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TNBS 诱导的大鼠炎性肠病模型的建立王园园王金凤蔡欣徐涛邹民吉刘深刘中成王旻龙民慧王嘉玺徐东刚摘要目的建立 2, 4, 6-三硝基苯磺酸 (T NBS 诱导的炎性肠病动物模型 , 以用于相关药物评价。
方法雄性 W istar 大鼠50只随机分为 T NBS 造模组、对照组及正常组 , 各组大鼠分别用 2%T NBS 、50%乙醇及生理盐水灌肠。
观察各组大鼠的粪便、精神状态和进食情况 , 并每日称量体重及食重。
分别在造模后第 3、 6和 14天处死大鼠 , 分离结肠组织 , 制作病理切片 , HE 染色后显微镜下观察结肠组织病理变化。
结果 T NBS 造模组在造模后第 1天即表现出明显的肠道稀便和血便 , 并持续约 8天 ; 造模后体重和进食明显下降 , 持续 7~10天后缓解 ; 造模后第 3天可观察到明显的肠道病理改变 , 并逐渐加重 , 至第 6天时可见黏膜的大量炎性细胞浸润以及肠壁的透壁性坏死。
造模对照组大鼠在造模后第 1天部分稀便 , 第 2天即恢复正常 , 造模后第 3天肠道可见轻度病理改变。
正常组大鼠一切均正常。
结论 T NBS 诱导的大鼠造模后表现出明显的炎性肠病症状 , 可作为 I B D 病因及治疗药物研究的有效模型。
关键词 2, 4, 6-三硝基苯磺酸炎性肠病动物模型Est ablishm en t of I nfl am ma tory Bowel D isea se M odels I nduced by 2, 4, 6-Tr i n itrobenzenesulfon i c Ac i W ang J infeng, W ang Yuanyuan, Cai X in, et al . Institute of B asic M edical Sciences, A cade m y of M ilitary ChinaAbstract O bjecti ve To devel op a model of inflammat ory bowel induced 6-trinitr obenzenesulfonic acid (T NBS . M ethods FiftyW istar rats were random ly divided model and nor mal gr oup. 2%T NBS, 50%ethanol and physi ol ogical saline were ad m inistered per t o of gr oup s, res pectively . Feces, p sychosis and appetite wereobserved, body weight and food killed after 3, 6and 14d, and the col ons were is olated and hist ol ogical findingswere exa m the rats in the model gr oup had l oose and bl oody st ools, and the sy mp t om s las 2ted f or about 8days . eaten were markedly decreased for 7-10days . Obvi ous pathol ogical changes in the col on were observed on third day on sixth day, characterized by mucosal necr osis and trans mutable infla mmati on . I n the mock model gr oup, the rats had l oose ools on first day, and recovered on second day . L ight pathol ogical changeswere found on third day . I n the nor 2mal gr oup, no pathol ogical changes were f ound in col on . Conclusi on Rats treated with T NBS showed obvi ous characters of infla mmat ory bowel disease, which could be used as a model in study on eti opathogenesis and evaluati on effects of medicines .Key words 2, 4, 6-trinitr obenzenesulfonic acid; I nflammat ory bowel disease; Ani m al model作者单位 :100850北京 , 军事医学科学院基础医学研究所基因工程研究室通讯作者 :徐东刚 , 电子信箱 :xudg@nic . bm i . ac . cn; 王金凤 , 电子信箱 :jf wangl@ 炎性肠病 (infla mmat ory bowel disease, I B D 是一类病因不明的慢性肠道炎症性疾病 , 由于具有恶变倾向因而对患者造成非常严重的威胁 , 是胃肠道中除恶变外最严重的疾病之一。
