痰液及下呼吸道分泌物培养简易操作规程
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痰和呼吸道分泌物标本采集规范一、微生物学【概述】痰标本采集方便,无创伤性,临床应用广泛,对病原学诊断具有重要价值。
痰标本的正确采集、处理是临床细菌检验成功的关键,标本采集与处理的规范化是准确、及时向临床提供重要的感染信息的基础。
目前咳痰标本仍是最常用、最简单的采样方法,必须指导或辅助患者深咳痰,及时送检,并通过镜检筛选合格标本。
损伤性采样技术仅在选择病例(抗生素治疗反应不佳;可疑特殊病原体感染,如寄生虫、痰菌阴性肺结核、混合感染或二重感染等)使用。
【操作方法】1、咳痰标本采集要求患者在清晨用药前留取,因为晨痰量多,且含菌量也多。
留取前刷牙,用清水漱口3次,以除去口腔内大部分杂菌,之后用力咳痰。
咳痰较困难者可用3%~5%氯化钠溶液雾化蒸气吸入进行导痰;对咳嗽乏力或昏迷患者,可用普通吸痰管经鼻腔或口腔吸引下呼吸道分泌物;对不能咳痰的婴幼儿或病重患者,如须采集痰标本做结核杆菌培养,可插胃管抽吸胃液标本送检,也可留取12~24h痰液,经漂浮浓集后检查,以提高结核杆菌检出率。
若做细菌或真菌培养,痰液必须盛于无菌容器内送检。
观察痰量应留取24h痰液,必要时在容器内加入少许防腐剂。
2、咽拭子采样上呼吸道感染可通过咽拭子获取标本。
标本采集前数小时内不得用消毒药物漱口或涂抹病灶局部。
用咽拭子采集标本时应小心、认真、准确,避免触及舌、口腔黏膜和唾液,以防污染。
如咽拭子标本发现致病菌,如肺炎链球菌、流感杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等,且数量较多时,提示有该菌所致感染存在。
3、纤维支气管镜抽吸采样以利多卡因做咽喉部局部麻醉后,插入纤维支气管镜(纤支镜),达到肺炎病灶引流支气管内,纤支镜吸引口依次连接标本采集瓶或试管及负压吸引装置,用负压将下呼吸道分泌物经纤支镜吸人标本采集瓶内送检。
气管切开或气管插管患者也可用普通无菌吸痰管直接经人工气道插至大约叶支气管水平,接负压装置将痰液经吸痰管吸入标本采集瓶内。
纤支镜直视下可准确采集病灶部位的分泌物,但插入时纤支镜顶端和内孔常受咽喉部正常菌群污染,所以纤支镜吸引物常规培养结果不能完全代表肺部感染的病原体。
下呼吸道感染细菌学检验操作规范—、相关临床知识临床通常将正常人喉以上部位称之为上呼吸道,上呼吸道定植有大量的正常菌群,而气管以下包括气管、支气管和肺泡称下呼吸道,通常无菌。
下呼吸道感染包括急性气管-支气管炎、慢性支气管炎急性发作、支气管扩张继发感染及肺实质感染(肺炎、肺脓肿)等。
病原体有细菌、病毒、衣原体、支原体、真菌、立克次体和原虫等。
下呼吸道感染患者可有发热、咳嗽和咳痰,痰呈脓性、粘稠或血性,可伴有胸痛、气急,肺部闻及湿罗音、白细胞总数及嗜中性粒细胞比例明显增高,x线检查提示肺部有炎症性浸润或胸腔积液等体症,严重时可导致感染性休克和呼吸衰竭,因此临床诊断一般不难;细菌学检验能明确感染病原,并提供有关抗菌药物对分离菌的抗菌活性等信息,有助于疾病治疗、流行病学调查研究和医院感染的监测。
临床呼吸道标本中常见分离细菌见表1表1呼吸道标本中的常见分离细菌二、标本米集本室必须注意生物安全防护。
