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1.目的规范无菌操作流程，减少及避免发生染菌现象出现。
2.使用范围无菌室及洁净区的操作。
3.无菌操作技术原则3.1环境要清洁，在每次无菌操作结束后都需要对环境进行清理、清洗；且避免操作前进行清扫。
3.2做好个人卫生，进入无菌室前需修剪指甲、洗手，穿好无菌服，帽子需遮住所有头发，口罩遮住口鼻。
3.3在无菌操作时，不可讲话，打喷嚏，对怀疑染菌的无菌物品，不可使用。
4.内容4.1.1 准备：工作人员着装整洁，洗手、戴口罩、修剪指甲；备齐用物（如：接种针、接种环、酒精灯、斜面、平皿、摇瓶、75%酒精棉、无菌水等）；核对无菌用品，接种菌种的种类、型号。
4.1.2 所有实验使用的物品都需要进行消毒、灭杀；进入洁净区前需要经传递窗进行紫外表面消毒30min以上；4.1.3 开始实验前需要打开超净台的紫外灯，消毒半个小时以上；超净台避免放入过多的物品（一般只放入当次的实验所有的物品），所使用的试剂和耗材都需事先进行灭菌（灭菌日期超过4天的需重新消毒）。
4.1.4 进入洁净区前关闭紫外灯，并打开风机，等待半个小时以上，使臭氧尽量排放干净。
4.1.5 除去手腕等部位的饰品，穿好无菌服，戴好头套、口罩，做到“三不漏”：不暴漏头发，不暴漏口鼻，不暴漏躯干皮肤和衣物。
4.1.6 双手要进行清洗、消毒。
4.1.7 要经风淋室风淋30秒后再进入洁净室。
4.1.8 在局部百级区域操作要戴一次性无菌手套。
4.1.9 实验操作过程中应尽量减少进入洁净区的人员（不超过4人/间）并尽量减少人员走动。
4.1.10 所有要放入超净工作台的物品都需进过消毒液喷洒擦拭消毒。
4.1.11 无菌物品若取离超净台则视为已污染，不得放回再用；无菌液体在取离超净台前必须密封其开口；密封的无菌液体容器在放入超净台后，对其开口前须对开口在酒精灯火焰上烧烤。
4.1.12 在拆开任何一次性无菌使用耗材的包装时都要在超净台内完成，并须同时保证与细菌直接接触的使用端/面不得与超净台内的任何物品发生触碰。
微生物实验室操作规程1.工作人员加强有菌观念，无菌操作。
2.每日工作前用紫外线照射实验室半小时以上。
3.入室前应穿工作服，并做好实验前的各项准备工作。
4.实验室内应保持肃静，不准吸烟、吃东西及用手触摸面部。
尽量减少室内活动，以免引起风动，无关人员禁入。
5.非必要物品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。
6.做好标本的登记、编号及试验记录。
未发出报告前，请勿丢弃标本。
7.标本处理及各项试验应在操作间进行，接种环用完后应立即火焰灭菌，沾菌吸管、玻片等用后应浸泡在消毒液内。
8.实验时手部污染，应立即用过氧乙酸消毒或浸于 3%来苏儿溶液中 5-10分，再用肥皂洗手并冲洗干净；如误入口内，应立即吐出，并用 1:1000高锰酸钾溶液或 3%双氧水漱口，根据实际情况服用有关药物。
9.实验过程中，如污染了实验台或地面，应用 3%来苏儿覆盖其上半小时，然后清洗；如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。
10.使用后的载玻片、盖片、平皿、试管等用消毒液浸泡，经煮沸后清洗或丢弃。
11.所有微生物培养物，不管标本阳性或阴性均用消毒液浸泡后，经煮沸消毒，才能清洗或丢弃。
12.取材、最好采用一次性工具，不能采用一次性工具者，每次取材前均应彻底消毒。
13.若出现着火情况，应沉着处理，切勿慌张，立即关闭电闸，积极灭火。
易燃物品（如酒精、二甲苯、乙醚和丙酮等）必须远离火源，妥善保存。
14.工作结束时检查电器、酒精灯等是否关闭，观察记录培养箱、冰箱温度及工作情况，用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，并将试剂、用具等放回原处，清理台面，未污染的废弃物扔进污物桶，有菌废弃物应送高压灭菌后处理。