肥大细胞和胃肠激素在TNBS所致大鼠溃疡性结肠炎模型中的变化赵平;董蕾;罗金燕;管海涛;马卉;王学勤【摘要】目的探讨肥大细胞(MC)、胃肠激素在三硝基苯磺酸(TNBS)所致大鼠溃疡性结肠炎模型发病机制中的作用及其相互作用.方法大鼠经肛门按100 mg/kg 注入TNBS的50%乙醇溶液0.3 ml,分别于实验第0、6、11、16、21 d处死,行结肠MC计数,采用荧光测定、放免等方法测定血组胺、结肠组织组胺、P物质(SP)、血管活性肠肽(VIP)、生长抑素(SS)含量;采用免疫荧光双染法观察TNBS模型MC与SP、VIP、SS阳性神经纤维关系.结果 TNBS模型实验第6d见远段结肠有明显溃疡形成,血组胺含量显著增加(P<0.05),结肠组织组胺浓度显著下降(P<0.05),以后上述指标逐渐恢复正常;实验第16天起MC计数显著增加(P<0.05),并持续至实验第21天,MC分布发生改变,结肠肌层出现MC聚集.实验第11天起SP显著增加(P<0.05),并持续至实验第21天.免疫荧光双染显示TNBS模型各时期远段结肠多数MC与SP、VIP阳性神经纤维紧邻,结肠肌层VIP阳性神经纤维增加,但MC与SP、VIP无共染现象.MC与SS阳性神经纤维无伴行关系.结论 MC及其释放的组胺参与了TNBS所致大鼠的肠粘膜损伤过程.SP、VIP分泌异常参与了TNBS所致大鼠UC发病过程.MC与SP、VIP的双向调节机制在TNBS所致大鼠UC发病过程中起重要作用.【期刊名称】《南方医科大学学报》【年(卷),期】2009(029)007【总页数】5页(P1359-1363)【关键词】三硝基苯磺酸;结肠炎;肥大细胞;P物质;血管活性肠肽;生长抑素【作者】赵平;董蕾;罗金燕;管海涛;马卉;王学勤【作者单位】西安交通大学医学院第二附属医院消化内科,陕西,西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院消化内科,陕西,西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院消化内科,陕西,西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院肿瘤外科,陕西,西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院消化内科,陕西,西安,710004;西安交通大学医学院第二附属医院消化内科,陕西,西安,710004【正文语种】中文【中图分类】医药卫生2009;29(7) 南方医科大学学报(J South Med Univ) ·1359 · 肥大细胞和胃肠激素在ηms 所致大鼠溃殇性结肠炎模型中的变化赵平 l ，董蕾 l ，罗金燕 l ，管海涛2 ，马卉 l ，王学勤 I （西安交通大学医学院第二附属医院 l 消化内科， 2 肿瘤外科，陕西西安 710004 )摘要：目的探讨肥大细胞（ MC ）、胃肠激素在三硝基苯磺酸（TNBS）所致大鼠溃荡性结肠炎模型发病机制中的作用及其相互作用。
·基础免疫学·ＴＮＢＳ／乙醇溃疡性结肠炎大鼠模型差异表达ｍｉＲＮＡ与ｍＲＮＡ共表达分析钦丹萍 周毅骏 杨雪静 张春丽 李艳平 代群 孙佩娜ＤＯＩ：１０．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．０２５４-５１０１．２０１５．１０．００５基金项目：国家自然科学基金资助项目（８１２７３９０３）作者单位：３１０００６杭州，浙江中医药大学附属第一医院消化内科（钦丹萍），中心实验室（杨雪静，李艳平，代群），病理科（张春丽）；浙江中医药大学第一临床医学院（钦丹萍，周毅骏，孙佩娜）通信作者：钦丹萍，Ｅｍａｉｌ：ｑｉｎｄｐ１９８４１＠ｓｉｎａ．ｃｏｍ，电话：０５７１-８７０６８００１【摘要】 目的 研究２，４，６-三硝基苯磺酸（ＴＮＢＳ）／乙醇溃疡性结肠炎（ＵＣ）大鼠中，ＵＣ相关ｍｉＲＮＡ的调控作用，即ｍｉＲＮＡ与ｍＲＮＡ互作关系。
方法 用ＴＮＢＳ／乙醇灌肠，诱导ＵＣ大鼠模型。
经过造模与１４ｄ生理盐水灌胃后，解剖处死。
留取正常组与模型组大鼠相应的结肠组织。
通过大体及镜下观察，验证造模效果。
同时对相应结肠组织进行ｍｉＲＮＡ芯片检测，根据芯片结果及相关文献报道，筛选出与ＵＣ发病密切相关的ｍｉＲＮＡ并对其进行ＲＴ-ＰＣＲ验证。
另外，利用ｍｉＲＷａｌｋ数据库对差异ｍｉＲＮＡ的靶基因进行预测。
为了验证预测结果与实际情况的相符度，又同步进行了ｍＲＮＡ水平的表达谱芯片实验，筛选出与差异ｍｉＲＮＡ确有互作作用的ｍＲＮＡ。
为了更好地说明ｍｉＲＮＡ与ｍＲＮＡ的互作关系，又利用Ｄａｖｉｄ数据库对靶基因进行注释，最终形成ｍｉＲＮＡ与ｍＲＮＡ共表达网络。