(一)采集方法1 •自然咳痰法以晨痰为佳,采集标本前应用清水、冷开水漱口或牙刷清洁口腔和牙齿,有假牙者应取下假牙。
尽可能在用抗菌药物之前采集标本。
用力咳出呼吸道深部的痰,痰液直接吐入无菌、清洁、干燥、不渗漏、不吸水的广口带盖的容器中,标本量应》lml。
标本应尽快送检,不能及时送检的标本,室温保存w 2h o2•支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法均由临床医生按相应操作规程采集,但必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。
3 •小儿取痰法用弯压舌板向后压舌,将拭子伸入咽部,小儿经压舌刺激咳嗽时,可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。
幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方,以诱发咳痰。
(二)标本验收遇有不合格标本,应及时与临床联系,报告不合格标本拒收的具体理由。
下呼吸道标本验收与拒收见表2o三、实验室检查(一)肉眼观察 观察痰液的颜色、粘度、有无血丝和是否呈脓性,如见有颗粒存在,则应注意可能 与放线菌属及奴卡菌属感染有关。
简易吸痰器的使用流程概述简易吸痰器是一种常见的医疗器械,用于清除呼吸道分泌物,帮助呼吸困难或痰液较多的患者顺利呼吸。
本文将介绍简易吸痰器的使用流程,帮助操作人员正确使用吸痰器,确保患者的呼吸畅通。
材料准备在使用简易吸痰器之前,需要准备以下材料: - 简易吸痰器装置 - 吸痰管 - 痰液容器 - 消毒液 - 无菌手套 - 消毒棉球使用步骤1.手部消毒–戴上无菌手套。
–取一块消毒棉球,用消毒液擦拭双手,确保双手彻底消毒。
2.准备吸痰器装置–打开吸痰器包装袋,取出吸痰器装置。
–检查吸痰器装置是否完好无损。
3.连接吸痰管–取出吸痰管,确保吸痰管无损。
–将吸痰管插入吸痰器装置的连接口上。
4.准备痰液容器–取出痰液容器,确保痰液容器干净。
–将痰液容器放置在合适的位置,容器底部留一定空间以放置痰液。
5.开始吸痰–让患者取姿势,一般为坐位或半卧位。
–轻轻握住吸痰器装置,将吸痰管的一端放入患者嘴巴或鼻孔,另一端连接到吸痰器装置上。
–慢慢转动吸痰器装置上的旋钮或按下吸痰器装置上的按钮,吸痰器将会产生负压吸力。
–注意观察痰液的颜色、稠度和量,确保痰液被顺利吸出。
6.清理器械–吸痰完成后,将吸痰管从吸痰器装置上拔出。
–将吸痰管放入痰液容器中,确保吸痰管完全覆盖在痰液中。
–拆开吸痰器装置,取出痰液容器,密封并正确处理。
7.清洁与消毒–将使用过的吸痰器装置和痰液容器进行清洗,使用消毒液进行消毒,确保无菌。
–将清洁消毒后的吸痰器装置和痰液容器存放在干净的地方,以备下次使用。
注意事项•操作人员在操作吸痰器时,应尽量避免与患者的痰液接触,以免交叉感染。
•患者使用吸痰器过程中,应保持呼吸平稳,避免突然咳嗽或吞咽,以免引起异物误吸。
•使用过的吸痰器装置和痰液容器应及时清洁消毒,确保无菌。
以上是简易吸痰器的使用流程,通过正确操作简易吸痰器,可以帮助呼吸困难或痰液较多的患者清除呼吸道分泌物,保证呼吸通畅。
在操作过程中,操作人员应注意手部消毒、器械清洁、消毒等环节,确保操作过程的无菌,以最大限度地保护患者的健康。
新型冠状病毒感染的肺炎患者下呼吸道标本采集操作规程