15.离室前工作人员应将双手用消毒液消毒，并用肥皂和清水洗净。
16.爱护仪器设备，遵守仪器使用规范，经常清洁，注意防尘和防潮。
每天观察培养箱、冰箱、干燥箱的温度，并做好记录。
17.发出的微生物报告应认真复审，分析报告、评价报告。
无菌室使用规程1 目的建立无菌室管理使用规程，保证操作者正确使用。
微生物操作规程
《微生物操作规程》
微生物操作是实验室中常见的操作，但由于微生物具有一定的危害性，因此对微生物操作有严格的规程。
以下是对微生物操作规程的一些要点：
1. 穿着适当的防护装备：在进行微生物操作时，实验人员应该穿着适当的防护装备，包括实验服、手套、口罩和护目镜等。
这可以有效预防微生物和其代谢产物对皮肤和呼吸系统造成危害。
2. 操作实验室的卫生消毒：在进行微生物操作前，需要对实验室进行必要的卫生消毒，确保操作环境的清洁与无菌环境。
3. 严格的操作流程：在进行微生物操作时，需要严格按照规程进行操作，避免出现操作失误导致微生物泄漏或污染的情况发生。
4. 正确处理微生物废弃物：在微生物操作结束后，实验人员需要将微生物废弃物进行正确处理，避免对环境和人体造成危害。
5. 定期进行培训和检查：对从事微生物操作的实验人员需要进行定期的培训和检查，以提高其微生物操作的安全性和准确性。
总之，微生物操作规程是保证微生物操作安全的基础，严格遵
守微生物操作规程可以有效预防微生物的危害，并保障实验人员和环境的安全。
微生物实验室清洁消毒操作规程（ISO13485-2016/YYT0287-2017）1.0目的规范微生物实验室清洁与消毒程序，使洁净区环境控制始终符合GMP要求，减少甚至避免因环境不合格导致的假阳性结果的出现。
2.0适用范围适用于微生物实验室清洁与消毒管理。
3.0引用/参考文件ChP2015实用药品微生物检验检测技术指南《工作环境控制程序》《微生物实验室管理规程》4.0职责微生物QC负责执行微生物实验室的清洁与消毒操作，QA实施监督并参与偏差处理。
5.0程序5.1清洁工具丝光毛巾（蓝色用于顶棚及墙面、绿色用于地面、黄色用于仪器设备）、人字梯、不锈钢盆或桶、喷瓶、镊子、吸水拖把、T型架等。
5.2清洁剂洗洁精、纯化水、0.1%氢氧化钠、乙醇。
5.3消毒剂75%乙醇、臭氧、0.1%新洁尔灭（仅用作地漏消毒）、3%双氧水（仅用作地漏消毒）、84消毒液。
5.4清洁原则从上到下，从里往外的原则进行清洁和消毒，即从较干净的地方到较脏的地方，如天花板、灯罩、墙面、设备表面、工作台面、设备侧面、工作台支架、地面。
5.5清洁方法5.5.1顶棚的清洁用不锈钢桶接15L的纯化水，蓝色色的丝光毛巾放入纯化水中浸湿，保证丝光毛巾浸湿均匀，将丝光毛巾包裹在T字架上，T字架的运动方向应是从里往外。
从室内的最远端开始清洁，至通往缓冲间的通道处结束，要保证所有区域天花板都能清洁到位。
在需要时重新清洗丝光毛巾或者更换新毛巾后再使用。
阳性室清洁工具不能和其他房间混用。
5.5.2墙壁（玻璃窗）的清洁蓝色的丝光毛巾放入纯化水中浸湿，保证浸湿均匀，将丝光毛巾包裹在T字架上，T字架的运动方向应是从上到下，不能反方向清洁。
从室内的最远端开始清洁，至通往缓冲间的通道处结束，要保证所有区域墙壁都能清洁到位。
在需要时重新清洁丝光毛巾或者更换新毛巾后再使用。
阳性室清洁工具不能喝其他房间混用。
5.5.3表面的清洁（设备、工作台面、仪器等）黄色的丝光毛巾放入纯化水中浸湿，保证浸湿均匀，机器、设备按照从上到下、从后到前的顺序清洁。
操作标准文件
1. 目的：
对操作人员定期进行微生物检测，使操作人员确实执行清洁规范及个人卫生守则，以避免人为因素污染药品。
2. 范围：
本标准适用于控制区操作人员手部和工作服的微生物检测。
3.职责：
QA洁净度监测人员、QC微生物检验员对本标准的实施负责。
4. 程序：
本检测规程采用直接接触法。
4.1. 器具及培养基；
培养箱、培养皿、营养琼脂培养基。
4.2. 步骤：
4.2.1. 取已灭菌并在50±5℃保温的液态营养琼脂培养基，在层流净化台上倒入已灭菌的培养皿中。