结果模型组大鼠结肠大体及镜下表现均符合ＵＣ的发病特征。
通过ｍｉＲＮＡ芯片筛选出了６８个差异ｍｉＲＮＡ［倍数变化（ｆｏｌｄｃｈａｎｇｅ）＞２，P ＜０．０５，表达值（ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｍｅａｎ）＞７］，结合相关文献报道，筛选出６个与ＵＣ发病密切相关的ｍｉＲＮＡ。
同时对这６个ｍｉＲＮＡ进行了ＲＴ-ＰＣＲ实验，结果提示，与正常组相比，４个差异ｍｉＲＮＡ（ｍｉＲ-１４６ａ-５ｐ、ｍｉＲ-１４６ｂ-５ｐ、ｍｉＲ-１２６ａ-３ｐ和ｍｉＲ-２１-５ｐ）表达明显上调（P ＜０．０１，P ＜０．０５），２个差异ｍｉＲＮＡ（ｍｉＲ-２００ｂ-３ｐ、ｍｉＲ-１４５-５ｐ）表达明显下调（P ＜０．０１）。
实验性溃疡性结肠炎动物模型的造模选择摘要溃疡性结肠炎（CU）在欧美国家相当常见。
国内虽未见明确的流行病学报道，但近年发病率似有上升趋势。
虽有感染、遗传、精神因素、过敏、免疫等多种发病学说，但其病因、发病机制、药物治疗机制，尚未完全清楚［1］。
中医中药在辨证分型基础上组方，口服及局部治疗CU 有较好的疗效［2］。
选择合适的动物疾病模型，探索中医中药治疗机制对深入研究CU具有重要意义。
关键词结肠炎；溃疡性；疾病模型、动物；动物、实验1动物及类型1.1动物选择自发性溃疡性结肠炎在马、猴、猪等动物中都有散发，因病因不明，病情轻重不一，难以作为动物模型为实验所用［3］，目前国内外常用大白鼠、豚鼠、家兔为实验动物，药物学方法最常选用白鼠。
1.2模型类型①西医病理模型：以CU患者临床症状及病理特征为参照，运用药物、免疫等方法作用于动物，造成与人类疾病相近似的动物模型；②中医“证”与西医“病”相结合的模型：运用综合方法复制既符合中医证型又符合西医病症的CU模型。
如湿热型溃疡性结肠炎模型［4］2造模方法常用方法大致可以分为3类：药物学方法、免疫学方法和复合法。
2.1药物学方法2.1.1乙酸刺激法［4-7］乙酸是一种有机酸，呈弱酸性，具有使血管通透性增加，激活激肽，促进纤维蛋白水解及干扰凝血过程等作用，对动物胃肠粘膜有刺激作用，可以引起粘膜损伤。
1970年开始用于制作CU的鼠模型，至今仍广泛使用。
方法：SD大白鼠，体质量200g～250g，雌雄兼用，造模前禁食17h～24h，经肛门注入5g·L-1肥皂水1.5mL，约30min后用20g·L-1戊巴比妥钠经腹腔麻醉，插入直径３mm的聚乙烯纤维导管至大鼠直肠内，深度约5cm～7cm，注入50mL·L-1或100mL·L-1乙酸溶液1.5mL，准确计时10s～20s后再注入生理盐水3mL～5mL冲洗，以消除乙酸的作用。
之后，常规饲养。
康复新液对TNBS诱导大鼠溃疡性结肠炎治疗作用的研究目的：观察康复新液对2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的溃疡性结肠炎模型大鼠的治疗作用。
方法：将60只SD大鼠随机分为空白对照组（等体积蒸馏水）、模型对照组（等体积蒸馏水）、柳氮磺吡啶组（SASP，06g/kg）、康复新液高、中、低剂量组（20、10、5mL/kg），每组10只，雌雄各半。
采用TNBS 灌肠造模，造模后第3天开始灌胃给药，连续12d，给药结束后各组取材进行HE染色，并用ELISA法测定结肠组织中髓过氧化物酶（MPO）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和白介素-10（IL-10）的水平。
结果：造模后大鼠结肠呈明显溃疡样损伤；与空白对照组相比较，模型对照组大鼠结肠组织中促炎相关因子MPO、TNF-α和IL-1β的含量升高（P＜005），抗炎因子IL-10含量降低（P＜005）；与模型对照组比较，康复新液高剂量组大鼠结肠组织损伤减轻，高、中、低剂量组均能降低大鼠结肠组织中MPO、TNF-α含量（P＜005），也有降低IL-1β含量和升高IL-10含量的作用趋势。
结论：康复新液对TNBS诱导的大鼠结肠炎具有良好的治疗效果，机制可能与调节抗炎因子和促炎因子之间的平衡作用有关。
标签：康复新液；2，4，6-三硝基苯磺酸；溃疡性结肠炎；抗炎作用Experiment Study of Treatment Effects of Kangfuxin Solution on TNBS-Induced Ulcerative ColitisHU Tingting1RAO Chaolong1GENG Fu neng2DENG Qingxiu1XIE Xiaofang1*1Chengdu University of Traditional Chinese Medicine，Cheng du，611137，China；2Good doctor pharmaceutical group，Xichang，615000，China Abstract：Objective To observe the therapeutic effects of Kangfuxin solution on rat model of ulcerative colitis