柞蚕蛹蛋白的提取及SDS_PAGE分析
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双向电泳法在家蚕蛋白质分离中的应用家蚕(Bombyxmori)是蚕类动物,是家养和蚕桑人类居住地区诸多蚕类中最重要的家畜,因其十分多样的蛋白质,被广泛用于分离及分析研究,如比较微生物的蛋白质组成和药物研究。
双向电泳法(SDS-PAGE)是一种用于分离家蚕蛋白质的广泛应用的方法。
它可以分离家蚕的多种蛋白质,以精确的分子量为结果,以其灵活的分离能力为科学家们提供研究机会。
原理双向电泳法(SDS-PAGE)是一种流动态电泳法(IEF),它可以分离不同大小的蛋白质。
它主要是利用电流来分离,譬如蛋白质悬浮液或者凝胶中的物质可以被电流所吸引,并被向前或向后推进,最终形成各个分离峰,从而实现按不同分子量进行电泳分离。
家蚕蛋白质的电泳分离可以通过添加一种叫做聚脂酰胺的表面活性剂。
聚脂酰胺可以在原有的和电流的作用下,使蛋白质在家蚕蛋白质电泳分离过程中变得更加稳定,从而提高分离的效率。
过程家蚕蛋白质的双向电泳分离一般以室温下进行。
蛋白质悬浮液或凝胶放入电泳室,连接电极,然后开启电源,开启正负电流,使每个组分移动不同的方向,这样便能有效地进行分离,最后得到家蚕蛋白质的分离曲线。
家蚕蛋白质电泳后,蛋白带的形态可以通过遗传自动染色法来确定,并利用紫外分光光度计来检测它们的浓度。
在染色过程中,可以将家蚕蛋白带的形态和分子量相匹配,从而确定它们的分子量。
优势双向电泳法(SDS-PAGE)利用它的灵活性,可以分离出家蚕蛋白质的多种组分,精确的分子量,并根据它们的浓度、形态及分子量进行精确分离。
它具有高灵敏度,分离过程快捷,可以进行大量分离,节省时间,实验简便,操作安全,分离的结果准确。
它的分离能力与其他传统的分离方法相比具有明显的优势,可以更好地满足实验室的日常需求。
缺点家蚕蛋白质电泳分离中,双向电泳法(SDS-PAGE)不是完美的。
它只能分离出家蚕蛋白质的一部分,并不能分离出所有种类的蛋白质,可能会遗漏一些重要的分子,还可能会出现分离的结果不准确的情况,因此使用双向电泳法进行分离时,需要进行大量的核酸和蛋白质分析,以更准确的分析出家蚕蛋白质的组成成分。
柞蚕雌蛾粘液腺内容物中56kD蛋白的初步分离与纯化孙辉;刘朝良【摘要】[目的]为下一步阐明柞蚕粘液腺内容物中56 kD蛋白的功能提供参考.[方法]利用SDS-PAGE,分离柞蚕粘液腺内容物中56kD蛋白,并对其进行初步纯化.采用蛋白印迹法,将其成功转移至PVDF膜,检测其转移效果.[结果]通过对56 kD蛋白的分离和初步纯化,得到单一的蛋白质谱带.经电泳转移后的凝胶和PVDF膜染色结果表明,凝胶中未见蛋白谱带出现,而PVDF膜上的目的蛋白谱带清晰可见,表明56 kD蛋白质已经完全转移至膜上.[结论]该研究为目的蛋白的进一步纯化和氨基酸序列分析奠定了基础.%[Objective]The study aimed to provide reference for further study on the function of 56kD protein in the content of colleteral gland of Antherea pernyi.[Method]Using SDS-PAGE,56kD protein was separated from the contents of A.pernyi and it was purified ing Western blot, it was successfully transferred to a PVDF membrane to detect its transfer effect.[Result]Through the separation and preliminary purification of 56kd protein,single protein band was obtained.The PVDF film staining results of the transferred gel after electrophoresis showed that the protein band was not found in the gel,but the target protein band was clearly seen on PVDF film,which indicated that 56kD was completely transferred to the film. [Conclusion]The research laid thd foundation for further purification and amino acid sequence analysis of target protein.