转录组技术等。
第三章：海洋微生物的鉴定方法海洋微生物的鉴定主要基于其形态、生理代谢和分子生物学特征。
传统鉴定方法主要基于微生物生理学和生物化学的研究原理，包括形态学鉴定、生化鉴定和药敏试验等。
现代鉴定方法则利用分子生物学技术对微生物进行鉴定，包括16S rRNA序列分析、rpoB基因序列分析和比较基因组学分析等。
第四章：海洋微生物的应用研究海洋微生物的应用研究包括医药、食品、能源、环境等多个领域。
以医药领域为例，海洋微生物是重要的天然药物来源，如海洋真菌产生的头孢菌素和海洋细菌生产的抗生素等。
在食品领域，海洋微生物也具有重要的应用前景，例如海洋藻类可以提取富含蛋白质和营养物质的食品材料。
此外，海洋微生物还可以被用作生产能源、处理废水等环境保护领域。
第五章：海洋微生物的前景与展望随着现代分子生物学和生物技术的不断发展，海洋微生物的分离和鉴定技术也将得到不断提高和完善。
未来，海洋微生物在多个领域的应用前景将继续扩大，为人类的生活健康和环境保护等方面作出更大的贡献。
同时，我们也需要更深入地了解海洋微生物在海洋生态系统中的作用和意义，保护海洋生态系统，维护自然生态平衡。
第一章绪论一、海洋微生物的定义海洋微生物（marine microbe）以海洋水体为正常栖居环境的一切微生物。
自八十年代起海洋生物技术蓬勃发展，“向海洋要药物”是新世纪海洋生物技术提出的口号。
海洋微生物的研究起步较晚，但在最近几年也受到了普遍重视。
二、海洋环境的特征(1) 海洋占地球表面积的71% —资源丰富；(2) 海洋平均深度：4000m ——高压，低温(3) 主要离子：Na+，Cl-，Ca2+，K+，SO42- ——高盐(4) 营养匮乏（N，P，Fe）——稀营养1 . 远海环境（1）栖居着浮游（自由泳动）微生物（2）地球上最大的环境（3）一般有大空间规模的环境变化（温度、光度等）2 . 深海环境（1）沉积物表面（2）提供了附加的表面积（3）提供小生境的多样性，使得有小空间规模的环境变化3 . 海洋雪(marine snow)（1）海洋雪定义：生存或死亡的有机体被黏多糖（微生物和浮游植物分泌的胞外产物）粘在一起形成的大的聚集体。
（2）海洋雪的形成①黏多糖形成纤丝②纤丝凝结形成透明结构③透明结构不断碰撞形成更大的颗粒，即海洋雪。
（3）海洋雪的特点①海洋雪的产量随光合作用强度和洋流季节性地波动，春天更大一些。
② 80%的初级生产者分泌黏多糖③海洋雪的沉降速率是16-25m/d，沉降过程中颗粒不断增加。
④提供养料给深海生物。
三、海洋生物的特征（1）多样性（2）复杂性（3）特殊性四、陆栖微生物的研究拥有辉煌的历史微生物活性代谢物是药物的丰富源泉：自19世纪60年代首先从微生物中发现了青霉素以来，人们陆续从陆栖微生物中寻找到抗生素类药物、化疗药阿霉素、免疫抑制药环孢霉素A等120多种重要的临床使用药物。
五、陆栖微生物研究陷入了困境（1）陆栖微生物中发现新代谢产物的速率明显降低，重复发现率极高。
（2）传染性病菌对传统抗生素的抗药性正在迅速发展。
目前，约12种重要的病菌已有抗药性，寻找活性物质新源成为当务之急。
海洋细菌的分离与培养制药工程王凯指导教师曲田丽摘要：本文自青岛城阳区海西村海域距离海岸50m处采集海泥和海水样品，采用平板稀释分离方法进行海洋细菌分离，共分离出4种海洋细菌分别为X1、X2、X3、X4。
再以6种病原细菌，6种病原真菌为供试靶标菌进行生物活性测定，结果表明，所分离的海洋细菌X4对番茄早抑病菌抑菌效果最好，最高抑菌率达84.7%。
关键词:海洋细菌；分离；培养；活性测定Isolation and Cultivation the Marine BacteriaPharmaceutical engineering Wang kaiTutor Qu TianliAbstract:The mud and sea water of this experiment was come from the city of Haixi Village of Chengyang Qingdao sea，where away off the coast 50m, then use separation-plate -dilution methodand flat culture isolated four species of bacteria. Then use six bacteria, six fungi as the bacteria tested target for bacteria bioassay. At last the