18-20ml/皿。
4.2.2. 打开培养皿上盖，以培养基表面接触测试面轻压2-3秒，盖上盖子。
4.2.3. 以75%酒精擦拭消毒测试面。
4.2.4. 将培养皿放置于30-35℃培养箱中培养48小时。
4.3. 测试面之选择：
4.3.1. 手部：以手掌内侧面为主要测试面。
4.3.2. 工作服：以袖口、肘部、腹部为主要测试面。
4.5. 异常情况处理：
4.5.1. 异常情况：指测试结果超过规定标准，或出现病原菌的情况。
4.5.2. 出现异常情况，立即查找污染源，并进行彻底的清洁消毒。
4.5.3. 对在此期间生产的产品的微生物污染情况进行调查，必要时采取应急措施（收回、C O60照射等）。
4.5.4. 对生产部门进行人员个人卫生及清洁规范的教育和培训。
4.5.5.一个月内再进行测试，直到合格或找出污染源并消除为止。
5. 附：洁净区操作人员微生物检测记录ZL0071 00。
分发部门及份数：质量管理部1份目的：规范微生物实验室管理,确保微生物检验结果的准确性。
范围：适用于微生物实验室。
职责：微生物检测人员及检验室负责人对此规程执行负责.内容：1.微生物实验室包括微生物限度检查室、阳性菌接种室及抗生素微生物检定室。
1.1 微生物实验室结构应坚固、严密、防尘、光线明亮,地面应光滑，并应有缓冲间,设双层传递窗传递物件。
1.2 室内温度18～26℃，相对湿度为45～65％，室内必须保持整洁.2.微生物实验室洁净度要求：2.1微生物实验室洁净度应符合相应的医药洁净室设计规范和验收要求。
2.1.1 操作室洁净度应符合洁净度C级要求。
2。
1。
2 操作台洁净度应符合洁净度A级要求。
3.微生物实验室的使用：3。
1 微生物实验室由微生物检验员管理及使用,其他人员须经主管人员批准后方可进入和使用。
3.2 微生物实验室的人员需经过相关的岗位培训,必要时定期进行再培训。
3。
3 微生物实验室操作人员应严格遵守洁净工作区域净化控制规定。
3.3.1 保持个人卫生，不得佩带饰物，不得涂抹化妆品。
3.3。
2 室内应穿戴专用衣帽、口罩及鞋子。
3.3.3 手部应进行2次消毒,宜带无菌手套.3.3。
4 在操作中，操作台面应垫上消毒布巾，以防操作中有滴落液污染台面。
3.3.5 人员进入微生物限度检查室、阳性对照室或抗生素微生物检定室前，在一更脱外衣、换鞋后，进入一更缓冲间洗手，并消毒后，进入二更自上而下依次换上洁净帽、口罩、洁净服、洁净鞋后，进入二更缓冲间，手经再次用消毒液消毒后方可进入微生物限度检查室或阳性对照室，实验操作前须带上无菌手套。
3.4 微生物实验室使用前应确保操作室的洁净程度。
3.4.1 微生物实验室的清洁分为一般清洁及彻底清洁，其具体的清洁部位、方式方法、频率见下表所示:3。
4。
2 微生物实验室常用消毒剂及其配制3.4。
3 使用前30分钟应先开启操作台及操作室的净化和消毒系统，关闭消毒系统后10～15分钟再进入操作室；操作结束后,开启消毒系统30分钟后再关闭消毒系统和净化系统。
环境微生物检测标准操作规程作业指导书持有部门：院感办文件编号：
制定者：审核者：版次：1 制定日期：审核日期：执行日期：
一、监测目的
1.感染暴发或感染流行时，环境因素在感染传播中有流行病学意义。
2.监测潜在的危险环境状况，证明有危险的病原体存在或证明危险的病原体已被清除。
3.当某项感染控制措施改变时，评估其效果。
4.目标性监测的需要。
5.询证医学证据支持。
二、空气培养（沉降法）
1.采样时间：Ⅰ类环境在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境在消毒或规定的通风换气后与从事医疗活动前采样。
2.采样高度：距地面垂直高度
80-150cm。
3.采样点设定：
（1）Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类环境：室内面
积≤30m2，在对角线上设里、中、外3点，里、外两点位置各距。
