实验三蛋白序列比对到基因组

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实验三蛋白序列比对到基因组(GeneWise and exonerate)实验目的
1)了解基因结构,acceptor, sponsor 等概念
2)理解将蛋白序列比对到基因组的应用
3)掌握利用GeneWise 将蛋白序列定位到基因组上并得到基因结构
实验数据及软件
ftp://172.28.137.55/pub/lab_materia/biosoft/lab03/
1、Genewise 简介
Genewise 是EBI 的Ewan Birney <birney@> 和他的同事们开发的一套
软件系统,用来做蛋白质序列和DNA 序列之间的比对,软件比对过程中会考虑剪切位点信息,所以能够定义出intron/exon 结构,同时它和blast 的最大区别是它能够把基因的多个exon 的链接起来,从而得到基因整体的比对情况。

Genewise 只能一次进行
一条蛋白序列和一条核酸序列的比对,同等运算量的情况下,运行时间较blast,blat,sim4 等慢,由于进行的是蛋白质水平的比对,所以敏感性比blat,sim4 等要高。

2、下载
可从EBI 网站上下载,下载地址:
ftp:///pub/software/unix/wise2/wise2.2.0.tar.gz(FTP 服务器上已经下载有)
3、安装
1)解压缩
2)编译,
$ cd src
$ make all
3)设置环境变量:WISECONFIGDIR
4、使用语法
genewise <protein-file> <dna-file>
genewise –genesf [other options] <protein-file> <dna-file>
参数提示
1.默认情况下,蛋白序列和dna 序列的正链进行比对,即-tfor 参数;如果用户
不确定蛋白质序列是在dna 序列的正链上还是反链上,可以改用-both 参数;
2.当用户需要使用genewise 比对得到的dna 序列时,可以通过添加-cdna 得到;可以通过-trans参数得到对应的氨基酸序列;
应用1—确定基因结构
genewise –both –genesf input-protien3.fa input-dna3.fa > output3.genewise.out 结果(部分)
当序列比对中有移码出现时(非3 整数倍的插入、缺失),genewise 会在dan 翻译的氨基酸序列行显示一个“!”,如下:
应用2 检验假基因
当比对的结果里面出现“!”时说明dna 序列中出现了移码突变,当比对中出现X 时说明出现了premature stop codon。

程序DealGeneWise.pl 可以对Genewise 结果进行简要统计
Exonerate(自学)
Exonerate(a genetic tool for sequence alignment)是EBI 的Guy Slater
<guy@>和Ewan Birney(GeneWise 的作者)<birney@>在2005 年公布的一套软件系统,用来做序列比对。

此软件功能强大而且速度快。

比如,它能考虑剪切位点信息定出intron/exon结构,所以能代替GeneWise。

它既可以做全局比对,也可以做局部比对。

同时它比blast,blat 要快。

它基本上能够做你想做的任何一种比对。