《诊断学》 第五节 纤溶活性检测

第五节纤溶活性检测纤维蛋白溶酶（纤溶酶）可将已形成的血凝块加以溶解，产生纤维蛋白（原）的降解产物，从而反映纤溶活性。

纤溶活性增强可致出血，纤溶活性减低可致血栓。

一、筛检试验
（一）优球蛋白溶解时间
【原理】
血浆优球蛋白（euglobulin）组分中含有纤维蛋白原（Fg）、纤溶酶原（PLG）和组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）等，但不含纤溶酶抑制物（plasmin inhibitor）。

受检血浆置于醋酸溶液中，使优球蛋白沉淀，经离心除去纤溶抑制物，将沉淀的优球蛋白溶于缓冲液中，再加入适量钙溶液（加钙法）或凝血酶（加酶法），使Fg转变为纤维蛋白凝块，观察凝块完全溶解所需时间。

【参考值】
加钙法：（129．8±41．1）min；加酶法：（157.0±59．1）min。

一般认为<70rain为异常。

【临床意义】
本试验敏感性低，特异性高。

1．纤维蛋白凝块在70 min内完全溶解表明纤溶活性增强，见于原发性和继发性纤溶亢进，后者常见手术、应激状态、创伤、休克、变态反应、前置胎盘、胎盘早期剥离、羊
水栓塞、恶性肿瘤广泛转移、急性白血病、晚期肝硬化、DIC 和应用溶血栓药（rt-PA、UK）。

2．纤维蛋白凝块在超过120 min还不溶解表明纤溶活性减低，见于血栓前状态、栓性疾病和应用抗纤溶药等。

（二）D-二聚体定性试验
【原理】
D-二聚体（D-dirner，D-D）是交联纤维蛋白降解产物之一，为继发性纤溶特有的代谢物。

抗D-D单克隆抗体包被于胶乳颗粒上，受体血浆中如果存在D-二聚体，将产生抗原-抗体反应，胶乳颗粒发生聚集现象。

【参考值】
胶乳颗粒比阴性对照明显粗大者为阳性，正常人为阴性。

【临床意义】
D-D阴性是排除深静脉血栓（DVT）和肺血栓栓塞（PE）的重要试验，阳性也是诊断DIC和观察溶血栓治疗的有用试验。

凡有血块形成的出血，本试验均可阳性，故其特异性低，敏感度高；但在陈旧性血块时，本试验又呈阴性。

（三）血浆纤维蛋白（原）降解产物定性试验
【原理】
于受检血浆中加入血浆纤维蛋白（原）降解产物[fibrin （agen）degradationproduct，FDPs]抗体包被的胶乳颗粒悬液，若血液中FDPs浓度超过或等于5μg／ml，胶乳颗粒发生凝集。

根据受检血浆的稀释度可以计算出血浆FDPs含量。

【参考值】
胶乳凝集法：阴性。

【临床意义】
FDPs阳性或增高见于原发性纤溶（primary fibrinolysis）和继发性纤溶（sencondary fibrinolysis），后者如DIC、恶性肿瘤、急性早幼粒细胞白血病、肺血栓栓塞、深静脉血栓形成、肾脏疾病、肝脏疾病、器官移植的排斥反应、溶血栓治疗等。

二、诊断试验
（一）血浆组织型纤溶酶原激活剂测定
【原理】
血浆优球蛋白含有吸附于纤维蛋白上的组织型纤溶酶原激活剂（tissue-typeplasminogen actiVator，t-PA），它使PLG转变为纤溶酶（PL），PL可使发色底物（S-2251）释出对硝基苯胺（PNA）而显色，显色的深浅与受检血浆中t-PA含量呈正相关。

所测得的A值，可从标准曲线计算受检血浆中t-PA：A含量。

【参考值】
发色底物法：0.3～0.6活化单位／ml．
【临床意义】
1．增高表明纤溶活性亢进，见于原发性纤溶和继发性纤溶（如DIC）等。

2．减低表明纤溶活性减弱，见于血栓前状态和血栓性疾病，如动脉血栓形成、深静脉血栓形成、高脂血症、口服避孕药、缺血性脑卒中和糖尿病等。

（二）血浆纤溶酶原活性测定
【原理】
受检血浆中加链激酶（SK）和发色底物（S-2251），受检血浆中的血浆纤溶酶原活性（plasminogen，PLG）在SK的作用下，转变成纤溶酶（PL），后者作用于发色底物，释出对硝基苯胺（PNA）而显色。