微生物检验无菌室洁净标准及其操作规程无菌室(洁净室)是微生物检验室的核心。
无菌室普通是在微生物试验室内开拓的一个自立小房间。
无菌室的规划设计、建设要符合《洁净室施工及验收规范》(GB50591-2010)的要求。
(一)无菌室洁净标准无菌操作间洁净度应达到10000级，超净工作负清净度应达到100级，室内温度维持在18～27℃，湿度保持在30%～70%。
详细要求见表4-3。
表4-3 无菌室(洁净室)空气洁净度级别注：1.浮游菌m3和沉降菌/皿可任测一种。
2.100级洁净室(区)0.8m高工作区的截面最低风速：垂直单向流0.25m/s，水平单向流0.35m/s。
(二)无菌室操作规程 (1)无菌室应保持清洁，严禁堆放杂物，以防污染。
(2)无菌室应定期用相宜的消毒液灭菌清洁，以保证洁净度符合要求。
按照无菌室的净化状况和空气中含有的杂菌种类，可采纳不同的消毒剂，如、、、3%气溶胶喷雾(20mL/m3)、(配成1%浓度喷洒)、5%气溶胶喷雾(2.5mL/m2)等。
(3)工作人员进入无菌室前，必需用肥皂或消毒液洗手消毒，然后在缓冲间更换专用工作服、鞋、帽子、口罩和手套。
(4)无菌室用法前，应将全部物品置于操作部位(待检物除外)，然后打开紫外灯杀菌30min以上，并同时打开超净工作台举行吹风。
操作完毕，应准时清理无菌室，再打开紫外灯灭菌20min。
(5)凡带有活菌的物品，必需经高压灭菌后才干清洗或丢弃。
(6)每2～3周用3%石炭酸水溶液擦拭工作台、门、窗、桌椅及地面。
(7)无菌室应每月检查菌落数。
在超净工作台开启的状态下，取内径90mm的养分琼脂平板3～5个，分离放置在工作位置的左、中、右等处，开盖裸露30min后，倒置于30～35℃培养箱内培养48h，取出检查。
100级洁净室平板杂菌数平均不得超过1个菌落，10000级洁净室平板杂菌数平均不得超过3个菌落。
如超过限度，应对无菌室举行彻底消毒，直至重复检查合乎要求为止。
洁净室（无菌室）的使用和管理方案洁净室（无菌室）是微生物检测的重要场所与最基本的设施。
它是微生物检测质量保证的重要物质基础。
因此它的设计要按国家标准《洁净厂房设计规范》、国家药品监督管理局颁发的《药品检验所实验室质量管理规范（试行）》中第十八条规定执行。
微生物实验室洁净室的施工、安装、验收应按国家行业标准《洁净室的施工及验收规范》执行。
对于微生物检测工作者和使用管理者来讲，更大量的工作是进行正常管理到日常的使用。
洁净室（无菌室）的标准要符合GMP洁净度标准要求。
洁净室（无菌室）的使用管理要做到以下工作：一、洁净室（无菌室）要符合规范要求根据空气洁净度的不同，无菌室可分为哪几个级别一般情况下，无菌室的等级有百级，千级，万级，十万级，百万级等等。
净化等级一般分为100级、1000级、10000级、100000级，现在2010年版的GMP净化车间已经不用这个叫法了，分为A B C D级别，分别相对应于98版的几个级别，通过检测区域内的尘埃粒子数、浮游菌数、沉降均数评价净化级别，各个级别有不同的要求，净化等级分静态、动态两种。
无菌室应采光良好、避免潮湿、远离厕所及污染区。
面积一般不超过10m2，不小于5m2；高度不超过 2.4m。
由1—2个缓冲间、操作间组成（操作间和缓冲间的门不应直对），操作间和缓冲间之间应具备灭菌功能的样品传递箱。
在缓冲间内应有洗手盆、毛巾、无菌衣裤放置架及挂钩、拖鞋等，不应放置培养箱和其他杂物；无菌室内应六面光滑平整，能耐受清洗消毒。
墙壁与地面、天花板连接处应呈凹弧形，无缝隙，不留死角。
操作间内不应安装下水道。
无菌操作室应具有空气除菌过滤的单向流空气装置，操作区洁净度100级或放置同等级别的超净工作台，室内温度控制18—26℃，相对湿度45%—65%。
缓冲间及操作室内均应设置能达到空气消毒效果的紫外灯或其他适宜的消毒装置，空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差应大于5P a，洁净室（区）与室外大气的静压差大于10P a。