induced by TNBS. Method sixty SD rats were randomly divided into six groups：nomal control groups，model groups，SASP groups，high-dose Kangfuxin groups，medium-dose Kangfuxin groups and low-dose Kangfuxin groups.Each groups have 10 rats including 5 male rats and 5 female rats.TNBS was instilled into the colon of rats to induce ulcerative colitis. 3 days after modeling，every groups were given relevant drugs once a day for 12d. On the day 12，after administration，the rats were sacrificed to collect colon specimens for HE staining. Elisa was performed to detect the levels of MPO，TNF-α，IL-1β andIL-10 in colon specimens of rat. Result Compared with nomal control groups，the contents of anti-inflammatory factors MPO，TNF-α，IL-1β in colon specimens of rats were significantly higher（P＜005），pro-inflammatory factor IL-10 was significantly reduced （P＜005）. Kangfuxin solution can reduce the contents of MPO and TNF-α in colon specimens of rats（P＜005）and has a certain influence on the IL-1β and IL-10. Conclusion Kangfuxin solution has a good therapeutic effect on rat model of ulcerative colitis induced by TNBS and it’s mechanism may be related to adjust thebalance between anti-inflammatory factors and pro-inflammatory factors.Keywords：Kangfuxin Solution；2，4，6-Trinitro-Benzenesulfonicacid；Ulcerative Colitis；Anti-Inflammatory Effect溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis，UC）是一种直肠和结肠慢性非特异性炎症性疾病，临床症状常以黏液脓血便、腹痛、腹泻或里急后重为主，病情轻重不一，多呈反复发作；该病的治疗难度大，且与结肠癌的发病有一定的关系[1]。
溃疡性结肠炎动物模型构建方法的研究进展田家华1，索小涛1，马晨曦1，郑丽红2，王海强11 黑龙江中医药大学附属第一医院消化二科，哈尔滨150040；2 黑龙江中医药大学附属第四医院消化内科摘要：溃疡性结肠炎（UC）是一种病因不明的慢性非特异性肠道炎症性疾病，其确切发病机制尚不完全清楚。
目前，UC诊断尚无金标准，主要结合临床表现、影像学检查、结肠镜检查及肠组织病理检查等综合分析。
但UC病程往往较长，病情迁延难愈，缓解期与活动期交替出现，病例收集和随访难度较大。
而UC动物模型可模拟UC肠黏膜屏障损伤、肠道炎症状态及菌群紊乱情况。
因此，通过构建合理的动物模型对揭示UC的发病机制、探索高效的治疗策略至关重要。
目前，UC动物模型的构建方法主要有诱导法、基因敲除法和联合法。
根据诱导剂不同，诱导法可分为化学药物诱导法、微生物诱导法和食物诱导法。
根据敲除基因不同，基因敲除法可分为屏障蛋白基因敲除法和抗炎因子基因敲除法。
而联合法一般采取两种及以上方法构建UC动物模型。
这些模型构建方法各有利弊，应根据自身实验需求和实验条件选择最适合的动物模型。
关键词：溃疡性结肠炎；动物模型；诱导法；基因敲除法；联合法doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2024.13.027中图分类号：R574.6；R-332 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2024）13-0111-04溃疡性结肠炎（UC）是一种病因不明的慢性非特异性肠道炎症性疾病，病理改变主要累及结肠或直肠的黏膜层和黏膜下层，临床表现为黏液脓血便、间断性腹泻、腹痛、里急后重等。