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2011(039)023【总页数】2页(P14156-14157)【关键词】柞蚕;粘液腺;56 kD蛋白【作者】孙辉;刘朝良【作者单位】安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥230036;安徽农业大学生命科学学院,安徽合肥230036【正文语种】中文【中图分类】Sl32蚕蛾的粘液腺是蚕雌成虫体内部生殖器官的附属腺,粘液腺分泌的胶着物质涂布在卵的表面,使卵产下后附着在产卵材料上,为幼虫孵化提供最适宜的环境条件。
4种方法制备蝉蛹蛋白质效果的比较张巳轩;徐芊芊;孙长婷;张倩;任晶晶;湛孝东;李朝品【摘要】目的:比较4种方法提取蝉蛹蛋白质效果的差异.方法:以蝉蛹为原料,通过控制变量法进行预实验,筛选出碱提取法、盐提取法、酶提取法以及水提取法这4种方法在不同测试因素下蛋白质收率最高的实验条件,并以该条件作为各个方法的最优条件,利用最优条件提取蝉蛹蛋白质并测定蛋白质含量.结果:蛋白质收率为碱提取法41.62%、盐提取法6.77%、酶提取法73.02%、水提取法69.35%.结论:酶提取法收率最高,其次是水提取法、碱提取法,盐提取法收率最低.【期刊名称】《皖南医学院学报》【年(卷),期】2018(037)006【总页数】4页(P598-601)【关键词】蝉蛹;蛋白质;提取;制备【作者】张巳轩;徐芊芊;孙长婷;张倩;任晶晶;湛孝东;李朝品【作者单位】皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖241002;皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖 241002;皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖 241002;皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖 241002;皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖 241002;皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖 241002;皖南医学院医学寄生虫学教研室,安徽芜湖241002;皖南医学院活性生物大分子研究安徽省重点实验室,安徽芜湖 241002;皖南医学院医学寄生虫学教研室,安徽芜湖 241002【正文语种】中文【中图分类】R282.74蝉蛹(Cicada pupa)又称知了猴、蝉猴、蝉龟,多生活在热带、亚热带和温带区域,属于节肢动物门昆虫纲半翅目蛹科,是蝉不完全变态发育(卵、幼虫、成虫)过程中的幼虫阶段。
蝉蛹是集医学价值与营养价值于一身的一种昆虫资源,蝉蛹含有具有药理活性的物质,可以提高人体免疫力,延缓机体衰老,蝉蛹蜕下的壳富含甲壳素、异黄质蝶呤、赤蝶呤、腺苷三磷酸酶,入药常用于治疗外感风热、咽喉肿痛等症[1];蝉蛹含有丰富的蛋白质和多种氨基酸[2],是一种高营养价值的食品资源。
木本植物蛋白提取和SDS -PAGE 分析方法的比较和优化①1谷瑞升 2刘群录 2陈雪梅 2蒋湘宁②1(中国科学院植物研究所 北京 100093)2(北京林业大学森林生物实验中心 北京 100083)摘要 在几种木本植物上对4种常用蛋白提取方法、4种凝胶染色和脱色方法及影响蛋白定量和SDS -PAGE 电泳的因素进行了比较研究,发现:利用改良丙酮沉降法提取蛋白,不仅提取效率高,而且杂质干扰少,得到的电泳结果,蛋白条带清晰,数量多;将常规凝胶染色和脱色液中的乙醇改用为甲醇可大大改善染色和脱色效果,获得了没有背景或背景很浅的电泳结果。