下呼吸道标本分为三种:痰液、支气管细胞灌洗液、支气管分泌物,主要以痰液为主。
采集方法包括:自行咳痰法、吸引器经口鼻吸痰法、支气管镜下留取标本法。
一、目的:
取患者下呼吸道分泌物做病毒分离,以帮助诊断。
二、评估:
1、评估患者:
(1)双人核对医嘱,打印标签,准备无菌痰杯或一次性痰液收集器。
(2)核对患者,了解患者病情、咳嗽咳痰情况。
(3)向患者解释,取得配合。
2、评估环境:
安静整洁、宽敞明亮、室温适宜、光线充足。
三、操作前准备:
(1)人员准备:防护级别:三级防护(医用防护口罩、一次性帽子、防护服、护目镜、防护面屏、乳胶手套2双、防护靴套)。
(2)物品准备:治疗车上层:无菌痰杯或一次性痰液收集器、温开水、漱口杯、负压吸引装置一套(检查处于备用状态)、一次性吸引器连接管、密封袋2个、75%酒精、纱布数块、快速手消液、必要时备口咽通气道。
痰液常规检查标准操作规程【操作人员】经批准人授权的同志。
【部门主管】【质量控制员】【目的】保证测试结果的准确性。
【适用仪器范围】双目显微镜。
【该SOP变动程序】该标准操作程序的更改,可由任一使用本程序的操作人员提出并报请专业主管及科主任签字后生效。
【应用范围】痰液常规检查的手工操作。
【标本采集】痰液标本收集法因检验目的不同而异,但所用容器须加盖,痰液勿污染容器外(用不吸水容器盛留)。
1.痰液的一般检查应收集新鲜痰,病人起床后刷牙,漱口(用3%H2O2及清水漱3次) 用力咳出器官深部痰液,勿混入唾液及鼻咽分泌物。
2.细胞学检查用上午9-10时深咳的痰液及时送检(清晨第一口痰在呼吸道停留时久,细胞变性结构不清),应尽量送含血的病理性痰液。
3.浓缩法找抗酸杆菌应留24h痰(量不少于5ml),细菌检验应避免口腔、鼻咽分泌物污染。
4.困难者用45摄氏度10%NaCl水溶液雾化吸入,刺激咳痰。
【一般性状检查】正常人一般无痰或仅有少量泡沫痰或粘液样痰。
1.颜色正常参考值:无色或灰白色。
临床意义:(1)黄色提示呼吸道化脓性感染,见于化脓性支气管炎、金黄色葡萄球菌性肺炎、支气管扩张、肺脓肿等;(2)红色或咖啡色因痰中含有血液或血红蛋白,见于肺癌、肺结核、支气管扩张等;(3)绿色痰可见于黄疸、吸收缓慢的大叶性肺炎或肺部铜绿假单胞菌感染;(4)铁锈色多因血红蛋白所致,见于大叶性肺炎或肺坏死等;(5)棕褐色见于慢性充血性心脏病肺淤血、阿米巴肺脓肿;(6)灰黑色因吸入大量煤炭粉尘或长期吸烟所致,见于各种肺尘埃沉着症。
(7)烂桃样或果酱样痰见于肺吸虫病。
2.性状正常参考值:稍粘稠状。
临床意义:(1)浆液脓性肺组织坏死、支气管哮喘、肺脓肿。
(2)粘液性支气管哮喘、大叶性肺炎等。
(3)血性肺结核、肺吸虫、支气管扩张、肺梗塞、肺癌。
(4)脓性肺脓肿、穿透性脓胸、支气管扩张。
3. 肉眼可见的异样物质(1)支气管管型:是由纤维蛋白、粘液等在支气管内塑型而成的白色、灰白色树枝状。
《体位排痰技术》操作规程体位排痰技术是指通过调整患者的体位,利用重力作用帮助患者排除呼吸道分泌物的一种操作方法。
它被广泛应用于呼吸系统疾病的护理中,可以有效地改善患者的呼吸道通畅度,减少呼吸困难的发生。
以下是《体位排痰技术》的操作规程,旨在帮助临床护理人员正确使用该技术,提升患者护理质量。
一、准备工作1.检查患者的呼吸道分泌物:了解患者的病情,包括痰液的性质、黏稠度等,以便选择适当的体位。
