新人教版高中生物选修1-2.1_微生物的实验室培养(共53张PPT)

1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算：根据配方比例，计算100mL培养基各成分用量。 称量：准确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白胨时动
作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。 溶化：①加水加热熔化牛肉膏；②加入蛋白胨和氯
化钠继续加热；③加入琼脂；④用蒸馏水定容到100mL。 整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致 烧杯破裂。
培养乳酸杆菌时需要添加 维生素 ， 培养霉菌时需要将培养基pH调节为 酸性 ， 培养细菌时需要将pH调节为 中性或微碱性 。
（2）获得纯净培养物的关键是什么？ （3）避免杂菌污染的方法主要包括哪四个方面 （4）什么是消毒、灭菌，常用方法有哪些？
无菌技术包括： （1）对实验操作空间、操作者的衣着 和手进行 清洁和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基 等器具进行 灭菌 ； （3）为避免周围微生物污染，实验操 作应在 酒精灯火焰附近 旁进行； （4）避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品 相接触。
答：可以用手触摸盛有培养基的锥形 瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手 时，就可以进行倒平板了。
2、为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？
答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微 生物污染培养基。
3、平板冷凝后，为什么要将平板倒置？
答：平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固 后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置， 既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以 防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。
灭菌的方法：
1、灼烧灭菌 2、干热灭菌：160-170 ℃ 下加热1-2h。 3、高压蒸汽灭菌：100kPa、 121 ℃下维持15-30min.
6、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤 7、如何倒平板？
三、实验操作

专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
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（一）培养基
1、定义：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制 出供其生长繁殖的营养基质。 2、培养基成分:碳源、氮源、水和无机盐等4类 ★另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,以及 氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。如:培养乳酸菌时需 添加维生素、霉菌PH调成酸性、细菌PH调成中性或微碱 性、厌氧微生物提供无菌条件。 ★ 4类成分齐全的培养基叫基本培养基，例如牛肉膏蛋白 胨培养基
根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指
示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的
微生物。
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液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
沉淀生长
4
固体培养基：菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖 时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定 形态结构的子细胞群体，叫做菌落。
菌落特征是鉴定菌种的重要依据。
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于计算平均值，因为它不接近真实值，应重新实验
并注意：将菌液摇匀后再接种 P22
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㈤.微生物的培养与观察
培养不同微生物往往需要不同培养温度。 细菌：30～37℃培养1～2d 放线菌：25～28℃培养5～7d 霉菌：25～28℃的温度下培养3～4d。
在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止 因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
半固体培养基：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 6
选择培养基:从微生物群中选择具有特定表型的细胞. 使之进行繁殖所用的培养基,称为选择培养基.
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌

B.石油
C.二氧化碳
D.花生粉饼
解析 自养微生物能利用无机碳源。
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解析答案
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3.在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时又能抑制或者
阻止其他种类微生物生长的培养基称做( C )
A.鉴别培养基
B.加富培养基
C.选择培养基
D.基础培养基
解析 选择培养基可选择目标微生物，同时抑制或杀死其他微生物。
灭 干热灭菌 160～170 ℃条件下， 玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属
菌
加热1～2 h
用具等
高压蒸 汽灭菌
在高压蒸汽灭菌锅内， 121 ℃，100 kPa， 灭菌15～30 min
培养基等
紫外线灭菌 30 W照射30 min
小型接种室、接种箱等
活学活用
3.防止杂菌入侵，获得纯净的培养物，是研究和应用微生物的前提。 下列叙述错误的是( B ) A.实验室里可以用紫外线或化学药物进行消毒 B.接种环、接种针等金属用具，直接在酒精灯火焰的内焰部位灼烧灭菌 C.在实验室中，切不可吃东西、喝水，离开实验室时一定要洗手，以防止
问题导析
解析答案
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二 无菌技术
要防止外来的杂菌污染培养物，离不开无菌技术，要防止培养物污染 人体和环境，也离不开无菌技术。 1.目的：防止外来杂菌 的污染。 2.方法：消毒 和 灭菌 。
知识梳理
项目
消毒
灭菌
概念
使用较为温和的 物理或化学方法 杀 死物体表面 或 内部 的部分微生物(不 包括 芽孢 和 孢子)
解析答案
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4.不同的微生物对营养物质的需要各不相同，但一般都需要水、碳源、 氮源和无机盐。下列有关微生物所需营养物质的描述，正确的是( ) A.氮源物质只能为该微生物提供必要的氮元素 B.有些碳源也可以给微生物的生长提供能源 C.无机盐是微生物不可缺少的营养物质，所以无机盐越多越好 D.固体培养基中不含水分

微生物需要的五大类营养要素物质： 1.碳源 2.氮源 3.生长因子 4.无机盐 5.水 1.碳源
⑴概念 ：凡是能为微生物提供碳元素的营养物质。
⑵来源： ①无机碳源：CO2；NaHCO3等 ②有机碳源：糖类、脂肪酸、石油等
⑶作用： ①构成细胞物质和一些代谢产物 ②异养微生物的能源
2.氮源
⑴概念： 凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。
不加氮源的无氮培养基 分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基 分离自养型微生物
加入青霉素等抗生素的培养基 分离导入了目的基因的受体细胞 back
——
伊 红 美 蓝 培 养 基
（四）无菌技术
1.概念
无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防 止杂菌污染的方法。 2.消毒与灭菌
⑴消毒定义： 利用化学或物理方法，杀死部份微生物的过程。
培养基的种类
划分标准
培养基种类
液体培养基
半固体培养基
物理性质
固体培养基
特点 不加凝固剂
加凝固剂，如琼脂
用途
工业生产 观察微生物的运 动、分类鉴定
微生物分离、 鉴定、活菌计 数、保藏菌种
化学成分 用途
天然培养基 合成培养基
选择培养基
含化学成分不明确的天然物质
培养基成分明确 在培养基中加入某种化学物质, 以抑制不需要的微生物的生长, 促进所需要的微生物的生长
鉴别培养基
在培养基中加入某种指示剂或 化学药品,用以鉴别不同种类的
微生物
工业生产 分类、鉴定 培养、分离出 特定微生物
鉴别不同种 类微生物
液体培养基：
表面生长 均匀混浊生长 沉淀生长
半固体培养基：
无动力
固体培养基：菌落