通过研究确定了一套优化的适用于木本植物的蛋白提取、定量、凝胶制备、电泳、染色、脱色以及干胶制备的方法。
利用这一优化方法对胡杨细胞盐胁迫蛋白进行了研究,发现了与高水平盐胁迫有关的66kD 蛋白和与盐胁迫和干旱胁迫均有关的28kD 蛋白,获得了满意的蛋白SDS -PAGE 分析结果。
关键词 木本植物,蛋白提取,十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳COMPARIS ON AND OPTIMIZATION OF THE METHODSON PROTEIN EXTRACTION AND SDS -PAGE IN W OODY PLANTS1GU Rui -Sheng 2LIU Qun -Lu 2C HE N Xue -Mei 2JI ANG Xiang -Ning1(Institute of Botany ,The Chines e Ac ademy of Scie nce s ,Beijing 100093)2(Expe rimentalC ente r of Fores t Bi ol ogy ,Beijing Fore st Unive rsit y ,Beijing 100083)A bstract The methods of pr otein extraction and SDS -PAGE were compared and optimized in woody plants .The impr oved steps included modified protein extraction ,substitution of ethanol for methanol in the solution of staining and destaining .Satisfied results were achieved in the application of the optimized method to the protein analysis of several woody plants .66kD protein band related to salt stress and 28kD protein band associated with osmotic stress were obviously showed out in the analy -sis for the suspensivly cultured cells stressed with NaCl of Populus euphratica .Key words Woody plants ,Protein extraction ,SDS -PAGESDS -PAGE (十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳)是分析生物体蛋白质常用的方法,其技术多采用Laemmli (1970)分析细菌蛋白的方法。
要意义。
4栽培要点4.1抗青283×抗青10杂交组合具有发芽早,发条数多,生势旺,叶形大,叶肉厚,产量高,叶质优,抗青枯病能力强等优良性状,适宜在肥水较好、排灌方便的环境条件下栽植,注意氮磷钾搭配,施足造桑造肥,多施有机肥,才能更好地发挥其丰产性能,西对于那些低洼易积水、阳光不足的土地则不宜种植。
4.2要做到深沟厚肥,成苗大小分级栽植,分类管理,每667m2种植5000 ̄7000株为宜。
4.3本杂交组合对蓟马、桑粉虱、浮尘子、叶螨等刺吸式昆虫的抵抗能力较弱,要经常观察虫情及时喷药除虫。
4.4该杂交组合的收获与剪枝型式一般宜冬根刈,翌年头二造采叶片,第三造后剪留60cm促进其多发壮枝,形成空中密植。
为增强树势提高桑叶产量,在做好冬耕肥培管理的基础上,施足造桑造肥,满足桑树夏秋季节旺盛生长。
抗青283×抗青10杂交组合是中抗水平的桑树抗青枯病品种,所以在严重病区桑叶的收获型式上,万万不可认为它是抗病品种,在高温季节进行造造降枝。
如造造降枝,桑树伤流过多,营养物质消耗过大,根毛枯死,削弱树势,病菌乘虚侵害。
因此,本品种桑叶的收获必须做到合理采伐,第四造以后每次收获应在上次刀位处贴剪。
家蚕蛹到蛾期蛋白SDS-PAGE电泳观察王叶元秦获刘京倪惠波林健荣钟杨生(华南农业大学蚕丝科学系,广州510642)摘要蛹到蛾期蛋白SDS-PAGE电泳约有17条左右的蛋白带,蛋白组分有一定变化。