2.检查患者体位的限制:了解患者是否有体位限制或禁忌,如颈椎骨折、脑部手术等,以避免对患者造成不适或损伤。
3.消毒准备:洗手并戴上一次性手套。
准备护理床单、盆和护理巾等辅助用具,并进行消毒。
二、操作步骤1.辅助患者排空膀胱:提醒患者排空膀胱,以免排痰过程中因咳嗽而造成尿失禁。
2.协助患者取适当体位:基于患者的病情和身体限制,选择适当的体位。
常用的体位有:半坐位、仰卧位、卧位、矮床位等。
3.调整床位高度:根据患者的具体情况,适当调整床位的高度,以保证患者舒适和护理的方便。
4.托住患者的头部:用一只手托住患者的头部,保持患者的颈部、肩膀和背部的舒适度。
5.让患者深呼吸:鼓励患者深呼吸数次,以增加胸廓的运动和呼吸肌的收缩。
6.胸部敲击:用手指轻轻敲击患者的胸部,从上至下、从前至后,以松散的拳头敲击为宜,来刺激和松动患者的呼吸道分泌物。
7.侧身体位:将患者的身体向一侧倾斜,对于需要排痰的侧肺,将患者的身体向下倾斜,以利于呼吸道分泌物的排出。
8.背部按摩:用手掌轻轻按摩患者的背部,从上至下、从前至后,以促进呼吸道分泌物的松动和流动。
9.轮换体位:根据患者的情况,适时轮换体位,以促进呼吸道分泌物在不同部位的排出。
10.清理呼吸道分泌物:使用组织纸或吸痰器等工具,及时清理患者口腔、鼻腔和咽部的呼吸道分泌物,以保持通畅。
11.观察患者的反应:在操作过程中,密切观察患者的生命体征变化、排痰情况和不适表现,及时做好记录和报告。
三、操作注意事项1.操作前要与患者进行沟通,详细告知操作目的和过程,并征得其同意。
吸痰操作规程及清洁技巧引言:吸痰作为一项护理技术,主要应用于需要排除呼吸道分泌物的病患。
正确操作吸痰过程以及合理清洁工具对于患者的呼吸道健康具有重要意义。
本文将介绍吸痰操作规程以及清洁技巧,帮助护理人员正确、高效地完成吸痰操作。
一、吸痰操作规程1. 确定吸痰操作的适用对象:吸痰操作主要适用于以下病患:- 有明显呼吸困难或咳嗽并伴有痰液积聚的患者;- 感染性疾病患者,特别是喉咙、气管和支气管感染;- 患有肺炎、乙肝肺炎等疾病的患者;- 高龄、弱敏、昏迷状态下的病人。
2. 准备吸痰操作所需的工具和设备:进行吸痰操作前,应准备以下工具和设备:- 吸痰器:可选择手动或电动吸痰器;- 吸痰管:使用一次性吸痰管,确保卫生;- 纱布和生理盐水:用于擦拭和清洁呼吸道;- 无菌手套和口罩:保护护理人员和患者的卫生。
3. 患者准备:在吸痰操作前,需要做好患者准备工作:- 保持患者舒适和安静;- 位置可以如半躺位或坐位,选取患者最适合的姿势;- 让患者口服或注射镇静剂以缓解不适感。
4. 操作流程:下面是吸痰操作的基本流程:- 洗手并戴上无菌手套和口罩;- 清洁吸痰器和吸痰管;- 轻轻将吸痰管插入患者咽喉或气管内,直到遇到阻力或患者出现咳嗽反应;- 吸出痰液,维持负压直到吸尽痰液;- 在每次吸痰后,应用生理盐水清洗管道;- 完成吸痰操作后,将吸痰管和吸痰器进行清洁和消毒。
二、吸痰操作的注意事项1. 遵循无菌操作原则:吸痰操作需要保持无菌状态,避免交叉感染。
操作前请正确洗手并戴上无菌手套和口罩,操作环境也需要清洁,以保证吸痰过程的卫生。
2. 注意操作顺序:在插入吸痰管时,请确认吸痰管的长度以及患者的病情需要,避免不必要的刺激或伤害。