有研究表明，UC可增加自身免疫性肝病、结直肠癌、贫血等疾病的发生风险，并可引起焦虑、抑郁等精神心理疾病，给患者造成沉重的经济负担和巨大的心理压力［1-3］。
目前，UC的确切发病机制尚不完全清楚，可能与肠道微生态失衡、自身免疫功能紊乱以及家族遗传等因素有关［4］。
UC诊断尚无金标准，主要结合临床表现、影像学检查、结肠镜检查及肠组织病理检查等综合分析。
免疫复合型溃疡性结肠炎大鼠模型的实验研究康宜兵;吕永慧;吴宇金;钟志勇;武昕【摘要】目的建立免疫复合型溃疡性结肠炎大鼠模型并探讨其应用价值.方法 20只SD大鼠,随机分为正常对照A组10只、模型组10只.模型组用大鼠颈、背部皮下注射抗原乳化液,第23天,造模组大鼠TNBS灌肠.空白对照组以生理盐水灌肠,比较各组大便的性状、便血程度、体重下降情况,并进行组织学观察.结果 UC模型大鼠体重减轻,体重增长缓慢(P＞0.05).血清IL-10水平降低(P＜0.05).大便的性状评分、CMDI评分均升高(P＜0.01).结论免疫复合型溃疡性结肠炎大鼠模型,该模型成功率高,重复性好,且模型的病变机制与人类UC相符,是较为理想的溃疡性结肠炎动物模型.【期刊名称】《云南中医中药杂志》【年(卷),期】2015(036)010【总页数】3页(P55-57)【关键词】溃疡性结肠炎;大鼠;动物模型【作者】康宜兵;吕永慧;吴宇金;钟志勇;武昕【作者单位】广东省广州市中医医院,广东广州510000;广东省广州市中医医院,广东广州510000;广东省广州市中医医院,广东广州510000;广东省医学实验动物中心,广东广州510000;广东省医学实验动物中心,广东广州510000【正文语种】中文【中图分类】R285溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)是一种主要累及直肠、结肠黏膜的慢性非特异性炎症。
在动物试验模型的研究方面，近年来开展的UC的实验动物模型有化学诱导模型、免疫致敏模型、细胞移植模型和基因敲除模型等，其中TNBS 诱导、单纯免疫法及免疫复合法3种UC大鼠模型较为常用。
免疫复合法模型的致病机制是在全身致敏的基础上给TNBS，导致迟发性变态反应造成肠黏膜的损伤，达到全身免疫异常与局部炎症病变的结合。
虽然制作方法稍复杂，但免疫复合法重复性好，病变更类似人UC，持续时间长，是较理想的造模方法。
免疫复合法模型病变累及全结肠以及末段回肠，溃疡病变可维持8周以上，12周后有愈合倾向，但仍可见结肠壁增厚及炎性细胞浸润[1]。
选择性环氧合酶－２抑制剂对大鼠溃疡性结肠炎作用的实验研究【摘要】目的明确选择性环氧合酶COX-2抑制剂塞来昔布对2、4、6三硝基苯磺酸（TNBS）诱导的大鼠溃疡性结肠炎的作用，并初步探讨其作用机制。
方法将大鼠分为三组，第1组和第2组为造模组，用0.25 ml TNBS乙醇溶液（TNBS浓度25 mg/ml，乙醇浓度50％），灌肠，诱导大鼠实验性溃疡性结肠炎模型。
造模组大鼠于造模前3 h开始，分别给予塞来昔布（12．5 mg/kg）和蒸馏水(1 ml/0．3 mg)，2次/d，共7 d。
第3组为正常对照组。
第7 d实验结束时处死所用存活动物，观察结肠黏膜损伤程度，并用ELISA法检测IL-1β、IL-10、TNF-β的浓度。
结果造模组结肠损伤积分为（8．20±1．96）（第1组）和（12．05±2．30）（第2组）均显著高于正常对照组（0．64±0．15）（P值均＜0．01）。
第1组的结肠损伤积分显著低于第2组（P＜0．05）。
第1组中IL-1β、TNF-β的表达分别为（5．27±1．13 ）pg/ml、（5．12±1．62）pg/ml较第2组的（6．76±2．01）pg/ml、（7．96±2．12）pg/ml低（P＜0．05），但均高于正常对照组；而IL-10的表达第1组为（2．38±0．31）pg/ml较第2组（1．56±0．84）pg/ml高（P ＜0．05），均低于正常对照组。
结论选择性COX-2抑制剂塞来昔布使大鼠实验性溃疡性结肠炎损伤减轻，对IL-1β、IL-10、TNF-β的表达有不同的影响。
【Abstract】Objective An investigation was conducted to assess the effects and mechanism of celecoxib ［a selective cyclooxygenase(COX)-2 inhibitor］on a rat ulcerative colitis model induced by trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS). Methods The rats were divided into three groups .Group 1 and Group 2 were experimental groups. Ulcerative colitis was conducted by TNBS (25 mg/ml) in a vehicle of 50% ethanol (0．