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毕业论文《选题报告》院（系）：生命科学学院九江学院JIU JIANG UNIVERSITY毕业论文题目红薯叶提取物及总黄酮抗氧化活性研究英文题目Stem and leaf extract of sweet potatostems and total antioxidant activityof flavonoids院系生命科学学院专业生物科学姓名张学涛年级08级生物科学指导教师严晓华（教授）二零零九年四月红薯叶提取物及总黄酮抗氧化活性研究摘要本文研究红薯叶提取物及总黄酮的抗氧化活性。
比较测定了红薯梗、茎、叶提取物的抗氧化活性, 用分光光度法测定了它们的总黄酮含量, 并比较了两者的相关性。
关键词:红薯;总黄酮;抗氧化性AbstractThis paper stems and leaves of sweet potato extract stem and total antioxidant activity of flavonoids. Comparison of sweet potato were determined by stalk, stem and leaf extract of the antioxidant activity was determined by spectrophotometry of total flavonoids of their content, and compared the correlation between the two.Key words: sweet potato;Total flavonoids; Antioxidant目录摘要Abstract1引言1.1 红薯的特性及药用价值1.2 红薯梗茎叶提取物的抗氧化性1.3 黄酮的介绍2 试验材料与方法2.1 材料与试剂2.2 仪器设备2.3 主要试剂与配制2.4试验方法3 结果与分析4方法结论5参考文献6致谢1．引言1.1 红薯的特性及药用价值随着我国人口向老龄化发展, 心血管疾病等成人病防治和抗衰老的研究已不仅是医学家和生物学家所涉的课题, 也成为食品学家乃至全社会所关心的问题。
红薯茎叶多糖和黄酮提取物的抗菌及降血糖功能研究红薯又名甘薯、白薯，通常以产块根或茎叶为主。
我国每年480亿千克红薯叶、50亿千克红薯藤尖和470亿千克红薯藤，除部分地区作为饲料外，多数被抛弃掉，造成资源浪费和环境污染。
目前，对红薯茎叶的研究及利用还不多见，本文从开发利用这一丰富的资源出发，研究由大面积栽培的品种“徐薯18”红薯茎叶中获得的红薯茎叶多糖和黄酮提取物的抑菌及降血糖作用。
研究结果如下：1．红薯茎叶多糖和黄酮提取物抑菌作用的研究以苯甲酸钠和丙酸钙为对照进行抑菌实验，与对照相比黄酮提取物对细菌的抑制作用较强，而多糖提取物对细菌的抑制作用较弱。
多糖和黄酮提取物对大肠杆菌的最低抑菌浓度（Minimal Inhibition Concentration, MIC）分别为11.25mg/mL、5.25mg/mL，对金黄色葡萄球菌的MIC 分别为9.25mg/mL、3.25mg/mL，对志贺杆菌的MIC分别为8.75mg/mL、3.25mg/mL，对根霉的MIC分别为150.00mg/mL、27.50mg/mL，对黑曲霉的MIC分别为325.00mg/mL、50.00mg/mL。
培养基pH对多糖和黄酮提取物抑菌作用有显著影响，培养基pH较低时抑菌效果较好；溶液pH对多糖和黄酮提取物抑菌作用影响较小，中性或偏酸性更利于发挥对细菌的抑制作用；处理温度对多糖和黄酮提取物抑菌作用影响不大。
2．红薯茎叶多糖和黄酮提取物降血糖作用的研究多糖和黄酮提取物对正常小鼠的空腹血糖、胰岛素、肝糖原和糖耐量无明显影响。
多糖和黄酮提取物能显著和极显著降低四氧嘧啶所致糖尿病小鼠空腹血糖的升高，而对糖尿病小鼠血清胰岛素水平无影响；多糖和黄酮提取物能够极显著和显著提高糖尿病小鼠肝糖原含量；多糖和黄酮提取物能极显著提高糖尿病小鼠的血清SOD水平，能显著和极其显著降低血清MDA水平；多糖和黄酮提取物能极其显著地改善糖尿病小鼠的糖耐量，但与正常组相比仍存在极显著差异。
甘薯叶中黄酮类化合物的提取工艺研究
1 甘薯叶的性质
甘薯叶，是一种植物特有的叶片，含有丰富的黄酮类化合物。
它们主要含有类胡萝卜素、黄酮、多糖等成分，还有丰富的维生素，微量元素及脂肪、木质素等物质。
它具有抗氧化、抗菌、抗病毒、降血糖及抗疲劳等活性，是一种支撑人类健康的物质。
2 黄酮类化合物的提取工艺
黄酮是一种非常重要的天然活性成分，在医药、食品等行业中都有广泛应用。
由于其生物活性和抗氧化作用，在医学和保健领域具有很高的价值。
因此，提取甘薯叶中黄酮类化合物非常重要。
目前，提取甘薯叶中黄酮类化合物的研究工艺主要有超临界流体提取法、水萃取法、熬制萃取法、抽提法等，其中采用超临界流体提取法比较适用于提取活性较强的黄酮类化合物。
在此基础上，为了获得更高的黄酮类化合物提取率，可以对超临界流体提取的条件加以优化，例如温度、压力、添加剂等。
此外，也可以采用其他提取工艺来优化黄酮类化合物的提取。
3 结论
提取甘薯叶中黄酮类化合物的工艺研究具有重要意义。
现代科学技术及技术工艺应用可以提高提取甘薯叶中黄酮类化合物的效率，使得对黄酮类化合物的研究及应用有更好的发展以支持健康。