同时,在每次吸痰后,应用生理盐水清洗管道,以维持通畅的呼吸道和避免细菌侵入。
3. 观察患者反应:吸痰操作过程中,应随时关注患者的反应。
如果患者出现不适或明显咳嗽、呼吸困难等症状,应停止吸痰并及时给予处理。
吸痰操作流程口述吸痰是一种常见的护理操作,通常用于呼吸道分泌物较多、患者自主咳痰能力较弱或无法咳出痰液时。
正确的吸痰操作可以有效清除呼吸道分泌物,减少感染的风险,保持呼吸道通畅,提高患者的舒适度。
下面将为您详细介绍吸痰操作的流程及注意事项。
1. 准备工作。
在进行吸痰操作之前,首先要做好准备工作。
包括准备好吸痰器、生理盐水、护理垫、口腔护理用品等。
同时,要确保患者处于适当的体位,通常为半坐位或侧卧位,以利于呼吸道分泌物的排出。
2. 洗手。
在进行吸痰操作之前,护理人员需要进行充分的手部卫生,使用肥皂和流动水洗手,并在手部消毒后再进行吸痰操作,以避免交叉感染。
3. 吸痰器准备。
将吸痰器连接好,确认吸痰器的吸引力适中,不宜过大或过小,以免损伤呼吸道黏膜或无法有效吸出分泌物。
4. 通知患者。
在进行吸痰操作之前,要向患者说明吸痰的目的和过程,取得患者的配合和理解,让患者尽量放松,以利于吸痰操作的顺利进行。
5. 口腔护理。
在进行吸痰操作之前,可以给患者进行口腔护理,包括擦拭口腔、清洁牙齿等,以减少吸痰时细菌的传播。
6. 吸痰操作。
将吸痰管插入患者口腔,通过口腔吸痰或气管插管吸痰的方式进行,注意不要刺激咽部黏膜。
在吸痰的过程中,要控制吸引力,避免过度吸引导致呼吸道黏膜损伤。
吸痰的时间一般不宜过长,以免影响患者的呼吸。
7. 吸痰后的护理。
吸痰结束后,要及时给患者进行口腔护理,包括擦拭口腔、清洁牙齿等。
同时,要观察患者的呼吸情况,确保呼吸通畅。
8. 吸痰器的清洁。
吸痰器使用后,要及时进行清洁消毒,避免细菌的滋生和传播。
总结。
吸痰操作是一项重要的护理技能,正确的吸痰操作可以有效清除呼吸道分泌物,保持呼吸道通畅,减少感染的风险。
在进行吸痰操作时,护理人员需要做好充分的准备工作,与患者进行充分的沟通,掌握正确的吸痰技巧,确保操作的安全和有效。
希望以上内容能够帮助您更好地掌握吸痰操作的流程及注意事项。
简易吸痰器的操纵流程之杨若古兰创作【目的】清除患者呼吸道分泌物,坚持呼吸道通畅.【筹办】1、护士:着装整洁、洗手、戴口罩.2、用物:吸痰盘(内有一次性吸痰包2个、一次性医治碗、生理盐水、听诊器、手电筒、一次性压舌板(包纱布).须要时备开口器、舌钳.)吸引安装一套3、评估:患者病情、痰液地位、黏稠度及能否配合操纵.【操纵流程】1、携用物至床旁,医治盘放于床头桌,吸引安装置于患者床头.2、向患者或家属解释吸痰目的及可能发生的不良反应,并取得患者及家属的配合.3、协助患者头部偏向护士一侧,检查口腔、鼻腔粘膜,取下活动义齿.4、安装吸引器,打开负压开关,将吸引器负压调至0.04-0.06Mpa,试通畅,备用.吸氧的患者加大氧流量.5、打开吸痰包,戴手套,铺医治巾,连接吸痰管,试通畅.6、吸痰:先吸口咽部,再吸口腔;吸双侧鼻咽部至鼻腔.插管深度适宜,零压进、负压出,由深至浅摆布扭转提出,每处吸引终了后,均冲洗吸痰管;每处抽吸很多于3秒钟,冲洗吸痰管并分离,冲洗接头,拔出压脉带备用,关闭小开关.昏迷患者使用压舌板帮忙患者张口.7、擦净口鼻分泌物,检查口、鼻腔粘膜有没有损伤.(吸氧患者酌情调节氧流量)8、观察病情,协助患者取舒适卧位.9、清算用物,洗手,做记录.