主要观察到:1)分子量约为220kD的蛋白带在化蛹第2天出现,并随着蛹期发育至羽化,其浓度不断的增加。
2)分子量约为70kD的蛋白带,化蛹第1天是一条带,第2天至羽化其蛋白组分有变化。
3)分子量约为29kD的蛋白带随着蛹期发育到羽化,浓度逐渐减弱。
关键词蚕蛹;蚕蛾;蛋白质项目资助:华南农业大学校长基金(2006K003),科技部农业科技成果转化基金(04EFN214400226),广东省科技厅项目(2005B40101012)。
第1篇实验名称:总蛋白提取实验实验日期:XXXX年XX月XX日实验地点:实验室一、实验目的1. 掌握总蛋白提取的基本原理和操作方法。
2. 学习并掌握不同组织蛋白提取方法的优缺点。
3. 提高实验操作技能,培养严谨的实验态度。
二、实验原理蛋白质是生物体的重要组成部分,具有多种生物学功能。
总蛋白提取是指从生物样本中提取所有蛋白质的过程。
本实验采用组织匀浆法提取总蛋白,通过加入适量的裂解液,使细胞破裂,释放出蛋白质。
三、实验材料1. 实验动物:小白鼠2. 主要试剂:裂解液、蛋白酶抑制剂、SDS-PAGE凝胶制备试剂盒、考马斯亮蓝G-250染料等3. 主要仪器:组织匀浆器、离心机、电泳仪、凝胶成像系统等四、实验方法1. 组织匀浆:取小白鼠肝脏,称重后加入适量的裂解液,使用组织匀浆器进行匀浆处理。
2. 裂解:将匀浆后的组织裂解液在冰浴中放置30分钟,使蛋白质充分释放。
3. 离心:将裂解液在4℃、12000r/min条件下离心10分钟,收集上清液即为总蛋白提取液。
4. 蛋白质定量:采用考马斯亮蓝G-250法对总蛋白提取液进行定量。
5. 电泳:将定量后的总蛋白提取液进行SDS-PAGE电泳,分析蛋白质的分离情况。
五、实验结果与分析1. 蛋白质提取:通过组织匀浆法和裂解液处理,成功提取了小白鼠肝脏的总蛋白。
2. 蛋白质定量:采用考马斯亮蓝G-250法对总蛋白提取液进行定量,结果显示提取的总蛋白浓度较高。
3. 电泳分析:通过SDS-PAGE电泳,观察到总蛋白提取液中含有多种蛋白质,表明实验成功提取了肝脏的总蛋白。
六、实验讨论与心得1. 实验过程中,组织匀浆和裂解是蛋白质提取的关键步骤。
匀浆程度和裂解时间对蛋白质提取效果有重要影响,需根据实验材料和条件进行调整。
2. 蛋白质定量是评价蛋白质提取效果的重要指标。
本实验采用考马斯亮蓝G-250法进行定量,该方法操作简便、灵敏度高,适用于蛋白质浓度的大致测定。
3. SDS-PAGE电泳是一种常用的蛋白质分离技术,可以观察到蛋白质的分离情况,为后续蛋白质分析提供依据。
食品工业科技S cience and Technology of Food Industry研究与探讨2008年第07期150 柞蚕蛹蛋白的提取及S DS -P AGE 分析苗 君1,董 亮1,沙惠琴1,2,李晓军1,赵长新1,3(11大连工业大学生物与食品工程学院,辽宁大连116034;21石家庄珍极酿造集团有限责任公司,河北石家庄051530)摘 要:以柞蚕蛹为原料,采用索式提取法,以石油醚、丙酮和环己烷为溶剂进行脱脂,然后以1%NaOH 和019%NaCl乙醇溶液提取脱脂柞蚕蛹中的碱溶和醇溶蛋白,同时采用S DS-P AGE 凝胶电泳进行分析。
实验发现,碱溶蛋白提取率高于醇溶蛋白。
电泳分析结果为,碱溶蛋白8条带为:178、72、64、62、42、30、28、16k Da;醇溶蛋白7条带为:178、64、62、42、30、28、16k Da 。
关键词:柞蚕蛹,提取方法,蛋白质分析Extracti on and S DS -P AGE determ inati on of p r otein in oak silk wormM IAO Jun 1,DONG L iang 1,S HA Hui -qin1,2,L I Xiao -jun 1,Z HAO Chang -xin1,3(11Dalian Polytechnic University College of B i ol ogy and Food Technol ogy,Dalian 116034,China;21Shijiazhuang Zhenji B re w Gr oup Co 1,L td 1,Shijiazhuang 051530,China )Ab strac t:U s i ng S