红薯叶总黄酮的提取工艺优化及其抑菌、抗氧化活性研究文章编号：1006-1126-2018（3）-0311-05摘要：以红薯叶提取物中总黄酮含量（以芦丁标准品为对照）为评价标准，利用单因素试验，着重考察提取时间（A ）、提取料液比（B ）、乙醇浓度（C ）对红薯叶黄酮提取效果的影响，选用L 9（34）正交试验设计，优化红薯叶总黄酮的提取工艺，得到最佳工艺条件：60%乙醇溶液，料液比为1∶40（m/V ），回流1.5h ，总黄酮提取率平均可达8.81%。
该工艺在实验室规模（200.0g ）具有很好的稳定性，具有一定的工业开发潜力。
对红薯叶总黄酮提取物进行体外抗氧化作用（1,1-二苯基-2-苦基肼自由基（DPPH ·）的清除）和体外抑菌（金黄葡糖球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、伤寒杆菌和黑曲霉菌）效果研究。
结果显示：红薯叶黄酮提取物对DPPH ·的清除效果显著，有明显的抗氧化效果。
红薯叶总黄酮提取物对金黄葡糖球菌和大肠杆菌具有较好的抑制作用，在高剂量条件下抑菌率最高，分别达到108.66%、115.89%，MIC 分别为5.02、10.05mg/mL ，具有较好的抑制活性，有很高的开发价值。
关键词：红薯叶；总黄酮；提取工艺；抗氧化活性；抑菌活性中图分类号：R284.2文献标识码：A收稿日期：2018-03-19基金项目：商洛学院科学与技术研究基金项目（17SKY005）；2017年陕西省大学生创新创业训练计划项目（20172715）第一作者：延永（1988—），男，硕士研究生，研究方向：药物合成。
延永1，李玉萌2，张亦琳1，王溪2，简丽萍1（1.商洛学院生物医药与食品工程学院，陕西商洛726000；2.商洛学院健康管理学院，陕西商洛726000）Optimization of Extraction Technology of Flavonoids from Sweet Potato Leavesand Antimicrobial and Antioxidant ActivityYAN Yong 1，LI Yu-meng 2，ZHANG Yi-lin 1，WANG Xi 2，JIAN Li-ping 1（1.College of Biology Pharmacy and Food Engineering ，Shangluo University ，Shangluo ，Shaanxi 726000，China ；2.College of Health Management Address ，Shangluo University ，Shangluo ，Shaanxi 726000，China ）Abstract:Using the content of flavonoids extracted from sweet potato leaves as the evaluation criterion （rutin standard was control group ），the effects of time （A ），extraction liquid ratio （B ），and ethanol concentration （C ））on flavonoid extracts were analyzed by single factor test.The extraction process was optimized by L 9（34）orthogonal design.The optimum condition was that the extraction liquid ratio was 1∶40（m/V ）with 60%eth ⁃anol solution and refluxed for 1.5hours.The average extraction rate of total flavonoids reached to 8.81%.The process had good stability in laboratory scale （200.0g ）and certain industrial development potential.In vitro antioxidant activity test （removal of 1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl free radical （DPPH ·））and in vitro antibacterial activity test （Staphylococcus aureus ，Escherichia coli ，Klebsiella pneumoniae ，Salmonella typhi ，and Aspergillus niger ）were carried out and results showed that the flavonoid extracts of sweet potato leaves had significant effect on removal of DPPH ·and antioxidation.Flavonoid extracts of sweet potato leaves had a good inhibitory effect on S.aureus and E.coli ，and the inhibitory rates was 108.66%and 115.89%un ⁃der the high dosages ，respectively ，and the minimum inhibitory concentration （MIC ）was 5.02mg/mL and 10.05mg/mL ，respectively.Extracts of sweet potato leaves had a good inhibitory activity and a high develop ⁃ment value.Key words:sweet potato leaf ；total flavonoids ；extraction process ；antioxidant activity ；antibacterial activity第47卷第3期2018年9月广西林业科学Guangxi Forestry ScienceVol.47No.3Sep.2018广西林业科学第47卷因素水平123A提取时间/h1.52.02.5B料液比/（m/V）1:201:301:40C乙醇浓度（%）40%50%60%D空白123红薯叶即指秋天红薯成熟后地上秧茎顶端的嫩叶，又称地瓜叶，是常被忽视的红薯种植过程中的副产品。
研究发现，红薯叶富含多酚、蛋白质、维生素和矿物质等营养成分，营养价值高，具有提高免疫力[1]、抗氧化[2]、抑菌[3]、促进新陈代谢[4]等多种保健功效，在欧美、日本、香港等地甚至掀起一股"红薯叶热"，红薯叶已被当成一种新型的蔬菜，走向人们的餐桌。
而在皮肤护理领域，红薯叶所含的有效成分也被报道可使肌肤变光滑、保持皮肤细腻、延缓衰老[5]。
然而，我国大部分地区对红薯叶的开发利用非常有限，绝大部分红薯叶都被当作牲畜饲料，或者直接被遗弃，造成了巨大的资源浪费。
我国红薯的产量占全球比例的80%[6]，而红薯叶的利用率不到10％[7]，主要原因是红薯叶的提取工艺不成熟，缺乏对其性质的研究。
因此，对红薯叶的提取工艺开发和对提取物性质的测试具有重要的研究意义。
本研究通过对以往相关文献的分析，采用正交分析法对红薯叶所含黄酮类化合物的提取工艺进行了优化，并对提取物的抗氧化活性和抑菌活性进行研究，为红薯叶的进一步开发利用提供理论依据和技术支持。
1材料与方法1.1材料与试剂新鲜红薯叶(采摘于商洛学院农业试验田)。
芦丁标品（中国药品生物制品鉴定所），试验中涉及试剂均为市售AR。
供试菌金黄葡糖球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、伤寒杆菌和黑曲霉菌由商洛学院生物学院张亦琳博士提供。
1.2仪器与设备KQ5200DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；UV-755B紫外可见分光光度计（上海分析仪器总厂）；ZF-I型三用紫外分析仪（上海顾村光电仪器厂）；HK-02A粉碎机（广州旭朗机械设备有限公司）；高压灭菌锅；DHG-9240A 恒温恒湿培养箱（上海齐欣科学仪器有限公司）。
1.3方法1.3.1红薯叶提取采集新鲜红薯叶，恒温恒湿培养箱烘干（60℃），粉碎机粉碎，得到红薯叶粉末。
准确称取所得红薯叶粉末2.0g，加入规定浓度乙醇溶液，回流规定时间，冷却，过滤，滤饼用乙醇溶液（10.0mL）洗涤3次，滤液转移至100mL容量瓶中，去离子水定容至刻度线，摇匀，放置15 min，得提取样品液。
1.3.2黄酮含量测定精确称取98%的芦丁标准品0.0501g，置于50mL容量瓶中，加乙醇20.0mL，水浴上微热使溶解，冷却，乙醇稀释至刻度，摇匀，精密吸取5.0mL置50mL容量瓶中，加水稀释至刻度，即得0.2mg/mL芦丁对照品溶液。
精密量取上述对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0和6.0mL，分别置于25mL量瓶中，各加水至6.0mL，加5%亚硝酸钠溶液l.0mL，混匀，放置6min，加10%硝酸铝溶液1.0mL，摇匀，放置6min，加4%NaOH试液10.0mL，再加水至刻度，摇匀，放置15min，在510nm处，分别测得系列浓度溶液的吸光度值，根据标准曲线制作方法得到标准曲线方程Y= 2.253X+0.0006（R2=0.9963），表明芦丁浓度与吸光度具有良好的线性关系。
1.3.3红薯叶总黄酮提取工艺优化通过查阅相关文献，溶剂提取法提取红薯叶黄酮类化合物最佳的提取溶剂是乙醇[8]。
乙醇与其他溶剂相比较，具有无毒无害，污染小，易回收，成本低，并且不会对红薯叶中黄酮类化合物造成污染的优点。
本研究采用正交试验设计（表1），利用单因素试验，着重考察提取时间（A）、提取料液比（B）、乙醇浓度（C）对红薯叶黄酮提取效果的影响，选用L9（34）正交试验设计，对红薯叶中黄酮类化合物的提取条件进行优化。
表1红薯叶总黄酮提取因素水平Tab.1Factors levels for total flavonoids extracts of sweet potato leaves1.3.4红薯叶总黄酮提取物体外抗氧化活性检测红薯叶黄酮类化合物的抗氧化机理与其它酚类抗氧化剂相似，自身作为优良的供氢体，向活泼自由基提供氢后，形成的自由基可通过共振杂化与其它自由基结合成稳定的二聚体，从而切断链式反应，发挥抗氧化作用[9]。