【留意事项】1、按照无菌操纵准绳,插管动作轻柔、敏捷.2、吸痰前评估患者病情、痰液地位、黏稠度及能否配合操纵;根据动脉血气分析结果、肺部听诊、胸片、病人咳嗽反应等判断是否须要吸痰及痰液潴留的部位.听诊部位:双侧肺尖(锁骨上窝),双侧肺底(腋中线第八肋间).听诊顺序为:右上、左上、左下、右下.3、吸痰指征:听诊双肺有痰鸣音、呼吸机的吸气峰压添加、患者血氧饱和度降低.4、选择合适的吸痰管,成人普通10—12号.小儿吸痰管5—8号,最大10号.5、未行机械通气病人吸痰前后应给予高流量吸氧,行机械通气的病人吸痰时应将呼吸机调至吸痰模式.吸痰时间每次不宜超出15秒,如痰液较多,须要多次吸引,应间隔3-5分钟,患者耐受后再进行.吸痰时将吸痰管末端反折,零压进负压出.6、吸痰过程中要留意观察病情如面色、呼吸情况、有没有特殊不适,心电监护病人同时观察其心率、血氧饱和度、血压等变更,如病人发生紫绀、心率降低等缺氧症状,应立即停止吸痰,加大吸氧流量,通知大夫,给予对症处理.7、观察痰液的性质、色彩、量、气味,如有异常应及时取深部痰液标本检验,为临床用药提供可靠材料.如果患者痰液黏稠,应酌情采纳各种湿化措施,便于痰液吸出.8、神志清醒病人,操纵前做好解释工作取得配合,清除紧张.病情危重、生命体征不波动者,吸痰前应向病人家属告知,须要时签署特殊医治和谈书,同时床边备简易呼吸器、气管插管用物或气管切开包等急救设备.9、若采取鼻塞吸氧,调节氧流量时应先将鼻塞取下,再进行调节.10、吸引的并发症:低氧血症、肺不张、气道损伤、心律失常、颅内压增高、咳嗽和支气管痉挛等,严重者可呼吸、心跳骤停 .。
.痰液及下呼吸道分泌物培养标准操作流程
1 观察标本合格后操作。
一般为晨痰,再留取痰之前刷牙、反复漱口,应从气管深部咳出痰,吐进无菌容器内送检。
涂片白细胞小于10,上皮细胞大于25为不合格痰,相反白细胞大于25,上皮细胞小于10-25为合格痰标本。
2 点燃酒精灯,尽量保证无菌中间。
3 接种环灭菌—待冷却后—取痰液—接种到血平板、中国兰平板(或麦康凯平板上)。
平板划线分离培养:
(1)用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线,在第二三区依次用接种环划线。
(2)每划一区域应将接种环烧灼一次,冷却后再划下一区域,每一区域的划线应接触上一区域的接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。
(3)划线完毕将平板加盖倒置(琼脂平板的底部向上)于35°C培养18-24小时。
4观察菌落特征涂片染色,确定阳性菌、阴性菌、球菌还是杆菌后鉴定种属。
5 做药敏试验-------报告结果。
便培养标准操作流程
1.收取有粘液或脓血、稀水粪便标本。
2.点燃酒精灯,尽量保证无菌中间。
3.接种环灭菌—待冷却后—取粪便—接种到血平板、SS平板、中国兰平板(或麦康凯平板上)。
平板划线分离培养:
(1)用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线,在第二三区依次用接种环划线。
(2)每划一区域应将接种环烧灼一次,冷却后再划下一区域,每一区域的划线应接触上一区域的接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。