marine bacteria had best effect on Alternaria solani,the inhibitory rate was 84.7%.Key word: Marine bacterium; Separation; Raise; Active determination1 引言1.1农药的研究现状20世纪，人工合成的化学物质已遍及人类生活的各个角落，化学合成药剂成为药物的主流，合成药剂的出现，天然产物药剂被冷落了很多年，但实践证明，化学合成作为发现新药的工具目前存在这很大的局限性，如在新药的研发中筛选物质比较盲目、能源消耗大、药剂毒性大、作用单一、抗菌谱窄以及残留量大和造成环境污染等问题，它们虽然对人类的生活和健康做出了巨大的贡献，但也让人类为此付出了沉重的代价。
与此同时，近年来制药工业新药产出率持续低落。
随着人们对生态农业和环境意识的提高，化学防治的种种弊端已越来越引起人们的关注，同时随着人类发展观－可持续发展以人为本，消费观－注重提高生活质量，医疗保健观-整体上提高自身免疫力的发展变化，特别是伴随绿色革命－回归自然的时代到来，人们对药剂的选择有了重大转变，并已开始认识到充分利用天然物质是最佳选择。
天然产物在新药发现中占有非常重要的地位。
我国农业部农药检定所颁布的《农药登记资料要求》中与生物防治有关的农药种类包括：（1）生物化学农药:主要包括信息素、激素、天然植物生长调节剂和昆虫生长调节剂、酶等；（2）微生物农药:自然界存在的用于防治病、虫、草、鼠害的真菌、细菌、病毒和原生动物或被遗传修饰的微生物制剂；（3）转基因生物农药:指防治《农药管理条例》中所述的有害生物或调节植物抗逆性、抗除草剂的利用外源基因工程技术改变基因组构成的农业生物。
其登记有特殊要求；（4）天敌生物农药:指商品化的除微生物农药以外具有防治《农药管理条例》中所述的有害生物的生物活体。
其中微生物农药是目前发展最为迅速的生物农药之一，在农业生产中得到日趋广泛的重视和推广应用[1]。
1.2海洋微生物在农药中的应用1.2.1海洋微生物的研究进展浩瀚的海洋是地球生命的摇篮，海洋生物有49个门类，至少16万种以上。
海洋生物资源的最大特点在于它能够通过生物个体的繁殖、发育、生长和新老交替，使资源得到更新、补充，具有一定的自我调节能力。
因而有人称它为“再生性资源”或“可补性资源”。
海洋的面积占地球面积的71%。
海洋独特的自然条件:高压、低营养、无光照、局部高温、高盐等,使得海洋微生物具有特殊的代谢途径和遗传背景,从而具有产生特殊结构和功能活性物质的能力[2]。
据研究发现,约27 %的海洋微生物都能产生抗菌活性物质;从海洋真菌分离出的次级代谢产物70 %～80 %具有生物活性。
许多海洋微生物能产生新结构的活性物质。
Koyama 等从一株未鉴定的海洋真菌中得到一种新的二萜: Phomactin H；Robert等从海洋来源的真菌Aspergilla us carneus 的代谢产物中分离到7种活性化合物,其中5种是新化合物(aspergillicins A-E)[3]。
目前,在海洋微生物及其代谢产物中发现了许多特异、新颖、结构多样、陆地微生物很少产生的活性物质,有些物质的结构类型在陆生生物中从未发现过,因此海洋微生物成为又一个具有巨大开发潜力的天然药物宝库。
海洋微生物有产生生物活性物质的巨大潜力，目前已从海洋微生物(包括海洋细菌、海洋细菌和海洋放线菌)中分离到许多海洋生物活性物质，这些物质化学结构丰富多样，许多分子结构新颖独特，是陆地生物所不具有的。
因此，人们对从海洋环境中极其多样性的微生物中开发到新的特效药寄予极大的希望。
对海洋细菌的分离与培养研究，能发现几种具有生物性的农药先导化合物，为后期的农药新品种的研发奠定基础[4]。
海洋生物目前还属于一块新开发的领域，是未来人类获取药物的一个重要来源，海洋细菌作为一个重要分支，其发展潜力巨大。
浩瀚的海洋是地球上生命的摇篮，目前的研究表明，海洋微生物不仅在海洋生态环境和物质循环中具有及其重要的作用，也是各种新型生物活性物质的潜在来源。
海洋微生物的开发，极其关键的一步就是将特定环境里的资源菌株分离出来。
1.2.2进行海洋微生物分离培养研究的意义微生物对抗生素的耐药性是治疗人类细菌性疾病的一大难题。
寻找更为有效的抗生素成为各国研究者的研究热点。
目前，海洋以其独特的生境条件成为新抗生素的重要来源。
国外在上世纪四十年代就开始了对海洋微生物抗菌活性物质的研究，50年前从海洋生物中发现并成功研制了第一个新抗生素—头抱菌素，开创了开发海洋新抗生素的先河。