oxh le t e xtra c tion to d e fa t oa k s ilkw o r m w ith p e tro le um e the r,a c e tone,c yc l ohe xa ne 1The n,the p ro te i n c on te n t of s am p le s w ith 1%N aO H a nd 019%N aC l w e re d e te r m i ne d 1A t la s t,SDS -PAG E w a s us e d to a na lyze fu rthe r m o re 1The s tud y i nd ic a te d a lka li e xtra c te d p ro te in w a s p rio r to e tha no 1In SDS -PAG E,a lka li e xtra c te d p ro te i n s how e d 8b a nd s w e re:178,72,64,62,42,30,28,16kD a;e tha no e xtra c te d p ro te in s how e d 7b a nd s w e re:178,64,62,42,30,28,16kD a 1Ke y wo rd s:oa k s il kw o r m ;m e thod of e xtra c ti on;p ro te i n a na lys is中图分类号:TS20112+1 文献标识码:A 文章编号:1002-0306(2008)07-0150-03收稿日期:2007-11-13 3通讯联系人作者简介:苗君(1983-),男,硕士研究生在读,研究方向:蛋白质纯化。
蚕蛹是缫丝工业的主要副产品,蛋白质是蚕蛹中的主要成分,其含量可占其干重的60%[1]以上,每生产1t 生丝可产近1t 的干蛹[2]。
但绝大部分干蚕蛹被用作饲料蛋白,不仅资源利用率低,而且利用蚕蛹饲养的畜、禽、鱼等的肉质带有蛹腥味,严重影响了产品的质量。
研究发现,蚕蛹蛋白是一种全价蛋白质,所含18种氨基酸组分合理、比例均衡,人体必需氨基酸种类齐全,是一种理想的优质蛋白。
研究同时表明,蚕蛹蛋白粉在生物价值和功效上明显优于大豆蛋白质,易消化吸收,且有促进动物生长作用[3],可以作为营养食品供应婴幼儿及老年人。
鉴于蚕蛹蛋白良好的应用前景,东南亚各国,特别是日本、韩国投入大量资金对其进行研究和开发。
我国作为蚕蛹大国,柞蚕业又是辽宁的优势产业,年产茧量占全国的70%以上,占世界的60%[4]。
但是我国对柞蚕蛹蛋白的研究只停留在摸索提取工艺条件的初级阶段,而对其组成及各组分蛋白的含量尚无报道,因此本文以柞蚕蛹为原料,以S DS-P A GE 凝胶电泳为分析手段,对柞蚕蛹蛋白的组成及其含量进行研究探讨,以其为开发辽宁省柞蚕蛹蛋白资源提供理论依据。
1 材料与方法111 材料与仪器柞蚕蛹 购于丹东市宽甸县;丙酮、环己烷、石油醚(60~90℃)、浓盐酸、无水乙醇 均为分析纯;考马斯亮蓝G250、标准牛血清蛋白质、标准蛋白质maker (低分子量和高分子量) 购于大连宝生物。
索式提取器,电热干燥箱,可见分光光度计,DE LT A320pH 计,垂直板电泳仪,移液器,电子分析天平G B303,恒温水浴锅,粉碎机。
112 实验方法11211 原料预处理 湿柞蚕蛹用稀盐酸浸泡中和,水洗至中性,50℃烘干24h,操作过程参照文献[5]。
11212 柞蚕蛹脱脂 采用索式提取法,分别以石油醚、丙酮和环己烷为溶剂,进行脱脂,操作过程参照文献[6,7]。
11213 碱溶蛋白的提取 用1%的Na OH 进行提取,温度70℃,固液比1∶8(g /mL ),搅拌提取时间6h,pH 为815,抽滤,蛋白质碱溶液搅拌加入2N HCl 溶液,调节pH 至415,操作过程参照文献[5,8,9]。
11214 醇溶蛋白的提取 用019%N aC l 的30%乙醇溶液进行抽提,温度70℃,时间2h,固液比1∶15(g /mL ),搅拌,抽提结束后,过滤,得棕褐色滤液,操作过程参照文献[10]。
11215 S DS-P A GE 凝胶电泳分析柞蚕蛹蛋白成分 研究与探讨食品工业科技V ol.29,N o.07,2008将碱溶蛋白和醇溶蛋白沉淀分别用1%N a OH和30%乙醇重新溶解,分别稀释5、10、20倍,采用B radf ord法[11,12]测其蛋白质含量。