25 ml) in rats. Three hours before induction of ulcerative colitis.the rats were beginning and continuing to treat orally with celecoxib（12．5 mg/kg）and distilled water (1 ml/0．3 mg) twice per day for 7 days. Group 3 was healthy control group.All rats that survived at the end of the experiment (7 d) were killed and the severity of damage were assessed. The IL-1β、IL-10、TNF-βconcentrations were tested by ELISA. Results The colonic damage scores were8．20±1．96 in group 1 and (12．05±2．30)in group 2. Both were significantly higher than that of group 3 (0．64±0．15) (P＜0．01). The colonic damage score of group 1 was significantly lower than that of group 2 (P＜0．05). The concentrations of IL-1β、TNF-βin group 1 were,(5．27±1．13) pg/ml、(5．12±1．62)pg/ml lower than(6．76±2．01)pg/ml、(7．96±2．12)pg/ml in group 2 and the concentrations of IL-10 in group 1 was(2．38±0．31)pg/ml higher than(1．56±0．84)pg/m in group 2 . Conclusion These results suggest that treatment with celecoxib (selective COX-2 inhibitor) may protect in experimental ulcerative colitis induced by TNBS.【Key words】Ulcerative colitis; Celecoxib; Imflammatory factors研究提示，选择性环氧合酶（COX）-2抑制剂对结肠肿瘤有化学预防作用。
基金项目:甘肃省教育厅基金资助项目(编号:103002)。
作者简介:王小莲(1974—),女,讲师,甘肃省张掖医学高等专科学校(张掖 734000)。
溃疡性结肠炎大鼠模型研究进展王小莲 关键词:溃疡性结肠炎;动物模型;综述中图分类号:R574162 文献标识码:A 文章编号:1000-7156(2011)03-0054-03 溃疡性结肠炎(UC )又称非特异性溃疡性结肠炎,是一种病因不明的大肠黏膜的慢性炎症和溃疡性病变。
建立理想的动物模型对于阐明该病的病因、病变发展规律以及有效的防治有重要意义。
UC 动物模型的制备方法,除了常用的经典方法如乙酸造模法、角叉菜胶法等化学方法,近年来,出现了许多新的造模方法,在发病机制上更接近于自然患病。
现将制作UC 动物模型方法综述如下。
1 化学造模法111 乙酸造模法:Cetinkaya A[2]将乙酸注入大鼠结肠,然后以019%NaCl 溶液冲洗2次。
造模后大鼠出现腹泻、血便,第3天病变达高峰期,病变以远端结肠为主,多在1周内消失。
该模型的不足之处在于结肠炎症以急性单纯性黏膜炎症为主,病情进展和愈合迅速。
目前主要用于UC 急性炎症发作期药物治疗的疗效观察和评价黏膜愈合机制。
112 角叉菜胶造模法:大鼠自由饮用3%角叉菜胶溶液2周后出现UC 症状,3周后肉眼可见盲肠、结肠、直肠出现针尖大小的溃疡和出血点。
组织学可见隐窝脓肿、变形,黏膜溃疡形成,黏膜和黏膜下层炎性细胞渗出。
该模型的特点是病变局限于结直肠,造模过程中粪便含菌量升高。
该模型的优点是持续时间长,急性期3～6周,持续6～8周,停止饮用角叉菜胶后炎症持续1～2周。
缺点是模型动物多用豚鼠,成本较高,周期较长。
113 葡聚糖硫酸钠(DSS ):BALB /c 小鼠自由饮用5%DSS溶液5天,造成急性UC 模型。
急性模型表现为体重下降、腹泻、血便,溃疡多出现于远端结肠。
产生的细胞因子主要为白细胞介素(I L )-12、干扰素(I F N )-γ、I L -1、肿瘤坏死因子(T NF )-α等。
中药药理与临床２００７；２３（６）８１我们要求药理实验者首先起码应当是一名合格的技术操作人员，我们提倡他们成为所从事专业试验的解牛庖丁，我们更希望他们掌握更多的医药学研究的科学艺术。