(3)划线完毕将平板加盖倒置(琼脂平板的底部向上)于35°C培养。
4培养18-24小时后观察菌落特征涂片染色,确定阳性菌、阴性菌、球菌还是杆菌后鉴定种属。
5 做药敏试验-------报告结果。
尿培养标准操作流程
1 收取晨尿第一泡清洁中段尿。
(把外阴用肥皂清洗一遍,再用清水清洗两遍,待干或用干净布擦干)用导尿管的病号需新换导尿管后取标本
2 点燃酒精灯,尽量保证无菌中间。
3 接种环灭菌—待冷却后将标本混匀,用定量接种环取尿液1ul(大约一接种环)—
接种到血平板,接种环灭菌---待冷后取标本接种到中国兰平板(或麦康凯平板上)。
(抗菌素治疗患者应增加一个10ul接种。
)
4 平板单区划线法:用灭菌接种环在血平板与中国兰(或麦康凯)平板的中间位置
单区划线(这种方法适合菌落计数,假如细菌多不容易分出单个菌落。
)
5划线完毕将平板加盖倒置(琼脂平板的底部向上)于35°C培养18-24小时。
6观察菌落特征涂片染色,确定阳性菌、阴性菌、球菌还是杆菌后鉴定种属。
7 做药敏试验------报告结果。
注:接种1ul尿量者,菌落数乘以10,接种10ul尿量者,菌落数乘以100.即为每ml尿液中所含有的细菌数(CFU/ml),如菌落数生长过多无法计数则报告大于100000 CFU/ml.
分泌物培养标准操作流程
1 在无菌环境下用一次性拭子快速取分泌物或脓液标本。
2 点燃酒精灯,尽量保证无菌中间。
平板划线分离培养:
(1)用拭子将标本涂布在平板第一区域并作数次划线,在第二三区依次用接种环划线。
(2)每划一区域应将接种环烧灼一次,冷却后再划下一区域,每一区域的划线应接触上一区域的接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。
(3划线完毕将平板加盖倒置(琼脂平板的底部向上)于35°C培养18-24小时。
3观察菌落特征涂片染色,确定阳性菌、阴性菌、球菌还是杆菌后鉴定种属。
4 做药敏试验——报告结果。
穿刺液培养标准操作流程
1 收取合格的穿刺液标本。
(咨询下是否按要求取的标本)
2 点燃酒精灯,尽量保证无菌中间。
3 将穿刺液接种到增菌培养液进行培养。
(穿刺液含细菌数量较少,因此,必须做增
菌培养)
4 培养18-24小时候后,用酒精消毒培养液瓶口,用五毫升注射器抽取0.5毫升液体打入血平板、巧克力平板(CO2环境中以分离嗜血杆菌)中国兰平板(或麦康凯平板上)
接种环灭菌—待冷却后。
平板划线分离培养:
(1)用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线,在第二三区依次用接种环划线。
(2)每划一区域应将接种环烧灼一次,冷却后再划下一区域,每一区域的划线应接触上一区域的接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。
(3)划线完毕将平板加盖倒置(琼脂平板的底部向上)于35°C培养18-24小时。
5观察菌落特征涂片染色,确定阳性菌、阴性菌、球菌还是杆菌后鉴定种属。
6 做药敏试验-------报告结果。
注:标本经增菌转种平板后,经35°C24-48小时孵育后,如无细菌生长,平板还应继续孵育至第3天.如怀疑有奴卡菌,平板应持续孵育7天证实无菌生长,才能报告阴性.