分别在分离胶浓度为12%、浓缩胶浓度为5%和分离胶浓度为8%、浓缩胶浓度为5%的条件下进行电泳实验,每孔上样量为25μL,空泳道上电极缓冲液。
2 结果与分析211 不同溶剂脱脂效果分析表1 3种脱脂剂的性能比较溶剂安全性极性时间(h)脱脂率(%)价格(元/t)环己烷低毒无味非310011000石油醚低毒无味非31007000丙酮低毒有味极2151006800 如表1所示,采用3种有机溶剂,都能达到很好的脱脂效果,只是时间上存在差异,丙酮的脱脂时间最短,但考虑到安全因素,故不采用;而丙酮和石油醚价格相近,环己烷最高。
综合考虑以上因素,采用石油醚为脱脂溶剂。
212 碱法和乙醇法提取蛋白的结果以11213和11214所述实验方法进行实验,每种方法重复3次,实验结果见表2、表3。
表2 碱法的蛋白提取率样品号脱脂蛹粉(g)蛋白粉(g)提取率(%) 120814524212522081342411703208160343100平均208146342132表3 乙醇法的蛋白提取率样品号脱脂蛹粉(g)蛋白粉(g)提取率(%) 120116648132220116898145320117278163平均20116938146 由表2、表3可知,碱法对蛋白的提取率为42132%,醇法对蛋白的提取率为8146%,碱法提取率高于醇法30多个百分点,碱提法时间是乙醇的3倍,而根据陈芳艳[10]等的研究表明,增加乙醇的提取时间能够提高蛋白的提取率,但幅度不大。
213 SD S-PAGE凝胶电泳结果分析21311 碱提蛋白和乙醇提蛋白的比较分析 如图1所示,采用分离胶12%,浓缩胶5%分离得到6条碱溶蛋白带,其分子量分别为72、64、42、30、28、16k D a; 5条醇溶蛋白带,其分子量分别为64、42、30、28、16k Da。
主要差别在72k Da的条带上,碱溶蛋白有这条带,而醇溶蛋白没有。
根据相关文献的研究, 42k Da的条带为卵黄原蛋白(vg)和卵黄磷蛋白(vn)的小亚基,属于卵黄蛋白质的一种;30k Da的蛋白为家蚕的另一种卵黄蛋白质,在30k Da左右表现为4条带, 30k Da和28k Da为卵黄蛋白质;72k Da和64k Da为家蚕的卵特异蛋白(一种糖蛋白)的两个亚基。
研究发现,柞蚕蛹中出现了相应蛋白带,说明其中有卵黄蛋白质、卵特异蛋白、卵黄原蛋白和卵黄磷图1 分离胶12%,浓缩胶5%时的电泳图第5泳道是标准低分子量maker;1~4泳道是碱提蛋白质; 6~9泳道是醇提蛋白;第10泳道是加样品缓冲液的空泳道。
蛋白的亚基,并且碱溶蛋白比醇溶多了一条72k D a 分子量的卵特异蛋白亚基。
如图1所示,采用分离胶12%,浓缩胶5%时, 9712k Da以上的蛋白没有得到分离,因此采用8%的分离胶,5%的浓缩胶,进行重新分离。
如图2所示,采用分离胶8%,浓缩胶5%分离得到4条碱溶蛋白带,其分子量分别为178、72、64、62k Da;4条醇溶蛋白带,其分子量分别为178、64、62、42k Da,其中178k D a的蛋白带为采用分离胶12%,浓缩胶5%电泳时没有分离出的高分子量蛋白。
根据相关文献的研究,该蛋白是和家蚕的180k Da分子量相似的卵黄原蛋白(vg)和卵黄磷蛋白(vn)的大亚基。
图2 分离胶8%,浓缩胶5%时的电泳图第5泳道是标准高分子量maker;1~4泳道是碱溶蛋白质; 6~9泳道是醇提蛋白;第10泳道是加样品缓冲液的空泳道。
研究发现,碱溶蛋白中含有卵黄原蛋白和卵黄磷蛋白的2个亚基,同时有卵特异蛋白的2个亚基;醇溶蛋白中缺少了卵特异蛋白的72k Da分子量的大亚基,只有64k Da的亚基,其它蛋白的亚基相同。
3 结论本文以柞蚕蛹为原料,采用索式提取法,以3种不同溶剂进行脱脂,研究发现:选取石油醚为脱脂溶剂;碱法提取率高于醇法。
碱溶和醇溶蛋白经S D S-P A GE凝胶电泳分析,碱溶蛋白8条带分子量为178、72、64、62、43、30、28、16k D a;醇溶蛋白7条带分子量为178、64、62、42、30、28、16k Da。
分子量为72k D a和64k Da的是卵特异蛋白质经S DS-P A GE分析的两个亚基;分子量为178k Da和42k Da是卵黄原蛋白和卵黄磷蛋白经S DS-P AGE分析的大亚基和小亚基; 30k Da和28k Da是卵黄蛋白质。