近几年，由于海洋生物技术的发展，从海洋生物中提取的抗感染活性物质更是层出不穷。
日本学者发现约27%种属的海洋微生物具有产抗菌活性物质的能力；还检测了海洋微生物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白假丝酵母等8种细菌和真菌的抑菌作用，结果发现，海洋中14.1%的细菌、44.0%的防线菌，0.5%的真菌具有不同的抑制作用[5]。
研究海洋微生物的培养与分离不仅可以为人类提供更多更好的物质来源，还可以为人类的医药事业作贡献。
现代化生物技术在海洋微生物多样性研究中的应用，克服了传统分离培养方法的限制。
同时，也应看到，现代生物技术不仅所需费用较高，而且方法本身还存有不足，已有研究表明，纯培养条件下得到的微生物的测序结果与直接对样品检测的结果相差很大。
因此，在对利用现代生物技术所取得的结果进行理论探讨时，应该时刻考虑到方法的代表性和稳定性。
同时，还应对传统的微生物分离培养得到的结果，做出了合理的判断和解释，只有这样，才能寻找更好的分离培养的方法。
近来，我们发现海洋微生物的资源的开发与利用更有助于医药、农药的发展。
资源比陆生生物丰富的多，投资发展海洋微生物科技,可能会产生新的化合物,对药物开发具有重要意义。
陆源天然产物一直以来是人类丰富的药物资源，但随着对陆地资源的深入研究，从中发现新的药物先导化合物已变的越来越困难，而传染性病菌对传统抗生素的抗药性正在迅速发展，特别是新病原菌和新病毒不断出现，因此人们逐渐把注意力转向一个尚未开发的巨大天然资源宝库—海洋，特别是对从海洋微生物中找到新的特效药物寄予极大的希望。
1.3 海洋细菌在农药中的开发和应用目前，已知的大多数生理活性化合物的产生是菌株特异的，故可直接培养分离到的菌株以取得新生理活性化合物。
对新药的开发而言，从海洋细菌中筛选具有活性的菌株是一项重要的前期工作，而对海洋细菌的分离培养就是前期工作的关键。
由海洋细菌代谢物提取的农药，抗菌谱广、毒性低，有极好的防治效果，是一种无公害的农药，具有很大的发展前景。
海洋细菌及其代谢产物中寻找控制病原菌的生物农药成为新农药研究的一个重要方向。
在农药开发研究方面国外科学家取得了不少进展如Capon等从澳大利亚维多利亚西南海岸附近海滩采集到的样本中分离到海洋放线菌MST-MAl90，从其培养液中分离到2个新的芳香酰胺lorneamidesA-B，表现出杀真菌和杀线虫的活性。
同时我国的林永成和周世宁研究组从南海海泥中筛选出拟诺卡菌属的No.110并分离出5种环二肽，具有明显的抑菌能力[6]。
2002年由中国科学院沈阳应用生态所和华北制药集团爱诺有限公司联合开发成为生物农药—宁康霉素。
经室内抑菌试验，结果表明，宁康霉素对供试植物病原菌玉米纹枯病菌、苹果轮纹病菌和灰霉病菌等抑菌效果十分显著，田间试验对番茄灰霉病、黄瓜灰霉病、葡萄灰霉病、苹果轮纹病、梨黑星病、葡萄毛毡病和棉花黄萎病等作物病害生物防治效果突出。
宁康霉素是纯微生物制剂，与化学农药相比，具有无毒高效的优点，属于对环境友好型的绿色新型生物农药，在生态农业中具有广阔的应用前景[7]。
张海龙等采用稻瘟霉活性筛选体系进行菌种筛选，发现海洋细菌Alter nalia sp. 的发酵液对稻瘟霉分生孢子有很强的抑制和诱导变形作用。
对该菌株发酵液中的代谢产物进行活性追踪分离，得到了6个化合物。
近来，越来越多的研究表明许多具有开发前景的海洋生物活性物质并不是由海绵、海藻等动植物自身产生的，而是由与其共生或者腐生的微生物产生的。
海洋细菌作为海洋微生物的一个重要组成部分，其代谢产物的多样性正日益受到重视。
如从海洋链霉菌—鲁特格斯链霉菌鼓浪屿亚种的代谢产物中，不仅发现了新抗生素8510，而且也发现了肌醇胺霉素和春日霉素，过去它们都是由陆栖微生物产生的。
其中春日霉素是一种重要的农用抗生素，抗菌谱广、毒性低，对稻瘟病等有极好的防治效果，是一种无公害的农药[8]。
1.4 海洋细菌的分离与培养目前国内外对来自沿岸、近海区域的样品，最常用的细菌分离方法是将样品采用无菌海水进行一系列的稀释，在吸取一定量某几档稀释度的均液涂布于培养基上分离培养；对远海、深海的样品，特别是深海中，由于异样细菌密度较小，在培养前需将样品中的微生物浓缩到超滤膜上，再将超滤膜进行分离培养[9]。
早期一直认为海洋细菌难以培养和分离鉴别，对其活性物质的研究难有作为，进步缓慢。
近来，海洋细菌研究技术取得重大的，有些是突破性的进展。
主要有两方面：一是培养技术，例如发现采用稀释培养法能使人们得以分离获得海水中大量存在的寡营养细菌，极大的丰富了人们对海洋浮游细菌的认识。