血培养标准操作流程
1 用严格无菌技术静脉采血法采集2套外周血,作培养标本。
2 检查培养瓶确保它们被安全放臵,检查瓶子上的标签确认与申请单上的患者资料是否一致。
3 保证获得适量的血液.小孩最少3ML,大人最少5ML,正常应该是10ML。
4 放入35°c孵育7天。
5 孵育至3天后和5天后分别用酒精消毒培养液瓶口,用五毫升注射器抽取0.5毫升液体打入血平板、巧克力平板(CO2环境中以分离嗜血杆菌)中国兰平板(或麦康凯平板上)
接种环灭菌—待冷却后。
平板划线分离培养:
(1)用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线,在第二三区依次用接种环划线。
(2)每划一区域应将接种环烧灼一次,冷却后再划下一区域,每一区域的划线应接触上一区域的接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。
(3)划线完毕将平板加盖倒臵(琼脂平板的底部向上)于35°C培养18-24小时6 培养瓶继续孵育至第七天,每日早晨取出检查有无生长,并摇均培养液续孵。
下列几种情况提示细菌生长。
(1)均匀浑浊,发酵葡萄糖产生气泡。
(2)微浑浊有绿色变化。
(3)血球上面出现颗粒状或絮状沉淀物生长,或自下而上的严重溶血。
(4)浑浊并有胶冻状凝固,瓶壁有颗粒黏附。
(5)表面有菌膜、菌环状生长,下呈浑浊。
7 肉眼见有细菌生长做如下处理:
(1)取生长物涂片,做革兰染色。
(2)取生长物做药敏试验(直接试验)。
(3)取生长物做相应的生化鉴定。
(4)取生长物移种血平板、巧克力和中国兰(或麦康凯)等平板进行分离以获得纯培养。
8 革兰氏染色所见结果应及时报告临床医师。
9根据革兰染色的结果,以培养瓶内培养液为菌液,做直接法药物敏感性测定,争
取在较短时间内得出初步结果,供临床医师作为治疗的参考。
标本经平板分离纯
培养后须重复做鉴定及药敏试验,以验证用增菌液直接试验结果的可靠性。
10 无细菌生长表现的培养瓶,在观察的7天中,最少2次盲目转种。
需养培养瓶
用血琼脂平板、中国兰(或麦康凯)及巧克力平板(二氧化碳环境),分别于增菌
培养第3日和第5日各作一次盲目分离培养;培养48小时后观察结果,7天仍未
见生长-------报告阴性。
各种标本培养采样时的注意事项:采样时必须按采样要求操作,并且须在使用
抗菌素前进行,并及时送检。
结果判断时必须注意区别病原菌和正常菌群。
正常无
菌部位培养出细菌有临床意义。
有正常菌群存在的部位,培养出细菌须区分是否为
正常菌群并结合临床情况判断。
革兰氏染色标准操作流程
1 取干燥、标本薄而均匀的涂片。
2 加龙胆紫染色10秒,之后水洗,甩干。
3 加碘溶液染色10秒,之后水洗,甩干。
4加脱色液脱色(10-20)秒,之后水洗,甩干。
5 最后加沙皇溶液复染10秒,之后水洗。
6 以滤纸吸干或在空气中干后,镜检
7 报告结果(革兰氏阳性菌呈紫色;革兰氏阴性菌呈红色。
)
抗酸染色标准操作流程
1取干燥标本薄而均匀的涂片。
2涂片自然干燥后,放置染色架上,玻片间距保持10mm以上的距离;火焰固定(在5秒内将玻片置于火焰上烤4次)
3滴加石碳酸复红溶液盖满玻片,染色10分钟或更久。
(不需加温步骤)
4流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去染色液,沥去标本上剩余的水。
5自痰膜上端外缘滴加酸性酒精溶液盖满玻片,脱色(1-2)分钟;如有必要,需流水洗去酸性酒精溶液后,再次脱色至痰膜无可视红色为止
6流水自玻片一端轻缓冲洗10-20秒冲去酸性酒精溶液,沥去玻片上剩余的水。
7滴加亚甲基蓝溶液,染色30秒钟。
8流水自玻片一端轻缓冲洗,冲去亚甲蓝溶液,然后沥去标本上剩余的水,待玻片干燥后镜检。
9 一张染色合格的玻片,痰膜肉眼观察为亮蓝色,无红色斑块。
10报告结果(在淡蓝色背景下,抗酸性菌(结核菌)呈红色,其他细菌及细胞呈蓝色。
)。