显色的深浅与纤溶酶的水平呈正相关，通过计算求得血浆中PLG：A的含量。

【参考值】
发色底物法：75％～140％。

【临床意义】
1．PLG：A增高表示纤溶活性减低，见于血栓前状态和血栓性疾病。

2．PLG：A减低表示纤溶活性增高，见于原发性纤溶、继发性纤溶和先天性PLG缺乏症。

（三）血浆纤溶酶原激活抑制物-1活性测定
【原理】
受检血浆中加入纤溶酶原激活剂（PA）和PLG，血浆中的PAI-1与PA形成复合物，剩余的PA使PLG转变成PL，PL作用于发色底物，释出PNA而显色，其颜色的深浅与PL的活性呈
正相关；而血浆中PL与纤溶酶原激活抑制物-1活性（plasmino-gen actiVator inhibitor-l，PAI-1）呈负相关，从所测得的A值，可计算出血浆中PAI-1：A的水平。

【参考值】
发色底物法：0.1～1.0抑制单位／ml。

【临床意义】
1．PAI-1增高表示纤溶活性减低，见于血栓前状态和血栓性疾病。

2．PAI-1减低表示纤溶活性增高，见于原发性和继发性纤溶。

（四）血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验（plasma protamine paracoagulation test，3P试验）
【原理】
受检血浆加入硫酸鱼精蛋白溶液，如果血浆中存在可溶性纤维蛋白单体（sollJble fibrinmonomer，sFM）与纤维蛋白降解产物（fmrin degradation produces，FbDP）复合物，则鱼精蛋白使其解离析出纤维蛋白单体，纤维蛋白单体自行聚合成肉眼可见的纤维状物，此则为阳性反应结果。

本试验特异性强，敏感性低。

【参考值】
正常人为阴性。

【临床意义】
1．阳性见于DIC的早、中期。

但在恶性肿瘤、上消化道出血、外科大手术后、败血症、肾小球疾病、人工流产、分娩等也可出现假阳性。

2．阴性见于正常人、晚期DIC和原发性纤溶症等。

本试验是鉴别原发性纤溶症和继发性纤溶症（DIC）的试验之一。

（五）血浆纤溶酶一抗纤溶酶复合物测定．
【原理】
用兔抗人纤溶酶抗体包被酶标板，加入受检血浆后再加入酶标记的第二抗体，最后加入底物显色，显色的深浅与受检血浆中所含的纤溶酶一抗纤溶酶复合物呈正相关。

【参考值】
ELISA法：0～150ng／ml。

【临床意义】
本试验是反映纤溶酶活性较好的试验。

增高见于血栓前状态和血栓性疾病，如DIC、急性心肌梗死、脑血栓形成、肺梗死、深静脉血栓形成、肾病综合征等。

（六）血浆D-二聚体定量测定
【原理】
将D-二聚体单抗包被于酶标反应板，加入受检血浆，血浆中的D一二聚体（抗原）与包被在反应板的D一二聚体单抗结合。

然后再加酶标记的D一二聚体抗体，与包被的D一
二聚体结合。

最后加人底物显色，显色深浅与血浆中D一二聚体含量呈正相关，所测得的A值可从标准曲线中计算出血浆中D一二聚体的含量。

【参考值】
ELISA法：0～0.256mg／L。

【临床意义】
见D一二聚体定性试验。

（七）血清FDPs定量测定
【原理】
将FDPs单抗色酸干酶标板，加入受检血清，血清中的FDPs （抗原）与包被在反应板的FI）Ps单抗结合。

然后再加入酶标记的FDPs抗体，与包被的FDPs结合。

最后加入底物显色，显色深浅与血清中FDPs含量呈正相关，所得的A值可从标准曲线中计算出血清中FDPs的含量。

【参考值】
ELISA法：<5mg／L。

【临床意义】
同FDPs定性试验。