参考文献１邓文龙．路漫漫其修远兮，吾将上下而求索——纪念《中药药理与临床》创刊二十周年．中药药理与临床，２００５；２１（５）：１～３造模因素对ＴＮＢＳ致大鼠溃疡性结肠炎模型的影响李茹柳１，迟莉１，郭文峰１，王桂香１，王静１，陈蔚文Ｌ２（１广州中医药大学脾胃研究所，广州５１０４０５，２上海市高校中医内科学Ｅ一研究院，上海２０１２０３）摘要目的：探讨造模因素对三硝基苯磺酸（ＴＮＢＳ）致大鼠溃疡性结肠炎的影响。
方法：①ｓＤ大鼠以４种造模方案观察动物体重和ＴＮＢＳ剂量对大鼠死亡率和结肠病变的影响，即大鼠１８０—２００９，ＴＮＢＳ１００ｍｇ／ｋｇ；大鼠２１０—２５０９，ＴＮＢＳ９０ｍｇ／ｋｇ；大鼠２４０～２８０９，ＴＮＢＳ８５ｍｇ／ｋｇ；大鼠２００—２２０９，ＴＮＢＳ５０ｍｇ／ｋｇ。
实验周期均为１５ｄ。
（室）Ｗｉｓｔａｒ大鼠观察实验周期对结肠病变的影响：大鼠２１０—２６０９，ＴＮＢＳ９０ｍｇ／ｋｇ，实验周期为１０、２０、３０ｄ。
结果：ＳＤ大鼠４个方案的死亡率、结肠肉眼观察平均分值分别为９０．Ｏ％，５．９；７０．０％，５．１；１８．２％，４．３；２５．Ｏ％，４．０。
（墓）Ｗｉｓｔａｒ大鼠实验周期１０ｄ：死亡率１８．８％，结肠肉眼观察平均分值５．２，组织病理学平均分值７．８；实验周期２０ｄ分别为１２．５％、４．３、６．５；实验周期３０ｄ分别为１８．８％、３．５、５．６。
结论：动物的种属、体重、ＴＮＢＳ剂量、实验周期等都是模型的影响因素。
推荐造模方案ＳＤ大鼠体重２２０—２４０９，ＴＮＢＳ剂量５０—６０ｍｇ／ｋｇ；Ｗｉｓｔａｒ大鼠体重２２０—２４０９，ＴＮＢＳ剂量８０一９０ｍｇ／ｋｇ；死Ｊ亡率控制在２０％以内比较合适。
关键词溃疡性结肠炎；动物模型；影响因素２，４，６一三硝基苯磺酸（２，４，６一ｔｒｉｎｉｔｒｏｂｅｎｚｅｎｓｕｔｆｏｎｉｃａｃｉｄ，ＴＮＢＳ）致大鼠溃疡性结肠炎（ＵｌｃｅｒａｔｉｖｅＣｏｌｉｔｉｓ，ＵＣ）是常用的ＵＣ动物模型，其病理特点是结肠组织呈一种慢性炎症变化，病程较长，与人类溃疡性结肠炎相似，比较适用于溃疡性结肠炎防治药物的筛选和研究，但目前关于造模因素对该模型影响的研究报道较少。
本文以动物一般状态、体重变化、死亡率、结肠病变肉眼和病理组织学检查等为指标，观察大鼠种属、体重、ＴＮＢＳ剂量、实验周期等因素对溃疡性结肠炎模型的影响，为建立适合中药药理学研究的实验方案提供参考。
１材料与方法１．１动物ＳＤ大鼠，ＳＰＦ级，雌雄兼有；Ｗｉｓｔａｒ大鼠，ＳＰＦ级，雌雄各半；均购自广州中医药大学实验动物中心。
１．２试剂ＴＮＢＳ：美国Ｓｉｇｍａ公司出品，批号０１４Ｋ５００７，分子量２９３．２，试剂浓度５０昏／Ｌ。
１．３造模及检查参照文献…方法，ＴＮＢＳ与无水乙醇以１：１比例混匀，按大鼠禁食后体重计算需注入的混合药液体积，具体剂量依据不同造模方案而定。
正常组大鼠不造模正常饲养；造模组大鼠禁食不禁水２４ｈ，乙醚麻醉，以灌胃针头从大鼠肛门轻柔插入结肠约７ｃｍ后注入造模药液，大鼠提尾倒置３０ｓ让药液充分停留结肠内。
造模后大鼠正常饲养，每日观察大鼠一般状态、死亡情况、称体重并记录。
实验结束时处死存活大鼠，取出结肠洗净，甲醛固定，石蜡包埋，切片作ＢＥ染色，光学显微镜下进行病理学检查。
１．３．１结肠病变肉眼评分标准０分：结肠无损伤；１分：结肠轻度充血水肿；２分：结肠明显水肿，肠粘膜粗糙呈颗粒状；３分：结肠粘膜溃疡形成，溃疡最长径≤ｌｃｍ；４分：结肠粘膜溃疡形成，溃疡最长径介于１—２ｃｍ之间；５分：结肠粘膜溃疡形成，溃疡最长径＞，２ｃｍ；６分：结肠全段的肠壁坏死或动物死亡ｐ。
１．３．２结肠组织病理学评分标准①上皮细胞：０分：正常形态；１分：有杯状细胞丢失；２分：杯状细胞大面积丢失；３分：隐窝细胞丢失；４分：隐窝细胞大面积丢失。
②炎细胞浸润：０分：没有浸润；１分：浸润在隐窝基底层；２分：浸润到达粘膜肌层；３分：浸润深人到粘膜肌层，伴随粘膜增厚和明显水肿；４分：浸润到达粘膜下层。
每只大鼠总评分为”上皮细胞”评分＋”炎细胞浸润”评分¨Ｊ。
２结果２．１动物体重、ＴＮＢＳ剂量对模型的影响以ｓＤ大鼠为实验动物，设立４个造模方案，主要以死亡率和结肠病变肉眼评分为观察指标。
造模当天为实验１ｄ，实验周期均为１５ｄ。
造模方案一１０只大鼠体重１８０～２００９，以ＴＮＢＳ剂量１００ｍｇ／ｋｇ造模。
结果在实验周期内死亡９只大鼠，解剖见结肠广泛坏死呈黑褐色，有的出现肠穿孔。
实验结束时处死的１只大鼠有明显的溃疡病灶。
肉眼评分：５分１只，６分９只，平均分值５．９。
本组大鼠造模后死亡率高达９０％，病变程度过重，考虑是由于大鼠体重较轻和造模剂量偏高。
造模方案二１０只大鼠体重２１０—２５０９，以ＴＮＢＳ剂量９０ｍｇ／ｋｇ造模。
结果在实验周期内死亡７只大鼠，实验结束时处死的３只大鼠其中１只可见明显的溃疡病灶，另外２只结肠见明显水肿，粘膜粗糙呈颗粒状。
肉眼评分：２分２只，５分１只，６分７只，平均分值５．１。
本组大鼠与”造模方案一”比较，虽然死亡率（７０％）有所降低，但仍然过高。
造模方案三１１只大鼠体重２４０—２８０９，以ＴＮＢＳ剂量８５ｍｇ／ｋｇ造模。
结果在实验周期内死亡２只大鼠，实验结束时处死的９只大鼠有８只出现溃疡病灶，１只以肠粘膜水肿为主。
肉眼评分：２分１只，３分２只，４分３只，５分３只，６分２只，平均分值４．３。
本组动物死亡率降至１８．２％，并使大多数动物产生溃疡病灶。
但本组大鼠实验时体重较重，实验前饲养周期较造模因素对TNBS致大鼠溃疡性结肠炎模型的影响作者：李茹柳， 迟莉， 郭文峰， 王桂香， 王静， 陈蔚文作者单位：李茹柳,迟莉,郭文峰,王桂香,王静(广州中医药大学脾胃研究所,广州,510405)， 陈蔚文(广州中医药大学脾胃研究所,广州,510405;上海市高校中医内科学E-研究院,上海,201203)刊名：中药药理与临床英文刊名：PHARMACOLOGY AND CLINICS OF CHINESE MATERIA MEDICA年，卷(期)：2007,23(6)被引用次数：5次1.沃格尔HG;沃格尔WH药理学实验指南--新药发现和药理学评价 20012.李茹柳,迟莉,郭文峰,徐颂芬,潘怀耿,陈蔚文鸟氨酸脱羧酶表达水平与溃疡性结肠炎病变时相的关系[期刊论文] -广州中医药大学学报 2007(3)3.Obermeier F;Dunger N;Strauch UG Contrasting activity of cytosine-guanosin dinucleotide oligonucleotides in mice with experimental colitis 20034.王皓,欧阳钦,胡仁伟三硝基苯磺酸结肠炎动物模型的建立[期刊论文]-胃肠病学 2001(1)5.Christine C;Catherine M;Gerard L The prebiotic characteristics of fructooligosaccharides are necessary for reduction of TNBS-induced colitis in rats 20036.Ishiguro Y;Sakuraba H;Yamagata K The presentation of haptenated proteins and activation of T cells in the mesenteric lymph nodes by dendritic cells in the TNBS colitis rat 20047.郑礼,高振强大鼠溃疡性结肠炎模型的实验研究[期刊论文]-中国药理学通报 1998(4)1.朱萱萱.沈洪.施荣山.邱召娟肠安胶囊治疗大鼠免疫性溃疡性结肠炎的实验研究[期刊论文]-中国中医药科技2002,9(1)2.刘莉.王志鹏.梅其炳.李晨2、4、6-三硝基苯磺酸诱导的大鼠结肠炎CD4+T细胞增加[期刊论文]-中国病理生理杂志2004,20(3)3.武继彪.隋在云.许复郁慢性血瘀证动物模型的建立及其血液流变学的变化[期刊论文]-中药药理与临床2001,17(5)4.杨建宏.王荣.王伟明.吴秉纯解脲支原体感染非淋菌性尿道炎大鼠模型建立及评价[期刊论文]-中药药理与临床2008,24(5)5.郭雁冰.王新月.林燕IL-8与溃疡性结肠炎复发的关系及中药抗复发的研究[期刊论文]-新中医2008,40(2)6.向志勇溃疡性结肠炎的中医实验研究近况[期刊论文]-湖南中医药导报2003,9(3)7.周燕红.于皆平.Yan-Hong Zhou.Jie-Ping Yu银杏天宝对大鼠实验性结肠炎抗氧化作用的影响[期刊论文]-世界华人消化杂志2007,15(15)8.郭雁冰.王新月.林燕.GUO Yan-bing.WANG Xin-yue.LIN Yan中药抗溃疡性结肠炎复发的临床观察[期刊论文]-中华中医药学刊2008,26(2)9.张永斌.邹移海.连至诚.陈苇菁溃疡性结肠炎大鼠模型及其结肠电异常[期刊论文]-实验动物科学与管理2002,19(2)10.金艳.刘莉.王庆伟.王志鹏.李宇华.冯娟.梅其炳.JIN Yan.LIU Li.WANG Qing-wei.WANG Zhi-peng.LI Yu-hua. FENG Juan.MEI Qing-bing己烯雌酚对2、4、6-三硝基苯磺酸/乙醇诱导的大鼠结肠炎的影响[期刊论文]-中国临床药理学与治疗学2006,11(2)1.高玉桥,苏丹,胡莹,林慧,张文霞,戴卫波山芝麻对大鼠溃疡性结肠炎的影响[期刊论文]-中药材 2013(04)2.周艳,彭彰智,阮征,印遇龙,李玲,黄小流,张翠低聚乳果糖对结肠炎大鼠食糜代谢物影响[期刊论文]-食品科学2011(11)3.周艳,阮征,黄小流,李玲,刘文群,温艳梅,米书梅,吴信,印遇龙低聚乳果糖对结肠炎大鼠血浆Th1/Th2型细胞因子的影响[期刊论文]-食品科学 2013(17)4.王刚正交设计对“溃结方”进行组方优化的动物实验研究(健脾益气组部分)[学位论文]硕士 20105.韩遵民舒肝健脾颗粒对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜形态学的影响[学位论文]硕士 2010引用本文格式：李茹柳.迟莉.郭文峰.王桂香.王静.陈蔚文造模因素对TNBS致大鼠溃疡性结肠炎模型的影响[期刊论文]-中药药理与临床 2007(6)。
